枸杞多糖抗氧化作用的研究

目的:研究枸杞粗多糖(Lycium Barbarum Polysaccharide,LBP)在小鼠体内的抗氧化作用。方法:用高(400mg/kg.d)、中(200mg/kg.d)、低(100mg/kg.d)剂量的枸杞粗多糖生理盐水溶液对D-半乳糖(100mg/kg.d)之衰老模型小鼠和正常小鼠灌胃。结果:枸杞粗多糖能较显著(P0.01)提高小鼠血清、肝脏及脑组织中SOD活性,降低MDA含量;极显著(P0.01)提高正常小鼠常压耐缺氧能力和游泳抗疲劳能力;此外小鼠的脾指数和胸腺指数均得到显著提高,表明枸杞粗多糖对提高小鼠的机体免疫水平具有重要的促进作用。结论:枸杞粗多糖对小鼠具有显著的抗氧化、抗衰老作用。     

牛膝多糖对草鱼免疫和抗氧化功能的影响

为探讨在饲料中添加牛膝多糖(ABP)对草鱼免疫和抗氧化功能的影响, 选取平均体重(88.130.76) g的健康草鱼375尾, 随机分成5个处理, 即基础饲料组、0.05 %、0.10 %、0.20 %、0.40 % ABP添加组, 每个处理3个重复, 每个重复25尾鱼, 饲养65 d。结果表明, 在饲料中添加ABP对草鱼头肾体指数影响不显著(P0.05), 对脾体指数影响显著(P0.05), 与对照组相比, 0.05 %、0.10 %、0.20 %和0.40%添加组脾体指数分别增加6.29% (P0.05)、28.00% (P0.05)、9.14%(P0.05)和13.14% (P0.05); 血液中NBT阳性细胞数随着ABP添加量的增加呈增加的趋势, 但各组间差异不显著(P0.05); 在饲料中添加ABP对草鱼血清白蛋白、白介素-１(IL-1)、白介素-6(IL-6)含量和过氧化氢酶活影响不显著(P0.05), 显著影响草鱼血清总蛋白(TP)、碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、溶菌酶(LZM)、-肿瘤坏死因子(TNF-)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)含量(P0.05)。与对照组相比, 0.40%添加组的TP和AKP分别增加24.64% (P0.05)和33.56% (P0.05); 0.20 %、0.40 %添加组的LZM活力分别增加34.97% (P0.05)和31.21% (P0.05), SOD活力分别增加27.28% (P0.05)和22.41% (P0.05); 饲料中随着ABP添加剂量的增加, 各组血清ACP活性先增加后缓慢下降, MDA含量先下降后上升。与对照组相比, 0.20%、0.40 %添加组ACP活性分别增加15.33% (P0.05)和11.10% (P0.05), 0.05%、0.10 %、0.20 %及0.40%添加组MDA含量分别下降11.97% (P0.05)、21.33% (P0.05)、32.37% (P0.05)和2.53% (P0.05)。饲料中随着ABP添加量的增加, 各组草鱼血清TNF-含量变化规律不明显, 但与对照组相比, 0.20%添加组TNF-含量显著增加(P0.05)。综上所述, 在草鱼基础日粮中添加适量牛膝多糖可以提高草鱼的免疫和抗氧化能力, 建议添加量为0.20%。       

枸杞多糖在免疫和抗衰老方面的研究进展

枸杞子是传统的名贵补益中药,具有滋补肝脾、益精明目之功效。枸杞多糖是其中的主要生物活性成分,具有免疫调节,抗衰老等多种生物学作用。就其在这两方面的药理学研究进展进行综述。     

