允许性高碳酸血症对大鼠机械通气相关性肺损伤NF-kB 表达的影响

目的：探讨允许性高碳酸血症对大鼠机械通气相关性肺损伤（VILI）时NF-kB 表达的影响。方法：健康雄性Wistar 大鼠30 只,体重220～280 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分3 组（n=10)：对照组（C 组）保留自主呼吸、机械通气肺损伤组（V 组）和 VILI+ 高碳酸血症干预治疗组(H 组)行机械通气4 h。采用吸气相高气道压机械通气模式制备机械通气相关性肺损伤模型。H 组通 过调整吸入的CO2浓度来维持动脉血PaCO2分别为80～100 mmHg。于机械通气15 min 时、机械通气1 h、2 h和4 h 时记录 MAP,采集股动脉血样,进行动脉血气分析,记录PaO2;机械通气结束时,测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白、TNF-琢和巨噬 细胞炎症蛋白-2（MIP-2）的浓度;取肺组织,测定湿干重比（W/D 比）、细胞间粘附分子（ICAM-1）和NF-kb 蛋白的表达水平,并观 察病理学结果,进行肺损伤评分。测定肺组织丙二醛（MDA）含量及过氧化物歧化酶（SOD）活性。结果：与C 组比较,V 组和H 组 肺损伤评分、W/D 比、ICAM-1表达水平、BALF中总蛋白浓度、TNF-alpha和MIP-2 浓度、MDA 含量和肺组织NF-资B 活性升高,PaO2 降低（P<0.05）;与V 组比较,H 组肺损伤评分、W/D 比、ICAM-1表达水平、BALF 中总蛋白浓度、TNF-alpha和MIP-2 浓度和肺组织 NF-kB 表达降低,SOD活性增强,PaO2升高（P<0.05）。结论：允许性高碳酸血症可下调NF-资B的表达,从而抑制炎症反应减轻大 鼠机械通气相关性肺损伤。     

高碳酸血症对大鼠机械通气肺损伤时炎症因子和p38MAPK 表达的影响

目的:探讨高碳酸血症对大鼠机械通气性肺损伤(VILI)时炎症因子和p38MAPK表达的影响。方法:健康雄性Wistar大鼠30只,体重220～280g,采用随机数字表法,将大鼠随机分3组(n=10):对照组(C组)、机械通气肺损伤组(V组)和高碳酸血症组(H组)。C组保留自主呼吸,V组和H组行机械通气4 h。采用高气道压机械通气模式制备机械通气性肺损伤模型。H组通过调整吸入的CO2浓度来维持动脉血PaCO2分别为80～100mmHg。机械通气结束时,测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白、TNF-α和巨噬细胞炎症蛋白-2(MIP-2)的浓度;取肺组织,测定湿干重比(W/D比)、细胞间粘附分子(ICAM-1)和p38MAPK蛋白的表达水平以及p38MAPK的活性,并观察病理学结果,进行肺损伤评分。结果:与C组比较,V组肺损伤评分、W/D比、ICAM-1表达水平、BALF中总蛋白浓度、TNF-α和MIP-2浓度和肺组织p38MAPK活性升高,PaO2降低(P<0.05);与V组比较,H组肺损伤评分、W/D比、ICAM-1表达水平、BALF中总蛋白浓度、TNF-α和MIP-2浓度和肺组织p38MAPK活性降低,PaO2升高(P<0.05)。结论:高碳酸血症通过调节p38MAPK的表达,从而抑制炎症反应减轻大鼠机械通气肺损伤。     

高碳酸血症对急性肺损伤时核因子-κB和TNF-α的影响

目的:观察高碳酸血症对兔急性肺损伤(ALI)模型核因子-κB(NF-κB)和TNF-α表达的影响,探讨其对ALI的作用机制.方法:22只新西兰大白兔随机分为对照组(C组)、非高CO2通气组(N组)、高CO2(8%)通气组(H组).N组和H组通过静脉注射油酸(0.1ml/kg)复制ALI模型,观察肺组织中NF-κB的表达情况、血清和BALF中TNF-α的含量变化及肺组织病理学改变.结果:血清及BALF中TNF-α含量N组和H组高于C组(P＜0.01,P＜0.05),且N组高于H组(P＜0.05).免疫组化及蛋白印迹分析表明H组NF-κB的表达较N组减少(P＜0.05).H组气道峰压显著低于N组,动态胸肺顺应性显著高于N组.动脉血氧分压H组明显高于N组(均P＜0.05).H组病理组织学改变较N组明显减轻.结论:机械通气时吸入8%的CO2所致高碳酸血症对ALI动物模型有保护作用,其机制可能与高碳酸血症抑制NF-κB的活化,从而抑制炎症介质如TNF-α的表达有关.     

