脂联素基因SNP45T／G多态性与2型糖尿病相关性研究

目的：探讨脂联素基因（APM1）SNP45T／G多态性与湖北汉族人群2型糖尿病的相关性。方法：采用聚合酶链反应．限制性片断长度多态性（PCR—RFLP）方法分析了479例样本的APM1基因SNP45T／G多态性,并测定身高、体重、腰围、臀围、血压和空腹血糖等生理指标。结果：两种实验设计中对照组与病例组基因型和等位基因频率差异均无统计学意义。结论：脂联素基因SNP45T／G多态性在湖北汉族人群2型糖尿病的发生发展中可能不起主要作用。     

乳腺癌与MICA基因多态性的相关性研究

目的:研究海南汉族人群MICA等位基因的多态性与乳腺癌的相关性。方法:采用PCR-SSP和PCRSBT方法对样本MICA等位基因的多态性进行检测分析。结果:乳腺癌患者中有检测出10种MICA等位基因,其中MICA*002/019基因型频率较对照组显著偏低(OR=0.32,Pc0.05)。结论:MICA*002/019基因型可能与乳腺癌的保护相关。     

脂联素基因单核苷酸多态性T45G与湖北汉族人2型糖尿病的遗传关联研究

采用病例.家系对照和随机病例.对照两种设计,分析了603例样本脂联素基因(Adiponectin,APMl)单核苷酸多态性(SNP)rs13061862(T45G)与湖北汉族人群2型糖尿病的相关性.在所有样本中,2型糖尿病病人的G等位基因及GG基因型频率显著高于正常人(G:42.0%比21.7%,P<0.001;GG:13.6%比4.5%,P=0.032);在180个病例.家系对照中,2型糖尿病患者的GG基因型频率显著高于对照组(GG:17.8%比5.6%,P=0.011);在423个随机病例.对照中,2型糖尿病患者GG基因型频率也显著高于对照组(GG:12.2%比3.9%,P=0.025);单因素Logistic回归分析显示,GG基因型是2型糖尿病的危险因子(OR=3.58,95%C/=1.70-7.54).这些结果表明,脂联素基因SNPT45G多态性与湖北汉族人群2型糖尿病的发生发展相关,GG基因型是中国湖北汉族人2型糖尿病的遗传危险因素.     

贵州荔波封闭人群MTHFR基因多态性研究分析

目的 对贵州汉族、布依族亚甲基四氢叶酸还原酶（Methylenetetrahydrofolate Reductase,MTHFR）基因多态性进行研究,为贵州少数民族基因多态性数据库的建立提供相关数据。方法 应用聚合酶链式反应及限制性片段长度多态性检测贵州荔波汉族90例、布依族119例MTHFR基因两个单核苷酸（677及1298位）多态位点的基因频率及基因型频率。结果 汉族、布依族MTHFR 677位T等位基因的分布频率分别是22、8％,16．1％,x^2=1．561,P〉0．1;MTHFR 1298位C等位基因的分布频率分别是28．9％,39、1％,x^2=2．075,P〉0．1;677CT／1298AC双杂合子的分布频率分别是16．66％,22．7％。结论 MTHFRC 677T和A1298C多态性在中国南方和北方人群存在群体差异;贵州汉族与布依族此两位点无显著性差异。贵州荔波布依族MTHFR 1298位有较高的C等位基因频率。     

Calpain10基因多态性与2 型糖尿病的相关性研究

目的：探讨钙蛋白酶10（Calpain10）基因第3内含子SNP19多态性在湖北汉族人群2型糖尿痛发生发展中的作用。方法：采用同胞对（家系内对照）和随机病例-对照两种实验设计,结合聚合酶链反应-限制性片断长度多态性（PCR-RFLP）．技术分析共403个样本的Calpain10基因第3内合子SNP19多态性,并测定身高、体重、腰围、臀围、血压和空腹血糖等生理指标。结果：两种实验设计中对照组与病例组的基因型和基因频率均无显著差异（PO．05）。结论：Calpain10基因SNP19多态性在湖北汉族人群2型糖尿病的发生发展中可能不起主要作用。     

肺癌与DNA 甲基化研究的进展

DNA甲基化是表观遗传学研究的重要内容。其本质是在甲基转移酶的催化下,DNA的CG两个核苷酸的胞嘧啶被选择性地添加甲基,形成5’甲基胞嘧啶的过程。CpG岛是DNA甲基化常发生的部位。CpG岛指基因组中长度为300～3000 bp的富含CpG二核苷酸的一些区域,主要存在于基因的5’区域。以往的研究表明,肺癌的发生常与CpG岛的异常甲基化有关。多基因异常的甲基化常为肿瘤发生的重要机制。近年来,研究比较热门的基因有p16、RASSF1A、CDH1、CDH13、FHTI、TMS1/ASC等。研究集中在肺癌组织与癌旁组织甲基化频率的统计分析,以及对于血液,痰液,肺泡灌洗液发生甲基化频率的统计分析。对于肺癌相关抑癌基因甲基化的研究,为肺癌患者的早期诊断提供思路,并为治疗开辟新的方向。去甲基化治疗虽研究较少,但目前已取得一定进展。     

