烤烟‘K326’的组织培养与快速繁殖

为了提供市场所需的大量种苗,适应云南烤烟(Nicotiana tabacum)规模化生产的需要,以田间烤烟的叶片、茎段、培养瓶内种子萌发的叶片和茎段为外植体进行组织培养实验.实验比较了5种培养基,筛选出烤烟的最佳愈伤组织诱导和愈伤组织不定芽分化培养基为MS 6-BA 2 mg·L-1 NAA0.2 mg·L-1 Sugar30 g·L-1 Agar6 g·L-1;生根培养基为MS Sugar30g·L-1 Agar6 g·L-1,生根率为100%;用营养土移栽后,存活率为100%.     

扁桃愈伤组织诱导及分化的研究

以扁桃优良品种'Naporeil'的茎段、叶片和花药作为外殖体,分别对其进行愈伤组织诱导和分化研究,以筛选愈伤组织的最佳诱导增殖培养基、分化培养基和生根培养基.结果表明,该品种以茎段、花药作为外殖体最易诱导获得愈伤组织,叶片不适宜作为外殖体诱导愈伤组织;愈伤组织的最佳诱导增殖培养基均为B5+0.5 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA,愈伤组织诱导率为100%,增殖倍数最高可达7倍;茎段愈伤组织的分化培养基为MS+0.2 mg/L NAA+0.8 mg/L 6-BA+0.5 mg/L ZT,分化率为71%;花药愈伤组织未见分化.由茎段愈伤组织再分化获得的不定芽在1/2MS+0.5 mg/L IBA培养基上诱导生根,并给以黑暗预处理可使生根率达80%以上.     

广西绞股蓝的组织培养和快速繁殖

广西绞股蓝是极具开发潜力的绞股蓝属植物。以其茎尖和叶片为外植体进行的组织培养试验表明,茎尖为最适的外植体,愈伤组织诱导和不定芽增殖的最适培养基为MS+6-BA 1.0mg.L-1+NAA 0.02mg.L-1,在此培养基中,茎尖和叶片的愈伤组织诱导率平均达95%,丛芽增殖系数平均达14。广西绞股蓝最适的生根培养基为MS+NAA 0.20mg.L-1,生根率92.50%。炼苗后组培苗的移栽成活率达95.5%。     

藏药匙叶翼首草高频组织培养再生体系优化研究

以匙叶翼首草种子为材料,探索种子最佳消毒方法,对影响无菌苗外植体愈伤组织诱导、增殖及植株再生的因素进行了研究。结果表明:(1)剥去外种皮的种子,经75%乙醇1min+0.1%HgCl_27min+50%多菌灵500倍液30min消毒后,在1/2 MS培养基中的发芽率达60.67%,无污染。(2)无菌苗的叶片和茎段都适宜诱导愈伤组织,在培养基MS+5.0mg·L~(-1) 6-BA+2.0mg·L~(-1) 2,4-D中可在10d内诱导出生长旺盛的愈伤组织,愈伤诱导率分别为84.00%、97.33%。(3)适宜的愈伤组织增殖培养基为MS+3.0mg·L~(-1) 6-BA+2.0mg·L~(-1) IAA,培养20d的叶片和茎段愈伤组织的生长率分别为74.37%、70.52%。(4)适宜的丛生芽诱导培养基为MS+3.0mg·L~(-1) 6-BA+2.0mg·L~(-1) IAA+250mg·L~(-1) L-脯氨酸+150mg·L~(-1)水解酪蛋白,30d后茎段和叶片的丛生芽发生率分别达到100%、94.44%。(5)再生苗在1/2 MS+0.5mg·L~(-1) NAA培养基中生根培养30d,生根率为100%。匙叶翼首草高效稳定的再生体系为保护其野生资源和工厂化育苗提供了有效途径。     

万寿菊杂交亲本的离体培养

以万寿菊‘钻石’雄性不育株的幼嫩叶片和子房为外植体进行离体快繁,结果表明:培养基MS+0.8 mg·L-1 IAA+0.6 mg·L-1 6-BA+30 g·L-1蔗糖既有利于叶片愈伤组织的诱导也有利于不定芽的分化,愈伤组织诱导率达97.9％,不定芽诱导率达45.8％;培养基MS+0.5 mg·L12,4-D+0.5 mg·L-16-BA+ 30 g·L-1蔗糖为诱导子房愈伤组织的最佳培养基,出愈率为77.8％;培养基MS+0.05 mg·L -1 NAA+0.5 mg·L-1 6-BA+ 30g·L-1蔗糖为诱导子房愈伤组织不定芽分化的最佳培养基;将不定芽接至MS培养基上,7d后即可生出不定根,生根率可达98％,移栽成活率达90％以上.     

