龙脑液导致癌细胞凋亡的实验研究

目的:在细胞培养下检验加入龙脑液诱导癌细胞凋亡的作用.方法:采用人鼻咽癌、肺鳞癌、肺腺癌,乳腺癌细胞和正常细胞株,保持细胞正常培养基浓度下,用不同浓度稀释的龙脑液培养细胞,培养不同时间用四唑盐(MTT)比色试验观察龙脑液对癌细胞增殖的影响,采用细胞涂片染色观察细胞死亡性质,在流式细胞仪分析其凋亡率和性质.结果:二倍稀释浓度的龙脑液能快速导致癌细胞凋亡,四倍稀释浓度的龙脑液培养,均有细胞凋亡发生,凋亡程度从高到底依次为肺鳞癌、肺上皮癌和鼻咽癌,正常细胞293T则只有基础水平的凋亡发生;在撤出龙脑液回到正常培养环境下正常细胞能较快恢复到正常生长状态,而癌细胞则在一定时间内继续发生凋亡.在形态学上出现胞膜起泡或出芽,染色质凝聚分裂、细胞质减少,细胞碎片化等.早期细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻明显导致细胞凋亡,也通过Caspases3凋亡通路变化而引起癌细胞凋亡.结论:龙脑对癌细胞有促凋亡作用.     

肝细胞癌中miR-92a的表达及其对HepG2细胞凋亡的影响

目的:探讨miR-92a与肝细胞癌的相关性,及其表达改变对肝细胞癌HepG2细胞凋亡的影响.方法:实时定量PCR检测肝细胞癌和癌旁正常组织中miR-92a的表达;将miR-92a的抑制物miR-92a inhibitor转染了肝细胞癌HepG2细胞,然后检测了转染后细胞的凋亡.结果:与癌旁正常组织相比,肝细胞癌组织中miR-92a的表达显著上调;转染后miR-92a inhibitor组的凋亡率显著增加.结论:miR-92a与肝细胞癌的发生相关,抑制其表达能够促进肝细胞癌细胞凋亡,在肝细胞癌中发挥癌基因的作用.     

细胞外基质在个体发育早期中的作用

细胞外基质,是存在于细胞外的基本物质,细胞外基质的主要成分是一些多糖和蛋白,这些物质起着很大的作用,比如连接组织结构,细胞与细胞之间,细胞与环境之间都是基于细胞外基质为物理连接点连接的,对于调节组织的构成主要是细胞之间的连接,和细胞的生理活动主要是细胞的分化具有极大的意义。在动物体幼期,对于细胞的存活,分裂以及分化起着重要作用,在这个时期,控制细胞外基质产生以及分泌的基因得以疯狂表达,然而,在一些癌细胞的表面,一些细胞外基质也在疯狂表达,我们知道,细胞外基质对细胞的分化有重要意义,一旦脱离了某些细胞外基质,细胞将停止分化,这说明正常细胞的细胞外基质和癌细胞的细胞外基质是不同的,并且一旦脱离了特定细胞外基质,细胞将会凋亡。我们可以利用Real-time PCR技术去测得正常细胞与癌细胞的某些基因的相对表达量,弄清楚这些基因在两者中的相对表达量的不同,分析哪些细胞外基质对生物体是有益的,哪些促进了癌细胞的生长,对于哪些癌细胞需要的细胞外基质,而正常细胞不需要的,可以利用生物导弹分解,破坏癌细胞赖以生存的环境,杀死癌细胞,这些对于我们去治疗癌症具有重要意义。     

尿液蛋白质治癌的研究

寻找能够有选择性的杀死癌细胞而对正常细胞无害的药物,是研究工作者多年的希望。1976年4月Burzynski等初步报道了从正常人尿液中,分离出一类很小的蛋白质类物质,有干扰癌细胞分裂的能力,同时不影响正常细胞分裂。他们首先从血液中筛选,找到了一组只含10至15个氨基酸单元的小蛋白质类,继而从105加仑正常人尿中成功的分离出四种这样的蛋     

免疫毒素

<正>序言 目前使用的大多数抗癌药物是杀死正在分裂的细胞。这些药物的选择性是基于癌细胞比正常细胞分裂得更快的特性。遗憾的是,象肠道上皮和骨髓的造血系统细胞等正常组织,却有大量正处于繁殖的细胞,以致于因药物处理而受损。事实上,在许多型别的肿瘤里,恶性细胞与正常细胞间的敏感性差距,对药物疗效来说是太窄了。     

