三种不同方法检查尿液有形成分结果的比较研究

目的:探讨利用三种不同方法检查尿液有形成分的符合率及其影响因素.方法:采用AX-4280全自动干化学分析仪、IQ200全自动尿液分析仪和人工镜检法联合检测尿液,并对结果进行比较和分析.结果:尿液各种有形成分的检测结果均存在不同程度的假阳性,人工镜检法与AX-4280的符合率为:红细胞71.1%;白细胞76.4%.人工镜检法与IQ200全自动尿液分析仪人工修饰前和人工修饰后结果的符合率分别为:红细胞81.3%、91.5%;白细胞85.9%、93.8%;透明管型81.4%、89.7%,未分类管型52.6%、77.4%:结晶84.1%、92.4%;细菌65.1%、88.2%;精子72.0%、91.5%.以人工镜检为标准,IQ200全自动尿液分析仪人工修饰前和人工修饰后各检测项目的假阳性率分别为:红细胞23.0%、9.3%,白细胞16.4%、6.6%,透明管型22.9%、11.4%,未分类管型90.2%、29.2%.结晶19.004、8.2%,细菌53.7%、11.0%,精子38.9%、9.3%.结论:三种检查方法的联合应用更能提高尿液有形成分检查结果的准确性,为临床诊治提供依据.     

大肠杆菌变种的两种分子生物学检测方法分析

目的:对大肠杆菌的一种重要的变种--肠出血性大肠杆菌O157-H7的几种检测方法进行比较研究.方法:以自动免疫磁珠收集系统(AIMS)、自动酶标免疫测试系统(VIDAS)与传统常规的分离方法进行对比分析.结果:运用自动免疫磁珠收集系统(AIMS)方法对80份可能含有肠出血性大肠杆菌O157-H7的实样进行检测,检出份数为6份,检出率为7.5％,而且在一周之内可以全部对上述检出实样进行鉴定.AIMS法能够检出浓度在10cfu/mL模拟实样之中的肠出血性大肠杆菌O157-H7,然后将此法与CHROMagar 0157琼脂板相结合,其效果则更为明显.而自动酶标免疫测试系统(VIDAS)与传统与的分离方法则检测的效果不佳,检出率为0.自动免疫磁珠收集系统(AIMS)检测方法与自动酶标免疫测试系统(VIDAS)、传统与的分离方法在检出率方面存在显著的统计学差异,P＜0.01.结论:运用自动免疫磁珠收集系统(AIMS)结合CHROMagar 0157琼脂板对出血性大肠杆菌O157-H7进行检测,检出率较高、灵敏度较高且快速便捷,可以用于O157-H7外环境检测与食品污染源的实际调查之中,应该对其加以广泛地推广并应用.     

华南虎血常规两种测定方法的比较应用

通过全自动血细胞分析仪与人工镜检法分别对华南虎(Panthera tigris amoyensis)血常规进行分析,并对获得结果做比较分析,探究建立适合华南虎血细胞分析的方法。收集临床华南虎血液标本40份,分别使用全自动血液分析仪和人工显微镜检法对红细胞、白细胞进行计数检测,并对白细胞进行分类分析。如人工计数和仪器计数获得的数据均符合正态分布,则应用配对样本T检验比较差异性,否则应用非参数检验(两个相关样本:Wilcoxon带符号秩检验)。相关性采用Spearman分析,以P <0.05为差异有统计学意义。结果表明,通过两种方法获得的红细胞计数、白细胞计数、中性粒细胞比率、嗜酸性粒细胞比率结果差异均不显著(P> 0.05);淋巴细胞比率、单核细胞比率和嗜碱性粒细胞比率,两种方法检测结果具有显著性差异(P <0.05)。红细胞计数(r=0.915)、白细胞计数(r=0.832)、淋巴细胞比率(r=0.832)、中性粒细胞比率(r=0.481)应用两种方法获得的结果相关性均较好。单核细胞比率(r=0.283)、嗜酸性粒细胞比率(r=0.309)、嗜碱性粒细胞比率(r=0....     

两种新型L-苏氨酸醛缩酶的鉴定及活性检测方法

为了实现重要医药中间体p-羟基-α-氨基酸的生物酶法合成,挖掘验证新型的L-苏氨酸醛缩酶.以pET-28a(+)作为表达载体,通过蛋白表达纯化、薄层层析色谱(TLC)和高效液相色谱(HPLC)技术分析L-苏氨酸醛缩酶及其催化产物的性质.基于4-氨基-3-肼基-5-巯基-1,2,4-三氮唑(Purpald)显色试剂开发检...     

