不同品系小鼠在三种常见抑郁检测方法中的行为学表现

目的探讨4种不同品系小鼠在3种实验（空场实验、悬尾实验及强迫游泳实验）中的行为学差异,为抗抑郁新药研究中的实验动物选择提供参考。方法利用空场实验检测C57BL/6、BALB/c、ICR、和昆明小鼠的自主活动能力和对新奇环境的探索能力;利用悬尾实验和强迫游泳实验检测它们在应激刺激下的行为绝望状态。结果在空场实验中,BALB/c、ICR和昆明小鼠的运动总路程、运动速度和运动时间明显高于C57BL/6小鼠（P〈0.05）,ICR和昆明小鼠的直立次数也明显高于C57BL/6小鼠（P〈0.05）;悬尾实验C57BL/6小鼠的不动时间显著长于其他3种品系小鼠（P〈0.05）,但是4种品系小鼠在强迫游泳实验中的不动时间差异无显著性。结论 C57BL/6小鼠自发活动量低,对新奇环境的探索能力差,并且在急性应激刺激下容易造成行为绝望,因此C57BL/6小鼠可能适合作为急性应激抑郁模型动物。     

不同时间睡眠干扰所致小鼠的类抑郁样行为

目的研究不同时间睡眠干扰后所致的小鼠类抑郁样行为学表现。方法使用滚筒睡眠干扰仪对小鼠进行不同时间(5、10、15 d)睡眠干扰后,分别对各组动物进行自主活动测试实验、强迫游泳实验和悬尾实验。结果干扰5 d组与对照组比,自主活动总路程、平均速度、运动总时间减少(P<0.05),干扰10 d组与对照组比,自主活动总路程、平均速度、运动总时间减少(P<0.05)。干扰5 d后,小鼠强迫游泳、悬尾实验中各指标与对照组比无差异,干扰10 d组小鼠的游泳不动时间[(143.92±9.48)s]和悬尾不动时间[(127.89±6.33)s]均较对照组小鼠游泳不动时间[(128.50±6.63)s]和悬尾不动时间[(102.64±9.57)s]长(P<0.05),干扰15 d组小鼠的游泳不动时间[(143.08±8.13)s]和悬尾不动时间[(119.10±10.43)s]均较对照组小鼠游泳不动时间[(113.00±7.28)s]和悬尾不动时间[(89.55±9.07)s]长(P<0.05)。干扰5 d组、10 d组、15 d组与对照组比,体重均降低(P<0.05)。结论滚筒法睡眠干扰10、15 d可引起小鼠的类抑郁样行为学表现。     

GalR2基因的表达对小鼠抑郁症影响的初步探讨

目的 建立C57BL/6J小鼠抑郁症模型,探讨GalR2基因表达对小鼠抑郁症的影响.方法 脂质体转染重组真核表达质粒pEGFP-GalR2至人宫颈癌细胞系Hela细胞,Western blotting检测GalR2基因在细胞内的表达.参照CUMS和CORT建模方法构建小鼠抑郁症模型.侧脑室注射脂质体包裹的pEGFP-GalR2质粒,观察GalR2基因表达对小鼠抑郁症的影响.结果 通过Western blotting鉴定了GalR2基因获得表达.抑郁症模型小鼠体重增加量、摄食量、液体消耗实验中糖水消耗和糖水偏爱百分比均明显下降,纯水消耗显著提高;强迫游泳实验中挣扎时间和游泳时间缩短,不动时间延长.侧脑室注射pEGFP-GalR2后小鼠行为学改变未得到有统计学意义的结果.结论 成功鉴定了GalR2基因在细胞内的表达.成功构建C57BL/6J小鼠抑郁症模型.CORT模型造模效果要优于CUMS模型.GalR2蛋白对抑郁症的影响有待后续实验进一步探讨.     

用适应性实验对ICR、BALB/c和C57BL/6小鼠探索行为及记忆能力的评价

用洞板仪和旷场行为红外线检测系统对远交群ICR小鼠、近交系BALB/c小鼠和近交系C57BL/6小鼠的探洞、直立和跨格行为进行了测试,并通过适应性实验比较了它们的探索行为和记忆能力。研究发现：在各项试验中,ICR小鼠表现出最强的探索能力,而C57BL/6小鼠的探索能力最差;ICR小鼠还表现出比另外两个品系小鼠更强的对新环境的适应性,其记忆也明显优于C57BL/6小鼠。实验结果提示：小鼠探洞行为的适应性实验可以用来测试小鼠的记忆能力,而小鼠的直立行为在一定程度上也反映了其对周围环境、事物的探索和认知。这些结果为今后在研究小鼠神经生物学时的行为学指标选择问题提供了参考依据,同时也提示了在进行小鼠行为学实验时,根据不同研究目的选择不同品系的重要性。     

