基于根际生物屏障构建的烟草青枯病绿色防控技术的应用研究

青枯病防控一直是烟草农业发展中亟需破解的难题,探究并构建绿色、持续、高效的烟草青枯病防治技术体系具有重要的生产实践价值.本研究选择四川省宜宾市筠连县蒿坝镇烟草青枯病连年重发区,集成以基于根际生物屏障构建的烟草青枯病绿色防控技术体系,采用土壤保育、拮抗菌剂基质拌菌、有机肥拌菌、营养抗性诱导技术,系统评价技术体系应用后对烟草生长发育、土壤元素、微生物菌群变化以及经济效益的影响.结果表明,技术体系应用后显著促进了烤烟生长发育,与对照区相比,打顶后处理区烟株株高、叶片数、茎围、最大叶长、最大叶宽提升了9.8%, 19.53%, 16.56%, 14.86%和29.65%;显著提高了烤烟对土壤元素的利用,处理区碱解氮、有效磷、有效钾相比对照区减少了76.58 mg/kg, 80.89 mg/kg, 506.25 mg/kg,交换性钙、镁、 pH值分别增加了1 600 mg/kg, 176.50mg/kg与0.4个单位;优化了土壤微生物菌群,与对照区相比,示范区内烟草根际细菌中有益菌属Bacillus,Sphingomonas,Bryobacter,Bradyrhizobium,Flavobact...     

基于集成技术调控的烟草青枯病绿色防控技术应用研究——以遵义市桐梓县九坝镇白盐井村为例

青枯病是烟叶生产中最难防控、导致损失最大的根茎病害之一.为集成可持续的防控技术体系,本研究针对遵义市桐梓县烟草早生快发慢、青枯病危害严重的实际问题,在该地区连续3年的实践基础上,集成了土壤调酸、根际微生态调控、营养平衡和烟株抗性提升技术的本地化绿色防控技术体系,并评价了集成技术对烟草青枯病的控制效果,及对烟草农艺性状和产质量的影响.结果显示,处理区土壤理化性质得以改善,集成技术对处理区烤烟的生长具有一定的促生作用,全育期增加7 d,对团棵期和打顶期烟苗促生作用最明显.其中,打顶期株高、茎围、叶片数、最大叶长、最大叶宽和叶面积均显著高于对照区,分别提高了14.33%, 42.88%, 34.28%, 17.60%, 19.30%和40.27%.此外,采用集成技术的处理区一定程度上延缓了烟草青枯病的发生,病情指数和发病率均显著低于对照区,发病初期相对防效高达94.87%;发病暴发期的相对防效高达78.91%,发病平稳期的相对防效仍高达71.39%.经济性状方面,相比于对照区,处理区每667 m²增收了489.52元,且烟叶均价提高了1.12元/kg.本研究结果可为烟草...     

黑胫病感染对烟草茎秆及根际土壤真菌群落结构的影响

烟草黑胫病是由寄生疫霉烟草变种引起的一种对烟草生产造成巨大经济损失的土传病害。本文以健康烟株与感染黑胫病烟株茎秆和根际土壤为研究对象,通过PCR技术扩增样本中真菌转录间隔区的ITS1区域,采用Illumina Miseq高通量测序技术对扩增片段进行测序,旨在了解黑胫病感染对于烟草茎秆和根际土壤真菌群落结构与多样性的影响。本研究20个测序样品,共获得755 599条高质量序列片段,最短序列为200bp,最长序列为356bp,平均序列长度248bp。结果表明,健康烟株和发病烟株根际土壤的优势真菌为子囊菌门Ascomycota、接合菌门Zygomycota和担子菌门Basidiomycota,所有茎秆样品的优势真菌为子囊菌门、担子菌门。健康烟株与感染黑胫病烟株根际土壤样品相对丰度大于1%的属有镰刀菌属Fusarium、被孢霉属Mortierella、隐球菌属Cryptococcus、链格孢属Alternaria和赤霉菌属Gibberella等,其中,健康烟株根际土壤优势属为镰刀菌属（39.35%）和被孢霉属（14.19%）,发病烟株根际土壤镰刀菌属和被孢霉属相对丰度分别为40.26%和20.77%;健康茎秆样品优势属为隐球菌属（31.12%）、链格孢属（18.28%）、镰刀菌属（15.67%）和红酵母属Rhodotorula（13.34%）;病健交界茎秆样品优势属为镰刀菌属（41.36%）、隐球菌属（28.15%）和链格孢属（22.32%）;发病茎秆优势属为隐球菌属（62.14%）和链格孢属（27.75%）。烟株感染黑胫病后,其根际土壤与茎秆样品真菌优势属种类与健康烟株无明显变化,但属水平的相对丰度变化显著。发病烟株茎秆与根际土壤样品真菌群落Sobs、Chao1、Shannon指数较健康烟株降低,Simpson指数上升,表明烟株发病后根际土壤真菌与茎秆内生真菌群落丰富度与多样性降低。该结果对于研究烟草黑胫病发生的微生态机制及其生物防治具有一定的理论指导意义。     

