五龙鹅MHC ClassⅠ基因克隆及同源建模研究

主要组织相容性复合体(MHC)与动物机体对外源性抗原的免疫应答之间存在关联。从GenBank/DDBJ/EMBL基因库中读取鸡、其他鸟类、爬行类和哺乳类的MHC ClassⅠ基因进行序列分析设计引物, 使用LA-PCR法从五龙鹅的基因组中克隆了MHC ClassⅠ基因序列(DNA序列和mRNA序列GenBank登录号分别为: AM114925和AM114924), 并分析其基因组结构。运用生物信息学技术对测序结果进行分析显示: 基因组DNA由8个外显子和7个内含子组成, 与鸡基因序列同源率为60.8%~64.1%, 与人的同源率为42.9%。分子进化树进一步揭示了五龙鹅与鸡、其他鸟类、爬行类、哺乳类以及人类的进化关系, 同源建模分析发现该基因由氨基末端结构域和羧基末端结构域构成。     

犬类MHC复合体Ⅱ类基因研究进展

概述了犬类MHCⅡ类基因的物理结构图谱,对基因的结构、功能及表达、基因分型方法、基因多态性、基因与疾病的关联研究等作了详细的综述,指明了对犬类MHCⅡ类基因的研究利于其抗病育种,对人类自身免疫性疾病和器官移植等方面具有重要现实意义。     

MHC分子与肿瘤免疫及治疗的研究进展

恶性肿瘤是危害人类生命健康的重大疾病,主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex, MHC) I类分子和II类分子与肿瘤的发生、发展关系密切,近年来越来越受到人们的关注。MHC I类分子和II类分子的表达和调控影响着肿瘤细胞的增殖,并能够诱导肿瘤免疫,从而在一定程度上可抑制肿瘤细胞的增殖。根据肿瘤免疫中涉及的MHC分子参与的抗原递呈及T细胞受体识别等机理,在临床上可以为肿瘤治疗提供新的手段。因此,了解MHC分子与肿瘤免疫及治疗的最新研究进展非常必要。现从MHC分子的结构和功能、在肿瘤细胞中的表达及调控、与肿瘤免疫的关系及其在肿瘤免疫及治疗领域的应用等4个方面进行介绍,以期为肿瘤的免疫治疗等相关研究提供有意义的参考。     

嗜水气单胞菌胁迫下东北林蛙MHCⅠ基因在不同组织的表达

本研究旨在探讨嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila,Ah)胁迫下MHCⅠ基因在东北林蛙不同组织的表达特征,为揭示两栖类抗感染免疫应答机制提供依据。文中首先构建嗜水气单胞菌感染下的试验动物模型,通过苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-eosin staining,HE染色)观察病理学变化;利用RT-PCR克隆东北林蛙MHCⅠ基因α1+α2肽结合区并进行生物信息学分析,再运用荧光定量PCR技术检测Ah胁迫下MHCⅠ在不同组织中的转录水平。结果表明:在Ah感染后,皮肤、肝脏和肌肉等组织均出现细胞结构消失和纹理紊乱等现象;获得MHCⅠ基因α1+α2肽结合区片段494bp,可编码164个氨基酸,与两栖类同源性在77%以上,与哺乳类同源性低至14.96%,表明MHCⅠ基因α1+α2区在不同物种间保守性较低;荧光定量PCR结果显示,在Ah胁迫下,实验组肝脏、脾脏、肾脏、皮肤和肌肉组织MHCⅠ基因的转录水平在72 h前均高于对照组,但是各组织到达峰值的时间具有差异性(P0.01),表明Ah胁迫下MHCⅠ基因在不同组织的表达时间存在差异。研究结果为进一步探究MHC分子在抗感染中的免疫功能提供了参考依据。     

猪脂肪组织表达序列标签(ESTs)大规模测序及分析

利用大规模DNA序列测定的方法,对猪脂肪组织进行了表达序列标签(Expressed Sequence Tag,EST)序列测定,获得高质量EST共7790个,并对此进行了初步分析。使用STACK-PACK软件进行聚类分析,得到4354个基因聚类,包括3609个单拷贝基因和745个多拷贝基因;将候选基因序列用BlastN与nr库进行比较(e=1e-10),从4354个候选基因中得到2712个已知基因,其中单基因为1987个,多拷贝基因为725(3694克隆)个;未知功能基因和新EST有2109个克隆。根据BlastN结果,利用基因组文库添加序号(GenBank Accession No．)为索引,构建了猪脂肪组织已知功能基因表达谱。从基因表达谱可以看出,在猪脂肪组织中参与代谢的基因所占比例最高,在某些方面也显示了脂肪组织旺盛的代谢活性。同时发现在猪脂肪组织中主组织相容性抗原(Major Histocompatibility Complex,MHC)或与MHC相关的基因表达丰度很高。其中单拷贝基因181个,多拷贝基因44个,共计257个克隆,占细胞机体防御(cell and organism defense)总数的44．9％。占总已知基因数的5.4％。提取出全部与MHC相关的EST序列(257个克隆),发现所有EST的部分序列(长约200个碱基),几乎分布在每一个已知猪BAC的所有编码序列上。据此推测,构成MHC的这些EST序列中,有一段长约200个碱基(200bp)的碱基序列高度保守,MHC基因中每一段编码序列都包含有这一段序列。这些MHC序列虽然在不同的BAC上其蛋白的域不同,但均为高度保守区域,并且都与免疫功能密切相关。猪脂肪中如此大量表达的MHC部分保守序列,由于与免疫功能高度相关,在MHC基因的传递过程中,可以反复复制,并能够稳定遗传。     

