表达强毒pp38决定簇的马立克病病毒疫苗毒CVI988点突变株的构建和特性

用鸡马立克病病毒（ＭＤＶ）强毒ＧＡ株的３８ｋＤ磷蛋白（ｐｐ３８）基因克隆ＤＮＡ转染Ｉ型弱毒疫苗ＣＡＩ９８８／Ｒｉｓｐｅｎｓ株ＭＤＶ感染的鸡胚成纤维细胞,再用能识别Ｉ型强毒ｐｐ３８的单克隆抗体Ｈ１９做免疫荧光试验,筛选到能在ｐｐ３８基因上表达强毒株特异性抗原决定簇的定向点突变弱毒株ＣＶＩ／ｒｐｐ３８。用＾３５Ｓ－蛋氨酸标记的细胞裂解物做免疫沉淀反应表明,单抗Ｈ１９不能识别天然ＣＶＩ９８８株ＭＤＶ中的     

从一名国内感染的艾滋病人分离人免疫缺陷病毒（HIV）

从一名国内感染的艾滋病人采血,分离其外周血单核细胞（ＰＭＣｓ）。首先与正常的ＰＭＣｓ共培养,４周后检测其ＨＩＶ－１ｐ２４抗原（ＥＬＩＳＡ）达到峰值。用此时的细胞及其上清分别感染Ｊｕｒｋａｔ－ｔａｔ、ＣＥＭ、ＭＴ４细胞,可很快地在这三株细胞中检测到ＨＩＶ生长,ＨＩＶ在Ｊｕｒｋａｔ－ｔａｔ细胞中生长情况最好,同时用病人血清直接感染Ｊｕｒｋａｔ－ｔａｔ和ＭＴ４细胞,４周后检测其细胞上清ＨＩＶ－１ｐ２４抗原（ＥＬＩＳＡ法）为阳性,但ＯＤ值很低（约为ＰＭＣ共培养组的一半）。用病人的少量全血与正常ＰＭＣｓ共培养,得到的结果与分离病人ＰＭＣｓ法相近。应用间接免疫荧光法（ＩＦＡ）、免疫酶法（ＩＥＡ）、蛋白印迹法及ＨＩＶ－１ＰＯｌ基因和Ｅｎｖ基因特异引物的聚合酶链反应（ＰＣＲ）等证实为ＨＩＶ－１病毒。分离的ＨＩＶ在Ｊｕｒｋａｔ－ｔａｔ细胞中连续传代,细胞被感染后２－３天即出现以大量融合细胞为主的细胞病变,感染后７－１０天细胞几乎全部死亡。病毒在连续传代过程中的生长特征及致细胞病变特征不变。此病毒命名为ＣＡ－２毒株。     

马立克氏病病毒（MDV）814株B抗原基因的克隆及部分序列分析

提取感染鸡胚成纤维细胞ＭＤＶ－Ｉ弱毒株８１４病毒ＤＮＡ为模板,根据ＲＢＩＢ株ｇＢ基因５′及３′两端核苷酸离列设计引物,利用ＰＣＲ技术扩增了我国ＭＤＶ－Ｉ弱毒株８１４ｇＢ基因（２．９ｋｂ）将扩增片段平末端克隆到载体ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ中ＥｃｏＲＶ位点,经ＢａｍＨＩ,ＨｉｎｄＩＩＩ酶切鉴定得到不同插入方向的重组质粒。构建圹增片段的酶切图谱及部分序列分析证明与ＲＢＩＢ株ｇＢ基因无差异,显示了极高的     

马传染性贫血病毒驴白细胞弱毒疫苗gag基因的序列测定及分析

以马传染性贫血病毒（ＥＬＡＶ）驴白细胞弱毒疫苗株（ＤＬＡ）病毒基因组ＲＮＡ为材料,用ＲＴ－ＰＣＲ方法扩增出ＥＩＡＶ ｇａｇ基因,以平端针其克隆到质粒载体ｐＵＣ１９中,由于疫苗不是克隆株,因此通过５次单独克隆与测序,推导出ＥＩＡＶ－ＤＬＡ ｇａｇ基因的优势序列。ｇａｇ基因全长１４５８个碱基,编码一４８６个氨基酸残基的前体蛋白。与美国ＥＩＡＶ Ｗｙｏｍｉｎｇ１３６９株比较,核苷酸同源性为８０％,氨基酸     