基因的多态性与生命科学

人类基因组的测序将要大功告成,但这并非是我们已经能破译人类生命密码,而是指目前的工作和成果只是能“读出”人类的生命密码,离“读懂”生命的密码尚需要时日。而在读懂人类和生物DNA密码的过程中,SNP是至关重要的因素。SNP是单核苷酸多态性的英字母缩写,也称作单碱基多态性,简单地讲就是基因的多态性。     

我国汉族和彝族rRNA基因多态性的研究

人类ｒＤＮＡ顺序既偏偏保守性积蓄高的转录区,又有变异性较大的不转录间隔区。随着对ｒＤＮＡ结构的不断认识,发现对不转录间隔区特征的研究在分子群体遗传学上具有重要的价值。我们运用ｒＤＮＡ基因探针和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹法对甸汉族和彝族ｒＲＮＡ基因３＇端不转录间隔区作多态性分析,ＲＦＬＰ特征揭示两个民族有广泛的共性,又有各自的特点,这一遗传标志对少数民族群体遗传学乃至我国民族的迁移和演化的研究有重要意义。     

MICB基因多态性与乳腺癌的易感关联性研究

目的:研究海南汉族人群MICB等位基因的多态性与乳腺癌易感性之间的关联性。方法:采用PCRSSP(PCR sequence-specific primers)和PCR-SBT(PCR sequence-based typing)方法对样本MICB等位基因的多态性进行检测。结果:乳腺癌患者中检出14种MICB等位基因;和对照组相比较,MICB*002和MICB*014等位基因在乳腺癌患者组分布频率较少,MICB*002和MICB*014等位基因可能对乳腺癌不易感(MICB*002:OR=0.31,95%CI:0.19-0.51,Pc0.05;MICB*014:OR=0.32,95%CI:0.17-0.60,Pc0.05)。MICB*016和MICB*003等位基因在乳腺癌患者组分布较多;MICB*016和MICB*003等位基因可能对乳腺癌易感(MICB*016:OR=10.68,95%CI:2.52-45.28,Pc0.05;MICB*003:OR=3.57,95%CI:1.34-9.49,Pc0.05);MICB*002/002和MICB*014/014基因型可能对乳腺癌不易感(MICB*002/002:OR=0.12,95%CI:0.04-0.36,Pc0.05;MICB*014/014:OR=0.30,95%CI:0.10-0.89,Pc0.05)。结论:MICB等位基因的多态性与乳腺癌的易感性之间存在关联性。     

ACE2基因多态性与高血压患者血压昼夜节律变化相关性研究

目的:研究血管紧张素转换酶2(ACE2)基因多态性与高血压患者血压昼夜节律变化的关系.方法:选择符合入选标准的高血压患者336例,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)的方法,进行ACE2基因分型.根据血压昼夜节律变化,将高血压患者分为勺型与非勺型两组.分析基因型是否为非勺型血压的危险因素.结果:男性勺型组与非勺型组ACE2基因型多态性的分布存在显著差异,勺型组以G等位基因携带者为主.结论:ACE2基因多态性与男性高血压患者血压昼夜节律相关,携带G等位基因的患者可能更易发生夜间血压升高.     

法洛四联症合并肺动脉闭锁的手术治疗分析

目的：探讨法洛四联症合并肺动脉闭锁的手术治疗,对其各型手术时机、手术方法进行概述。方法：在我院就诊的21例法洛四联症合并肺动脉闭锁患者,15例患者在全身廓醉中度低温体外循环下实行一期根治术,6例患者实行分期手术。结果：3例发生术后早期死亡,Ⅲ患者2例,Ⅳ型患者1例,死亡原因：低心排血量综合征1例,灌注肺1例,严重感染1例。16例保持长期随访,随访0．6．4年,NYHA心功能都达到Ⅰ或Ⅱ级标准。结论：法洛四联症合并肺动脉闭锁确诊后,根据肺动脉发育情况选择合适的手术方式尽快手术,能提高患者的治愈率,降低病死率。     

Promoter methylation and expression of the VANGL2 gene in the myocardium of pediatric patients with Tetralogy of Fallot