基于保健-预警-系统控制的烟草靶斑病绿色防控技术研究——以重庆市酉阳县两罾乡石门坎村为例

烟草靶斑病具有扩散迅速、连片发生且危害严重等特点,能大幅降低烟叶产量和质量,该病害已成为当前阻碍烟草生产的重大问题之一,解决烟草靶斑病问题刻不容缓.本研究基于绿色防控的理念,以健康栽培为核心,以预测预报为基础,以系统控制为支撑,强调营养元素平衡和抗性诱导,突出精准用药,在重庆市酉阳县开展预防和精准防控相结合的统防统治,取得了理想的防控效果.结果表明,不同生育期试验区烟株的农艺性状都显著优于常规处理区,且常规处理区烟草靶斑病发病率及病情指数始终高于试验区,发病高峰期相对防效达到79.13%,发病末期相对防效高达82.14%,试验区经济效益突出,与常规处理区相比,每667 m²可增加产值963.28元,说明采用病害系统防治方案能够有效降低烟草靶斑病的发生,同时对病毒病和其他叶斑类病害也有很好的综合防治效果,预测预报结合实际情况精准用药能够实现绿色、生态、安全有效的病害防控.     

长柄木霉和泾阳链霉菌复配对烟苗生长及其抗病性的影响

以烟苗为试验材料,采用室内拮抗试验和活体筛选试验相结合的方法,研究了长柄木霉和泾阳链霉菌两种生防菌复配的亲和性和抑菌广谱性,并分析了生防菌及其组合对烟苗生长、诱导抗性和黑胫病防效的影响.结果表明：两生防菌株无相互抑制作用,具有较高的亲和性,并且两菌株本身及其代谢产物对不同生境下的病原菌(黑胫病、猝倒病和赤星病)均具有较高的抑菌活性和较广的抑菌谱.两菌株复配能影响根部和地上部的形态建成,促进烟苗根系和茎、叶的生长,显著增加地下部根系体积、根系总表面积、根长和根系平均直径以及地上部茎高、茎围、叶长、叶宽和生物量,具有显著的促生效能,并且两菌株复配的促生效应优于单独接种.生防菌组合能显著提高烟苗根系超氧化物歧化酶、过氧化物酶和过氧化氢酶等防御酶活性,对烟草黑胫病的相对防治效果达到了69.3%,具有显著的防病效能.研究表明长柄木霉和泾阳链霉菌是具有较高亲和性的增效组合,两菌株复配后在防病、促生方面能够发挥协同增效作用,可有效促进烟苗生长和防治烟草黑胫病.     

烟草黑胫病综合防治研究进展

烟草黑胫病是烟草上重要毁灭性病害之一。近年来,该病在我国大部分烟区发生普遍,造成的损失惨重,对烤烟的可持续发展构成严重的威胁。从农业防治、化学防治和生物防治等方面对烟草黑胫病的发生特点及其综合防治策略进行系统论述,以期为更好地防治该病奠定理论基础。     

烟草品种Beinhart1000-1抗黑胫病基因的QTL定位

为研究烟草黑胫病不同亲本来源的抗性遗传规律,定位抗性基因位点,本研究利用抗黑胫病品种Beinhart1000-1构建了220个F2分离群体。通过病圃接种鉴定和遗传分析,确定Beinhart1000-1对烟草黑胫病的抗性由多基因控制。利用筛选到的70对稳定SSR引物对烟草黑胫病抗性进行了QTL分析,绘制了一张包含14条染色体的遗传连锁图谱,且定位到5个与烟草黑胫病抗性紧密相关的QTLs,分别在2、3、3、6、12号染色体上,其贡献率分别为6.2%、6.0%、6.7%、5.6%和5.1%。此结果使烟草黑胫病抗性研究进一步深入,推进了烟草黑胫病分子标记辅助选择。     