用适应性实验对ICR、BALB/c和C57BL/6小鼠探索行为及记忆能力的评价

用洞板仪和旷场行为红外线检测系统对远交群ICR小鼠、近交系BALB/c小鼠和近交系C57BL/6小鼠的探洞、直立和跨格行为进行了测试,并通过适应性实验比较了它们的探索行为和记忆能力。研究发现:在各项试验中,ICR小鼠表现出最强的探索能力,而C57BL/6小鼠的探索能力最差;ICR小鼠还表现出比另外两个品系小鼠更强的对新环境的适应性,其记忆也明显优于C57BL/6小鼠。实验结果提示:小鼠探洞行为的适应性实验可以用来测试小鼠的记忆能力,而小鼠的直立行为在一定程度上也反映了其对周围环境、事物的探索和认知。这些结果为今后在研究小鼠神经生物学时的行为学指标选择问题提供了参考依据,同时也提示了在进行小鼠行为学实验时,根据不同研究目的选择不同品系的重要性。     

慢性间断性缺氧对帕金森病模型小鼠行为学及纹状体多巴胺含量的影响

目的:探讨慢性间断性缺氧(chronic episodic hypoxia,EHYP)对帕金森病(Parkinson disease,PD)模型小鼠行为学及纹状体多巴胺(DA)含量的影响。方法:44只雄性6周龄C57BL/6小鼠随机分为百草枯 EHYP组、EHYP组、百草枯组和对照组,观察小鼠自发行为活动及悬挂实验、游泳实验、步态实验进行行为学检测,高效液相色谱分析(HPLC)测定纹状体DA含量。结果:百草枯 EHYP组小鼠出现PD综合征表现,悬挂实验及游泳实验结果与其它各组间有显著性差异(P<0.05或P<0.01),纹状体DA含量较其它各组小鼠出现明显下降(均P<0.01),余各组行为学实验结果及纹状体DA含量差异无显著性(P>0.05)。结论:EHYP联合百草枯暴露可使小鼠出现PD综合征表现及纹状体DA含量的明显下降。     

乳香精油抗抑郁作用的研究

为探讨乳香精油的抗抑郁作用及其可能机制,以慢性轻度不可预见性应激方法建立小鼠抑郁症模型,造模同时每日灌胃给药。用旷场实验、悬尾实验、强迫游泳实验对小鼠进行行为学评测,并用高效液相——电化学方法检测小鼠大脑内5-HT含量。试验显示,0.1、0.2 m L/100 g的乳香精油可不同程度地改善小鼠的行为学行为,显著提高小鼠脑内的5-HT含量(P0.05)。乳香精油具有抗抑郁作用,对中枢单胺类神经递质5-HT的调节是其作用机制之一。     

帕金森病小鼠模型行为学检测方法的比较研究

目的比较目前常用的5种帕金森病(PD)小鼠模型行为学检测方法在PD研究中的作用。方法用MPTP建立C57BL小鼠PD模型,通过行为学检测(自主活动计数、滚轴实验、游泳实验、爬杆实验、悬挂实验)、免疫组织化学和荧光分光光度法,对比5种行为学检测方法的平均数与变异系数,观察MPTP对PD小鼠模型的行为学、黑质多巴胺(DA)神经元和纹状体酪氨酸羟化酶免疫反应阳性(TH-ir)神经纤维以及纹状体DA水平的影响。结果给与MPTP后,小鼠行为学计数降低,爬杆实验未能得到检测结果,悬挂实验变异系数很高,结果有明显的偶然性,滚轴实验结果变异系数中等,平均数呈现一定的上升趋势,自主活动计数中移动与站立和游泳实验的平均数则呈现明显的下降趋势,变异系数很低,而黑质DA神经元数目减少约58%,纹状体TH-ir神经纤维密度减低,纹状体DA水平明显降低约88%,两组相比差异有显著性(P<0.01)。结论MPTP所致的C57BL小鼠的神经病理、生化改变与PD患者近似,自主活动计数和游泳实验优于其他行为学检测方法。     