三代测序与靶向捕获技术联用进行高分辨HLA基因分型及MHC区域单倍体型精细鉴定

人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)的高分辨率、精准分型对于组织配型以及HLA相关疾病研究具有重要意义。本研究以12位原发性肝细胞癌病人的外周血为供试样本,分析二、三代测序数据用于高分辨率HLA分型的优劣势,同时结合探针捕获与三代测序技术对YH、HeLa标准细胞系以及一个原发性肝细胞癌病人的主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)区域进行靶向分析,探究长读长测序技术对于整个MHC区域精细分析的潜力。研究表明:(1)二、三代测序技术均能实现6～8位高分辨HLA分型,且两者分型结果一致。但是三代数据的覆盖均一度显著优于二代,不会出现明显的"断层"现象;(2)超长的三代数据可直接跨越整个扩增子,对于基因单倍体型的判定(phasing)具有明显优势。样本中92.79%的HLA基因能够得到准确的单倍体分型结果,远高于二代的75.65%;(3)长读长的三代测序数据不但能实现对MHC区域的更好组装,还具有对整个MHC共计3.6 Mb区域进行phasing的能力,而这将有助于明确各个突变位点、等位基因、非编码区等基因原件在每个MHC单倍体型上的定位与相互连锁信息,为免疫等相关疾病的研究提供理论依据。     

爬行动物MHC基因研究进展

主要组织相容性复合体(MHC)是有颌脊椎动物中发现的编码免疫球蛋白受体的高度多态的基因群,因其在免疫系统中的重要作用而备受关注。脊椎动物不同支系间MHC的结构和演化差异较大。尽管MHC基因特征在哺乳类、鸟类、两栖类和鱼类中已被较好地描述,但对爬行动物MHC的了解仍较少。鉴于爬行动物对于理解MHC基因的演化占据很重要的系统发育位置,研究其MHC具有重要意义。本文就近年来爬行动物MHC的分子结构、多态性维持机制、功能和主要应用的研究现状进行了系统地回顾和总结,并展望了其研究前景。     

主要组织相容性复合体I类分子交叉递呈研究进展

主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex, MHC) I类分子主要递呈来自于细胞内的内源性抗原,而其递呈外源性抗原称为MHC I类分子交叉递呈。MHC I类分子交叉递呈的发现,为研究外源性抗原的递呈提供了重要的理论依据。MHC I类分子抗原交叉递呈是一个复杂的过程,本身又包括两种不同的途径,抗原加工相关转运体(transported associated with antigen processing, TAP)依赖性途径和TAP非依赖性途径,并涉及到许多蛋白质与蛋白质之间、分子伴侣之间的相互作用。现就MHC I类分子对抗原的交叉递呈的途径、与交叉递呈相关的细胞系以及一些影响交叉递呈途径的因素进行综述,展望了交叉递呈研究的发展前景。     

三个地方鸡种MHC B-L BII基因遗传变异与免疫性状的关联分析

旨在研究3个地方鸡品种(汶上芦花鸡、莱芜黑鸡、济宁百日鸡)主要组织相容性复合体(Major Histocompatibility Complex,MHC) B-LBII基因遗传变异与绵羊红细胞(Sheep red blood cell,SRBC)、禽流感(Avian influenza,AI)和新城疫(Newcastle disease,ND)抗体滴度等免疫性状的关系,揭示不同品种间基因变异与免疫性状的相关性.以300只地方品种鸡为材料,运用直接测序和聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)等技术检测MHC B-L BⅡ基因的序列变异.在3个地方鸡品种中分别发现了19～22个核苷酸变异位点,可导致其中16～18个氨基酸的变异.3个地方鸡种MHC B-L BⅡ基因中分别有7～8个(Single nucleotide polymorphism,SNP)位点与部分免疫性状存在不同程度的显著相关性.变异位点G97A和T138A在3个品种中均存在,与SRBC、ND、AI抗体滴度均显著相关(P＜0.05).其中,G97A突变在济宁百日鸡中与ND抗体滴度显著相关(P＜0.05),在莱芜黑鸡中与SRBC抗体滴度显著相关(P＜0.05),在汶上芦花鸡中与H9抗体滴度显著相关(P＜0.05);变异位点T138A在汶上芦花鸡和济宁百日鸡中与H9抗体滴度显著相关(P＜0.05).研究表明3个地方鸡种的MHC B-LBII基因遗传变异与免疫性状存在显著关联.     