胆红素对急性肺损伤大鼠肺血管内皮细胞核因子κB,细胞间粘附分子1表达的影响

目的探讨胆红素对急性肺损伤(ALI)的对抗作用及其对肺血管内皮细胞核因子-κB和细胞间粘附分子1表达的影响.方法用雄性Wistar大鼠(200-250g)30只,随机分为正常对照组、ALI动物模型组(用内毒素制造模型)、胆红素干预组.采用原位杂交技术半定量法和免疫组织化学染色测定肺血管内皮细胞中细胞间粘附分子-1(ICAM-1)mRNA和核因子κB (NF-κB)蛋白的表达.结果 (1)ALI模型组肺血管内皮细胞ICAM-1mRNA表达和NF-κB核染色阳性细胞百分比与正常对照组比较显著升高,(P<0.001);(2)胆红素干预组ICAM-1mRNA表达和NF-κB染色阳性细胞百分比与模型组相比明显减低,(P<0.001、P<0.01),但与正常对照组比较仍较高(P<0.05).结论 ICAM-1和NF-κB在ALI显著增加,胆红素可以抑制ALI动物NF-κB和ICAM-1mRNA的表达,可能是其对抗急性肺损伤的作用机制之一.     

绿原酸对小鼠急性肺损伤的保护作用研究

本文探讨了绿原酸对补体旁路激活致小鼠急性肺损伤的保护作用及可能的作用机制。将32只KM小鼠随机分为正常对照组、模型组、白藜芦醇组、绿原酸组,预防给药7 d后,用特异性补体旁路激活蛋白眼镜蛇毒因子(CVF)尾静脉注射复制小鼠急性肺损伤模型。测定肺含水量、肺组织匀浆中髓过氧化物酶(MPO)活性、支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞数目和蛋白含量,ELISA法检测BALF和血清中白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、P选择素(P-selectin)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的含量,HE染色法观察肺组织病理形态学变化,免疫组化法测定肺组织中NF-κB p65的磷酸化水平。研究发现,绿原酸可以降低小鼠BALF中蛋白含量、炎性细胞数目、IL-6和TNF-α含量以及肺组织匀浆中MPO活性,并可显著降低血清中IL-6、TNF-α及P-selectin、ICAM-1水平;病理形态学显示绿原酸可以显著抑制炎性细胞浸润,免疫组化结果显示绿原酸可显著抑制小鼠NF-κB p65的磷酸化水平。以上结果说明绿原酸可明显减轻补体旁路激活诱导的小鼠急性肺损伤,其机制可能与抑制NF-κB p65的磷酸化及降低炎症反应程度有关。     

姜黄素干预油酸诱导的ALI/ARDS大鼠模型对NF-κB、TNF-α和IL-6的影响

急性肺损伤(acute lung injury,ALI)/急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)发病机制的大量研究表明核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)激活是其发生、发展的中心环节.姜黄素作为治疗ALI/ARDS的可能潜在性药物的作用和机制尚不明晰.该研究将大鼠随机分为正常组(C组)、模型组(M组)、二甲基亚砜(D组)和姜黄素治疗组(T组),通过大鼠ALI/ARDS模型,利用光镜H.E.染色观察肺部组织形态学变化,比较肺湿/干重(W/D),酶联免疫吸附法(ELISA)测定支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolarlavage fluid,BALF)中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)含量动态变化,以及间接免疫荧光染色和免疫印记(Western blot)检测肺组织NF-κB蛋白水平变化,分析姜黄素对ALI的保护作用以及NF-κB、TNF-α和IL-6水平的影响.研究发现造模后4 h,M组BALF中TNF-α、IL-6升高并达高峰(P<0.05);姜黄素干预后,T组肺组织病理学改变减轻,BALF中蛋白渗出、TNF-α和IL-6明显减少(P<0.05).间接免疫荧光检测和Western blot结果显示C组大鼠肺组织蛋白抽提物中存在少量NF-κB蛋白,而M组明显升高,在4 h时达高峰,这一峰值出现时间与造模后肺内炎性损伤因子TNF-α、IL-6释放的高峰时间相吻合.姜黄素治疗后T组肺组织提取物NF-κB水平显著低于M组,且在12 h达高峰(P<0.05).D组与M组各检测指标未见差异(P>0.05).结果表明姜黄素能明显抑制ALI/ARDS后的NF-κB的表达,抑制炎性反应,对ARDS可能具有潜在治疗价值.     

