鲍曼不动杆菌随机扩增多态性DNA法基因分型的研究

目的 利用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对鲍曼不动杆菌进行基因分型建立DNA指纹图谱,调查该菌在各临床科室的流行情况,并将其与药敏谱进行比较.方法 随机收集中南大学湘雅二医院2007年9月到2008年9月分离出的86株鲍曼不动杆菌,采用WHO推荐的K-B法对鲍曼不动杆菌进行药物敏感试验,建立药敏谱,同时利用随机扩增多态性DNA法(RAPD)技术进行基因分型,建立DNA指纹图谱,对二者进行比较,然后结合药敏谱和指纹图谱分析各临床科室鲍曼不动杆菌的感染情况.结果 药物敏感试验将86株鲍曼不动杆菌分为47型,RAPD技术将其分为14型,其中A、F、D、B和L型为5种优势型,其菌株数分别为22、15、11、9和7株.本院ICU,老年病科,神经内科,呼吸内科,神经外科鲍曼不动杆菌检出率较高.结论 RAPD分型方法优于药敏分型,其在流行病学研究上更能证实菌株的相关性,在早期发现和预防感染暴发流行中起重要作用.     

鲍曼不动杆菌老年人分离株耐药性与qacE△1-sul1基因检测

目的了解鲍曼不动杆菌老年人分离株耐药性与qacE△1-sul1基因存在情况,并讨论其临床意义。方法自老年人分离的20抹鲍曼不动杆菌按CLSI做药敏试验,采用聚合酶链反应法检测qacE△1-sul1基因。结果鲍曼不动杆菌qacE△1-sul1基因阳性15株,阳性率为75％。结论鲍曼不动杆菌老年人分离株qacE△1-sul1基因携带率较高,现行的消毒剂或消毒方法的有效性,应引起我国医院消毒界的广泛重视。     

2890株鲍曼不动杆菌的分布特征及耐药谱变迁

目的 探讨鲍曼不动杆菌的分布特征及耐药性的变迁,为临床治疗提供参考.方法 回顾性分析2002年至2011年湖州市中心医院各类临床标本分离出的鲍曼不动杆菌检出率、分布特点及药敏结果.结果 10年共检出鲍曼不动杆菌2890株,分离率为4.9％.来源以痰液为主,占84.3％.科室分布以重症监护室、呼吸内科、脑外科为主.鲍曼不动杆菌对替卡西林、替卡西林/棒酸、哌拉西林和氨苄西林/舒巴坦的耐药率最为严重,并逐年上升;对头孢他啶等10种抗菌药物耐药率也逐年上升,但对头孢哌酮/舒巴坦和多粘菌素E敏感性均良好.结论 鲍曼不动杆菌的分离率和耐药性均呈上升趋势,应重视对该菌耐药性的监测,合理使用抗菌药物,同时加强院感控制,防止耐药菌株播散.     

346株鲍曼不动杆菌临床分布及耐药率分析

目的了解鲍曼不动杆菌引起医院感染的特点以及对抗菌药物的耐药性的变化趋势。方法应用美国BD公司Phoenix^TM100全自动细菌和药敏系统鉴定仪对所分离的364株鲍曼不动杆菌进行鉴定和药敏试验,并进行统计学分析。结果 346株鲍曼不动杆菌来自痰液、伤口分泌物、中段尿、静脉血及大便,分别占58.96%、30.92%、5.49%、4.34%、0.29%。药敏结果显示鲍曼不动杆菌对多粘菌素和米诺环素敏感性最高,耐药率低于10.4%。结论加强鲍曼不动杆菌的耐药监测,了解其耐药性变迁,可合理指导用药,有效控制鲍曼不动杆菌耐药菌株的产生。     

306株鲍曼不动杆菌的临床分布及耐药性监测

目的调查杭州市某医院鲍曼不动杆菌感染的临床分布及其耐药性现状。方法监测该院2004年1月至2006年12月临床分离的306株鲍曼不动杆菌的临床感染分布及耐药性,药物敏感试验采用琼脂纸片扩散法,耐药性数据分析采用WHONET 5软件。结果2004年至2006年3年间,鲍曼不动杆菌的检出率呈逐年增加趋势(从1.60%增至2.40%);临床分布以重症监护室(ICU)最高(84/306),老年患者多见(131/306);有184株(60.13%)来源于痰液标本。药敏试验结果显示鲍曼不动杆菌对美罗培南最敏感,耐药率为4.6%;其次是亚胺培南/西司他丁和头孢哌酮/舒巴坦,耐药率分别为7.2%及8.5%;对3代头孢菌素及环丙沙星的耐药率均>50.0%;同时发现185株(60.5%)为多重耐药菌株。结论鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素及头孢哌酮/舒巴坦较敏感,临床医师应注意合理使用抗菌药物,以减少多重耐药菌株的产生。     

