用高效液相色谱测定细胞分裂素

高效液相色谱是一种快速、灵敏、分辨率高的检测技术。近代的高效色谱仪;还配有电子计算机装置,使操作和数据处理的自动化程度大为提高,分析测定的结果更加准确可靠。在研究植物激素工作中,运用高效液相色谱技术已有近十年历史。本文就细胞分裂素类物质的高效液相色谱检测方法作一介绍。     

一种根系分泌物中有机酸的前处理和高效液相色谱检测方法

改进了根系分泌有机酸的前处理和高效液相色谱检测方法.将DEAE纤维素层析法直接用于根系分泌物中有机酸的富集浓缩,并与旋转蒸发浓缩的回收率进行了比较.结果表明,DEAE纤维素柱层析有较高的回收率,可用于根系分泌物中有机酸的富集浓缩,特别适用于大批量样品的前处理.确定了反向高效液相色谱同时检测草酸、酒石酸、马来酸、苹果酸、乙酸、柠檬酸、琥珀酸等7种有机酸的条件.玉米根系分泌物样品中可检出苹果酸等5种有机酸.     

高效液相色谱法制备Ⅰ型胶原蛋白及其性质研究

从猪皮中分离纯化I型胶原蛋白,并对其部分性质进行研究。采用粗提法,高效液相色谱半制备法进行分离纯化,用分析型高效液相色谱检测纯度,同时对其理化性质进行鉴定,并对所提取的胶原进行全身急性毒性试验及皮肤致敏试验。高效液相色谱测定结果显示所得样品为一单峰,理化性质测定结果符合I型胶原蛋白特征;通过整体水平的安全性评价,表明该方法提取的I型胶原蛋白具有较大的安全性和可靠性。因此,用高效液相色谱可制得高纯度且具有良好生物安全性的I型胶原蛋白。     

高效液相色谱法制备Ⅰ型胶原蛋白及其性质研究

从猪皮中分离纯化Ⅰ型胶原蛋白,并对其部分性质进行研究。采用粗提法,高效液相色谱半制备法进行分离纯化,用分析型高效液相色谱检测纯度,同时对其理化性质进行鉴定,并对所提取的胶原进行全身急性毒性试验及皮肤致敏试验。高效液相色谱测定结果显示所得样品为一单峰,理化性质测定结果符合Ⅰ型胶原蛋白特征;通过整体水平的安全性评价,表明该方法提取的Ⅰ型胶原蛋白具有较大的安全性和可靠性。因此,用高效液相色谱可制得高纯度且具有良好生物安全性的Ⅰ型胶原蛋白。     

AUT凝胶电泳在牛胰核糖核酸酶折叠研究中的应用

目的:牛胰核糖核酸酶是一种用于蛋白折叠研究的经典模式蛋白,在折叠研究过程中主要使用高效液相色谱用于分离检测不同阶段的蛋白折叠中间体。高效液相色谱具有自动化、分离效果好、样品可回收等优点,同时也存在检测通量较低、仪器设备较为昂贵等不足。AUT凝胶电泳简便、快捷、检测通量较高,本文尝试将其应用于牛胰核糖核酸酶的折叠研究。方法:使用AUT凝胶电泳、酶活性检测、质谱对牛胰核糖核酸酶还原变性过程及产生的折叠中间体进行检测;通过高效液相色谱和质谱对折叠中间单体进行分离检测,并分别进行AUT凝胶电泳检测以解析各折叠中间单体在电泳中的条带位置;通过AUT凝胶电泳和酶切后质谱鉴定各折叠中间单体的二硫键配对方式。结果:AUT凝胶电泳可以有效区分不同条件下的牛胰核糖核酸酶还原变性过程,检测结果与酶活性、质谱结果相符,并可以很好地区分牛胰核糖核酸酶还原变性过程折叠中间体。高效液相色谱将牛胰核糖核酸酶还原变性过程折叠中间体分离为13个色谱峰,并与AUT凝胶电泳中的11个条带位置进行匹配。确认牛胰核糖核酸酶还原变性过程折叠中间单体的二硫键配对方式,并与AUT凝胶电泳条带进行匹配,Cys58-Cys110和Cys26-Cys84构象熵减作用强于Cys40-Cys95和Cys65-Cys72。结论:AUT凝胶电泳适用于检测牛胰核糖核酸酶折叠中间体,可以与高效液相色谱、质谱等检测技术相互补充,共同应用于牛胰核糖核酸酶的折叠研究。     