人工合成红景天苷对大鼠急性肺损伤的保护作用

为了研究人工合成红景天苷(salidroside,Sal)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导大鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的保护作用及其机制,将雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为生理盐水对照组、3 mg/kg LPS损伤组、不同剂量Sal干预组(5、20和80 mg/kg)以及5 mg/kg地塞米松(dexamethasone,Dex)干预组,气管内滴注LPS建立ALI模型,在LPS造模前0.5 h腹腔给予人工合成Sal或Dex,造模6 h后处死动物。计量肺湿/干重比值(wet/dry weight ratio,W/D),苏木素-伊红染色观测肺组织病理形态学变化和肺损伤评分。用瑞氏染色计数肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)离心沉淀的中性粒细胞(polymorphonuclear leukocyte,PMN),用BCA法测定BALF离心上清蛋白含量,并用酶联免疫吸附法测定TNF-α、IL-1β和IL-6的含量。测定肺组织中髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,Western blot检测肺组织中磷酸化NF-κB和总NF-κB蛋白表达水平。结果显示,与LPS组比较,人工合成Sal能减轻肺组织损伤程度,降低肺损伤评分和W/D比值(P0.05),减少BALF中PMN计数、蛋白含量以及炎症因子水平(P0.05),降低肺组织中MPO和MDA含量(P0.05),抑制肺组织中磷酸化NF-κB蛋白的表达(P0.05)。以上结果提示,人工合成Sal对LPS诱导的ALI具有保护作用,其机制与抑制肺组织NF-κB蛋白磷酸化以及减少PMN在肺内聚集有关。     

急性肺损伤大鼠肺组织基质金属蛋白酶2及其抑制因子蛋白和mRNA的表达

目的探讨内毒素致急性肺损伤（ALI）大鼠肺组织核转录因子-κB（NF-κB）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）及其抑制因子（TIMP-2）蛋白和mRNA表达的变化。方法 20只雄性Wistar大鼠随机分为2组：对照组、LPS模型组,每组再分为4 h和8 h两个亚组。尾静脉注射脂多糖（LPS）（10 mg/kg）建立大鼠急性肺损伤模型。检测血白细胞计数、支气管肺泡灌洗液（BALF）蛋白含量,采用免疫组化ABC法和实时荧光定量PCR分别测定肺组织NF-κB、MMP-2、TIMP-2蛋白及其mRNA的表达,并观察肺组织病理变化。结果与对照组相比,模型组4 h和8 h时大鼠肺组织中的NF-κB、MMP-2蛋白染色阳性面积率及其mRNA表达均显著增高（P〈0.01）、TIMP-2蛋白染色阳性面积率及其mRNA表达均明显降低（P〈0.05或P〈0.01）。病理学观察显示,模型组大鼠肺组织出现出血及坏死。结论内毒素致急性肺损伤的发病机制可能与NF-κB、MMP-2蛋白及其mRNA表达升高、TIMP-2蛋白及其mRNA表达降低有关。     