EHFV感染家兔后组织脏器的病毒抗原定位及其病理变化

采用流行性出血热病毒（ＥＨＦＶ）１１４株实验感染家兔,用免疫荧光法（ＩＦＡ）及ＰＡＰ双桥法对家兔各脏器组织进行病毒抗原定位,同时将各脏器石蜡切片作常规Ｈ－Ｅ染色,观察受检组织的病理变化。结果表明：家兔在感染后７－１５天中,用ＩＦＡ法在胸腺、心、肺、肝、脾、胰腺、淋巴结、脑、睾丸、卵巢、肾、大肠及小肠中均检出ＥＨＦＶ抗原。用ＰＡＰ双桥法在细胞水平进行病毒抗原定位,发现所有受检组织小血管及毛细血管内皮细胞均为ＥＨＦＶ的原始靶细胞。生殖腺实质细胞病毒抗原阳性,为ＥＨＦＶ的垂直传播提供了实验依据。从肺支气管粘膜内皮细胞、尤其是腔面的纤毛柱状上皮内检出病毒抗原。推测ＥＨＦＶ通过气溶胶造成传播可能是水平传搐的方式之一。病理学初步观察,各脏器组织细胞未发现不可逆的病理损害。     

沼泽绿牛蛙病毒的分离及其细胞感染的初步研究

沼泽绿牛蛙病毒的分离及其细胞感染的初步研究张奇亚,李正秋,江育林,梁绍昌,桂建芳（中国科学院水生生物研究所,武汉４３００７２）关键词沼泽绿牛蛙（美国青蛙）,病毒,细胞感染ＰＲＥＬＩＭＩＮＡＲＹＳＴＵＤＩＥＳＯＮＶＩＲＵＳＩＳＯＬＡＴＩＯＮＡＮＤＣＥＬ...     

鸡传染性支气管炎病毒S1基因在昆虫细胞中表达水平初探

将含有鸡传染性支气管炎病毒 Ｓ１ 基因ｃ Ｄ Ｎ Ａ 的重组转移质粒ｐ Ｓ Ｘ Ｉ Ｖ Ｖ Ｉ＋ Ｘ３ Ｓ１ ． Ｈｏｌｔｅ 和ｐ Ｓ Ｘ Ｉ Ｖ Ｖ Ｉ＋ Ｘ３／４ Ｓ１ ． Ｈｏｌｔｅ 分别与粉纹夜蛾核型多角体病毒 Ｔｎ Ｎ Ｐ Ｖ Ｓ Ｖ Ｉ－ Ｇ Ｄ Ｎ Ａ（ Ｏ Ｃ Ｃ－ ,ｇａｌ＋ ） 共转染草地夜蛾（ Ｓｆ９） 细胞,经空斑纯化得到重组病毒 Ｔｎ Ｎ Ｐ Ｖ（ Ｘ３） Ｓ１ ． Ｈｏｌｔｅ Ｏ Ｃ Ｃ＋ 和 Ｔｎ Ｎ Ｐ Ｖ（ Ｘ３／４） Ｓ１ ． Ｈｏｌｔｅ Ｏ Ｃ Ｃ＋ 。将重组毒株分别感染 Ｔｎ５ Ｂ１ 细胞,并进行 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 与 Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ 检测。结果表明, Ｔｎ Ｎ Ｐ Ｖ（ Ｘ３／４） Ｓ１ ． Ｈｏｌｔｅ Ｏ Ｃ Ｃ＋ 在感染的细胞中高效表达了 Ｓ１ 蛋白, Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 凝胶薄层色谱分析结果显示,感染病毒后７２ ｈ Ｓ１ 蛋白的表达量占细胞内总蛋白量的３５ ．８ ％ ,而 Ｔｎ Ｎ Ｐ Ｖ（ Ｘ３） Ｓ１ ． Ｈｏｌｔｅ Ｏ Ｃ Ｃ＋ 感染的细胞内检测不出 Ｓ１ 蛋白。经分析认为这一差异主要来自 Ｓ１ 基因翻译起始位点及其附近的周围环境。     