基于核壳色谱技术快速测定冬虫夏草腺苷含量

为提高检测效率、节约检测成本,建立了基于核壳技术的高效液相色谱冬虫夏草腺苷快速分析方法。该方法具有良好的专属性、线性、重复性和灵敏度,可在2 min内完成冬虫夏草腺苷含量的测定,与常规色谱柱相比,可明显缩短分析时间。使用核壳色谱柱测定10批样品,其结果与常规色谱柱的测定结果一致。检测方法符合中国药典要求,具有耗时短、柱压低、溶剂用量少等优势,对冬虫夏草质量评价提供了技术支撑。     

饲料中三聚氰胺的测定研究

本文就饲料中三聚氰胺的检测方法做一些探讨。目前对饲料中的三聚氰胺的检测,主要有酶免疫法,高效液相色谱法,高效液相色谱-质谱法和气相色谱-质谱法。本文就这些检测方法进行探讨,对其优缺点进行研究。在这些检测方法中,目前比较实用的方法是高效液相色谱-质谱法。     

在氢氧化铝凝胶灭活寨卡病毒疫苗中甲醛残留量的测定方法

<正>建立了一种简便测定氢氧化铝凝胶配制的灭活寨卡病毒疫苗中甲醛残留量的方法,以用于药品质量评价。甲醛与2,4-二硝基苯肼(DNPH)反应,衍生产物用高效液相色谱检测,检测波长为360 nm。衍生化反应可在高效液相色谱中2 mL样品管进行样品直接分析。该方法已根据国际药品注册协调会议Q2指南得到充分验证。氢氧化铝凝胶质量浓度达     

高效液相色谱技术在药品检验中的应用及进展

高效液相色谱法是20世纪中后期发展起来的一种新型的用于分离分析的色谱方法。具有分离速度快、分离效率高、灵敏度高及自动化程度高等优点,被广泛应用在生命科学领域和化学化工领域。近年来,高效液相色谱法在药品检验中也得到广泛应用,发挥了巨大的作用。本研究从高效液相色谱的简介、高效液相色谱法在药品检测中的应用等方面进行综述,目的是为我国药品检测提供新思路。     

反义寡核苷酸药物癌泰得的定性分析方法研究

 癌泰得 (ACTCACTCAGGCCTCAGACT)为端粒酶表达抑制活性反义寡核苷酸 .为了探讨其定性检测手段 ,通过阴离子交换高效液相色谱和毛细管凝胶电泳分析方法 ,确定了该硫代寡核苷酸以及与其有关的短序列和部分未被硫代类似物的保留时间 ,并分析了不同混合物样品 .结果表明 ,阴离子交换高效液相色谱对硫代寡核苷酸骨架上的差异非常敏感 ,可很好地分离长度相同的硫代和未完全硫代类似物 ,并且随未被硫代磷酸基数目增加 ,保留时间依次缩短 .阴离子交换高效液相色谱对硫代寡核苷酸的长度不敏感 ,不能分离相差一个碱基的硫代寡核苷酸 .毛细管凝胶电泳可很好地分离长度相差一个碱基的硫代寡核苷酸 ,不能分离同长硫代和部分硫代寡核苷酸 .高效液相色谱结合毛细管凝胶电泳可有效地确定癌泰得的纯度和修饰程度 .     

质谱技术在植物内源激素检测中的应用(综述)

植物内源激素对植物的各种生理活动具有显著的调节作用,但含量极少,对其进行超微量定量检测具有重要意义。在各种检测方法中,质谱法因具有高效、快速、灵敏的优点而得以广泛应用。本文综述近年来质谱技术在植物内源激素检测中的应用,包括样品前处理方法、有机质谱联用技术(气相色谱-质谱、液相色谱-质谱)和生物质谱等,并探讨其未来研究方向。     

柱色谱硅胶的应用

色谱硅胶通常分为薄层色谱、柱色谱和液相色谱（含高效液相色谱）固定相用硅胶,它们在对物质分离、分析的机理方面基本一致。近几年由于生物技术和生物制药技术的发展,柱色谱硅胶的应用普及迅速,本文针对柱色谱硅胶的应用进行讨论与分析。     

高效液相色谱法对重组人甲状旁腺素相关肽的研究

针对重组人甲状旁腺素相关肽在反相柱的高效液相色谱中出现的两个峰,研究两个峰性质并对两个峰是由于一种物质形成了两种构象造成的加以讨论。采用了离子交换柱的高效液相色谱分析、电泳、高效液相色谱和质谱联用分析、SDS破坏小肽高级结构再进行反相柱的高效液相色谱分析、更换反相柱高效液相色谱分析中的流动相等方法,结果表明,从高效液相色谱分析和电泳分析来看,样品为纯品。同时推测两个峰是由于一种物质形成了两种不同的构象造成的,且两种构象可以在有酸性离子对试剂的情况下快速达到动态平衡。     