新引进烟草种质资源的黑胫病抗性鉴定

本文对来自云南省烟草农业科学研究院的288份烟草种质资源进行黑胫病抗性鉴定,其中烤烟101份,白肋烟55份,雪茄内包烟8份,雪茄填充烟23份,雪茄外包皮烟38份,烟熏烟2份,马里兰烟8份,香料烟3份,杂交种13份,黄花烟13份,类型不明确的有24份,鉴定结果发现290份种质资源有17份抗病资源,23份中抗资源,79份中感资源,171份感病资源,黑胫病抗性较好的有MZ182、MZ254、MZ255、MZ321、MZ307、MZ319和MZ496。     

生物促腐剂对烤烟生长发育、产量和质量的影响

本研究以牛栏粪和HM腐熟剂为材料,研究了生物促腐剂的应用对烟株生长和品质的影响。研究结果表明,T2处理茎围较对照(CK)增加0.4cm,较T1处理增加0.5cm,均达到了差异显著水平;T2处理上部叶叶面积较对照(CK)增加131.9cm,中部叶较T1处理增加117.6cm。相对于T1处理,生物促腐剂的应用明显减轻病害发生程度,其中T2和T3处理烟株青枯病和黑胫病发病率和病情指数明显下降,普通花叶病毒病发生程度也有所减轻;总糖和还原糖含量分别增加1.6%～3.0%和2.0%～3.5%,总植物碱含量降低0.13%～0.17%,糖碱比更趋协调。生物促腐剂的应用对烟株前期生长无明显影响,但对烟株后期生长的促进作用较为明显,因此,生物促腐剂腐熟剂1号的应用在一定程度上能够促进烟株生长,明显减轻病害发生程度,协调烟叶内在化学成分,改善烟叶评吸质量。     

云南省烟植地青枯菌RS-22的分离及其拮抗菌的筛选和鉴定

【背景】由青枯劳尔氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的烟草青枯病是一种重要土传病害,在我国南方烟区普遍发生。生物防控是针对烟草青枯病的一种有效防治措施,但是相关的研究报道还较少。【目的】分离云南省烟植地的青枯病原菌,筛选其拮抗菌并对其抑菌效果进行鉴定。【方法】采用平板稀释法从云南感病烟草中分离获得青枯菌,采用平板对峙法筛选青枯菌拮抗菌,筛选得到的拮抗菌通过16SrRNA基因测序比对确定菌种类型,并在实验室和大田鉴定其对青枯病的防治效果。【结果】从感病烟草茎中分离出一株强致病性青枯菌小种RS-22,该菌能侵染烟草和番茄并最终使植物死亡;筛选出12株RS-22拮抗菌,其中拮抗作用最强的是Y4;Y4被鉴定为一株解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),其菌体和分泌物都能抑制RS-22生长;Y4根部灌根处理能显著提高烟草和番茄对青枯菌RS-22的抗性,Y4处理能使感病烟草部分恢复正常,在云南文山州烟草种植大田施加Y4菌剂和菌剂有机肥混合物也能显著降低烟草青枯病的感病率。【结论】青枯菌RS-22具有广谱的致病性,筛选的拮抗菌Y4能显著抑制青枯菌生长,而且对青枯菌侵染植物有很好的防治效果。研究结果为进一步研究烟草青枯病的生物防控提供了新的理论依据。     

不同叶面免疫诱抗剂对烟草生长和抗性的影响

为明确施用不同叶面免疫诱抗药剂对烟草抗性和生长的影响,在重庆市奉节县基地开展田间小区试验,探究在烟草生长期施用不同叶面免疫诱抗药剂对烟草生长和抗性的影响.结果表明：在烟草生长中期,喷施生物诱抗药剂智能聪(ZNC)和化学诱抗剂氯吲哚酰肼(CHI),会显著降低烟草病毒病、烟草野火病和烟草赤星病的发病率,而且ZNC和CHI对生长有一定的促进作用,同时CHI还可显著提高烟叶的质量与产值.当喷施济农有机肥时,能显著促进株高和叶面积对烟株有明显的促生长作用,并且显著提高了烟叶的产量与收益.     