2种植物体内NO3-含量检测方法的比较

NO3-是多数植物吸收氮素的主要形态,NO3-含量的检测对衡量植物的氮素利用率具有非常重要的意义.从实验操作、样品测定量、安全性、数据稳定性等多个方面对水杨酸浓硫酸比色法和硫酸肼还原并流动分析仪法进行比较分析,发现硫酸肼还原并流动分析仪法具有实验操作简单、样品测定量大、数据稳定性好、效率高等优点,是目前NO3-含量检测...     

四种厌氧菌生化性状检测方法的比较

使用国内的三种厌氧菌生化鉴定装置及购进的API20A 条,对标准参考菌株10 株,临床分离株109 株及从粪便分离株 14 株共计 133 株进行了测试比较,虽然这四种方法各有其优缺点,但结果这几种方法与国外的API20A 法相比,其符合率及重复率均无明显差异(P> 0.05),而国内的厌氧菌生化鉴定装置都具有快速,简便、准确的特点,无论是符合率还是重复率都在80% 或90% 以上,当然这四种方法还存在着一定问题待改进,所以我们希望上述国内有关装置在不断地改进中完善,使我们的厌氧菌检测水平更上一层楼。     

两种甲型肝炎病毒抗原快速检测方法的建立

目的建立两种甲型肝炎病毒抗原(HAV-Ag)检测试剂盒,并对其检测效果进行评价。方法生物素标记甲型肝炎病毒抗体(HAV-Ab)与辣根过氧化物酶标记亲和素联合应用建立甲型肝炎病毒抗原BA-ELISA检测法;同时使用辣根过氧化物酶标记HAV-Ab作放大系统建立双抗体夹心甲型肝炎病毒抗原ELISA检测试剂,对比两种检测方法的特异性、灵敏度及实际应用效果。结果用生物素标记甲型肝炎病毒抗体-辣根过氧化物酶标记亲和素作放大系统建立的甲型肝炎病毒抗原BA-ELISA检测法,较双抗体夹心ELISA检测方法灵敏度高1～2个稀释度;两种检测法均对10余种病毒无交叉,P/N值BA-ELISA检测法较高。结论甲型肝炎病毒抗原BA-ELISA检测法是一种灵敏度高,特异性好,方便快捷的检测方法,可广泛应用于甲型肝炎病毒研究及临床检测中。而甲型肝炎病毒抗原双抗体夹心ELISA检测法,检测灵敏度适中,操作简单,更适用于甲肝疫苗生产检定。     

一种快速检测分离溶藻细菌方法的初探

传统的细菌培养基对铜绿微囊藻具有毒性作用。会大大影响溶藻细菌的筛选效率和准确性。通过基本培养基各成分对铜绿微囊藻DS的作用研究发现,培养基中的葡萄糖成分对藻有抑制作用,并且这种抑制作用与培养基中的葡萄糖浓度密切相关,当培养基中葡萄糖的浓度在0．1～0．4g/L时,藻细胞生长受到抑制,当用柠檬酸三钠取代葡萄糖后,铜绿微囊藻在改良后的培养基中生长正常,与对照组相比无显著性差异(P＜0．05)。用改良的培养基富集水样中的溶藻微生物,并用此培养液直接感染宿主藻,一周内即可初步快速检测是否含有溶藻细菌。此种方法既排除了培养基的干扰因素,又迅速增加了溶藻细菌的生物量,并可大量收集细菌分泌的胞外物质,为溶藻细菌尤其以分泌物质溶藻的细菌的初步筛选提供了一条快捷、有效的途径。     

一种快速检测分离溶藻细菌方法的初探

传统的细菌培养基对铜绿微囊藻具有毒性作用。会大大影响溶藻细菌的筛选效率和准确性。通过基本培养基各成分对铜绿微囊藻DS的作用研究发现,培养基中的葡萄糖成分对藻有抑制作用,并且这种抑制作用与培养基中的葡萄糖浓度密切相关,当培养基中葡萄糖的浓度在0．1～0．4g/L时,藻细胞生长受到抑制,当用柠檬酸三钠取代葡萄糖后,铜绿微囊藻在改良后的培养基中生长正常,与对照组相比无显著性差异(P＜0．05)。用改良的培养基富集水样中的溶藻微生物,并用此培养液直接感染宿主藻,一周内即可初步快速检测是否含有溶藻细菌。此种方法既排除了培养基的干扰因素,又迅速增加了溶藻细菌的生物量,并可大量收集细菌分泌的胞外物质,为溶藻细菌尤其以分泌物质溶藻的细菌的初步筛选提供了一条快捷、有效的途径。     