人参总皂苷和远志总苷配伍对小鼠抗抑郁作用

目的确定人参总皂苷（GTS）和远志总苷（PTG）抗抑郁配伍剂量比例,形成参远苷（SGY）制剂,为研制开发抗抑郁新药提供实验数据。方法采用析因设计方法,GTS和PTG均选取25、50、100 mg/kg三个剂量,按照完全随机的两因素3×3实验设计,得到参远苷的9个不同配比组。C57BL/6J小鼠（用于悬尾实验）和ICR小鼠（用于强迫游泳实验）随机分为对照组、阳性药组（10 mg/kg,帕罗西汀用于悬尾实验;阿米替林用于强迫游泳实验）及参远苷的9个不同配比组,共11组。灌胃给药7 d,观察各组对悬尾或强迫游泳实验小鼠不动时间的影响,并通过空场实验观察参远苷各配比对小鼠自主活动的影响。参远苷与单味GTS、PTG的抗抑郁作用比较实验中,C57BL/6J小鼠（用于悬尾实验）和ICR小鼠（用于强迫游泳实验）随机分为对照组、阳性药组（10 mg/kg,帕罗西汀用于悬尾实验;阿米替林用于强迫游泳实验）、参远苷低中高剂量组（37.5、75、150 mg/kg）、GTS和PTG各四个剂量组（均为18.75、37.5、75、150 mg/kg）,共13组。灌胃给药7 d,观察各组对悬尾或强迫游泳实验小鼠不动时间的影响。结果析因设计结果表明,GTS和PTG之间无交互效应。参远苷配比组75 mg/kg（GTS∶PTG为50∶25）及150mg.kg-1（GTS∶PTG为100∶50）显著并稳定缩短悬尾或强迫游泳不动时间（P〈0.05）,得出GTS和PTG的剂量配伍比例为2：1。空场实验结果显示,参远苷各配比对小鼠运动总路程无影响。参远苷与单味GTS、PTG抗抑郁作用比较实验结果显示,GTS 75、150 mg/kg缩短悬尾实验小鼠不动时间（P〈0.01,P〈0.05）,对强迫游泳实验小鼠不动时间无影响。PTG 18.75、37.5 mg/kg缩短强迫游泳实验小鼠不动时间（P〈0.01,P〈0.05）,对悬尾实验小鼠不动时间无影响。参远苷75、150 mg/kg缩短悬尾实验小鼠不动时间（P〈0.05）。同时,参远苷37.5、75 mg/kg缩短强迫游泳实验小鼠不动时间（P〈0.01,P〈0.05）。结论 GTS和PTG以2：1的比例形成的参远苷（SYG）制剂,质量容易控制,作用机制多样,符合抑郁症复杂多样的发病机制,优于单味GTS和PTG,进一步研究之后,有可能成为新型的抗抑郁药物。     

可乐代替饮用水对小鼠健康的影响

可乐是一种高糖碳酸饮料,学者们普遍认为过量饮用可乐会影响机体糖脂代谢,诱发肥胖,但缺乏实验证据。该研究以6周龄雄性C57BL/6J小鼠为研究对象,以可乐代替饮用水饲养小鼠3个月,旨在确定可乐对小鼠体质量、糖脂代谢和行为的影响。结果表明,与饮用水组小鼠相比,可乐组小鼠采食量显著减少,体质量、脂肪和肝脏的质量均显著下降。通过对脂肪组织基因表达情况进行分析发现,可乐组小鼠的脂合成基因(FAS、PPARγ、aP2)、脂分解基因(ATGL、LPL、HSL)的表达水平均显著升高。行为学分析结果表明,可乐组小鼠在旷场实验中表现出更高的活跃度,在强迫游泳和悬尾实验中更容易放弃挣扎。综上所述,可乐代替饮用水会抑制小鼠食欲,减少体质量和脂肪的累积,且能够增加其活跃度。     

人类疾病模型小鼠的标准化维持方法研究

目的研究人类疾病模型小鼠的可遗传生物学特性,建立品系的标准化维持方法。方法选用FVB TgN、MRL Mpj和SAMP1Ka三个疾病模型小鼠品系作为代表性实验对象,通过测定生长曲线、RAPD同工、酶电泳、行为学试验等方法,找出三个品系相对于各自对照品系的不同特征,并建立了标准化检测指标作为维持方法的依据。结果MRL Mpj的生长曲线相对于对照品系有明显的统计学差异;FVB TgN、MRL Mpj、SAMP1Ka等三个品系的RAPD图谱在阳性引物及扩增出的条带方面均不一致;同工酶电泳的结果表明不同品系的个体之间表型不完全相同;行为学试验更从多方面直观地显示了各品系的不同特征。结论人类疾病模型小鼠除了用常规检测方法外,还应建立各品系在生长曲线、RAPD、同工酶电泳、行为学试验等方面的特殊检测方法,及时检测模型小鼠品系的独特性状并作为保种依据,以避免遗传漂变的发生。     

