先天性非小头畸形寨卡病毒感染的研究进展

寨卡病毒(Zika virus, ZIKV)是一种主要通过蚊虫叮咬传播的黄病毒。不同于其他黄病毒,ZIKV还可以通过性传播或垂直传播引起神经系统障碍,与新生儿小头畸形密切相关,这些特征使ZIKV受到全球关注。进一步临床证据表明,产前暴露于ZIKV的婴儿,即使在出生时没有小头畸形,也可能存在与ZIKV有关的神经发育障碍,尤其是在远期神经发育方面表现出语言、运动和认知的不同程度的发育迟缓。目前针对先天性非小头畸形ZIKV感染的机制已有一些直接和间接证据,其发病机制可能包括ZIKV导致神经细胞死亡、诱导细胞自噬以及非神经细胞作用等。现就近年来产前ZIKV暴露对非小头畸形新生儿神经发育影响相关的研究作一概述。     

寨卡病毒引发小头症?关系越确定,防治越迫切!

自2015年初至今,寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)以巴西为首先后在数十个国家和地区暴发流行。几乎同时,与日俱增的小头症患儿使全球对此陷入警惕状态。目前,全球正在积极探索ZIKV感染所引发的各种神经系统疾病。在越来越多证据表明在细胞水平和动物模型中ZIKV能直接损伤胚胎脑部发育的同时,ZIKV感染者的防治需求也越来越迫切。本文从ZIKV的流行病学、与小头畸形因果关系的研究进展及其预防疫苗和治疗药物的研究现状等方面进行概述。     

寨卡病毒,不仅仅是小头畸形

寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)属于黄病毒科黄病毒属,由蚊虫叮咬传播。ZIKV发现于1947年。2007年以来,由于基因突变,ZIKV获得了更强的神经嗜性和在蚊虫体内播散的能力,因而在全球加快流行,并与成人吉兰-巴雷综合征和胎儿小头畸形的发生密切相关。最近的临床观察和动物研究进一步表明,ZIKV感染引起的临床症状复杂多样,所造成的疾病不仅仅是小头畸形,它还能够损伤雄性生殖系统,干扰下丘脑对神经内分泌系统的调节,引起多种激素分泌缺陷,导致生长发育迟缓和学习记忆能力损伤。因此,对于先天感染ZIKV的新生儿,不仅要在孕期监测小头畸形的发生,出生后也需进行长期的跟踪观察;对于出生后感染ZIKV的婴幼儿以及学龄前儿童,无论病情轻重,也需要进行随访,以明确ZIKV感染的远期影响。     

寨卡疫苗相关研究进展

寨卡病毒(zika virus, ZIKV)是一种主要以蚊虫传播的虫媒病毒,其感染孕妇后,可导致胎儿畸形和新生儿小头症;感染成人后,可引起以神经缺陷为特征的自身免疫性疾病"格林-巴利综合征"等病症。近年来,寨卡病毒已是一种严重危害人类健康的病原体,对全球公共卫生产生了重大威胁,因此,各国相关研究人员均在积极研制安全有效的ZIKV疫苗,以预防该病毒的感染和蔓延。现就ZIKV的基本特征、目前正在研究的几种ZIKV候选疫苗,如减毒活疫苗及嵌合活疫苗、全灭活病毒疫苗、核酸疫苗、病毒载体疫苗等作一概述,旨在为该疫苗的进一步研究提供参考。     

乙脑/寨卡嵌合病毒包膜蛋白V343A及I341V/V343A联合突变对小鼠脑内神经毒力的影响

为探讨乙脑/寨卡嵌合病毒JE/ZIKV(MR766)的包膜蛋白V343A突变及I341V/V343A联合突变对小鼠神经毒力的影响，分别构建了V343A和I341V/V343A联合突变的嵌合病毒全长cDNA质粒，经酶切鉴定后，体外转录获得病毒RNA，并电转染入BHK21细胞拯救病毒。利用病毒测序和免疫荧光实验鉴定病毒；蚀斑实验和生长曲线对比突变病毒与亲本株生物学特性差异；动物实验比较神经毒力差异。基因测序与免疫荧光等证明突变病毒JE/ZIKV(V343A)和JE/ZIKV(I341V/V343A)拯救成功。突变病毒JE/ZIKV(V343A)和JE/ZIKV(I341V/V343A)的蚀斑直径分别为（1.09±0.15） mm和（1.15±0.29） mm，小于亲本株JE/ZIKV(MR766)蚀斑直径（2.09±0.36） mm（P<0.001）；生长曲线显示两突变病毒增殖速度均快于亲本株，且JE/ZIKV(I341V/V343A)快于JE/ZIKV(V343A)；动物实验结果显示，JE/ZIKV(V343A)的LD50为5.62 pfu/0.03 mL，JE/ZIKV(I341V/V343A)的LD50为34.84 pfu/0.03 mL，均高于亲本株（LD50=2.21 pfu/0.03 mL）。研究结果表明，寨卡病毒E蛋白V343A突变使嵌合病毒小鼠脑内神经毒力减弱，I341V/V343A联合突变使病毒毒力进一步减弱，表明E蛋白的341和343位氨基酸残基参与了嵌合病毒对小鼠的脑内神经毒力的调控。     