直接测序法构建圈养大熊猫MHC遗传档案

主要组织相容性复合体(MHC)基因的遗传参数是濒危动物圈养遗传管理的重要参考依据.本研究通过建立MHC基因分型的直接测序方法,对中国大熊猫保护研究中心圈养的91只大熊猫Ailuropoda melanoleuca进行了3个Ⅰ类MHC基因(Aime-C、Aime-I、Aime-L)和4个Ⅱ类MHC基因(Aime-DQA1...     

鹿科动物MHC的基因组学、多态性及与性状的相关性

近年来主要组织相容性复合体(MHC)基因已经成为保护遗传学和分子生态学重要的遗传标记.鹿科动物是很多生态系统中的关键物种,也包含很多重要的经济物种和濒危物种.因此,鹿科动物的MHC研究可为种群遗传结构、进化、遗传多样性和种群生存力评估、疾病风险评估、抗病力的定向选育等领域的研究提供新的视角.本文从MHC的基因组结构、多态性,与抗病、抗寄生虫的关系,与鹿角生长的关系等方面,综述了20年来鹿科动物MHC的研究成果,并为今后的研究提出了思路.     

家禽主要组织相容性复合体的研究进展

随着家禽基因组计划的开展,对家禽的主要组织相容性复合体（MHC）的研究取得了较大的进展。关于家禽MHC的各部分基因研究正在逐步深入,并且完成了MHC部分测序和染色体定位工作。 本文介绍近些年来对家禽MHC的基因结构和作用、与抗体的作用以及相关的基因组研究所取得的进展。人、小鼠及其他动物的相关研究结果将对家禽MHC研究的发展产生重要的影响。 Abstract:As the development of poultry genome project,it has been acquired many advances in the study of poultry MHC.At present,we have achieved some MHC sequences 、 locations of MHC on chromosome and some MHC gene functions.This article give a detailed introduction about gene structure of poultry MHC and its role in immune reaction、relation with antibody and advances in poultry genome about MHC.With the development of related research,how to use the result of the study more efficiently become more and more important to the poultry MHC study.     

中国人群主要组织相容性复合物基因多态性及其与疾病相关性的研究

人类的主要组织相容性复合物(major histocompatibility complex,MHC)又称为人类白细胞抗原系统(human leukocytc antigens,HLA)。 MHC基因位于第6号染色体短臂,分布于2—3×10~6bp长度的DNA链上。根据结构和功能,HLA抗原可分为三类。HLA-Ⅰ类抗原,主要是HLA-A,-B,-C基因产物,存在于所有有核细胞的表面,这类也是经典的组织抗原,是淋巴细胞排斥带有异己抗原或病毒感     

器官排斥和配偶选择——谈组织相容性抗原（MHC）

器官移植，即使是在人类的不同个体之间，也常会引起排斥反应。排斥的主要原因是一类叫做“主要组织相容性复合体”（英文简写MHC）的蛋白质分子。MHC的一个主要功能，就是向身体“报告”外来生物物质中的特异蛋白质，从而让免疫系统消灭这些外来入侵物。MHC有数以千计的变种，而每个人只能拥有其中少数的变种，由此产生的不同人之间MHC分子的差异是造成器官排斥的主要原因。这种差异也是影响人类配偶选择的一种因素。     

主要组织相容性复合体(MHC)基因的研究概况

主要组织相容性复合体(MHC)因其在免疫方面的重要作用而倍受免疫学家重视．随着研究的不断深入,了解到MHC是一个高度多态的基因群,它广泛分布于各种脊椎动物体内．MHC除了具有免疫功能外,还在其它许多方面起作用．MHC基因的多态性是最受关注的特征,尤其是Ⅱ类基因．根据MHC基因的多态性,可以在遗传、进化、行为、保护及生态等许多方面对其进行研究．就目前的研究情况,在结构、功能及应用等方面对MHC作了介绍．     