PRMT6过表达在NF-κB/p65介导小鼠肺气肿炎症反应中的作用

[目的]观察蛋白精氨酸甲基转移酶6(PRMT6)过表达在NF-κB/p65介导小鼠肺气肿模型炎症反应中的作用及机制。[方法]80只Balb/c小鼠暴露于香烟烟雾建立肺气肿模型,随机分为阴性对照组、模型组、阳性对照组(空白慢病毒载体气管内滴注)和PRMT6过表达组(PRMT6慢病毒载体气管内滴注)各20只。HE法观察肺组织形态学,Western Blot测定肺组织PRMT6表达。ELISA测定肺泡灌洗液(BALF)和肺组织匀浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-8(IL-8)水平。[结果]与阴性对照组比较,模型组和阳性对照组小鼠气道阻力、BALF和肺组织匀浆TNF-α及IL-8水平、肺组织NF-κB/p65表达均升高,动态肺顺应性、肺组织PRMT6相对表达量降低(P<0.05);与模型组和阳性对照组比较,PRMT6过表达组小鼠气道阻力、BALF和肺组织匀浆TNF-α及IL-8水平、肺组织NF-κB/p65表达降低,动态肺顺应性、肺组织PRMT6相对表达水平升高(P<0.05)。[结论]PRMT6过表达可能通过抑制肺气肿小鼠肺组织NF-κB/p65核转位,发挥抗炎作用,改善肺功能。     

L-精氨酸对脂多糖诱导大鼠肺损伤的保护作用及其机制的研究

目的：观察一氧化氮供体L-精氨酸（L-Arg）对脂多糖诱导大鼠肺损伤炎症反应和核因子-κB（NF-κB）信号通路的影响,探讨L-Arg对肺损伤的保护作用及其机制。方法：健康雄性SD大鼠采用舌下静脉注射脂多糖（LPS）复制肺损伤模型,分别于给予LPS3h和6h后给予生理盐水（对照组及LPS组,ip）和L-Arg（500mg/kgip）（L-Arg治疗组）,治疗3h。每组8只动物。免疫组化染色分析肺组织中NF-κB的核移位;逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）检测肺组织细胞间粘附分子-1（ICAM-1）基因表达;放射免疫法分别测定肺组织中肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白介素6（IL-6）的含量;光镜观察肺组织病理变化。结果：与对照组比较,大鼠肺损伤后NF-κB活化,明显从细胞浆移位于细胞核,表达量也显著增加;ICAM-1基因表达上调;肺组织中TNF-α、IL-6含量明显升高。肺损伤3h用L-Arg治疗3h后,NF-κB从细胞浆向细胞核的移位被明显限制,NF-κB的表达量、肺组织中TNF-α、IL-6含量明显低于相应的LPS组,肺组织病理改变减轻;肺损伤6h用L-Arg治疗3h对LPS引起的以上变化没有明显影响。结论：LPS3h后给予L-Arg可减轻内毒素性肺损伤,抑制核因子的活化,在一定程度上阻断NF-κB相关信号通路的传导,减轻炎症反应是其机制之一。     

大潮气量致急性肺损伤犬呼吸机相关性肺损伤模型的构建

目的建立大潮气量致急性肺损伤（ALI）犬呼吸机相关性肺损伤（VILI）模型。方法健康雄性杂种犬12只用油酸静脉注射法制备犬ALI模型,造模成功后进行支持通气15min过渡,然后随机分为VILI组及对照组行机械通气6 h,每组6只。VILI组潮气量（Vt）=20 mL/kg,对照组Vt=6 mL/kg,两组呼气末正压（PEEP）均为10 cmH2O。动态观察各组血气交换指标变化。通气6 h后取支气管肺泡灌洗液（BALF）作白蛋白浓度检查,取肺组织作病理切片肺损伤评分。结果各组在油酸静脉注射后（2.50±0.80）h达到ALI标准。VILI组在犬机械通气6 h后PaO2、SaO2及氧合指数（OI）较对照组略下降（P〈0.05）,而PaCO2波动不大,且心率、血压波动也较对照组小（P〈0.05）。VILI组BALF中蛋白浓度和肺组织损伤评分均较对照组显著升高（分别P〈0.05,P〈0.01）。结论本实验成功建立了大潮气量致ALI犬VILI模型。     