天花粉蛋白对滋养层细胞专一损伤机制的研究

在体外培养条件下,天花粉蛋白胶体金以受体介导的内吞方式进入滋养层细胞和绒癌细胞,最终进入胞质溶胶附着在核糖体上。经相同处理的肝癌细胞,绿猴肾细胞和正常鼠胚肝细胞,金颗粒既不与这些细胞表面结合,也没有被专一内吞的现象。分别用BSA,转铁蛋白活化的胶体金处理滋养层细胞和绒癌细胞的比较观察,也证明滋养层细胞和绒癌细胞对天花粉蛋白的专一亲和性。更有趣的是:天花粉蛋白肝癌单抗胶体金结合物进入绒癌细胞的方式与天花粉蛋白的结果相同;先以旰癌单抗处理也不影响天花粉蛋白肝癌单抗结合物进入绒癌细胞。然而,对于旰癌细胞,天花粉蛋白肝癌单抗胶体金颗粒则专一地结合在细胞的微绒毛表面,这种结合因先以肝癌单抗处理而明显地被竞争抑制。这些实验结果相互印证地提供天花粉蛋白对滋养层细胞和绒癌细胞高度专一的亲和性,并证明天花粉蛋白对靶细胞的原初损伤部位是核糖体。进一步探讨天花粉蛋白在靶细胞表面结合位点的化学性质以及这种蛋白在靶细胞内的转运机制将是重要的问题。     

血清抑癌多肽某些生物学特性的研究

血清抑癌多肽(SCSP)在体外可以杀伤小鼠不同种类的腹水型癌细胞,如肝癌细胞、S180细胞、白血病细胞等。但它对小鼠的非癌细胞没有明显影响,对不同种类的人癌细胞株没有普遍的杀伤作用。 用反向间接血凝法检验结果表明,血清抑癌多肽可能由宿主脾细胞产生,而非来自癌细胞。 用超速离心法分离小鼠血清脂蛋白VLDL和HDL,并检测脂蛋白中SCSP含量与其对癌细胞杀伤作用的关系,相关性检验结果表明它们之间有相关关系。SCSP的含量高,则对癌细胞的杀伤作用强。     

醛酮还原酶家族1的C1亚型在胃癌的表达及其作用探讨

目的:研究AKR1C1(Aldo-keto reductase family 1 member C1)在胃癌中的表达,并初步探讨其在胃癌发生和发展中的作用。方法:采用胃癌组织芯片和免疫组化分析方法,检测60例胃癌患者癌组织及癌旁正常组织AKR1C1的表达;实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹western blot检测胃癌细胞株SGC-7901 AKR1C1的表达;在胃癌细胞株SGC-7901中转染沉默AKR1C1的sh RNA质粒及空质粒,MTT比色法检测各实验组细胞增殖。结果:组织芯片和免疫组化结果显示,与正常组织相比,胃癌组织中AKR1C1呈高表达;实时荧光定量PCR和western blot观察可以发现胃癌细胞株SGC-7901高表达AKR1C1;MTT比色法检测发现,转染沉默AKR1C1的sh RNA质粒组与空质粒对照组相比,SGC-7901细胞的增殖受到明显抑制,差异有统计学意义(P0.05)。结论:AKR1C1与癌细胞的增殖有关,可能是其参与或间接参与了癌细胞的生长周期,为胃癌的发生及细胞增值提供了新的研究思路和方向。     

开发肺小细胞癌的新标记ProGRP的检查药

国立癌中心部长山口建小组和Thermo()、东燃公司开发肺小细胞癌的新标记——胃泌素释放肽前体(ProGRP)的检测盒获得成功。1994年9月已申请制造认可。 ProGRP是利用人胎儿期肺进行检测的物质,可诱发产生很多肺小细胞癌细胞。作为肺小细胞癌的标记有破坏细胞向血液中释放的神经元特异烯醇化酶(NSE)的作用,但是,与NSE相比,ProGRP可在癌的最早期能高效率地检测。正常者和肺小细胞癌患者的血液中浓度差平均为100倍或更大。其特点是对肺小细胞癌的特异性高等。 国立癌中心、Thermo、东燃公司开发的药盒是用小鼠的单克隆抗体和多克隆抗体的夹层酶联免疫测     