Zika病毒与Zika病毒病

Zika病毒(Zika virus,ZIKV)是一种新现虫媒病毒,属于黄病毒科黄病毒属。其感染后临床表现为轻症发热,因病重住院者罕见。流行病学数据显示Zika病毒病的流行与自身免疫性神经性疾病格林-巴利综合征及先天性小头畸形有关,引起了专家和公众的关注,但具体机制有待深入研究。     

Science子刊:利用LAMP方法快速低成本地检测寨卡病毒

正在一项新的研究中,来自美国、巴西、尼加拉瓜和德国的研究人员开发出一种新的技术而使得通过捕捉和测试蚊子来监控寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)传播能够变得更加快速和更加低廉。这种基于环介导等温扩增反应(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)的检测方法能够区分寨卡病毒亚洲毒株和非洲毒株,而且在理论上可能被用来在现场直接检测蚊子中     

Nature:研究解析出寨卡病毒结构并鉴定药物靶向位点

正在一项新的研究中,来自杜克-新加坡国立大学医学院(Duke-NUS)的研究人员在理解寨卡病毒(ZIKV)结构方面取得重要突破。相关研究结果在线发表在Nature期刊上。研究揭示出ZIKV病毒结构,并且鉴定出这种病毒表面上的潜在药物靶向作用位点。这一认识将有助全世界努力抵抗这种知之甚少的病毒。当前,ZIKV是公共卫生和研究的重点。     

寨卡病毒研究进展

寨卡病毒(zikavirus,ZIKV)发现距今已有70多年。早期的患者临床症状较轻,通常为自限性疾病。近年来,由于基因突变使ZIKV致病力逐渐增强,导致严重的神经系统并发症,引起了人们普遍关注。目前,全球尚无针对性的疫苗和药物,ZIKV的暴发、流行已经成为全球公共卫生问题。为了有效防控ZIKV感染,许多国家和地区加快了对ZIKV的研究,并取得了一定的成果,现就ZIKV的生物学特征、流行特点、致病机制及防控措施等作一概述。     

Nature:研究破解寨卡病毒秘密

正解析寨卡病毒结构并鉴定药物靶向位点在一项新的研究中,来自杜克-新加坡国立大学医学院(Duke-NUS)的研究人员在理解寨卡病毒(ZIKV)结构方面取得重要突破。相关研究结果在线发表在Nature期刊上。这些发现揭示出ZIKV病毒结构,并且鉴定出这种病毒表面上的潜在药物靶向作用位点。这一认识将有助全世界努力抵抗这种知之甚少的病毒。当前,ZIKV是公共卫生和     

寨卡病毒RNA恒温快速扩增检测方法的建立

2015年以来,寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)感染被报告和小头症之间存有关联,已有多个国家和地区报告ZIKV感染证据,我国持续面对ZIKV输入风险。为发展适用于现场的快速高效的ZIKV核酸检测方法,选取ZIKV NS1片段保守区设计特异性引物探针,经优化建立了多种功能蛋白介导的ZIKV RNA恒温快速扩增检测方法。利用所制备的ZIKV NS1片段体外转录RNA作为参考品,并与实时荧光定量RT-PCR检测结果进行比较。同时利用ZIKV细胞培养物中加入健康人血清制备的模拟临床标本进行初步验证。结果显示,建立的RNA恒温快速扩增检测方法可100%检出100拷贝/μL体外转录RNA,可在15 min以内判读,大大低于PCR的常规检测时间;用该方法检测其他相关病毒,无交叉反应。病毒滴度在(10~4～10~7PFU/mL)之间的模拟临床病人标本可达到100%检出。本研究建立的ZIKV RNA恒温扩增快速检测方法快速、灵敏、特异,适用于ZIKV现场应急检测,为ZIKV的防控提供了重要的技术支撑。     

Science子刊:利用LAMP方法快速低成本地检测寨卡病毒

正在一项新的研究中,来自美国、巴西、尼加拉瓜和德国的研究人员开发出一种新的技术而使得通过捕捉和测试蚊子来监控寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)传播能够变得更加快速和更加低廉。这种基于环介导等温扩增反应(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)的检测方法能够区分寨卡病毒亚洲毒株和非洲毒株,而且在理论上可能被用来在现场直接检测蚊子中可能存在的寨卡病毒。相关研究结果发表在Science Translational Medicine期刊上,论文标题为"Rapid and specific detection of     

Generation of A Stable GFP-reporter Zika Virus System for High-throughput Screening of Zika Virus Inhibitors