MHC及其在种群遗传学和保护遗传学中的应用

主要组织相容性复合体（major histocompatibility complex,MHC）是脊椎动物体内与免疫应答调节密切相关的一个基因家族,是基因组中多态性最丰富的区域。通过MHC的遗传变异分析可以提供物种的遗传多样性水平、进化历史和种群动态,以及种群遗传结构等信息,并在濒危物种饲养繁殖种群的遗传管理中有重要应用。 MHC and Its Application in the Population and Conservation Genetics YANG Guang,CHEN Xu-yan,REN Wen-hua,YAN Jie Institute of Genetic Resources,Nanjing Normal University,Nanjing 210097,China Abstract:The major histocompatibility complex (MHC),with the highest genetic polymorphism,is a cluster of genes involved in immune response regulation in the vertebrates.MHC can provide information such as population genetic diversity,evolutionary history and population dynamics,and population genetic structure etc.It can also be applied in the captive breeding programme for endangered vertebrate species. Key words：major histocompatibility complex (MHC);genetic diversity,population viability;population genetic structure;captive breeding     

家禽MHC结构研究进展

禽主要组织相容性复合体(Major histocompatibility complex,MHC)的结构与禽病防控、禽免疫学、禽类遗传学研究密切相关。文章对鸡、火鸡、鹌鹑、鸭和鹅的MHC结构方面的研究进展进行了综述,表明其有以下共同特点:都有保守的MHC区域,包括MHC I基因和MHC II基因及一些功能未知基因;基因排列简单而紧凑;MHC I基因内含子的长度都比哺乳动物小;鸡、火鸡、鸭和鹅的MHC I基因组序列都有8个外显子和7个内含子,MHC IIβ基因组序列都有6个外显子和5个内含子;鸡、火鸡和鹌鹑的BG基因结构模式相同;都存在微卫星重复单元。但也存在种属差异:鸡的MHC I基因和MHC II基因是双拷贝,而鸭、鹅和鹌鹑有若干个拷贝;BG基因的拷贝数及其外显子数目不同。对主要家禽MHC结构进行分析比较,将有利于对禽病学及禽免疫遗传学的进究。     

滋养层细胞表面主要组织相容性复合体抗原的研究进展

胎盘滋养层是直接与母体接触的与母体基因型不同的胎儿组织，滋养层细胞是否表达主要组织相容性复合体(MHC)抗原以及表达何种MHC抗原对于妊娠成功与否至关重要.非经典MHCⅠ类抗原发现较晚，其中HLA-G在滋养层细胞表达，可以保护带有父方同种异体抗原的胎儿免受母体免疫系统的杀伤.经典MHCⅠ类抗原有多种亚型，不同亚型在滋养层细胞的表达有所不同.MHCⅡ类抗原在妊娠维持过程中表达极弱，新近的研究资料表明，滋养层细胞CⅡTA在MHCⅡ类基因表达调控中起主要作用.     

异种脏器移植用纯系小猪

农林水产省宣布93年预计实行的特别研究是对免疫系统明显的“主要组织适合抗原复合体(MHC)纯系小猪”进行系统研究。研究课题是“了解家畜的活体防御机构开发 MHC 纯系小猪”。预定研究期限为93～96年。93年度的预算为2400万日元。由于多种病原体产生的复合感染和机会感染等使小猪的感染病症很难预防和消除,所以用小猪为实验动物进行开发。最初二年分类小猪的 MHC 型,制作判明小猪 MHC 型的纯系小猪。后2年查明脏器移植及病原体的感染实验中免疫应答机构和抗病性以及 MHC 纯系小猪的免疫特性。MHC 均一的小猪供脏器     

降香通过抗氧化应激改善后负荷增加型心衰小鼠的心脏功能

目的:研究降香对后负荷增加引起的的心脏功能下降的保护作用及其机制。方法:雄性C57小鼠30只,随机分为三组,分别给予假手术(sham)、主动脉弓结扎(Transverse aortic constriction,TAC)手术和主动脉弓结扎手术降香治疗(TAC+DO)处理。通过灌胃给药4周,随后超声检测心脏功能、四腔心切片观察心肌重构,RT-PCR检测左心室αMHC、βMHC的m RNA表达、相应试剂盒心肌总抗氧化能力(TAOC)和丙二醇(MDA)含量。结果:同sham组相比,TAC组射血分数(EF),αMHC m RNA水平和TOAC均显著降低,且左室舒张末内径(LVIDd)、左室舒张期后壁厚度(LVPWd)、左室质量(LV mass)、心肌质量/胫骨长度(HW/TL)及β及β度、MDA均显著增加。同TAC组相比,DO组射血分数(EF),αMHC m RNA水平和TOAC均显著增加,且左室舒张末内径(LVIDd)、舒张末室间隔厚度(IVSd)、左室质量(LV mass)、心肌质量/胫骨长度(HW/TL)及βMHC、MDA均显著下降。在离体培养的心肌细胞,H_2O_2可显著增加细胞内ROS含量,给予降香或TEMPOL处理均可减轻H_2O_2诱导的氧化应激并增加心肌细胞存活率。结论:降香可通过降低氧化应激抑制线粒体分裂并改善后负荷增加型心衰的心脏功能。