Background: Tetralogy of Fallot (ToF) is the most common form of cyanotic congenital heart disease and is a major cause of significant morbidity and mortality. VANGL2 is a critical gene in the planar cell polarity pathway that plays an important role in the development of the heart. This study investigates the methylation status of the promoter region of VANGL2 and the expression pattern of VANGL2 in cardiac tissue. Methods: The promoter region of VANGL2 was sequenced in 200 ToF patients and 400 control subjects. Methylation levels were measured in four regions of the VANGL2 promoter (B1‐1: ?282 bp ～ ?117 bp, B1–2: ?117 bp ～ 41 bp, B2: 8 bp ～ 157 bp, B3: 132 bp ～ 401 bp) by bisulfite sequencing PCR in the right ventricular outflow tract of the myocardium. Quantitative real‐time PCR and immunohistochemistry were used to detect the mRNA and protein expression levels, respectively. Results: No mutations were found in the promoter region, but two SNPs (rs11582932 T>G, rs11265385 T>G) were found in ToF patients and controls with similar frequencies (p > 0.05). The overall methylation status of the VANGL2 promoter was significantly higher in ToF patients than in controls (p = 0.0234). Specifically, the methylation levels of regions B1‐1 and B3 were significantly higher in ToF patients (p = 0.0042, p = 0.0418). Both the VANGL2 mRNA and protein levels were significantly lower in ToF patients than in controls (p < 0.05). Conclusion: The aberrant VANGL2 promoter methylation and the decreased gene expression in ToF patients may provide important clues for the development of ToF. Birth Defects Research (Part A) 100:973–984, 2014. © 2014 Wiley Periodicals, Inc.     

miRNA‐940 reduction contributes to human Tetralogy of Fallot development

Tetralogy of Fallot (TOF) is a complex congenital heart defect and the microRNAs regulation in TOF development is largely unknown. Herein, we explored the role of miRNAs in TOF. Among 75 dysregulated miRNAs identified from human heart tissues, miRNA‐940 was the most down‐regulated one. Interestingly, miRNA‐940 was most highly expressed in normal human right ventricular out‐flow tract comparing to other heart chambers. As TOF is caused by altered proliferation, migration and/or differentiation of the progenitor cells of the secondary heart field, we isolated Sca‐1⁺ human cardiomyocyte progenitor cells (hCMPC) for miRNA‐940 function analysis. miRNA‐940 reduction significantly promoted hCMPCs proliferation and inhibited hCMPCs migration. We found that JARID2 is an endogenous target regulated by miRNA‐940. Functional analyses showed that JARID2 also affected hCMPCs proliferation and migration. Thus, decreased miRNA‐940 affects the proliferation and migration of the progenitor cells of the secondary heart field by targeting JARID2 and potentially leads to TOF development.     

乌司他丁对体外循环法洛四联症患儿围心脏手术期循环和呼吸功能的影响

目的:探讨乌司他丁对体外循环法洛四联症患儿围心脏手术期循环和呼吸功能的影响。方法:选取我院于收治的60例法洛四联症婴幼儿参与研究,并将其随机分为对照组和试验组两组,每组患儿30例。其中试验组患儿在体外循环前以及患儿进行手术后的三天内每天均给予10000U/kg乌司他丁,而对照组患儿则在相应的时间点给予等量的生理盐水。分析比较两组患儿的体外循环时间、心脏停搏时间、手术时间、在监护室治疗的时间以及患儿术后住院时间和患儿肺部感染发生例数等临床病理情况。结果:所有入选患儿均痊愈出院,在两组患儿的手术操作情况和治疗效果对比中,对照组患儿的手术时间、体外循环时间和心脏停搏时间均显著低于试验组患儿,但重症监护时间及术后住院时间则高于试验组患儿;在两组患儿治疗后的循环功能指标比较中,试验组患儿超滤后CVP和血管活性药物均低于对照组患儿而超滤后MAP则显著高于对照组患儿;在两组患儿治疗后的呼吸功能指标的比较中,试验组患儿的动脉血氧分压明显高于对照组患儿以及试验组患儿的术后机械通气时间和肺部感染例数均低于对照组患儿,两组患儿的数据比较差异除手术时间、体外循环时间和心脏停搏时间外均具有统计学意义(均P0.05)。结论:乌司他丁对体外循环法洛四联症患儿围心脏手术期的循环和呼吸功能具有较好的保护作用,值得在临床上加以广泛推广和运用。     

法乐氏四联症右室流出道心肌间质胶原表达改变

摘要：探讨法乐氏四联症患者右室流出道I、Ⅲ型胶原蛋白mRNA与蛋白质合成的表达改变,以期进一步阐明法乐氏四联症的发病机制．用RT—PCR方法检测32例法乐氏四联症患者与同期17例小室缺患者右室流出道Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达差异,并分析了不同氧饱和度对法乐氏四联症胶原蛋白mRNA表达的影响．同时应用免疫组化图像分析及Western blot检测右室流出道Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白含量并作对比分析．研究发现法乐氏四联症患者右室流出道Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA与蛋白质合成均较对照组增高并且出现胶原比值改变,缺氧程度与胶原合成关系密切．     