辐照灭菌对枸杞多糖免疫调节作用的影响

用３个剂量的γ射线对枸杞药材进行灭菌试验,并对辐照前后枸杞多糖的免疫调节作用进行检测。结果表明,灭菌剂量下的γ射线辐照不影响枸杞多糖的免疫调节作用。     

不同处理方式对枸杞多糖抗氧化活性影响的研究

以枸杞子抗氧化活性为指标,考察有机溶剂洗涤法、冷冻干燥法、大孔吸附树脂脱色法三种处理方式所得枸杞多糖抗氧化能力的差异,从而研究不同处理方式对枸杞多糖生物活性的影响。利用DPPH法和Fenton法测定枸杞多糖对DPPH自由基和羟自由基的清除率。结果表明:在实验浓度范围内,以Vc为对照,三种处理方式得到的枸杞多糖均有一定程度的抗氧化活性,并且对自由基的清除能力存在显著差异(P0.05);其中大孔树脂脱色法得到的样品Ⅲ对DPPH自由基清除能力最强,达到62.46%,冷冻干燥法得到的样品Ⅱ对羟基的清除能力最强,高达92.02%。     

枸杞色素及多糖的不同提取次序对其得率及抗氧化活性的影响

为探究先后提取枸杞多糖及枸杞色素时对各自得率的影响。本研究通过分别考察这两种成分在提取过程中的提取溶剂、提取温度、料液比、提取次数及提取时间等因素对枸杞色素和枸杞多糖的得率影响,确定枸杞色素和枸杞多糖在提取次序不同时,两者的最佳提取工艺以及对DPPH·和·OH自由基清除率。结果表明,首先提取枸杞多糖后,枸杞色素的最佳提取工艺为采用正己烷,80℃时,料液比1∶10,提取2次,每次1 h,枸杞色素得率为2.48%,此时枸杞多糖得率为7.45%;而首先提取枸杞色素后,采用了超声辅助提取的方式提取枸杞多糖,发现超声效率为25%,料液比1∶10,提取20 min,枸杞多糖得率为5.23%,此时枸杞色素得率为3.93%。因此,首先提取枸杞多糖,使其平均得率为7.45%,而后提取枸杞色素,其平均得率为2.48%;总体上,枸杞色素1和枸杞多糖1对DPPH·自由基清除率都较高,枸杞多糖1对·OH自由基清除率较高,其抗氧化活性都接近Vc。     

枸杞多糖对鲤生长性能和肝胰脏抗氧化能力的影响

为探索枸杞多糖(Lycium barbarum polysaccharide,LBP)对鲤生长性能及肝胰脏抗氧化能力的影响,在试验饲料中分别添加比例为0、0. 005%、0. 01%、0. 015%、0. 02%的枸杞多糖,配制成5种等氮等能试验饲料。以450尾平均初始体质量为(10. 57±0. 89)g的健康鲤为试验对象,随机分为5组,每组3个重复,每个重复30尾试验鱼,分别投喂5种试验饲料,养殖时间为56 d。结果发现,鲤增重率(weight gain ratio,WGR)、特定生长率(specific growth ratio,SGR)均在枸杞多糖添加量为0. 005%时最大,分别为(118. 45±23. 80)%、(1. 39±0. 20)%/d,且差异显著(P0. 05)。枸杞多糖添加量大于0. 005%后,WGR,SGR则呈微弱下降的趋势,但差异不显著(P0. 05);饲料系数(feed conversion ratio,FCR)随着枸杞多糖添加量的提高而呈先降低后升的变化趋势,在0. 005%时最小,为1. 54±0. 24(P0. 05);添加量大于0. 005%后,FCR则呈上升趋势,且差异显著(P0. 05)。随着枸杞多糖添加量的提高,鲤肝胰脏超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活性均呈现先升高后降低的变化趋势,均在枸杞多糖添加量为0. 005%时最高,分别为(110. 85±7. 51)U/mg、(104. 58±4. 53)mg/(g·min)(P0. 05);添加量大于0. 005%后,SOD活性呈微弱的下降趋势。CAT则在其添加量大于0. 01%后呈微弱的下降趋势(P0. 05);丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量则呈先降低后升高的趋势,在添加量为0. 01%时最低,为(0. 73±0. 81)nmol/mg,但差异不显著(P0. 05)。研究说明添加一定比例的枸杞多糖可提高鲤对饲料的利用率,促进其生长,提高鲤机体的抗氧化能力,且综合考虑,鲤饲料中枸杞多糖的适宜添加水平为0. 005%。     