阿片受体在急性应激引起的识别记忆变化中的作用

多项研究结果表明急性应激会损伤动物的学习记忆,但对获取、巩固及提取阶段的影响不尽相同。同时,有关人类和动物的实验表明内源性阿片系统与应激也密切相关,应激后脑内内源性阿片类物质的表达和释放量会上升。然而,内源性阿片系统是否参与应激后学习记忆功能的损伤尚未明确。本研究旨在通过新物体识别实验三天范式来探讨强迫游泳应激对C57小鼠识别记忆的影响以及阿片受体在其中的作用。结果显示,急性强迫游泳应激损伤小鼠识别记忆的提取,而对其识别记忆的获取及巩固影响不明显;腹腔注射阿片受体拮抗剂纳洛酮本身对小鼠的物体识别记忆没有影响,但可以反转应激对于识别记忆提取的损伤。采用实时定量PCR技术对全脑、海马和前额叶μ阿片受体转录水平相对表达量进行观察,结果显示,强迫游泳应激后全脑和海马μ阿片受体的m RNA相对含量有所下降,而预注射纳洛酮可以反转这种变化。上述结果提示急性应激可能通过阿片受体损伤识别记忆的提取。     

大鼠眶额叶GABA及其B型受体在应激性抑郁行为发生中的作用及其影响机制

为了探讨眶额叶(orbital frontal cortex,OFC)GABA及其B型受体在应激性抑郁行为发生中的作用及其影响机制,实验采用强迫游泳方法建立急性应激抑郁模型。在OFC区微量注射γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)及其B型受体阻断剂,通过开场实验、强迫游泳方式检测动物行为学表现,用免疫组织化学染色和Western blotting方法检测OFC区Kalirin表达,用高尔基染色法观察锥体细胞树突和树突棘。结果显示:强迫游泳应激引起动物抑郁样行为表现,同时,OFC区Kalirin阳性颗粒数及表达量显著减少,且锥体细胞树突棘密度下降;OFC区微量注射GABA具有抗抑郁效应,使OFC区Kalirin表达显著升高,锥体细胞树突棘密度增加;GABA-B型受体阻断剂CGP35348可以抑制GABA的这种效应。由此可见,通过强迫游泳应激诱发的抑郁样的行为变化与OFC区Kalirin表达减少和神经元树突棘密度降低有关,GABA可能通过GABA-B型受体增加OFC区Kalirin表达,以防止神经元退行性变化而产生抗抑郁作用。     

梨果仙人掌红花品系的毒性研究

通过对梨果仙人掌红花品系的小鼠急性毒性试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验研究,梨果仙人掌红花品系雌、雄小鼠LD50均大于170．0g／kgBw,属无毒物质;小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验结果均为阴性。因此在本次实验条件下,梨果仙人掌红花品系为无毒物质,未显示有遗传毒性作用。     

10个品系小鼠的RAPD 分析

小鼠是应用最为广泛的实验动物,预先了解品系或近交系的遗传纯度或系间遗传距离,对于试验材料的选取和实验结果分析都有很大帮助.传统的实验动物遗传监测多限于基因表型的检测,检测位点在整个基因组中所占比例小,分布不均.由于RAPD方法的优势,用一系列引物可检测出覆盖整个基因组的遗传改变,在动、植物品系鉴定和遗传监测方面已取得大量成果(陈洪等,1994;沈曦等,1999),但对多品系小鼠的研究报道较少.因此,本研究选用10个常用小鼠品系,筛选较好的多态标记,建立各品系的RAPD图谱,以区分不同品系的小鼠,为今后的质量监测工作提供参照标准;同时根据RAPD扩增结果计算出各品系间的相对遗传距离,在DNA水平探讨不同品系小鼠间的亲缘关系.     