小儿法洛四联症根治术后氨基末端脑钠肽前体水平变化及其临床意义分析

目的：探讨小儿法洛四联症根治术后血浆氨基末端脑钠肽前体（N—terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP）水平变化及其临床意义。方法：选择我院2011年10月～2013年4月收治的法洛四联症患儿52例,所有患儿行法洛四联症根治术治疗,并于术前、术后3h、12h、48h、1周、1个月和3个月测定患儿血浆NT-proBNP水平,应用心脏彩超机检查肺动脉跨瓣压差、右室舒张末期容积（rightventricularend．diastolicvolume,RVEDV）、左室射血分数（Leftventricular ejection fraction,LVEF）和右心Tei指数（Teiindex）。结果：①术后3hNT—proBNP水平开始逐渐升高,术后48h达最高,明显高于术前水平（P〈0．01）,术后1个月、3个月明显低于治疗前水平（P〈0．05）。②术后1周,右心功能不全组血浆NT．proBNP水平、肺动脉跨瓣压差、RVEDV明显高于右心功能正常组,LVEF明显低于右心功能正常组（P〈0．05）。③术后3个月,重度返流组、中度返流组患儿术后48h、1周、3个月血浆NT—proBNP明显高于轻度返流组（P〈0．05）;重度返流组患儿术后1周、3个月血浆NT—proBNP明显高于轻度返流组（P〈0．05）。结论：NT．proBNP在小儿法洛四联症根治术后早期的变化水平与右心功能的变化一致,可以作为评估右心功能的客观指标。     

Allele-Specific Non-CpG Methylation of the Nf1 Gene during Early Mouse Development

Recent reports of cytosine methylation occurring at CpA and CpT dinucleotides in murine ES cells as well as in Drosophila have renewed interest in methylation at sites other than CpGs. Our examination of the murine neurofibromatosis type 1 gene by sodium bisulfite genomic sequencing has revealed non-CpG methylation primarily in the oocyte and the maternally derived allele of the 2-cell embryo, with markedly lower levels found in sperm. Non-CpG methylation was not found in later stages of embryo development or in adult tissue. Our results suggest that maternal-specific de novo non-CpG methylation has occurred sometime between ovulation and formation of the 2-cell embryo, while during the same period the paternally derived allele has undergone site-specific active demethylation. Our data demonstrate both stage and parent-of-origin specific changes in methylation patterns within the neurofibromatosis type 1 coding region-involving cytosines located at both CpG and non-CpG dinucleotides.     

白血病患者骨髓中RASSFlA基因启动子甲基化状态及其临床意义

目的：通过检测各类型白血病骨髓中RASSFlA基因启动子区甲基化水平,探讨其对白血病分型的临床检测意义。方法：抽选93例不同类型白血病患者（观察组）予以甲基化特异性PCP（MSP）方法进行骨髓RASSFlA基因甲基化状态检测,研究不同类型白血病甲基化状态差异,同期抽选93例非白血病者为对照研究（对照组）。结果：观察组中有13例（13．98％）检测到RASSFlA基因甲基化,而对照组中RASSFlA基因甲基化率为0％,比较差异显著（P〈0．05）。不同类型白血病RASSFlA甲基化率比较：淋巴系显著高于髓系（P〈O．05）,急性与慢性白血病比较差异无显著性（P〉0．05）。结论：白血病骨髓中MSP法检测存在RASSFlA甲基化;而RASSFlA基因在淋巴系白血病中的甲基化概率明显增高,因此,对RASSFlA进行甲基化检测有可能作为白血病临床诊断分型的生物学指标之一。     

人脑胶质瘤细胞中GDNF 基因启动子1 区甲基化状态的研究

目的:观察GDNF启动子1区在人脑胶质瘤细胞中的甲基化修饰状态,以期探讨其对于GDNF在胶质瘤中高表达的影响。方法:基因测序检测10例胶质瘤与5例正常脑组织中GDNF基因序列,比较其基因是否有突变发生;重亚硫酸盐修饰后基因测序检测20例胶质瘤(10例低级别和10例高级别)与5例正常脑组织中GDNF启动子1区甲基化修饰状态。结果:GDNF启动子1区基因在胶质瘤中没有发生突变;GDNF启动子1区甲基化修饰在正常脑组织、低级别、高级别中发生率分别为72.25%、86.25%、86.75%。在胶质瘤中的甲基化修饰水平比正常脑组织明显增高(P<0.05),而高低级别之间无显著性差异。结论:在胶质瘤细胞中,GDNF启动子1区发生了高甲基化修饰,这种修饰很可能会影响GDNF基因的表达。