426株鲍曼不动杆菌的耐药性分析与OXA-23型碳青霉烯酶检测

目的 了解暨南大学附属第一医院2009年至2011年鲍曼不动杆菌的分布特点和耐药状况,为临床合理使用抗生素提供依据,同时研究广州地区亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌中OXA-23型碳青霉烯酶的分子流行病学特征.方法 利用梅里埃VITEK-2 Compact微生物分析仪鉴定细菌,K-B法进行药敏试验,采用WHONET 5.6软件统计分析药敏结果,PCR检测OXA-23型碳青霉烯酶的编码基因.结果 2009年至2011年临床分离出426株鲍曼不动杆菌,主要分离自呼吸科病房(119株,占27.9％)和ICU病房(107株,占25.1％),标本类型以痰液为主(361株,占84.7％),鲍曼不动杆菌对12种抗生素的耐药率总体呈逐年上升趋势,对亚胺培南的耐药率从13.2％上升到39.3％,在124株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌中PCR检出98株OXA-23型碳青霉烯酶阳性菌株.结论 鲍曼不动杆菌对各种抗菌药物的耐药性逐年增强,产OXA-23型碳青霉烯酶是其对亚胺培南耐药的主要机制之一.     

益生乳酸菌的纸片扩散法药敏性试验评价

乳酸菌菌株的药敏性评价是目前国际上益生乳酸菌安全性评价的首要内容, 然而用于乳酸菌药敏性测试的相关国际通引标准还未出台。本文就药敏试验使用的培养基进行了探讨, 并从中选取了合适的商品化培养基——RCA用于乳酸菌的药敏性测试。选取的培养基适合目前市场上常用益生菌的生长, 经方法优化后可得到满意的结果, 为今后制定针对乳酸菌的抗菌药物敏感性试验执行标准提供了一定依据。随后采用纸片扩散法对分属于4个属的9株乳酸菌进行了19类51种抗生素的敏感性测定, 较全面地了解了这些菌株的药敏谱。     

具有抑制单胺氧化酶作用的干酪乳杆菌JH-23的药敏性研究

采取纸片琼脂扩散法对具有抑制单胺氧化酶作用的干酪乳杆菌JH-23进行抗生素的敏感性测定.考察了不同菌液浓度、培养时间和接种方式对药敏性实验的影响,在此基础上建立了其对12类30种抗生素的药敏谱,以进一步全面评估该益生菌的安全性.     

鲍曼不动杆菌中OXA碳青霉烯酶的表型筛选与PCR检测

摘要：目的 了解OXA碳青霉烯酶在暨南大学附属第一医院耐亚胺培南鲍曼不动杆菌中的流行状况,完善OXA碳青霉烯酶的分子流行病学资料。方法 采用改良Hodge试验筛选产碳青霉烯酶菌株,多重PCR法检测OXA碳青霉烯酶的编码基因（blaOXA-23-like、blaOXA-24-like、blaOXA-58-like和blaOXA-143）,利用生物信息学的方法对OXA亚型进行比对分析并制作分子进化树。结果 在157株耐亚胺培南鲍曼不动杆菌中Hodge试验筛选出碳青霉烯酶表型阳性菌株141株,PCR检测结果显示有132株携带OXA-23编码基因,未检测到OXA-24-like、OXA-58-like和OXA-143亚型。结论 产OXA-23碳青霉烯酶是该院鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药的主要机制之一。     

微生物分析仪法与常规纸片扩散法在细菌耐药表型检测中的比较

为了比较VITEK 2Compact微生物分析仪法和常规纸片扩散法在细菌耐药表型检测中的差异,随机选取我院细菌室2012年7月至2013年6月分离保存的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯杆菌各100株,分别以常规纸片扩散法和VITEK 2Compact微生物分析仪检测其耐药表型,并分析比较结果。检测结果显示,VITEK 2Compact检测耐药表型结果与常规纸片扩散法检测结果无显著性差异(p>0.05)。本研究表明VITEK 2Compact微生物分析仪能对致病菌的耐药表型进行快速、准确地测定,且灵敏度、特异度较高,能够及时、准确地为临床提供药敏结果,大大提高抗感染治疗的疗效。     