线粒体E3泛素连接酶MARCH5表达上调促进肝癌生长

目的:膜相关锌指蛋白MARCH5(membrane-associated RING-CH 5)是定位于线粒体外膜的E3泛素连接酶,在调控线粒体分裂融合相关蛋白的表达中发挥重要作用。以往研究在多种肿瘤中证实了线粒体分裂融合的异常,但目前MARCH5在肝癌中的表达与生物学作用均不清楚。本研究旨在探讨MARCH5在肝癌组织与细胞系中的表达及其在肿瘤生长中的调控作用。方法:1).利用免疫组化实验检测62对肝癌癌与癌旁组织中MARCH5表达,以明确MARCH5在肝癌中的表达是否发生了异常改变。2).利用qRT-PCR与Western blot实验检测4株肝癌细胞(SNU-354、SNU-368、HLE与HLF)与1株正常肝细胞HL7702中MARCH5表达,进一步分析MARCH5在肝癌细胞系中的表达改变。3).下调肝癌细胞中MARCH5表达后,利用EDU实验与克隆形成实验分析对肝癌细胞增殖与克隆形成能力的影响。结果:1).MARCH5在肝癌组织中表达显著高于癌旁组织。2). MARCH5在4株肝癌细胞中的表达均显著高于正常肝细胞。3).下调MARCH5表达可显著抑制肝癌细胞的增殖与克隆形成。结论:MARCH5在肝癌中表达显著上调并通过诱导增殖与克隆形成而促进肝癌的生长。     

肿瘤的实验性亲和化学疗法

1878年Ehrlich 就提出了化疗的设想。癌症的化疗,近20年来虽然在精原细胞癌、绒毛膜上皮癌、何杰金氏病等方面取得了重要的进展;但三种常见癌:乳癌、肺癌与结肠癌的治疗却进展不大。即使大剂量联合药物治疗,患者也往往死于转移疾病。限制化疗发展有两个主要因素:(1)组成肿瘤的细胞有亚群,它们对药物治疗反应非常不同;(2)大部分抗癌药缺乏对肿癌细胞的特异性,对正常组织细胞也有毒性。     

癌与遗传学研究

随着医学遗传学的发展,现已发现将近有 三千种疾病与遗传有关,癌就是其中一种。癌 与遗传的关系如何。这涉及癌的病因。我们知 道,癌细胞是由正常细胞癌变而成的,也就是 说,在致癌因子作用下,或是细胞原先就有的遗 传信息发生了改变,或是基因调控系统受到干 扰,改变了原先的遗传信息表达的时空程序,最 后使细胞代谢出现了异常而导致癌变。所有这 一切都是同基因的结构和功能的改变有关的, 这就表明了癌同遗传学研究的关系。     

GRP78 在食管鳞状细胞癌、不典型增生及正常食管鳞状上皮 组织中的表达

目的:检测葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated proteins 78,GRP78)在同一食管癌患者食管的鳞状细胞癌、不典型增生及正常鳞状上皮组织中的表达,研究GRP78与食管鳞状细胞癌发生发展的关系。方法:取90例食管鳞状细胞癌患者的病变组织,其病理切片中正常鳞状上皮组织、不典型增生组织和鳞状细胞癌组织均存在,用免疫组化的方法 ,检测GRP78在3种不同组织中表达的情况,分析GRP78与性别、年龄、浸润深度、分化程度、分期及淋巴结转移等参数之间的关系。结果:GRP78在食管正常鳞状上皮组织、不典型增生组织、鳞状细胞癌组织中的阳性表达率分别为7.8%、85.6%、47.8%,GRP78在正常食管组织、不典型增生组织、食管鳞癌组织3组中表达的差异有显著性意义(P<0.01)。鳞状细胞癌组织中GRP78表达阴性者,年龄较阳性者大;GRP78表达与肿瘤分化程度、分期、淋巴结转移等有明显相关性。结论:GRP78在食管正常细胞向恶性细胞转化的过程中可能扮演了重要角色,检测GRP78的表达可能有助于对食管鳞状细胞癌的预防及早期诊断。     