Hr突变体转基因小鼠的构建和表型分析

无毛基因（Hr）定位于8p12,在染色体上跨越14 kb,包含19个外显子。无毛基因的自发突变能引起人和动物毛发脱落及相关毛发疾病的产生。为深入研究Hr基因的功能,本文利用Gateway技术构建Hr表达载体,在该基因的3 427位引入点突变(G→A),通过显微注射建立转基因小鼠。采用PCR方法鉴定出阳性的转基因小鼠,确定首建鼠,通过与C57BL/6小鼠回交后互交数代建系。观察转基因小鼠毛发生长发育规律。结果表明,成功构建了pRP(Exp)-EF1A>mHairless mutant>IRES/EGFP真核表达载体,通过与野生型小鼠杂交获得阳性子代,进行同窝交配,第2代小鼠出生后14 d开始脱发,30 d左右脱落的毛发重新长出。取部分皮肤组织做石蜡切片,皮肤组织学观察发现,脱毛期无毛小鼠毛囊瓦解,真皮内形成大小不等的包囊,毛发重新生长时,真皮内见大量新生的毛囊。蛋白印迹实验表明,转基因小鼠脱发时HR蛋白表达量明显高于同龄阴性小鼠。本文成功建立稳定遗传的Hr突变的转基因小鼠品系,推测无毛基因突变引发转基因小鼠的脱发,为研究Hr基因的功能提供了良好的动物模型。     

数据记忆动物游泳测试仪的研制

目的研制一种用于检测动物负载游泳状况及过程的仪器,用于动物疲劳游泳试验。方法采用不同直径的可调换加载钢球、恒温水池、接近传感器信号转换、51系列单片微机控制和记忆信号。结果研制出一台可同时做六路平行实验的动物游泳测试仪,自动记忆动物在加载的情况下抗疲劳游泳的全过程。结论经36例小鼠实验证明,效果良好,该仪器为动物负载游泳实验提供了一种全新的测试方法。     

不同等级环境对大、小鼠及其应用的影响

目的了解不同等级环境（屏障环境和普通环境）对实验大小鼠的一般生理表现和抗应激能力以及对药物反应的影响,初步判定严格的微生物控制是否影响实验动物的人类模型作用。方法将40只SPF级Wistar大鼠和200只SPF级BALB／c小鼠分别饲养于屏障环境和普通环境内,通过以下实验对比观察不同等级环境对实验大、小鼠及其应用的影响：每周测量动物的体重增长情况;饲养35d后,测定大鼠15项血液学指标、14项血液生化指标和9个脏器的相对重量;以抗缺氧实验和游泳实验判断对小鼠体质和抗应激能力的影响;以5．氟尿嘧啶急性毒性实验和戊巴比妥钠麻醉实验测试其对药物作用的异同。结果在5周观察期内,屏障环境饲养小鼠和大鼠的体重增长均明显快于普通环境的对照动物（P〈0．05）;普通环境饲养大鼠的血液RBC、WBC、PCT、PLT、GOT、GGT、GPT、CK、TB值高于屏障环境大鼠（P〈0．05）,而CHO、LDL-C和HDL-C值低于屏障环境大鼠（P〈0．05）;不同微生物环境条件饲养小鼠的游泳耐力和抗缺氧实验结果接近,但是屏障环境组动物所获数据的变异较小;不同等级环境条件饲养小鼠的戊巴比妥钠麻醉反应和5-氟尿嘧啶中毒反应相似,而屏障环境组动物的麻醉维持时间较短,LD50较低,95％可信限狭窄。结论饲养于屏障环境和普通环境的实验大、小鼠在一般生理表现上出现部分差异,动物的抗应激能力和对药物的反应未发生显著变化;在屏障环境条件中,动物的药物反应更敏感、所获数据更稳定,因此,初步认为严格微生物控制条件下的SPF级动物可以作为生活在自然环境中的人类的模型动物。     

γ-氨基丁酸茶对小鼠抗疲劳作用的研究

目的:研究γ-氨基丁酸茶对小鼠的抗疲劳作用.方法:采用昆明种小鼠游泳力竭实验,实验动物分为γ-氨基丁酸茶高、中和低实验组及空白对照组,分别检测游泳力竭时间,测定小鼠血糖、肝糖原、肌糖原,血清BUN、LDH、CK、SOD、MDA、GSH-PX,以及游泳前后的血乳酸.结果:γ-氨基丁酸茶对小鼠的实验期间的体重无明显影响.力...     

复合因素建立亚健康小鼠模型

目的:复合因素建立与临床症状相似的亚健康小鼠模型。方法:采用强迫游泳、睡眠剥夺、装管束缚、夹鼠尾应激建立亚健康小鼠模型,通过小鼠外观、行为学数据及病理检测鉴定模型是否成功。结果:造模结束后,模型组小鼠外观、体重、自主活动量、避暗次数、绝望时间、力竭游泳时间与对照组小鼠相比差异显著(P0.05),病理结果显示模型组小鼠未见异常。结论:复合因素成功建立亚健康小鼠模型。