牡丹病程相关蛋白1表达载体的构建及遗传转化

为了对牡丹病程相关蛋白1（PsPRI）基因功能进行研究,构建了PsPRI基因超表达载体pBI121-PsPRI,通过农杆菌介导法将PsPR1基因转入普通烟草NC89中。经过抗性筛选和RT-PCR分子检测,获得含风PR1转基因植株。对转化烟草的T0代植株进行抗病性鉴定,发现转APRIJ基因烟草能轻微增强对烟草黑胫病的抗性,说明PsPRI基因具有抗烟草黑胫病原菌（Phytophthoraparasiticavar．nicotianae）的功能。     

产紫篮状菌的生防潜力及其对土壤微生物群落的调控

产紫篮状菌Q2菌株是一株分离自健康黄瓜根际的有益微生物。本文通过平皿对峙培养、温室盆栽试验和田间试验评估了Q2菌株对4种土传病害的生防潜力及其与土壤熏蒸技术结合对苦瓜枯萎病的防治效果,并通过平皿稀释培养法、高通量技术和定量PCR技术对其防治苦瓜枯萎病及调控土壤微生物群落的机制进行研究。结果表明: 在温室条件下,Q2菌株对苦瓜枯萎病、烟草黑胫病、烟草根黑腐病和马铃薯茎基腐病具有明显的预防效果,对烟草黑胫病和苦瓜枯萎病防治效果分别达到75.3%和63.4%。在苦瓜枯萎病人工病圃中,单一产紫篮状菌Q2制剂对苦瓜枯萎病的防治效果为51.0%,其结合威百亩土壤熏蒸技术在相同试验条件下对枯萎病的防治效果则达到80%以上。威百亩土壤熏蒸显著降低了土壤中苦瓜枯萎病病原菌即尖镰孢菌的丰度,而Q2菌株有效地抑制了尖镰孢菌数量的恢复趋势。施用Q2菌株显著富集了土壤中的青霉菌、芽孢杆菌和Gaiella等有益微生物,抑制了尖镰孢菌的恢复。土壤熏蒸后,施用产紫篮状菌Q2菌株有助于土壤有益微生物菌群的形成,从而抑制尖镰孢菌,实现对苦瓜枯萎病的防治。     

不同剪叶次数对“K326”烟株生长及抗性的影响

为了探究重庆市烟区不同烟苗剪叶次数对移栽前烟苗的影响,以及移栽后对烟株生长和抗性的影响,本研究以烤烟品种“K326”为材料,开展了不同剪叶次数对烟叶后期生长和抗性的影响分析.室内及田间试验结果表明,剪叶处理能够激活烟苗的植物超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性,使抗性相关基因ERF, GST, Oxidea和Pr1上调表达,并且在苗期能够促进根长、干物质的积累和减少烟草赤星病、烟草野火病的发生,当剪叶次数为2次时,效果最为显著,因此在生产上剪叶2次,其经济效益最佳.     

枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)Tpb55灌根与烟草根围细菌多样性变化的相关性北大核心CSCD

【目的】利用454高通量测序技术分析生防菌株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)Tpb55对烟草根围土壤细菌群落的影响;同时测定施加Tpb55处理对烟草黑胫病的大田防效。【方法】试验设置Tpb55菌剂108 CFU/m L灌根和空白对照2个处理,分别在处理0、10、22 d采集烟草根围土壤,提取土壤细菌总DNA,扩增细菌16S r DNA V1-V3区,对扩增产物进行454高通量测序,使用Qiime软件分析不同处理的细菌群落结构。【结果】对照和处理样品测序后共获得了41207个优质序列,鉴定属于细菌的25个门。所有样品中优势菌群均为放线菌门(Actinobacteria)、变形菌门(Proteobacteria)和酸杆菌门(Acidobacteria)。在病情发展过程中,放线菌门的细菌丰度逐渐下降,变形菌门含量呈上升趋势。施用Tpb55后,酸杆菌门含量明显上升并高于对照。对照中芽孢杆菌科(Bacillaceae)和多样性指示菌草酸杆菌科(Oxalobacteraceae)的细菌丰度均明显下降,Tpb55处理的样品中芽孢杆菌科含量不断上升,草酸杆菌科含量相对稳定。Chao1、ACE和Shannon指数分析表明,Tpb55处理的样品中细菌多样性和丰富度不断提高且高于对照。Tpb55处理后10 d和22 d,OTU序列数据库中与Tpb55 16S r DNA V1-V3区PCR产物高度同源OTU数目分别为31和45。Tpb55处理的烟草黑胫病病情指数(5.29)显著低于对照(38.52)。【结论】施用Tpb55可以提高根围土壤细菌多样性和群落结构稳定性,这可能是其发挥良好生防作用的重要机制之一。     