乌司他丁对机械通气致肺损伤大鼠肺组织CC16表达的影响

目的通过观察乌司他丁（UTI）对大潮气量机械通气大鼠肺组织Clara细胞分泌蛋白（CC16）表达的影响,探讨CC16在机械通气所致肺损伤（VILI）发病中作用以及UTI对VILI的干预作用。方法 24只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、大潮气量组和UTI干预组,观察其肺组织病理学改变,测定肺组织中丙二醛（MDA）和BALF中总蛋白（TP）含量,采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测肺组织CC16 mRNA的表达,采用免疫组织化学染色法检测肺组织中CC16蛋白表达及Clara细胞计数。结果与对照组比较,大潮气量肺组织MDA的含量及BALF总蛋白含量明显升高（P〈0.01）,而肺细支气管上皮细胞CC16mRNA及其蛋白表达水平明显降低（P〈0.01）;与大潮气量组比较,UTI干预组大鼠肺组织中MDA的含量及BALF总蛋白含量明显降低（P〈0.01）,而肺细支气管上皮细胞CC16mRNA及其蛋白表达水平明显升高（P〈0.01）。结论大潮气量机械通气导致肺组织CC16 mRNA及其蛋白表达水平降低在VILI发病中起重要作用,乌司他丁不但能促进Clara细胞分泌CC16而抑制肺组织炎症反应,还能抑制脂质过氧化物的产生,对VILI有一定保护作用。     

芍药苷对哮喘模型小鼠气道炎症趋化因子及受体的干预作用

目的观察芍药苷给药后对小鼠哮喘模型气道炎症趋化因子及受体的影响。方法用卵蛋白(OVA)致敏和激发建立小鼠哮喘模型;ELISA法检测血清IL-6、TNF-α水平及支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中卵蛋白特异性Ig E(OVA-Ig E)和趋化因子CCL19、CCL21水平;RT-PCR法检测肺组织中趋化因子受体CCR7mRNA表达;Western blot检测肺组织CCR7及核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)蛋白表达。结果芍药苷干预组小鼠血清IL-6、TNF-α水平显著下降;BALF中OVA-Ig E和CCL19、CCL21水平显著降低;肺组织CCR7mRNA、CCR7及NF-κB蛋白表达明显减少。结论芍药苷对哮喘模型小鼠气道炎症趋化因子CCL19/CCL21及其受体CCR7具有显著的抑制作用。     

血红素加氧酶-1对急性重症胰腺炎相关肺损伤TLR4/NF-κB通路的影响

目的:探讨血红素加氧酶-1(HO-1)对急性重症胰腺炎相关肺损伤(PALI)Toll样受体-4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号传导通路的影响。方法:32只SD大鼠随机分为Sham组、PALI组、HO-1促进剂组、HO-1抑制剂组,每组8只。PALI组经胆胰管注入牛磺胆酸钠制备急性重症胰腺炎(ANP)动物模型。Sham组胆胰管内不注入牛磺胆酸钠,其余操作同PALI组。HO-1促进剂组于造模后30 min经腹腔注射牛血晶素75μg/kg;HO-1抑制剂组于造模后30 min经腹腔注射锌-原卟啉20μmol/kg。PALI组和Sham组均于造模后30 min经腹腔注射等量生理盐水。各组大鼠术后24 h,进行肺损伤学评分,统计肺湿/干重比值。检测大鼠术后24 h血清淀粉酶、TNF-α、IL-6、NGAL水平。检测大鼠术后24 h肺组织中TLR4、NF-κB p65蛋白表达。结果:PALI组肺损伤学评分、肺湿/干重比值、淀粉酶、TNF-α、IL-6、NGAL、TLR4、NF-κB p65明显高于Sham组;HO-1促进剂组肺损伤学评分、肺湿/干重比值、淀粉酶、TNF-α、IL-6、NGAL、TLR4、NF-κB p65明显低于PALI组;HO-1抑制剂组肺损伤学评分、肺湿/干重比值、淀粉酶、TNF-α、IL-6、NGAL、TLR4、NF-κBp65明显高于PALI组;差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:HO-1能够通过抑制TLR4/NF-κB信号通路的激活,下调TNF-α、IL-6、NGAL等炎症因子的释放,从而发挥减轻急性重症胰腺炎相关肺损伤的作用。     