枸杞多糖与黄芪多糖抑菌活性的研究*

目的:研究黄芪多糖和枸杞多糖的抑菌活性并探讨不同pH值对其抑菌活性的影响。方法:采用滤纸片扩散法,分析不同浓度黄芪多糖和枸杞多糖在不同pH值下对几种常见细茵和霉菌(大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、黑曲霉、产黄青霉)的抑制效果。结果:对于细菌,枸杞多糖8mg/mL时出现抑菌圈,而黄芪多糖0.02 mg/mL时效果最佳;对于霉菌,随着枸杞多糖浓度的增大,抑菌圈的直径增大,而黄芪多糖0.02 mg/mL时效果最佳;当枸杞多糖和黄芪多糖在pH6的条件下,二者抑菌活性均最强。结论:枸杞多糖和黄芪多糖对细菌、霉菌都有一定的抑制效果,pH值可影响枸杞多糖和黄芪多糖的抑菌效果。     

海藻酸钠寡糖对小鼠免疫及抗氧化功能的影响

目的 研究海藻酸钠寡糖对小鼠免疫及抗氧化活性的影响。方法 采用不同浓度的海藻酸钠寡糖分别对小鼠连续灌胃15 d后,测量小鼠生长性能、小鼠胸腺和脾脏指数以及小鼠血浆中SOD和GSH的活性。结果 海藻酸钠寡糖能促进小鼠的生长性能,提高小鼠的胸腺和脾脏指数。其中给小鼠灌注高浓度的海藻酸钠寡糖15 d后,与对照组相比,小鼠的特定生长率和增重率分别提高了37.0%和48.5%（P<0.01）,小鼠胸腺和脾脏指数分别提高了18.8%和21.7%（P<0.01）。海藻酸钠寡糖还能增加小鼠的抗氧化活性,与对照组相比,灌注高浓度海藻酸钠组小鼠的SOD和GSH-Px活性分别提高了92.6%和35.9%（P<0.01）。结论 海藻酸钠寡糖能促进小鼠的生长性能,增强小鼠的免疫和抗氧化功能。     

枸杞多糖对肾性高血压大鼠离体血管反应性的影响及其机制

本工作利用两肾一夹肾性高血压大鼠模型,观察枸杞多糖对高血压大鼠血压的影响以及离体主动脉环丙皮细胞在调节血管张力中的功能改变,探讨ＬＢＰ对高血压发生发展的影响及其机制。结果表明,ＬＢＰ可防止２Ｋ１Ｃ大鼠高血压的形成。离体主动脉环灌流表明ＲＨ组对苯肾上腺素的收缩反应明显高于对照组,去除内皮后组间差异消失．     

枸杞多糖对糖尿病大鼠视网膜神经元的保护作用及其机制

目的:观察枸杞多糖(LBP)对糖尿病大鼠视网膜神经细胞的保护作用,并探讨其作用机制。方法:18只SD大鼠随机分为3组(n=6):正常对照组(NC),糖尿病模型组(DM)和LBP治疗组(DM+LBP),通过一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法制备糖尿病大鼠模型。DM+LBP组按1 mg/(kg·d)剂量的LBP灌胃12周。治疗结束后检测大鼠体重、空腹血糖、视网膜活性氧簇(ROS)的生成、视网膜神经节细胞(RGCs)和无长突细胞的表达、视网膜NF-E2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶-1(HO-1)的蛋白表达。结果:STZ诱导糖尿病大鼠模型造模成功率100%。与NC组相比,DM组大鼠体重明显降低、空腹血糖值升高、ROS的生成明显增加、RGCs和无长突细胞的数量均明显减少(P<0.01)。与DM组相比,LBP治疗组大鼠体重升高、血糖降低、ROS的生成减少、RGCs和无长突细胞的数量均明显增加(P<0.01或P<0.05);视网膜Nrf2和HO-1的蛋白表达均明显升高(P<0.01)。结论:LBP能改善糖尿病大鼠视网膜的氧化应激状态,对糖尿病大鼠视网膜神经细胞有一定的保护效应,其作用机制可能与其激活Nrf2/HO-1信号通路有关。     