胰十二指肠切除患者术后腹腔感染的危险因素和病原学特征及药敏试验分析

目的:探讨胰十二指肠切除患者术后腹腔感染的危险因素,并对其进行病原学特征及药敏试验分析。方法:回顾性分析2016年1月到2018年12月期间在中国人民解放军联勤保障部队第967医院接受胰十二指肠切除术治疗的60例患者的临床资料,分析术后腹腔感染的危险因素。根据细菌培养结果和药敏试验情况对术后腹腔感染患者的病原菌分布情况及其耐药性进行分析。结果:单因素分析显示术中输血量、肺部感染、胆瘘、胰瘘均与腹腔感染的发生有关(P0.05)。多因素Logistic回归分析显示,术中输血量≥1000 mL、肺部感染、胆瘘、胰瘘均是胰十二指肠切除患者术后发生腹腔感染的危险因素(P0.05)。20例术后腹腔感染患者的腹腔引流液中共培养出54株菌株,其中革兰阳性菌23株(42.59%)、革兰阴性菌28株(51.85%)、真菌3株(5.56%),主要革兰阳性菌(粪肠球菌、屎肠球菌、表皮葡萄球菌)对环丙沙星、红霉素敏感率低,均低于17.00%,对利奈唑胺、万古霉素敏感率高,均为100.00%,主要革兰阴性菌(大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌)对头孢他啶、头孢唑林和哌拉西林的敏感率较低,均低于或等于25.00%,对庆大霉素、亚胺培南的敏感率较高,均高于或等于80.00%。结论:术中输血量过多以及发生了肺部感染、胆瘘、胰瘘均是胰十二指肠切除患者术后发生腹腔感染的危险因素,临床上应根据药敏试验结果针对性地使用抗菌药物。     

A Simple Novel Agar Diffusion Method for Isolation of Indigenous Microalgae Chlamydomonas sp. CRP7 and Chlorella sp. CB4 from Operational Swampy Top Soil

A simple agar diffusion method is developed where pure colony of Chlamydomonas sp. CRP7 was isolated from Chlorella sp. CB4 mixtures by passing through agar migration with a light exposure of 6,000 lux for 7 h. The main concept behind it is that Chlamydomonas has flagella and the rhodopsin pigment is attracted towards light. Thus the above two microalgae species can be separated from the mixtures as eye spot serves as a navigator and flagella serves as a propeller for Chlamydomonas spp. Further the genomic DNA was isolated and purified from the above mentioned two species after the separation from the mixtures. PCR amplification was carried out for ITS1, 5.8S and ITS2 regions. The amplified products were sequenced and the sequence analysis confirmed that they belong to Chlamydomonas sp. and Chlorella sp. This is an important augmentation for isolation and separation of microalgae.     

Bioassay of Mildiomycin and a Rapid, Cost-Effective Agar Plug Method for Screening High-yielding Mutants of Mildiomycin

Summary A simple, reliable and low-cost agar diffusion bioassay for quantitative determination of mildiomycin was developed using a strain of Rhodotorula rubra AS 2.166 as the indicator organism and potato dextrose agar at pH 7.0 as the test medium. With equivalent precision and accuracy to HPLC analysis, this method was applied to analyse mildiomycin in complex culture broth during the fermentation process. A modified agar plug method based on the bioassay was constructed for rapid and efficient screening of high-yielding mutants of mildiomycin. Within four weeks, a high production strain, the mildiomycin productivity of which was 75.5% higher than the parent strain, was obtained from 15,000 mutants.     

体液病原菌分布及革兰氏阴性杆菌药敏结果分析

目的：分析2005-2006年我院内无菌体液病原菌流行状况及革兰氏阴性杆菌对常用抗生素的敏感性,以便更好地为临床治疗感染性疾病提供用药参考。方法：所有菌株用美国BD公司BBLCRYSTAL AUTOREADER仪器进行鉴定,药敏用K-B法,培养基和药敏纸片为BD公司的。结果：80株致病菌中,肠杆菌科占65%,非发酵菌占12.5%,革兰氏阳性葡萄球菌占17.5%,酵母样真菌占2.5%,厌氧菌占2.5%。大肠埃希菌感染占首位（50株）其次为铜绿假单胞菌（3株）。嗜麦芽窄食单胞菌（3株）。肺炎克雷伯菌（2株）。大肠埃希菌中ESBL阳性菌18%（9/50）ESBL阳性菌和阴性菌对不同抗菌药物的敏感性有显著差异,前者耐药明显高于后者。结论：临床应根据药敏结果合理使用抗生素,减少院内感染的发生。     

