反相高效液相色谱法测定黄芪和黄芪毛状根中大极性异黄酮成分的含量

本文用RP-HPLC法测定了黄芪和黄芪毛状根中四种大极性异黄酮成分,同时比较了硅胶处理法和溶剂萃取法制备样品对含量测定的影响.结果显示:对于极性较大的化合物用前法更精确、可靠、快速、误差小,将为生产工艺提供质量检测的可靠依据.色谱柱采用大连化学物理研究所的YMG C_(18)柱(250mm×4.6mmID;10μm)流动相为:①MeOH:MeCN:H_2O=40:5:60,②MeOH:MeCN:H_2O=28:5:67,流速为1.0ml/min,检测波长:230nm.     

黄芪毛状根的大量培养

毛状根（hairyroots）是发根农杆菌（他如加加洲南栩前议）感染双子叶植物后,其R质粒上的TDNA片断整合进植物细胞核基因组中诱导产生的一种特殊表现型,近10年来已发展成一种新的培养系统［‘j。与植物细胞培养相比,毛状根培养具有生长速度快、激素自养、分化程度较高以及遗传性状相对稳定等优点,因此通过毛状根大规模培养,从中提取有价值的植物次生代谢产物具有应用前景。由于近三分之一传统药材的药用部位是根,所以这一培养系统在传统药材生产中具有更重要的意义。自1997年Ache＿。nn［fi首先成功地用发根农杆菌转化高等植物以来…     

野葛毛状根离体培养与异黄酮生产

用发根农杆菌（Agrobacterium rhizogenes）R1601菌株感染野葛（Pueraria lobata(Willd.)Ohwi）叶片外植体后获得的毛状根,经连续4次继代培养,鲜重增加到最初的6.2倍。PH为5.5的1/2SH液体培养基较适合野葛毛状根的生长。与自然根相比,毛状根在无激素的1/2SH液体培养基中离体培养20d后,鲜重增加22.6倍,释放入培养液中的异黄酮量增加10.6倍。毛状根生产异黄酮的量略高于自然根,且根中含量明显高于愈伤组织及茎中异黄酮的含量。培养液体积影响毛状根的离体生长及异黄酮的释放。     

高效液相色谱法测定大豆乳清提取物中大豆异黄酮的含量

建立了大豆乳清提取物中大豆异黄酮含量的高效液相色谱测定方法。采用Nova-Pak C₁₈（3.9×150 mm,4 μm）色谱柱;以甲醇：0.4%磷酸=30：70（v/v）为流动相分析染料木苷和黄豆苷;流速为0.7 mL·min^-1;柱温为30℃;检测波长为260 nm。试验结果表明,大豆乳清提取物中的大豆异黄酮含量为72.5%,其组成以染料木苷和黄豆苷为主,二者比例接近1∶1,苷元型大豆异黄酮未检出。染料木苷和黄豆苷的平均回收率分别为98.1%和98.4%,相对标准偏差（RSD）分别为0.7%（n=5）和0.8%(n=5)。该方法快速、准确、重复性好。     

反相高效液相色谱法测定平邑

用高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）分析平邑甜茶内源ＡＢＡ、ＩＡＡ,选用Ｓｐｈｅｒｉｓｏｒｂ Ｃ１８反相柱,用ＵＶ检测器进行检测,使ＡＢＡ、ＩＡＡ得到很好的分离,测定方法迅速简便,流动相为甲醇、乙酸和水,系统研究了ｐＨ值、纯化方法对测定结果的影响,确定适合平邑甜茶ＡＢＡ、ＩＡＡ提取的分离条件。方法的精密度为：变异系数分别为２．８３和２．７９,最低检出限（信噪比＝２）分别为３．２７和３．２６ｎｍｏｌ／Ｌ,线     

茉莉酸甲酯和ABA对野葛毛状根中异黄酮含量的影响

10～ 10 0 μmol·L-1茉莉酸甲酯 (MJ)可提高野葛毛状根培养液中葛根素和大豆甙元的水平 ,促进毛状根内总异黄酮含量的增加。而用 0 .5～ 2 .0mg·L-1ABA处理后 ,无论对野葛毛状根还是培养液中葛根素、大豆甙元的含量仅略有提高 ,但对总异黄酮的合成与分泌等则有显著的促进。 10 0 μmol·L-1MJ和 1mg·L-1ABA处理 2 4～ 72h ,可促进毛状根内葛根素和培养液中总异黄酮的水平 ,以处理 4 8h的增加量最大     

黄芪毛状根化学成分分和免疫功能活性的研究

应用大规模培养技术生产的黄芪毛状根、获得１０ｇ／Ｌ的产量。与黄芪干燥根化学在分相比,黄芪毛状根中粗皂甙和可溶性多糖含量较高,黄芪甲甙含量相当,而６种异黄酮,总多糖和生多糖含量较少,证明两种来源的黄芪根质量相似。从免疫功能低下的小鼠免疫功能恢复的实验结果也证实了这一点。本结果显示大规模生产的黄芪毛状根可能成为中药材黄芪的一种新来源。     

高效液相色谱法测定辣椒素

用95%醋酸钠饱和乙醇溶液抽提辣椒树脂油中的辣椒素,经高效液相色谱(HPLC)分离,在紫外波长280 nm处测定。用此法分析测得福建特产"小米椒"的辣椒素含量为10.38%。     