枸杞多糖提取工艺的研究

采用热水浸提法从枸杞干果中提取枸杞多糖,经正交实验确定浸提时间、温度、料水比最优值分别为：5h、100℃、1：40;微波预处理超过25min时,多糖得率达15．91％;醇沉时当醇沉时间为4h、乙醇加入量为4倍时有利于枸杞多糖提取。     

莲子多糖的结构分析及抗氧化活性

用热水浸提、乙醇沉淀、Sevag法除蛋白分离得到水溶性莲子粗多糖。经十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）沉淀,硼酸反应以及SephadexG-150层析纯化,得到3种莲子多糖SN1、SN2、SN3。用气相色谱、红外光谱、紫外光谱分析其化学结构。结果表明：SN1主要由葡萄糖、半乳糖组成,含a—D-吡喃葡萄糖环;SN2主链为葡聚糖、并含有其他4种单糖;SN3含7种单糖,并推测是一种酸性氨基多糖或蛋白多糖。体外抗氧化活性实验表明莲子多糖具有一定的清除自由基能力,清除·O2-的能力较强。     

枸杞多糖LBP－I的分离纯化及性质鉴定

枸杞多糖ＬＢＰ－Ｉ的分离纯化及性质鉴定何进梁运祥张声华（华中农业大学生命科学技术学院,武汉４３００７０）（华中农业大学食品科学技术系）Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ,ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｐｒｏｐｅｒｔｙｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｐｏｌｙｓａｃｃｈ...     

枸杞多糖对HepG2细胞胰岛素抵抗的改善作用及机制研究

目的：观察不同浓度的枸杞多糖（LBP）对HepG2细胞胰岛素抵抗的影响并探讨其机制。方法：采用高糖高胰岛素处理HepG2细胞24 h建立胰岛素抵抗细胞模型后,用台盼蓝检测活力大于95%的HepG2细胞,以10⁴/孔密度接种于96孔板内,细胞贴壁后以30 μg/ml、100 μg/ml、300 μg/ml的LBP培养48 h,200 μl/well,各组均设4个复孔。检测不同浓度的LBP对HepG2细胞活性及胰岛素抵抗的影响;细胞内丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）的活性;各组细胞胰岛素信号转导通路中相关蛋白（IRS-2、PI3-K、Akt、GLUT2）的表达。结果：MTT显示：与正常对照组相比,IR模型组MDA含量显著升高,SOD活力明显降低,同时IRS-2、PI-3K、Akt、GLUT2蛋白表达水平明显下降;与IR模型组相比,中、高浓度LBP组MDA的含量明显降低,SOD的活力显著升高,且IRS-2、PI-3K、Akt、GLUT2蛋白表达水平明显升高;在相同的时间内,随着LBP浓度的增加,OD值逐渐降低;在同一浓度干预下,随着时间的延长,OD值也逐渐降低;葡萄糖消耗实验表明中、高浓度的LBP可显著提高胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗量,而低浓度LBP对HepG2细胞葡萄糖消耗量无明显影响。结论：中、高浓度枸杞多糖能改善HepG2细胞胰岛素抵抗,其作用机制可能与降低细胞氧化应激水平及提高胰岛素信号传导通路相关蛋白表达有关。     