念珠菌体外药敏试验方法的比较

目的探讨酵母菌纸片扩散法的临床适用性.方法分别采用E-test法、法国梅里埃ATB Fungs酵母菌药敏试验与K-B纸片法,检测念珠菌的体外药物敏感率,比较其差异显著性.结果 K-B纸片法和E-test法同时监测伊曲康唑(IT)、氟康唑(FL).2种药物的符合率为96.8%、100%,其敏感率比较88%/85%、98.4%/98.4%,差异无显著性(P＞0.05);K-B纸片法和法国梅里埃ATB Fungs酵母菌药敏试验法对制霉菌素(NYS)、酮康唑(KET)、益康唑(ECO)和咪康唑(MIC)这4种药物药敏结果的符合率分别为100%、100%、91.2%和93.6%,敏感率比较100%/100%、83.2%/83.2%、70%/62%和68%/71%,差异也无显著性(P＞0.05).结论 K-B纸片扩散法可用于临床酵母菌的药敏试验.     

大肠埃希菌泌尿系统感染患者临床分布及药物敏感性分析

摘要 目的：探讨大肠埃希菌引起泌尿系统感染患者的临床分布情况及其药物敏感性分析,为临床诊断及合理使用抗菌药物提供理论性依据。方法：选取2015年1月至2020年12月期间诊治的2052例大肠埃希菌泌尿系统感染患者为研究对象,使用MALDI-TOF MS全自动微生物鉴定质谱仪对细菌进行鉴定,应用VITEK 2 Compact全自动微生物鉴定及药敏分析仪进行药物敏感性分析。结果：2052例大肠埃希菌泌尿系统感染患者中泌尿外科患者占比最高,为17.50%,其次为肾病科患者,占12.87%。其中检出803株产ESBLs的大肠埃希菌,泌尿外科占比最高,为18.56%,其次是肾病科占13.95%,内分泌科占11.71%,重症医学科10.09%。2052株大肠埃希菌整体药敏分析结果显示,大肠埃希菌对美罗培南、亚胺培南、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、呋喃妥因、米诺环素、头孢西丁等药物敏感率高,均>90%,头孢唑啉、环丙沙星、左氧氟沙星、氨苄西林/舒巴坦、复方新诺明、氨苄西林敏感率低,均<50%,其中氨苄西林敏感率最低,只有28.17%。结论：大肠埃希菌泌尿系统感染主要发生在泌尿外科,产ESBLs大肠埃希菌整体检出率较高,临床应重视泌尿系统感染患者的尿细菌培养及药物敏感性分析,尽量避免仅凭经验性用药,根据药物敏感性结果合理选择抗菌药物。     

胆道疾病患者343份胆汁细菌培养与药敏分析

了解胆汁中细菌分布及药敏情况,以指导临床合理用药。对343例胆道疾病手术患者抽取胆汁进行常规培养及应用英国OXID血液增菌瓶和ATB自动细菌鉴定统对标本进行细菌鉴定和药敏分析。343份胆汁中共培养出10种113株细菌(不包括厌养菌)阳性率为37.4%,主要菌种有大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、粪肠球菌、阴沟肠杆菌、铜绿假单胞菌比率较高。药敏结果显示,革兰阴性杆菌对亚胺培南、头孢三代、阿米卡星、庆大霉素敏感性较好;革兰阳性球菌对万古霉素、亚胺培南、利福平敏感性较好。胆道感染多由肠道细菌逆行感染引起的,为此,根据药敏试验结果指导临床用药是非常重要的。     

SETD8基因表达对乳腺癌细胞周期、活性氧及药物敏感性的影响

目的:构建SETD8重组慢病毒载体,探讨SETD8对人乳腺癌细胞周期、氧化应激的影响,并观察稳定敲低SETD8后对乳腺癌细胞多西他赛敏感性的影响。方法:构建含SETD8基因的重组慢病毒载体,经转染,荧光显微镜观察感染效率;采用RT-qPCR和Western blot检测SETD8 m RNA和蛋白相对表达量;采用流式细胞技术检测细胞周期及活性氧水平,通过CCK-8试剂检测稳定敲低SETD8基因的乳腺癌细胞对多西他赛的敏感性变化。结果:成功包装慢病毒,荧光观察慢病毒感染效率在85%左右,通过PCR和WB验证SETD8过表达及敲低稳转细胞系的效率显著(P0.01)。低表达SETD8的乳腺癌细胞周期停滞在G2/M和S期,细胞内ROS水平高于对照组。不同浓度多西他赛处理的SETD8敲低稳转细胞系的细胞活性较对照组明显降低(P0.01)。结论:慢病毒介导下调SETD8表达,使得乳腺癌细胞周期阻滞在G2/M期,细胞内ROS增多,与多西他赛发生协同作用,从而增加了药物敏感性。