两种检测生鲜乳中β-内酰胺酶方法的比较

采用Unisensor试剂盒法和杯碟法对22份来自不同奶站的生鲜乳中β-内酰胺酶进行了检测,指出了两种方法各自的优点和缺点。β-内酰胺酶检测过程中,两种方法应配合使用,简便、快捷的Unisensor试剂盒法可以做现场及快速检测,杯碟法可以对Unisensor试剂盒法的检测结果进行确证。     

两种检测水产品中副溶血性弧菌方法的比较分析

为了比较传统检测方法与快速检测方法的优劣,本实验室采用国标法、显色培养基+API20E法对50组水产品进行副溶血性弧菌的检测,结果两种方法检测结果一致,即样品S006、S043中检出副溶血性弧菌,检出率为4%,其余样品未检出该菌。显色培养基+API20E法在检测时间和操作步骤方面要优于传统检测方法。     

两种缢蛏线粒体基因全序列扩增方法的比较

介绍了应用长PCR技术扩增缢蛏线粒体全序列的两种方法,并进行了比较.一种方法是使用通用引物扩增COI基因和16S基因并测序后,在两基因的两端分别设计两对引物扩增两基因中间的大片段,分别得到了9.7 kb和7.3 kb的扩增产物.另一种方法是在COI基因序列两端设计一对引物,扩增整个线粒体全序列,得到了17.1 kb的扩增产物.两种方法在缢蛏的研究中进行比较后发现,前一种方法在操作实用性和后期测序方面都比后者好.     

蜂毒肽的溶血作用与红细胞膜上两种酶活性变化的关系

从蜂毒肽作用于红细胞膜上的Na^＋-K^＋-ATPase和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)活性变化的角度,利用分光光度法测定酶活性,研究蜂毒肽与红细胞及膜作用过程中可能的靶点,讨论了蜂毒肽溶血过程与RBC膜上2种酶活性的变化．结果发现,蜂毒肽抑制RBC膜上酶活性的主要模式为附着/插入质膜与游离态并存模式,附着/插入质膜中的作用大于游离态的作用．Na^＋-K^＋-ATPase的K⁺结合位点是蜂毒肽的1个作用靶点．蜂毒肽插膜过程与其对此酶的作用随时间延长同步发生．蜂毒肽通过作用于葡萄糖-6-磷酸和NADP使G-6-PD的催化受到缓慢抑制,蜂毒肽形成四聚体的程度与酶活性密切相关．EDTA抑制蜂毒肽聚集,干扰蜂毒肽作用于G-6-P,蜂毒肽作用于底物G-6-P及辅酶NADP的生化机理相似,蜂毒肽抑制作用与G-6-PD的结构无关.     

两种方法检测糖化血红蛋白的临床应用

目的由于免疫层析法具有方法简单、快速、灵敏和准确等特点,便于临床使用,与经典的高效液相色谱法进行比较,以评价二者的相关性。方法应用高效液相色谱法（HPLC）和免疫层析法分别测定40例糖尿病患者糖化血红蛋白（HbA1C）水平,并对其结果进行配对t检验及相关分析。结果HPLC法和免疫层析法测定HbA1C差异没有显著性（P〉0.05）,二者的相关性良好,Y=0.97X＋0.21;r=0.9633;P〈0.01。结论HPLC法和免疫层析法显著相关,二者检测HbA1C的能力接近,具有可比性。提示免疫层析法检测HbA1C的结果是准确可靠的,可以在临床实验室推广使用。     

一种Vc二步发酵伴生菌的筛选方法

采用发酵种液离心法对Vc二步发酵伴生菌筛选方法进行研究。将发酵12h的发酵液4000r／min离心l0min,取上清液以20％的接种量接入种子发酵液中（30ml／250m1）,再接入1／20环大菌,29℃振荡（180r／min）培养24h,将发好种液以15％接种量转接摇瓶发酵（20ml/250ml）,29℃振荡（180r／min）培养,待残糖降至lmg/ml以下测酸。摇瓶发酵结果表明,此方法易操作、效率高,可应用于伴生菌筛选的初筛过程中。     