“单臂”的治癌抗体

理想的杀死癌细胞的药物,应能识别癌细胞,并有效地杀死它而又不危害正常细胞。当科学家们找到一种制作能识别癌细胞表面上特异标志的蛋白质的方法时,这种理想药物似乎会很快地研制出来,这种高度特异的蛋白质称为单克隆抗体。下一步是使这种抗体与一种名叫蓖麻蛋白的毒素相结合。问题是这种蓖麻蛋白很毒,它只能作为治疗这种不治之癌的一种最后手段。     

Molecular cell:切断癌细胞备用能源“饿”死癌细胞

正科学家们通过阻断肺癌细胞对备用营养物质的使用,找到了阻止肺癌细胞生长的新方法。相关研究结果发表在国际学术期刊molecular cell上,这项研究为肺癌治疗提供了新的方向。癌细胞到底"吃"什么癌细胞的代谢过程与正常细胞有很大不同。细胞的快速增殖意味着癌细胞对能量的需求会显著增加,而葡萄糖是癌细胞的主要营养来源,它们对葡萄糖的利用速率是正常细胞的几十倍甚至几百倍。但当葡萄糖变得缺乏,癌细胞就必须转而使用备用营养物质以维持细胞生长和存活。     

原核基因组的进化方向和癌／正常细胞的熵产生

本文评述了理论生物学的两个基础实验。一是用离子束辐照加速大肠杆菌进化的方法研究原核基因组的进化方向,证明进化中的缺失偏好性和编码信息量扩增律不矛盾。二是提出用导热法测量细胞的熵产生,比较研究了癌细胞和正常细胞的熵产生和外加电场的关系,证明在一定强度的电场作用下正常细胞的熵产生可以明显超过癌细胞,从而实现改变两类细胞间熵流方向的目的。     

抑癌蛋白p16INK4a:一种新的衰老调控因子

p16INK4a是一种非常重要的抑癌蛋白．可通过抑制癌细胞的分裂和诱导癌细胞的死亡而减少癌症的发生,因此它的缺失或异常将增加患癌症的概率。最新的研究却发现,p16INK4a还有另外一个重要作用,通过诱发老龄哺乳动物干细胞功能下降而促使衰老的产生．至少在骨髓、前脑、胰岛细胞和角化细胞等类型细胞中被证实。这个发现使人们对p16INK4a功能和衰老分子机制有了新的理解,因此为更好的临床应用提供了重要的材料。     

细胞不对称分裂

细胞不对称分裂是多细胞生物发育的基础。细胞不对称分裂的重要特征是细胞命运决定子在细胞分裂期间的不对称分离。细胞不对称分裂一般要经历4个步骤：在细胞中建立一个极性轴;沿此轴定向并形成纺锤体;细胞命运决定子沿极性轴作极性分布;细胞分裂后,不同的细胞命运决定子指导决定细胞的不同命运。     

衰老标记蛋白30 mRNA在癌细胞中的表达研究

目的:检测衰老标记蛋白(SMP)30 mRNA在不同癌细胞系中的表达情况,探讨其在不同细胞中的表达差异。方法:分别采用RT-PCR与荧光定量PCR检测SMP30 mRNA在正常肝细胞、肝癌细胞、胃癌细胞、乳腺癌细胞、宫颈癌细胞中的表达,并用SPSS13.0进行统计学分析。结果:SMP30 mRNA在所有被检测的细胞株中均有表达,在癌细胞中的相对表达量分别为肝癌细胞(0.926±0.340)、胃癌细胞(0.922±0.379)、乳腺癌细胞(0.614±0.356)、宫颈癌细胞(0.608±0.346),而在正常肝细胞中为0.175±0.158,显示SMP30 mRNA在癌细胞中的表达量较正常肝细胞中高(P0.05),且在肝癌细胞中的表达量比在其他癌细胞中更高。结论:SMP30 mRNA在癌细胞中的表达高于正常肝细胞,且在肝癌细胞中的表达高于其他癌细胞,具有临床应用价值。     

肉瘤-180小鼠体液中抑癌因子的研究

本文报告从肉瘤-180小鼠腹水液中分离出抑癌因子,并将其与艾氏腹水瘤小鼠腹水中的抑癌因子进行比较。结果表明,二者具有相同的生物学特性和理化性质:1.它们均能杀伤不同的癌细胞株,但对正常细胞没有影响;2.经聚丙烯酰胺凝胶电泳,为泳动速率相同的均一多肽。