超高效液相色谱及其于药物分析领域的应用

随着检测技术的不断发展,超高效液相色谱应用的领域越来越广,由于其具有检测限低、灵敏度高,分析结果快速准确的特点,所以在药物的分析领域应用价值较大,可以准确获得药物成分的色谱检测结果。     

多维液相色谱分离技术在复杂蛋白质组学样品鉴定中的应用

目的：随着蛋白组学技术的发展,液相色谱-串联质谱的联用技术（液质联用）逐渐成为蛋白组学的主流技术。方法：通过结合各种不同原理的色谱分离类型,多维液相色谱分离技术能够极大的提高分离系统的峰容量,达到有效分离复杂程度很高的蛋白质组学样品的目的。结果：最广泛使用的多维液相色谱分离系统是离子交换色谱（IEX）和反相色谱（RP）的二维结合,近年来又发展出了分离能力更强的三维液相色谱分离系统,并且已经在蛋白质组学研究中得到了应用。结论：本文综述了多种多维液相色谱分离方法,在这些方法中,不同的分离原理的色谱类型被用于肽段或蛋白混合物的预分离中,有效促进了样品的充分分离,极大地提高了复杂样品的蛋白组学鉴定能力。     

微生态学方法学的研究进展

随着现代科学技术的不断发展,特别是免疫技术、生物化学技术、示踪原子、基因工程、生物工程和分子生物学技术的快速发展,促进了微生物学检测技术的发展和微生态方法学的进步,不断地开拓了微生态学的研究领域,并把它引向深入。近几年来,新的微生物检验技术在微生物定性和定量方面已具有了长足的发展,现将在微生态学研究的应用综述如下。1色谱技术1.1高效色谱技术高效液相色谱(h igh perform ance liqu idchrom atography,HPLC)又叫高压(高速)液相色谱。它在生物大分子的分离和纯化方面占据了极其重要的地位。高效液相色谱仪是20世纪60年代…     

高效液相色谱技术在药品检验中的应用及进展研究

自1970年高效液相色谱逐步成为一种新的分离分析技术,随着高效液相色谱在实践中的不断探索,其在实践中得到了十分广泛的应用,并且成为十分重要的分离分析方法。高效液相色谱分析方法具有很多优点,自动化程度较高,而且检测的灵敏度较高,分离的效率和速度都比较快。随着应用实践的开展,高效液相色谱在药品的质量监控中起着越来越重要的作用。     

环境中合成麝香类化合物残留现状及其分析方法研究进展

随着日化产品的大量使用,合成麝香(SMCs)广泛分布于环境中。由于这类化合物亲脂憎水性较强、环境中难降解、易生物富集,并具有潜在致癌和环境激素作用,对人类的健康将产生巨大的威胁,目前越来越受到关注。本文综述了合成麝香类化合物的来源及其在环境中的残留现状,总结了不同环境介质中合成麝香的污染特征,特别是水体环境中的赋存状况及迁移转化等方面的研究进展,并对现有环境样品中该类化合物的分析方法进行了比较。总体上,环境样品(如大气、水、土壤、沉积物、生物组织等)中合成麝香类化合物的前处理方法正朝着环境友好、快速的方向发展;检测技术多采用气相色谱-质谱法,而超高效液相色谱-串联质谱、全二维-高分辨质谱等高灵敏度的技术将会被逐渐应用到实际样品分析中,同时随着大环类和脂环类合成麝香的生产和使用,这两类化合物的污染调查以及分析技术方面的发展也成为未来合成麝香类化合物分析技术及残留现状研究的热点。     

蛋白质组研究中分离新技术与新方法

对于蛋白质组的研究离不开分析技术的支撑。由于样品及其基质的复杂性,为了实现蛋白质的高通量、高灵敏度、快速分析鉴定,必须发展与之匹配的新技术与新方法。多维高效液相色谱/毛细管电泳技术,部分弥补了传统2D PAGE的不足,近年来,在蛋白质分离鉴定方面取得了最令人瞩目的成绩。本文分别从多维液相色谱分离技术、多维毛细管电泳蛋白质分离平台、微柱液相-毛细管电泳联用技术、极端pH蛋白质的分离分析和蛋白质的在线富集技术等方面对蛋白质组学研究中在新技术与新方法方面近期取得的成果加以系统阐述。     

荸荠球茎中腺嘌呤的高效液相色谱测定

近年来,高效液相色谱已经成为国际上广泛应用的一种分析植物激素的手段。我们在研究荸荠球茎中细胞分裂素代谢物时,采用反相高效液相色谱技术(ReversedPhase HPLC),结合生物测定,取得了比较满意的结果。 1983年我们证明在荸荠球茎中含有高水平的异戊烯基腺嘌呤核苷(iPA),这在植物的成熟贮藏器官是很少见的。一般认