一种动态检测小鼠微量血中T细胞受体重排删除环含量的方法

目的:通过检测比较外周血(颈动脉大量采血和微量隐静脉采血)、胸腺组织和脾脏组织等不同成分或组织中T细胞受体重排删除环(T cell receptor rearrangement excision circles,TREC)的含量,并建立一种通过微量外周血PCR预扩增的方法,评估胸腺输出功能。方法:采用C57BL/6小鼠作为实验对象,分成幼年组(5周龄,n=10)和成年组(15周龄,n=10)。经过隐静脉采血及颈动脉采血后处死小鼠,取小鼠胸腺器官和脾脏器官,提取基因组DNA(g DNA),隐静脉微量血g DNA通过PCR预扩增,提纯后再和颈动脉血、胸腺组织和脾脏组织g DNA一起进行实时定量PCR,分析各组织成分TREC的表达水平及差别。结果:幼年组胸腺组织及外周血中TREC的含量比成年组高,且二者趋势基本一致;而脾脏组织结果与其相反;幼年组小鼠胸腺组织中TREC的含量比脾脏组织中高,成年组小鼠结果与之相反;微量外周血经过预扩增后再进行实时定量PCR的结果与直接定量PCR结果一致,且更高效。结论:研究提供了一种新型高效的动态检测T细胞受体重排删除环和检测胸腺输出功能的方法。     

三种检测方法对样品中沙门氏菌的检测结果比较

本实验采用VIDAS、API 20E和SN 0170-92三种不同的检测方法对CNCA举行的食品中常见致病菌能力验证计划中提供的一份盲样进行检验, 总结对比了3种不同检验方法对沙门氏菌检测的各自优缺点。     

一种简易SNP 检测方法的建立

目的:建立一种快速、简单的SNP(Single Nucleotide Polymorphisms)检测方法。方法:设计带生物素标记的扩增引物对检测用具有单碱基差异的野生型和突变型靶序列分别进行扩增,然后通过紫外交联的方式将相应检测靶序列的探针固定在硝酸纤维素膜上,借助Taq酶完成膜上单引物延伸,从而对探针捕获的靶序列进行延伸固定在膜上,最后使用生物素-亲和素酶联显色(ABS-ELISA)反应肉眼观察结果。结果:阳性和阴性对照探针显示正常。野生型探针和突变型探针能够分别特异性结合靶序列,并通过生物素和亲和素显色系统放大为一种肉眼可判断结果的检测形式。结论:建立了一种基于硝酸纤维素膜载体上进行核酸扩增的SNP检测方法。     

两种萤火虫荧光素酶活性检测方法的一致性比较

目的：比较2种萤火虫荧光素酶活性检测方法的一致性。方法：分别采用化学发光技术（Che）及活体光学成像技术（Bio）,从细胞和动物水平检测在转染以萤火虫荧光素酶为报告基因的载体pCI-AAA-Fluc-neo后不同时间点,萤火虫荧光素酶的表达强度。结果：在细胞和动物水平,萤火虫荧光素酶的表达强度均随时间推移逐步递减。在HepG2细胞,萤火虫荧光素酶表达持续96h,活性从24h的2781±220mV（1．6×10^6±2．3×10^5光子）降至96h的49±3．5mV（6．4×10^4±2．5×10^4光子）。在动物水平得到相似的结果,BALB／c小鼠萤火虫荧光素酶表达持续20d,其活性从1d的16592±409mV（1．9×10^8±3．6×10^6光子）降至20d的798±139mV（3．37×10^5±3．8×10^4光子）。通过一致性检验,2种检测方法在细胞和动物水平的直线回归方程分别为lgChe=1．186·lgBio-3．764（r=-0．937,P〈0．001）和lgChe=0．451·lgBio＋0．64（r=0．915,P〈0．001）;进一步将理论数据与实验数据进行配对t检验,二者无统计学差异（P〉0．05）。结论：2种检测方法是一致的;从整个实验过程来看,活体光学成像技术较化学发光法更为简便、直观,可量化地对同一个体连续检测,减少了个体间差异和实验动物用量。