利用微波炉快速制备酵母质粒和基因组DNA PCR模板

制备基因组ＤＮＡＰＣＲ模板一般都比较费工费时 ,研究人员尝试用微波炉提取真核生物基因组ＤＮＡ ,然后做ＰＣＲ扩增取得了较好的效果[1 ,2 ] 。本文描述了一个利用微波炉快速制备酵母质粒和基因组ＤＮＡＰＣＲ模板的程序 ,具有良好的重复性。1　材料与方法1.1　材料酿酒酵母菌种 1ｃ163 6ｄａｒｇ11,ｕｒａ 3为比利时ＯｒｉａｎｅＳｏｅｔｅｎｓ馈赠。酵母载体ｐＹＸ13 3从美国康乃尔大学曹维国处获得 ,并由此构建了粗糙脉孢霉ａｒｇ 13ｃＤＮＡ的酵母表达载体ｐＹＸＡ5。培养基为ＳＤ或ＹＰＤ固体培养基。1.2　酵母质粒提取[3]取 1.5ｍｌ…     

第四届国际转基因动物学术讨论会

4ｔｈＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＣｏｎｆｅｒｅｎｃｅｏｎＴｒａｎｓｇｅｎｉｃＡｎｉｍａｌｓＮｏｖ 2 6- 2 9,2 0 0 2　　Ｓｈａｎｇｈａｉ,Ｃｈｉｎａ大会主席 :Ｄｒ.ＷｅｎｈａｏＸｕ (ＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＫａｎｓａｓＭｅｄｉｃａｌＣｅｎｔｅｒ)胡以平教授 (中国人民解放军第二军医大学转基因动物研究所 )大会副主席 :成国祥　教授 (上海转基因研究中心主任 )大会主题 :ＴｈｅＰｏｓｔ ｇｅｎｏｍｉｃＥｒａｏｆｔｈｅＴｒａｎｓｇｅｎｉｃＴｅｃｈｎｏｌｏｇ…     

三种被孢霉的电泳核型分析

利用等强度均一电场（Ｃｏｎｔｏｕｒ－ｃｌａｍｐｅｄ　Ｈｏｍｏｇｅｎｅｏｕｓ　Ｅｌｅｃｔｒｉｃ　Ｆｉｅｌｄ,ＣＨＥＦ）凝胶电泳技术比较了三种被孢霉菌株及两株诱变菌株的电泳核型。结果显示深黄被孢霉ＡＳ３．３４１０（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ　ｉｓａｂｅｌｌｉｎａ　ＡＳ３．３４１０）及其诱变株Ｍ(６－２２)、ＭＨ(２３)具有相同的染色体ＤＮＡ分子的数目和大小,而与拉曼被抱霉ＡＳ３．３４１３（Ｍ．ｒａｍａｎｎｉａｎａ　ＡＳ３．３４１３）和葡酒色被孢霉ＡＳ３．３４１４（Ｍｖｉｎａｃｅａ　ＡＳ３．３４１４）显示出明显的差异。三种被抱霉明显的染色体带数分别为１５条,１０条和１１条,分离的染色体ＤＮＡ大小范围大约为３９０ｋｂ－２６６０Ｋｂ,基因组大小分别约为２１６４０Ｋｂ、１５０４０Ｋｂ、１９６７０Ｋｂ。     

第四届国际转基因动物学术讨论会

4ｔｈＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＣｏｎｆｅｒｅｎｃｅｏｎＴｒａｎｓｇｅｎｉｃＡｎｉｍａｌｓＮｏｖ .2 6～ 2 9,2 0 0 2　Ｓｈａｎｇｈａｉ,Ｃｈｉｎａ大会主席 :Ｄｒ.ＷｅｎｈａｏＸｕ (ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ ,ＭｅｄｉｃａｌＣｅｎｔｅｒ,ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＫａｎｓａｓ)胡以平教授 (中国人民解放军第二军医大学转基因动物研究所 )大会副主席 :成国祥教授 (上海转基因研究中心主任 )大会主题 :后基因组时代的转基因技术大会议程 : 开幕词 :转基因技术的过…     

第四届国际转基因动物学术讨论会

大会主席 :Ｄｒ .ＷｅｎｈａｏＸｕ　(ＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＫａｎｓａｓＭｅｄｉｃａｌＣｅｎｔｅｒ)胡以平　教授 (中国人民解放军第二军医大学转基因动物研究所 )大会副主席 :成国祥　教授 (上海转基因研究中心主任 )大会主题 :ＴｈｅＰｏｓｔ ｇｅｎｏｍｉｃＥｒａｏｆｔｈｅＴｒａｎｓｇｅｎｉｃＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ (后基因组时代的转基因技术 )大会议程 :1.Ｏｖｅｒｖｉｅｗ :“Ｔｈｅｐａｓｔａｎｄｐｒｅｓｅｎｔｏｆｔｈｅｔｒａｎｓｇｅｎｉｃｔｅｃｈｎｏ…     