黄芪毛状根化学成分和免疫功能活性的研究

应用大规模培养技术生产的黄芪毛状根,获得10g／L的产量。与黄芪干燥根化学成分相比,黄芪毛状根中粗皂甙和可溶性多糖含量较高,黄苠甲甙含量相当,而6种异黄酮,总多糖和酸性多糖含量较步,证明两种来源的黄苠根质量相似。从免疫功能低下的小鼠免疫功能恢复的实验结果也证实了这一点。本结果显示大规模培养生产的黄芪毛状根可能成为中药材黄芪的一种新来源。     

高效液相色谱法测定黄芪注射液中黄芪甲甙的含量

本文报道用高效液相色谱法测定黄芪注射液中黄芪甲甙的含量。色谱柱为:NOVA-PAK C_(18)4μm(4.6mm×250mm);流动相:乙腈-0.1％磷酸(33:67),205nm检测,外标定量。结果表明,建立的方法完全适用于黄芪注射液中黄芪甲甙的含量测定。其方法快速、灵敏、重现性好。     

吐温-80对野葛毛状根生长及异黄酮含量的影响

将不同浓度的吐温-80添加到野葛毛状根悬浮培养液中,研究在一定的作用时间内其对毛状根生长及次生代谢物合成与分泌的影响。结果表明,采用2％浓度处理较为适宜,不仅可以提高毛状根内葛根素的含量,而且有利于培养液中葛根素、大豆甙元及总异黄酮的积累,与对照相比,其含量可分别提高24．2％、50％和46．7％。在该浓度下连续处理毛状根72h后,发现毛状根仍生长旺盛,其生长量已是对照的1．5倍。但不同时间的连续处理对毛状根及培养液中几种异黄酮物质的积累与释放作用不同,其中以处理48h最有利于培养液中总异黄酮的累积,其含量是毛状根中的38倍。     

反相高效液相色谱法测定厌氧菌有机酸代谢产物

建立反相高效液相色谱测定厌氧菌代谢发酵有机酸产物(乙酸、乳酸)的方法并用于测定乳酸菌代谢发酵产物中的含量。反相高效液相方法是一种简单、准确、灵敏的方法,可用于同时定量测定厌氧菌的有机酸代谢产物。     

高效液相色谱法测定酵母中麦角固醇含量

本文建立了酵母中麦角固醇含量高效液相色谱测定方法。其色谱条件为,色谱柱ＨＹ Ｐｅｒｓｉｌ ＢＤＳ Ｃ１８ ５ｕ反相柱,流动相为甲醇：水（９７：３）,紫外检测波长为２８３ｎｍ。酵母样加碱乙醇皂化、提取、洗涤、蒸干、定量测定。结果表明：标准曲线范围是０．０２－０．８ｍｇ／ｍｌ线性良好,最低限量为０．０１ｍｇ／ｍｌ;日内及日间ＲＳＤ（ｎ＝４）分别在２．１－４．０％和２．４－４．８％,回收率为９６．０－９     

黄芪毛状根GBSSI基因cDNA克隆及其结构分析

根据多种已发表的淀粉粒结构淀粉合成酶（ＧＢＳＳ）基因的比对分析,以它们保守区的核酸顺序为基础,设计一对简并引物。从膜荚黄芪（Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ（Ｆｉｓｃｈ）Ｂｕｎｇｅ）毛状根提取ｍＲＮＡ,用ＲＴ－ＰＣＲ的方法扩增出５６０ｂｐ的ｃＤＮＡ片段。序列测定表明,此片段与发表的豌豆和马铃薯ＧＢＳＳＩ基因相应序列同源性分别达８９．６％和７３．０％,通过５′／３′ＲＡＣＥ（ｒａｐｉｄ     

反相高效液相色谱法测定烟叶中的游离氨基酸

用不同浓度的乙醇溶液提取烟样中的游离氨基酸 ,结果显示 ,存在最佳的乙醇溶液浓度 ,使烟样中被提取的游离氨基酸总量最大 ;对比了活性炭、乙醚、5 %磺基水杨酸、阳离子交换柱的纯化效果 ,发现阳离子交换柱的纯化效果较其它三种试剂要好。在提取和纯化之后 ,采用OPA、FMOC联合在线衍生反相高效液相色谱法测定了烟样中的游离氨基酸 ,该方法使烟样中的氨基酸和亚氨基酸能被同时测定 ,并且分析方法的重现性和回收率均令人满意。最后用该方法对云南B2 F98(上部、橘黄、二等烟叶 ,98年产 )烟叶中的游离氨基酸进行了测定 ,有 15种氨基酸被测出 ,其中Pro含量最高 ,约占总量的 2 5 % ,Thr含量最低 ,约占总量的 1%。     

高效液相色谱法测定辣椒素

用９５％醋酸钠饱和乙醇溶液抽提辣椒树脂油中的辣椒素,经高效液相色谱分离,在紫外长２８０ｎｍ处测定。用此法分析测得福建特产“小米椒”的辣椒素含量为１０．３８％。     

反相高效液相色谱法测定金雀根中高丽槐素的含量

建立金雀根中高丽槐素含量测定的反相高效液相色谱分析方法,对6个不同产地的金雀根中高丽槐素的含量进行测定,同时给出金雀根中9种异黄酮类化合物在相同色谱条件下的分析图谱.结果表明在此色谱条件下,10～250 μg/mL浓度范围内,高丽槐素的峰面积与浓度具有良好的线性相关性(r2=0.9999),该方法精密度较高,重现性和稳定性良好,平均回收率为97.31%.     

高效液相色谱法分离测定香兰素

用６０％乙醇提取香荚兰豆的香兰素,经高效液相色谱法分离,在紫外波长３３０ｍｍ处测定,选取适当的流动相,能快速,准确地测定出香兰素,最低检测含量可达到０．０１μｇ．