脂多糖对新生小鼠肺血管内皮细胞的影响及机制探讨

该文旨在探讨脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)对新生小鼠肺血管内皮细胞的影响及机制。将分离培养的肺血管内皮细胞随机分为空白对照组和LPS组;用10μg/mL的LPS处理细胞后分别于0 h、6 h、12 h、24 h、48 h时间点收集细胞标本进行检测;采用划痕实验观察LPS对肺血管内皮细胞迁移的影响;用荧光定量PCR(Real-time PCR, RT-PCR)检测白介素-1β(IL-1β)、巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α) mRNA水平变化; Western blot检测血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)及核因子κB(nuclear factor kappa-B, NF-κB)相关蛋白P65水平的变化。结果显示,体外分离培养的肺血管内皮细胞成鹅卵石样排列, VIII因子相关抗原和CD31表面抗原荧光染色阳性。划痕实验中, LPS组细胞在12 h的迁移高于对照组(P0.001);荧光定量PCR检测到LPS组分泌的炎症因子IL-1β、TNF-α和趋化因子MIP-1α、MCP-1的mRNA表达明显高于对照组(P0.001); Western blot显示, LPS组与对照组相比, VEGF蛋白表达在24 h、48 h处降低(P0.05), VEGFR2蛋白表达在各时间段都明显降低(P0.001),同时, NF-κB相关蛋白P65活性显著升高(P0.05)。研究表明,脂多糖诱发的炎症反应影响肺血管内皮细胞的发育,其机制可能与NF-κB通路激活,诱导炎症因子、趋化因子表达升高和VEGF/VEGFR2表达下降有关。     

红景天苷对脂多糖诱导小鼠巨噬细胞炎性介质分泌的影响

本文旨在探讨红景天苷(salidroside,Sal)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导小鼠巨噬细胞系J774.1炎性活化的影响及其可能机制。J774.1细胞分为PBS对照组、LPS(0.5μg/m L)刺激组和不同剂量(5、25、125μg/m L)Sal预处理+LPS组。CCK-8比色法检测细胞活性,ELISA测定培养上清中TNF-α、MCP-1和MIP-2含量,硝酸还原酶法测定上清中NO含量,RT-PCR检测细胞i NOS m RNA表达,Western blot检测胞浆i NOS蛋白和胞浆与胞核NF-κB/p65蛋白表达,Trans AMTM NF-κB/p65活性检测试剂盒测定NF-κB/p65 DNA结合活性。结果显示,0.5μg/m L LPS以及不同剂量(5、25、125μg/m L)Sal处理细胞12 h对J774.1细胞活力无影响;与LPS刺激组比较,LPS刺激前Sal预处理J774.1细胞,培养上清中TNF-α、MCP-1、MIP-2和NO含量呈剂量依赖性降低(P0.05),细胞i NOS m RNA和蛋白表达水平下调(P0.05),胞核NF-κB/p65蛋白表达降低(P0.05)而胞浆NF-κB/p65蛋白相应增加(P0.05),且NF-κB/p65 DNA结合活性呈剂量依赖性降低(P0.05)。以上结果提示,Sal预处理能够降低LPS诱导的巨噬细胞炎性活化,其机制可能通过干扰LPS/TLR4/NF-κB信号通路,从而降低炎性介质及细胞因子的过度表达和分泌。     

脂多糖诱导大鼠急性肺损伤的机制研究

目的:观察NF-κB及CyPA在内毒素诱导急性肺损伤大鼠肺组织的活性变化,探索NF-κB及CyPA在内毒素诱导急性肺损伤的发病机理中的作用.方法:36只雄性SD大鼠随机分为2组:A组:正常对照组(n=18)尾静脉注射等量生理盐水;B组:内毒素组(LPS)(n_18):经尾静脉注射LPS 5 mg/kg;分别于造模后6、24、72小时,处死动物收取标本,每个时间点6只(LPS的24小时组因1只死亡固只处死5只).分别测定肺湿重/干重、肺组织TNF-α、IL-1β、NF-κB及CyPA.结果:湿重/干重:B组各个时间点均明显高于A组(P＜0.05);同一时间点的比较:B组较A组显著性升高,P＜0.05;NF-κB的核内表达量及肺组织CyPA的表达各个时间点之间B组均显著高于A组,P＜0.001;结论:NF-κB及CyPA在内毒素诱导大鼠急性肺损伤的发病机理中起了重要的作用.     