一个新的粗糙脉孢霉基因组DNA制备方法

粗糙脉孢霉基因组DNA的制备多数费工费时,并且需要液氮研磨。而一般实验室没有液氮设备。本文提供了一个不需要液氮研磨就可以快速制备粗糙脉孢霉基因组DNA的方法,使用裂解液、石英砂和苯酚振荡裂解细胞壁,然后用苯酚／氯仿抽提DNA。利用PCR从基因组扩增出粗糙脉孢霉Ⅰ号染色体右臂上的校孔转运蛋白基因片段。     

第四届国际转基因动物学术讨论会

大会主席 :Ｄｒ .ＷｅｎｈａｏＸｕ (ＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＫａｎｓａｓＭｅｄｉｃａｌＣｅｎｔｅｒ)胡以平教授 (中国人民解放军第二军医大学转基因动物研究所 )大会副主席 :成国祥教授 (上海转基因研究中心主任 )大会主题 :ＴｈｅＰｏｓｔ ｇｅｎｏｍｉｃＥｒａｏｆＴｈｅＴｒａｎｓｇｅｎｉｃＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ (后基因组时代的转基因技术 )大会议程 :1　Ｏｖｅｒｖｉｅｗ :“Ｔｈｅｐａｓｔａｎｄｐｒｅｓｅｎｔｏｆｔｈｅｔｒａｎｓｇｅｎｉｃｔｅｃｈｎｏｌｏ…     

第四届国际转基因动物学术讨论会

大会主席 :Ｄｒ .ＷｅｎｈａｏＸｕ(ＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＫａｎｓａｓＭｅｄｉｃａｌＣｅｎｔｅｒ)胡以平　教授 (中国人民解放军第二军医大学转基因动物研究所 )大会副主席 :成国祥　教授 (上海转基因研究中心主任 )大会主题 :ＴｈｅＰｏｓｔ ｇｅｎｏｍｉｃＥｒａｏｆｔｈｅＴｒａｎｓｇｅｎｉｃＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ(后基因组时代的转基因技术 )大会议程 :1 Ｏｖｅｒｖｉｅｗ :“Ｔｈｅｐａｓｔａｎｄｐｒｅｓｅｎｔｏｆｔｈｅｔｒａｎｓｇｅｎｉｃｔｅｃｈｎｏｌｏ…     

ACTA BOTANICA SINICA ,Vol.42 CONTENTS

Ｎｏ .1(Ｊａｎ .,2 0 0 1)ＡＲｅｗａｒｄｉｎｇＦｉｆｔｅｅｎＹｅａｒｓ:ＦｒｏｍＳＬＧｔｏＳＣＲ/ＳＰ11ＣＵＩＨａｉ＿Ｙａｎｇ ,ＬＡＩＺｈａｏａｎｄＸＵＥＹｏｎｇ＿Ｂｉａｏ……………………………………………… ( 1)ＴｈｅＳｔｒｕｃｔｕｒａｌＴｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｏｆＮｕｃｌｅｏｌａｒＤＮＡａｎｄＩｔｓＡｒｒａｎｇｅｍｅｎｔｉｎＮｕｃｌｅｏｌｕｓｏｆＡｌｌｉｕｍｃｅｐａＣｅｌｌｓ (ｉｎＥｎｇｌｉｓｈ)ＴＡＯＷｅｉ,ＺＨＡＮＧＬｉ＿Ｙｏｎｇ ,ＨＵＡＮＧＢａｉ＿Ｑｕ ,ＪＩＡＯＭｉｎｇ＿Ｄａ ,ＨＥＭｅｎ…     

重组家蚕病毒表达传染性法氏囊病病毒VP2蛋白

将传染性囊病病毒ＨＺ９６株主要宿主保护性抗原ＶＰ２的ｃＤＮＡ基因克隆到杆状病毒转移载体ｐＢａｃ－ＰＡＫ８中,获得重组转移载体ｐＢａｃＰＡＫ－ＶＰ２,载体ｐＢａｃＰＡＫ－ＶＰ２与修饰病毒Ｂｍ－ＢａｃＰＡＫ６线性化基因组ＤＮＡ共转染单层家蚕Ｂｏｍｂｙｘ ｍｏｒｉ（Ｂｍ）Ｎ细胞,经细胞内同源重组,筛选到重组病毒。ＥＬＩＳＡ和Ｗｅｓｔｅｒｎ免疫鲩迹结果表明,ＶＰ２在家蚕培养细胞和家蚕幼虫中均得到了表达。