传染性法氏囊病病毒弱毒株对Vero细胞的适应性研究

传染性法氏囊病病毒疫苗的传统生产工艺是利用鸡胚纤维细胞增殖ＩＢＤＶ,但易被外源病原污染,且生产成本很高,借鉴国内外流行性乙型脑炎疫苗生产的经验,使用Ｖｅｒｏ细胞增殖ＩＢＤＶ弱毒株,从病毒高峰出现时间、滴度峰值的高低、对细胞代谢的影响等方面研究了ＩＢＤＶ对Ｖｅｒｏ细胞的适应性,敏感性以及适应后的种毒的长期保存过程中发现病毒滴度有下降趋势,试用了不同试剂对病毒进行保护。     

应用亲和层析法是纯鸡马立克氏病病毒PP38基因重组产物

利用鸡马立氏病病毒（ＭＤＶ）Ｉ型特异单克隆抗体Ｈ１９致敏Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ－ＣＮＢｒ,从感染重组病毒ＢＰ３８Ⅱ的昆虫细胞中提纯鸡马立克氏病毒ＰＰ３８基因重组产物,获得良好效果,提纯的蛋白质的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ中表现出一条分子量约为３８ｋＤａ的蛋白质条带,在免疫印迹试验中该蛋白质带也能被单克隆抗体Ｈ１９识别。利用该提纯的重组ＰＰ３８免疫小鼠,所制备的小鼠抗血清在免疫荧光染色试验中不仅能与感染重组病     

用Vero细胞大量制备传染性法氏囊病病毒

目前传染性法氏囊病病毒疫苗主要是用原代鸡胚成纤维细胞 (ＰＣＥＦ)增殖ＩＢＤＶ进行生产。由于ＳＰＦ种蛋价格高 ,且ＳＰＦ种蛋在取得及培养过程中易被外源病原污染 ,造成产品质量的不稳定 ,生产成本很高[1] 。Ｖｅｒｏ细胞系是一种贴壁依赖性的传代细胞系 ,ＷＨＯ已经批准用Ｖｅｒｏ细胞作为载体进行病毒疫苗的生产。目前已成功地应用Ｖｅｒｏ细胞生产出脊髓灰质炎病毒疫苗和狂犬病毒疫苗[2 ] 。用Ｖｅｒｏ细胞生产传染性法氏囊病病毒疫苗也会有较好的前景。我们已完成了在Ｖｅｒｏ细胞上静止状态下增殖ＩＢＤＶ弱毒株的培养条件研究 ,而…     

视网膜电图振荡电位参数的稳定性

用系列强度１１档刺激闪光记录２０例３０只眼的视网膜电图（ＥＲＧ）振荡电位（ＯＰ）,研究ＯＰ的光强特性和参数稳定性。结果表明,ＯＰ各子波峰时和刺激光强呈指数曲线相关,相关性很高;而振幅和光强的函数关系的变异很大,相关性较低,不同对象间ＯＰ各子波振幅的变异系数较大,而峰时的变异系数较小,ＯＰ的峰时改变比振幅改变更为稳定。     

亮氨酸脑啡肽抑制培养大鼠主动脉平滑肌细胞增殖

实验以培养的ＳＤ大鼠胸主动脉平滑肌细胞为模型,用四唑盐比色地及＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入技术动态观察发现亮氨酸脑啡肽可显著抑制血管平滑肌细胞的增殖及ＤＮＡ的合成,阿片受体阻断剂纳洛酮对ＶＳＭＣｓ的增殖及ＤＮＡ的合成无影响,但ＮＡＬ可拮抗亮氨酸脑啡肽对ＶＳＭＣｓ增殖的抑制作用。     

EFFECTS OF GOSSYPOL ON GROWTH OF THE COTTON BOLLWORM AND DEVELOPMENT OF ITS PARASITOID CAMPOLETIS CHLORIDEAE*

Abstract The effects of gossypol, an important allelochemical in cotton, on growth of the cotton bollworm Helicoverpa armigera (Hubner) and development of its endoparasitoid Campoletis chlorideae (Uchida) in Huanghe River Valley were studied. Growth of H. armigera larvae was accelerated by adding 0.1% gossypol in the artificial diet, causing 10.75% reduction of the vulnerable period to C. chlorideae while the suppression activity of 0. 5 % gossypol to H. armigera larvae prolonged the vulnerable period by 28.15%. Negative effects of gossypol on the development of the parasitoid were demonstrated by using the artificial diet and cotton varieties WD-151 (glandless) and HG-BR-8 (glanded). Gossypol at 0.1% concentration in artificial diet did not remarkably increase the body weight of adult wasp, but significantly extended the egg-larval time and shortened the pupal time; 0. 5% gossypol and HG-BR-8 remarkably reduced the body weight of adult wasp, also significantly prolonged the egg-larval period and decreased the pupal period. Finally, the coordinate application of high gossypol resistant cotton varieties and C. chlorideae in H. armigera control is discussed.     