海滨锦葵胚轴愈伤组织诱导及植株再生

以海滨锦葵(Kosteletzkya virginica)胚轴为外植体, 在9种不同激素配比的培养基上进行愈伤组织诱导、继代培养、不定芽分化及生根培养, 确定了植株再生的最适培养条件: (1)愈伤组织诱导最适培养基为MS + IAA 1.0 mg.L-1 + KT 0.3 mg.L-1 + sucrose 30 g.L-1 + agar 8 g.L-1, 愈伤组织诱导率为93.94%; (2)不定芽诱导最适培养基为MS + IAA 0.1 mg.L-1 + ZT 0.5 mg.L-1 + sucrose 30 g.L-1 + agar 8 g.L-1, 不定芽诱导率为65.83%; (3)生根最适培养基为MS + sucrose 30 g.L-1 +agar 8 g.L-1, 生根率为96.67%。炼苗移栽后, 成活率可达85%。     

红叶石楠离体植株再生频率的影响因素研究

以红叶石楠带芽茎段及叶片为外植体,分析激素和培养条件等因子对愈伤组织诱导及植株再生的影响。结果表明,MS+0.10mg/L 2,4-D+0.50mg/L NAA+0.50mg/L 6-BA+0.50mg/L KT为最佳愈伤组织诱导培养基,暗培养的愈伤组织诱导率高于光培养,其愈伤组织诱导率可达100%(带芽茎段)和98%(叶片)。MS+0.50mg/L IBA+2.00mg/L 6-BA+2.00mg/L KT为最佳分化增殖培养基,分化率91%以上,增殖倍数6.8以上,均达到最高。1/2MS+0.50mg/L IBA+0.01mg/L NAA为最佳生根培养基,生根率92%,生根量4.4根/株,均达到最高。     

梨枣叶片和茎段再生体系的建立

用不同浓度配比的生长素和细胞分裂素诱导梨枣叶片和茎段愈伤组织的产生,并研究了不定芽诱导的最佳配方,建立了梨枣叶片和茎段的再生体系.结果表明,梨枣叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D 1.5 mg·L-1+6-BA 0.5 mg·L-1;茎段为MS+2,4-D 1.0 mg·L-1+6-BA 0.5 mg·L-1.叶片不定芽诱导的最佳培养基为MS+IBA 0.1 mg·L-1+6-BA 1.5 mg·L-1. AgNO3能阻止叶片外植体褐化并有效地促进叶片愈伤组织分化.茎段能在同一培养基上产生愈伤组织并直接分化出不定芽.     

乌桕不同外植体高效再生探索

以乌桕的成熟胚、胚乳、叶片和茎段为外植体,建立高效、稳定的组培快繁再生体系,并成功获得其再生苗.结果表明:(1)全胚乳带胚的愈伤组织诱导率达90%,其愈伤组织继续在MS+1.0 mg·L-1 NAA+1.0 mg·L-1 6-BA培养基上培养,不定芽最多达15个/外植体.(2)去胚乳的胚不加调节剂则胚直接萌动成苗,萌动率和成苗率可达100%;去胚乳的胚在MS+0.05 mg·L-1 NAA+0.3 mg·L-1 6-BA最佳培养基中培养,其胚轴处可直接诱导不定芽,最多达6个/外植体.(3)无菌苗叶片在MS+0.5 mg·L-1 NAA+0.5 mg·L-1 6-BA培养基中诱导的有效不定芽数最高达18个/外植体,诱导率达90%.(4)茎段在MS+0.05 mg·L-1 NAA+0.1~0.3 mg·L-1 6-BA培养基上不定芽的诱导率较高(100%),直接诱导的不定芽数最多达17个/外植体.(5)芽苗在1/2MS+0.5 mg·L-1 IBA上生根率达到100%,但根系较细弱,而在MS+1.0 mg·L-1镧稀土中的生根率达100%,且根系粗壮;生根的小苗练苗移栽后温室内成活率为89.2%,移栽到室外沙质土壤中的成活率为68.9%.     