从烟草上分离的黄瓜花叶病毒

黄瓜花叶病毒(CMV)危害烟草已成为烟区严重病害之一,如山东烟区CMV引起的烟草病毒病发病率达50%以上。CMV在福建烟区的发病率也达15～30%。上述调查系根据烟草田间症状表现以及温室内不同鉴别寄主的反应和抗性测定得到。为了进一步     

科技信息

·采用细胞工程技术,我国在国际上首次获得抗烟草黑胫病突变系:为了获得既抗病而又优质的烟草新品种,中科院遗传所和微生物所协作,以优质感病的生产品种为材料,采用细胞工程技术,经5年奋战,分离出并纯化烟草黑胫菌毒素,建立了一整套从花药培     

生防菌和杀虫剂组合对烟草移栽期根部病虫害的防治效果评价

针对秦巴山区烟田移栽期病虫害频繁发生的问题,本研究对不同生物农药和杀虫剂组合的烟草根部病虫害防治效果进行了评价.在烤烟井窖式移栽作业过程中,通过提前施用不同组合的生物农药和杀虫剂,在移栽期统计病虫害发生情况.结果发现,不提前使用药剂的防治效果最差;施用解淀粉芽孢杆菌和“润土润根”对烟草黑胫病的防治效果最好,相对防治效果为92.62%～93.10%;施用解淀粉芽孢杆菌和“润土润根”对烟草根黑腐的防治效果最好,相对防治效果为86.96%～87.10%;施用噻虫·高氯氟对小地老虎的防治效果最好,相对防治效果为78.57%～85.71%.因此,针对烤烟移栽期主要根茎类病虫害的最佳防治药剂组合为噻虫·高氯氟+解淀粉芽孢杆菌或噻虫·高氯氟+“润土润根”.本研究为秦巴山区烟草移栽期主要根部病虫害的防治提供了有效药剂组合的施用参考.     

抗青枯病烟草品种在重庆市武隆烟区的适应性研究

武隆是渝东南烟草青枯病高发烟区之一.为筛选适合重庆渝东南烟区种植的优良青枯病抗性品种,保障渝东南烟区烟草产量和品质,本研究以武隆当地主栽烟草品种“云烟87”和“K326”为研究对象,与近年来选育的青枯病抗性新品种“安烟2号”“安烟3号”“湘烟7号”和“贵烟36”进行对照试验,对各品种的青枯病抗病性、生育期、植物学性状、农艺性状、经济和品质性状等进行综合评价.结果表明,“贵烟36”的青枯病发病率低于“K326”和“云烟87”,病情指数与“K326”相当,低于“云烟87”.其次为“湘烟7号”,“湘烟7号”的发病率和病情指数均略高于“K326”和“云烟87”.“安烟2号”和“安烟3号”表现较差,发病率和病情指数均远高于“K326”和“云烟87”.经济性状显示“湘烟7号”和“贵烟36”每667 m²的产值分别为3 031.8元和3 075.3元,与“云烟87”相当,略低于“K326”;烟叶内在化学成分分析显示“安烟3号”和“湘烟7号”表现较好.综合试验结果表明,“湘烟7号”可进一步在渝东南地区进行验证推广.     

烟草内生细菌防治烟草黑胫病及促生作用研究

筛选烟草内生细菌防治烟草黑胫病,获得了对烟草黑胫病有很好防效的内生细菌118、57和93等菌株.在温室控病实验中它们的防效分别可达69.23%、61.53%和65.38%.118菌株对烟草疫霉(Phytophthora parasitica var.nicotianae)菌丝生长有明显的拮抗作用.118菌株具有较广的抗菌谱,且对烟草有促生效果,烟草的鲜重增产率为13.10%.