外源性硫化氢对大鼠内毒素性肺损伤的影响及机制研究

目的：应用H2S供体硫氢化钠（NaHS）,观察外源性H2S对中性粒细胞（PMN）在脂多糖（LPS）刺激大鼠肺内聚集的影响及其机制。方法：采用尾静脉注射致Sprague-Dawley（SD）大鼠内毒素急性肺损伤（ALI）模型,将大鼠随机分为4组（n=8～12）。对照组：由尾静脉注射无菌生理盐水（0.5ml/kg）;LPS组：由尾静脉注射LPS（1mg/kg）;LPS＋NaHS组：注射LPS前10min腹腔注射NaHS（28μmol/kg）;NaHS组：腹腔注射NaHS（28μmol/kg）。6h后光镜下观察各组大鼠肺组织学变化并计数肺泡间隔中PMN数目（number/HP）;脱氧核苷酸末端转移酶介导的原位末端标记技术（TUNEL）测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中PMN凋亡百分率及应用Western blot检测肺组织细胞间黏附分子（ICAM）-1和核转录因子（NF）-κB表达的变化。结果：注射LPS后动物肺组织出现出血、水肿及PMN聚集等病理征象。LPS组大鼠肺组织中PMN数目较对照组显著增加,PMN凋亡百分率下降,ICAM-1、NF-κB表达显著增高;应用NaHS后每高倍镜PMN数目显著减少,PMN凋亡百分率明显增高,ICAM-1、NF-κB表达显著降低,肺组织损伤减轻。单独应用NaHS组大鼠上述各项指标与对照组大鼠相比无显著差异。结论：NaHS可减少PMN在肺内聚集,其机制与其抑制NF-κB通路,从而下调ICAM-1表达、促进PMN凋亡有关。     

当归对阴虚哮喘小鼠气道黏液高分泌及TNF-α/NF-κB信号通路的影响*

目的: 探讨当归对阴虚哮喘小鼠气道黏液高分泌及TNF-α/NF-κB信号通路的影响。方法: 取KM小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、氨溴索组、当归低、中、高剂量(2、4、8 g/kg)组(n=12),采用卵蛋白与甲状腺片复制阴虚哮喘模型,观测当归对小鼠哮喘症状、IgE、TNF-α以及肺组织Muc5ac与NF-κB表达的影响。结果: 2、4、8 g/kg当归能明显缓解阴虚哮喘小鼠的哮喘症状,降低血清IgE与BALF中TNF-α水平,抑制肺组织Muc5ac与NF-κB的过度表达。结论: 当归具有明显的平喘作用,抑制TNF-α/NF-κB信号通路而缓解气道黏液高分泌是其平喘的作用机制之一。     

NF-κB启动的炎症反应在小鼠侵袭性肺曲霉病肺损伤中的作用

为了探讨NF-κB启动的炎症反应在小鼠侵袭性肺曲霉病肺损伤中的作用,将小鼠分3组:正常组、正常 烟曲霉菌接种组、IPA模型组,小鼠鼻吸入烟曲霉菌第4天处死,取肺组织,肺组织切片经HE染色观察病理损伤;比色法测定肺组织MPO活性;免疫组化法评价肺组织NF-κBp65蛋白的活化:RT-PCR法检测肺组织TNF-α、IFN-γ和β-tublin mRNA的表达. 结果显示,正常健康组小鼠肺组织结构正常,未见炎症发生;正常 烟曲霉菌接种组小鼠肺组织有炎症细胞浸润,未见孢子萌芽;IPA模型组小鼠的肺组织病理损伤严重,可见炎症细胞浸润,孢子萌芽生成菌丝.正常 烟曲霉菌接种组和IPA模型组小鼠肺组织的TNF-α和IFN-γ mRNA的相对表达水平、NF-κB p65免疫组化评分和MPO活性均高于正常组小鼠(P<0.05):并且IPA模型组小鼠肺组织NF-κB p65免疫组化评分值和MPO活性均高于正常 烟曲霉菌接种组(P<0.05).结果提示,烟曲霉菌感染可激活小鼠肺组织NF-κB介导的炎症信号通路,诱导下游TNF-α和IFN-γ的表达,募集大量的中性粒细胞于感染组织,是导致IPA小鼠肺组织严重病理损伤的因素之一.