非洲菊试管苗叶柄愈伤组织的诱导与分化研究

以非洲菊(Gerbera janesonii Bolus)品种‘Sunanda'试管苗幼叶的带叶叶柄为材料,研究了培养基、外植体类型和继代次数等因素对愈伤组织诱导及分化的影响.结果表明:培养基上附加不同植物生长调节剂所诱导出的愈伤组织在形态和分化能力上存在显著差异,叶柄基部诱导愈伤组织的最适培养基是MS+TDZ 0.3 mg L-1+NAA0.1 mg L-1.外植体以叶片长度＞0.5 cm,叶片已舒展,颜色嫩绿的幼叶最佳,继代培养基以MS+KT 1.0 mg L-1较适宜,愈伤组织在分化培养基MS+6-BA 2.0 mg L-1+NAA 0.1 mg L-1上分化出芽的同时还会增殖,分化率达87.4%,继代培养2次的愈伤组织分化率可提高至95%.不定芽在生根培养基1/2MS+IBA0.6 mg L-1上的生根率达100%,试管苗移栽45 d后,成活率达97%以上.     

茶条槭愈伤组织的再生体系建立及其没食子酸含量的测定

通过愈伤组织诱导途径, 建立了快速高效的茶条槭再生体系。成熟种子在MS+1.0 mg·L-1 6-BA的培养基中萌发, 以茎段作为外植体, 在WPM+0.002-0.01 mg·L-1 TDZ+0.1 mg·L-1 6-BA中培养3周诱导形成愈伤组织, 诱导频率平均为98.0%。愈伤组织转入WPM+0.01 mg·L-1 TDZ+0.1 mg·L-1 6-BA培养基中得到再生芽, 分化频率为42.0%,平均每块愈伤产生再生芽10个左右。转到WPM+0.3 mg·L-1 IBA的培养基上的再生芽均可生根并长成完整植株, 小苗移栽成活率达到89.0%。实验还建立了愈伤组织中没食子酸的提取和HPLC检测方法。对深绿色愈伤组织连续培养2个继代后, 没食子酸含量达到2.8%。     

红掌遗传转化受体系统的建立Ⅰ离体高效培养体系的建立

以红掌叶片和叶柄为材料,研究了影响红掌愈伤组织的诱导和分化的因素.结果表明,基因型对愈伤组织诱导有显著的影响,Pink Champion愈伤组织诱导率最高,为90%.基本培养基对愈伤组织诱导影响显著.在改良MS培养基上,愈伤组织诱导率为85%,出愈伤多,质量高.消毒时间和接种方式对愈伤组织诱导率亦有显著影响.初展开叶片用氯化汞消毒8-10min,背面向下接入培养基,愈伤组织诱导率高.外源激素对愈伤组织的诱导和芽分化影响显著.单独使用BA不能诱导红掌叶片产生愈伤组织,高浓度BA、低浓度2,4-D时,愈伤组织诱导率高.在MS+BA0.5 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1+CM 5%培养基上,芽分化率为97.5%,平均芽分化数为4.5个/块,芽粗壮.将分化出的芽转入1/2 MS+NAA 0.2 mg·L-1+AC 1 g·L-1培养基上诱导生根,生根率达100%.通过上述研究建立了红掌离体高效培养系统.     

匙羹藤愈伤组织培养研究

以匙羹藤组培苗为外植体,研究茎段、茎尖和叶片以及不同植物生长调节剂组合对愈伤组织形成的影响;采用4因素4水平正交设计,用SPSS软件其结果进行分析。结果显示:各种外植体诱导愈伤的能力不同,依次是茎段、叶片。叶片诱导出非胚性愈伤组织,茎段、茎尖利于诱导胚性愈伤组织和胚状体;愈伤诱导的最佳培养基为MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L,诱导率为84.5%,愈伤生长旺盛,分裂快,颜色为淡黄色。愈伤组织分化成苗效果最好的条件是MS+NAA 1.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L,分化率达到90.6%,最佳的生根条件是1/2 MS+NAA1.6 mg/L,生根率为100%。这为研究匙羹藤的组织的脱分化、分化以及胚状体的形成机制提供了参考。     

玉竹的组织培养与快速繁殖

以玉竹[Polygonatum odoratum (Mill.) Druce]根状茎、叶片和茎段为外植体,于附加不同激素配比的MS培养基中诱导愈伤组织、不定芽和不定根,探讨增殖培养和植株再生的条件.结果表明,叶片和茎段外植体诱导愈伤组织和芽的分化率很低;而根状茎外植体易于培养,有较高的诱导率和增殖倍数,其愈伤组织、不定芽和不定根的诱导率分别可达87%、90%和99%以上.适宜根状茎外植体愈伤组织诱导的培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,有利于增殖和丛生芽分化的培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA和MS+3.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,而1/2MS+3.0～5.0 mg/L NAA适宜诱导试管苗生根培养.试管苗的移栽成活率可达85%以上.     