枸杞多糖抑制SMMC-7721肝癌细胞的VEGF表达、迁移与侵袭

目的研究枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharide,LBP)对SMMC-7721肝癌细胞迁移、侵袭影响的机制。方法运用MTT法检肝癌细胞SMMC-7721的增殖率,Transwell检测细胞的迁移力和侵袭力,应用血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)小分子干扰RNA沉默VEGF表达,转染pcDNA 3.1-VEGF过表达VEGF,Western blot和qRT-PCR检测VEGF、MMP-2和MMP-9表达。结果 LBP(100、200、400μg/ml)处理可抑制SMMC-7721细胞的增殖、迁移和侵袭,并抑制MMP-2、MMP-9和VEGF表达;沉默VEGF可降低SMMC-7721细胞迁移、侵袭相关蛋白MMP-2和MMP-9水平,过表达VEGF可逆转LBP对SMMC-7721细胞迁移和侵袭相关蛋白MMP-2和MMP-9水平的抑制作用。结论枸杞多糖可抑制肝癌细胞的迁移和侵袭,其机制可能与直接抑制VEGF有关。     

不同提取方法对豫产白花蛇舌草多糖及抗氧化活性的影响

为评价不同提取方法对河南地区白花蛇舌草粗多糖的得率、总碳水化合物含量、杂质含量和抗氧化活性的影响,本实验分别以传统热水提取法、超声波辅助提取法、纤维素酶提取法从该药材中提取多糖。同时测定了粗多糖中总碳水化合物含量、杂质含量(总蛋白和总酚含量)以及羟基自由基清除能力、DPPH自由基清能力、还原力等抗氧化能力。实验结果显示三种提取法所得粗多糖相对于原药材的得率分别为6.77±0.09%、6.37±0.01%和4.81±0.90%;粗多糖中的总碳水化合物含量分别为289.14±1.33、246.83±2.33和278.92±2.92mg/g。粗多糖中总蛋白含量分别为28.59±2.21、23.26±2.43和4.96±0.18mg/g,总酚类成分含量分别为5.9±0.08、5.31±0.40和2.82±0.07mg/g。抗氧化活性实验结果表明,三种粗多糖的羟基自由基清除能力呈现出浓度依赖性,且均在3.0mg/mL时达到最大,对应最大清除率分别为89.13%、85.87%和74.71%。另外,三种粗多糖的DPPH自由基清除率分别在0.75~3.0mg/mL的浓度区间内达到最大并保持稳定,对应清除率的稳定区间分别为77.02%~77.90%、77.06%~77.96%和83.16%~85.73%。综上所述,以上三种不同提取方法对白花蛇舌草多糖的品质影响较大,可以为豫产白花蛇舌草的品质鉴别、多糖质量控制和开发利用提供依据。     

Sulfated modification can enhance the immune-enhancing activity of lycium barbarum polysaccharides

In test in vitro, four sulfated lycium barbarum polysaccharides (sLBPSs) with different degrees of sulfation (DS), sLBPS_0.7, sLBPS_1.1, sLBPS_1.5 and sLBPS_1.9, were added into cultured chicken peripheral lymphocytes and the changes of lymphocytes proliferation were compared by MTT assay taking the non-modified LBPS as control. Two sLBPSs with better efficacy, sLBPS_1.5 and sLBPS_1.9 were selected. In test in vivo, one hundred 14-day-old chickens were averagely divided into five groups randomly. The chickens except blank control group were vaccinated with Newcastle disease vaccine, repeated vaccination at 28 days old. At the same time of the first vaccination, the chickens in three experimental groups were injected with 0.5 mL of sLBPS_1.5, sLBPS_1.9 and LBPS at 4 mg mL⁻¹, in vaccination control group, with 0.5 mL of physiological saline, once a day for three successive days. On days 7, 14, 21 and 28 after the first vaccination, the changes of peripheral lymphocytes proliferation and serum HI antibody titer were determined. The result showed that two sLBPSs could significantly promote lymphocytes proliferation and enhance serum antibody titer. These results indicated that sulfated modification could enhance the immune-enhancing activity of LBPS, which there was a certain relativity with the DS of sulfated polysaccharide. sLBPS_1.5 possessed the best efficacy and would be expected as the component drug of a new-type immunopotentiator.