八种脑-肠肽侧脑室内注射对大鼠基础胃酸分泌的影响

用乌拉坦麻醉大鼠作急性实验,采用连续灌流胃并收集流出液的方法,观察向侧脑室内注射微量脑-肠肽对大鼠基础胃酸分泌的影响。实验结果如下:(1)雨蛙肽、八肽胆囊收缩素、促甲状腺素释放激素及四肽胃泌素均使总酸排出量增加;(2)生长抑素、胰多肽、P 物质、胰高血糖素则使总酸排出量减少;(3)上述肽类用侧脑室注射的剂量作肌肉注射,除四肽胃泌素也产生明显的刺激胃酸分泌作用外,对胃酸分泌均无明显影响。以上结果提示,脑内的一些肽类可能以神经递质或调制物的方式,参与中枢对胃酸分泌的调节。     

平阳霉素对鸡胚绒毛尿囊膜血管内皮细胞生长的影响

利用鸡胚绒毛尿囊膜研究平阳霉素对血管内皮细胞移动和增殖的影响.(1)内皮细胞移动采用组织学切片、常规H-E染色,通过观察不同胚龄鸡胚CAM的组织学结构即可判定毛细血管EC移动.发现鸡胚在第8、10、12天胚龄时CAM EC都位于外胚层绒毛膜上皮之下,随胚龄增大,EC逐渐由中胚层移向外胚层.而孵育至第14天后(16、18天)CAM毛细血管EC大都移至外胚层上皮之上,紧贴壳膜.PY可明显抑制EC移动,使第18天胚龄时早已该移至外胚层之上的毛细血管EC仍停留在外胚层上皮之下.(2)内皮细胞增殖用放射自显影技术对第10天胚龄的鸡胚CAM EC进行3H-TdR标记,标记率即反映EC增殖的程度.同时用血管生长抑制剂PY对比研究对EC增殖的影响.对照组和实验组EC 3H-TdR标记率分别为41.5±3.4%和20.3±1.5%,PY可使CAM EC的DNA合成减少,即抑制EC增殖.鸡胚CAM可作为研究EC移动和增殖的体内模型,用于血管生成刺激因子和抑制因子的筛选和研究.     

He—Ne激光对杜梨幼苗POD和CAT活性的影响

用不同剂量的Ｈｅ—Ｎｅ激光辐照杜梨种子,并测定其幼苗中过氧化物酶（ＰＯＤ）和过氧化氢酶（ＣＡＴ）活性,结果表明,适宜剂量的Ｈｅ—Ｎｅ激光辐照能显著提高杜梨幼苗的ＰＯＤ和ＣＡＴ活性。     

NAA对蜜环菌生长及CAT,SOD活性影响的研究

低浓度（低于30mg／L）的α－萘乙酸（NAA）能刺激密环菌的生长,其生长量可提高0～47．1％;并促进密环菌中SOD（超氧化物歧化酶）和CAT（过氧化氢酶）活性提高,随NAA处理浓度的增加及时间的延长（0～12d）2酶活性随之增强。过高浓度则2酶活性提高率下降,但仍高于对照。10mg／LNAA处理12dSOD活性提高61．1％,处理16dCAT活性提高54．7％。10mg／LNAA处理时可提高密环菌中可溶性蛋白质含量13．0％～17．4％。     

大鼠侧脑室注射精氨酸加压素对针刺镇痛的影响

以钾离子透入法引起大鼠甩尾反应为指标,测定动物的痛阈。由侧脑室注射精氮酸加压素(AVP)后,大鼠痛阈升高33.6％～68.5％,针刺镇痛效应明显加强,痛阈提高202.4％～302.7％。脑室注射抗精氨酸加压素血清,动物痛阈虽无明显变化,但针刺镇痛效应明显削弱,痛阈仅增加41.6％～71.0％。注射抗β-内啡肽血清和抗强啡肽A血清并不阻断AVP增强针刺镇痛效应。本工作的结果提示,脑内AVP参与针刺镇痛,这种作用与脑内内源性β-内啡肽和强啡肽的关系不甚密切。