沙拐枣的组织培养

1 植物名称沙拐枣(Calligonum mongolicwn Turvz.). 2 材料类别由种子获得的小苗茎段. 3 培养条件愈伤组织诱导培养基:(1)MS+6-BA0.05 mg·L-1(单位下同)+IAA 0.01;愈伤组织增殖培养基:(2)MS+6-BA 0.4;愈伤组织分化培养基:(3)MS+6-BA 0.4+2,4-D 0.5;继代培养基:(4)MS+IAA 0.1+6-BA 0.05;生根培养基:(5)MS+IAA 0.1.     

盐生植物海马齿离体再生

建立盐生植物海马齿(Sesuvium portulacastrum)的离体再生体系,为其生物技术改良奠定基础。以海马齿叶片、茎和腋芽为外植体, 在不同激素配比的培养基上进行愈伤组织诱导、继代培养以及不定芽的分化和生根培养。结果表明: 最适愈伤组织诱导的外植体为叶片, 其次为幼嫩的茎段和腋芽。以叶片为外植体, 愈伤组织诱导率最高的培养基为MS+2.0mg·L^–12, 4-D + 0.5 mg·L^–16-BA + 3%sucrose; 芽分化最适培养基为MS + 1.0 mg·L^–1 2, 4-D + 0.2 mg·L^–1 6-BA + 3% sucrose;生根最适培养基为MS + 3%sucrose + 0.1%AC。炼苗移栽后, 成活率可达80%。     

黄山药愈伤组织的诱导与分化

以黄山药的叶片、茎段和叶柄作外植体,以MS为基本培养基,试验了不同激素组合对愈伤组织诱导的影响,采用正交试验法研究了愈伤组织的分化效果。结果表明,以MS+2,4-D1~2mg/L+6-BA2mg/L培养基对叶片的愈伤组织诱导效果最好,接种12d后初见愈伤组织,20d后可形成大量的愈伤组织,而茎段和叶柄的诱导效果较差。分化试验结果表明,生根率最高可达85.3%,而出芽率最高仅达29.6%。     

大苞景天的组织培养与快速繁殖

1植物名称大苞景天(Sedum amplibracteatum K.T.Fu),又名鸡爪七、活血草、亮杆草. 2材料类别幼嫩茎段和叶片. 3培养条件(1)茎段愈伤组织诱导培养基:MS NAA 3.0 mg·L-1(单位下同) 6-BA 1.5 3%蔗糖;(2)叶片愈伤组织诱导培养基:MS NAA 5.0 6-BA1.0 2.5%蔗糖;(3)愈伤组织分化培养基:MS 6-BA 4.0 NAA 1.0 4%蔗糖 水解乳蛋白(LH)300;(4)生根培养基:1/2MS NAA 1.0 3%蔗糖.上述培养基均加0.6%～0.7%琼脂,pH 5.8.培养温度(25±2)℃,光照时间12 h·d-1,光照度2 000 lx.     

吊钟花的组织培养技术研究

以吊钟花(Enkianthus quinqueflorus Lour.)茎尖及带腋芽的茎段为外植体进行组织培养.结果表明,改良B5培养基(B5大量元素和钙盐+MS有机物、铁盐、微量元素)最有利于吊钟花的培养,外植体在改良B5+2,4D- 1 mg L-1的培养基中,愈伤组织诱导率可达100%.在含BA 1～2 m L-1+NAA0.1～0.5 mg L-1培养基中,可诱导产生不定芽.继代培养以改良B5+BA 1 mg L-1+NAA0.5 mg L-1培养基的增殖系数最高.生根培养基以1/2MS+IBA2 mg L-1为最佳,生根率可达80%以上.试管苗移栽成活率为90%以上.     

尾叶桉茎段再生系统的建立

本文以尾叶桉(Eucalypt urophylla)U6的无菌苗茎段为材料,选用MS培养基为基本培养基,研究不同IAA浓度对尾叶桉茎段愈伤组织诱导,不同IAA、6-BA浓度对尾叶桉茎段愈伤组织诱导芽、生根的影响。结果表明,当外植体的接种数一样,IAA的浓度为20.0mg/L时,愈伤组织诱导率达到最高,为95%,且此浓度下,出芽率、生根率最高,分别达43.3%和100%,而添加0.5mg/L6-BA则会抑制芽的再生、不能产生根。因此最适合诱导尾叶桉愈伤组织、再生芽和再生根的培养体系是MS+20.0mg/L IAA+30g/L蔗糖+8g/L琼脂。该再生系统的建立将为转基因技术改良桉树性状提供前提条件。