Zika virus(ZIKV) is associated with severe birth defects and Guillain-Barre′ syndrome and no approved vaccines or specific therapies to combat ZIKV infection are currently available. To accelerate anti-ZIKV therapeutics research, we developed a stable ZIKV GFP-reporter virus system with considerably improved GFP visibility and stability. In this system a BHK-21 cell line expressing DC-SIGNR was established to facilitate the proliferation of GFP-reporter ZIKV. Using this reporter virus system, we established a high-throughput screening assay and screened a selected plant-sourced compounds library for their ability to block ZIKV infection. More than 31 out of 974 tested compounds effectively decreased ZIKV reporter infection. Four selected compounds, homoharringtonine(HHT), bruceine D(BD), dihydroartemisinin(DHA) and digitonin(DGT), were further validated to inhibit wild-type ZIKV infection in cells of BHK-21 and human cell line A549.The FDA-approved chronic myeloid leukemia treatment drug HHT and BD were identified as broad-spectrum flavivirus inhibitors. DHA, another FDA-approved antimalarial drug effectively inhibited ZIKV infection in BHK-21 cells. HHT, BD and DHA inhibited ZIKV infection at a post-entry stage. Digitonin was found to have inhibitory activity in the early stage of viral infection. Our research provides an efficient high-throughput screening assay for ZIKV inhibitors. The active compounds identified in this study represent potential therapies for the treatment of ZIKV infection.     

Rearrangement of Actin Cytoskeleton by Zika Virus Infection Facilitates Blood–Testis Barrier Hyperpermeability

In recent years,various serious diseases caused by Zika virus (ZIKV) have made it impossible to be ignored.Confirmed existence of ZIKV in semen and sexually transmission of ZIKV suggested that it can break the blood–testis barrier (BTB),or Sertoli cell barrier (SCB).However,little is known about the underlying mechanism.In this study,interaction between actin,an important component of the SCB,and ZIKV envelope (E) protein domain Ⅲ (EDⅢ) was inferred from coimmunoprecipitation (Co-IP) liquid chromatography–tandem mass spectrometry (LC–MS/MS) analysis.Confocal microscopy confirmed the role of actin filaments (F-actin) in ZIKV infection,during which part of the stress fibers,the bundles that constituted by paralleled actin filaments,were disrupted and presented in the cell periphery.Colocalization of E and reorganized actin filaments in the cell periphery of transfected Sertoli cells suggests a participation of ZIKV E protein in ZIKV-induced F-actin rearrangement.Perturbation of F-actin by cytochalasin D (CytoD) or Jasplakinolide (Jas)enhanced the infection of ZIKV.More importantly,the transepithelial electrical resistance (TEER) of an in vitro mouse SCB (mSCB) model declined with the progression of ZIKV infection or overexpression of E protein.Co-IP and confocal microscopy analyses revealed that the interaction between F-actin and tight junction protein ZO-1 was reduced after ZIKV infection or E protein overexpression,highlighting the role of E protein in ZIKV-induced disruption of the BTB.We conclude that the interaction between ZIKV E and F-actin leads to the reorganization of F-actin network,thereby compromising BTB integrity.     

基于麻疹病毒的候选疫苗在同种异体小鼠妊娠模型中介导抗寨卡病毒的保护

<正>寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)流行的影响阐明了用疫苗来减少或预防感染以及预防致畸并发症的必要性。减毒株活麻疹病毒(Measles virus,MV)疫苗是一个很有前途的疫苗平台,因为它们能对其他抗原产生很强的体液和细胞免疫应答,并具有良好的安全性记录。为了探索其对ZIKV的保护潜力,作者将编码ZIKV prM和可溶性E蛋白的重组MV Schwarz株与原型铝佐剂全灭活的ZIKV颗粒疫苗进行了比较。对MV-Zika-sE感染细     

乙脑/寨卡嵌合病毒包膜蛋白T120A位点突变对小鼠脑内神经毒力的影响

为探索包膜蛋白T120A突变对乙脑/寨卡嵌合病毒JEV/ZIKV小鼠脑内神经毒力的影响,应用重叠延伸PCR和分子克隆技术构建含T120A突变的乙脑/寨卡嵌合病毒全长cDNA质粒,经酶切、测序鉴定后,以其为模板体外转录制备RNA,电转染导入BHK21细胞,收获培养液上清获得突变病毒株JEV/ZIKV (T120A).分别...     

COVER

正Recent large outbreaks of Zika vrius (ZIKV)in Oceania's islands and the Americas have linked the ZIKV infection with occurrence of microcephaly in newborns.The virus can be passed from a pregnant woman to her fetus.Even worse,ZIKV has now spread to nearly 30 areas worldwide and become     

Isolation and characterization of Zika virus imported to China using C6/36 mosquito cells

正Dear Editor,Zika virus(ZIKV)is a mosquito-borne flavivirus that usually causes asymptomatic infections or mild illness in humans.However,the unprecedented epidemics of ZIKV in Latin America since early 2015 have made this flavivirus an international health risk(Liu and Zhang,2016).In particular,the potential association of ZIKV infection with the remarkable increase in the number of     

Zika virus infection—do they also endanger male fertility?

正Zika virus(ZIKV)is a mosquito-borne flavivirus,first discovered in the 1940s.ZIKV was originally limited to sporadic cases in Africa and Asia,until the Brazil ZIKV incidences in 2015,when it rapidly spread throughout the Americas.Usually ZIKV infections are subclinical or characterized by mild febrile illness,but they may also induce neurological complications,including the rare Guillain-Barrésyndrome in adults,and congenital anomalies,