细胞因子与酒精性肝病

酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)的发生发展过程与体内多种细胞因子有关,尤其是肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)在调节肝细胞的凋亡过程中具有重要作用。TNF-α可引起肝细胞凋亡与炎症反应等,抗TNF-α治疗能明显减轻酒精引起的肝损害;TGF-β具有增加细胞外基质的合成和抑制细胞外基质降解的作用,TGF-β1升高与肝纤维化密切相关。细胞因子可能是防治酒精性肝病的有效分子靶点。     

CCK-8对内毒素休克大鼠肺脏细胞因子的抑制效应

观察八肽胆囊收缩素(cholecystokinin-octapeptide,CCK-8）改善脂多糖(lipopolysaccharide,LPS）引起的大鼠内毒素性休克（endotoxic shock,ES）过程中血清及肺脏细胞因子的变化,探讨p38比裂素活化蛋白激酶（p38 mito-gen-activated protein kinase,p38 MAPK）的信号转导作用。用生理多道记录仪观察尾静脉注入LPS(p38 mito-gen-activated protein kinase,p38 MAPK）的信号转导作用。用生理多道记录仪观察尾静脉注入 LPS（8mg/kg i.v.）复制的SD大鼠ES模型、LPS注入前10min尾静脉注入CCK-8(40ug/kg i.v.）、单独注入CCK-8(40Uug/kg i.v.）或生理盐水（对照）的四组大鼠平均动脉血压（MAP）的改变,应用ELISA试剂盒检测血清和肺脏中炎性细胞因子（TNF-a、IL-1β和IL-6）的变化。用Western blot检测肺脏p38 MAPK的表达。结果显示：CCK-8可改善LPS引起的大鼠MAP的下降。与对照组相比,LPS可显著增加血清和肺脏TNF-a、IL-1β和IL-6含量;CCK-8可显著抑制LPS诱导的血清和肺脏TNF-a、IL-1β和IL-6的增加。CCK-8可增加ES大鼠肺脏磷酸化p38 MAPK的表达。结果提示CCK-8可改善ES大鼠MAP的降低,并对肺脏促炎性细胞因子过量产生有抑制作用,p38MAPK可能参与了其信号转导机制。     

炎症Caspase与相关疾病

Caspase家族是一类与细胞凋亡和炎症反应重要相关的蛋白酶,其中与炎症相关的主要有Caspase-1、-4、-5、-11、-12,总称为炎症Caspase,主要与促炎症细胞因子IL-1的产生有关。IL-1处于免疫反应的上游,能刺激多种炎症细胞因子和多种效应分子的产生,引起神经细胞凋亡和毒性、关节疼痛和损伤、肝细胞凋亡、急性胰腺炎等与炎症相关疾病。因此,抑制炎症Caspase对治疗炎症相关疾病有重要意义。     

细菌类脂A结构与功能研究进展

类脂A分布在革兰氏阴性细菌的外表层,它是脂多糖分子的疏水基团.脂多糖,俗名内毒素,可以引起致命的脓毒症、内毒素血症和多器官功能障碍综合症等疾病.近年来的研究发现:脂多糖分子中只有类脂A部分具有内毒素的活性.当细菌侵入人体后,其表面的类脂A可以刺激宿主细胞表面的Toll样受体-4,在细胞内引起一连串的反应,产生一系列的细胞因子.本文根据近年来内毒素领域的国际研究进展,系统综述了类脂A的结构特征、合成途径和致病机理,并在此基础上分析了内毒素在疫苗开发领域的应用前景.     

内毒素血症对大鼠肝细胞线粒体的损伤及其机制

目的:观察内毒素血症大鼠肠粘膜与肝细胞线粒体氧化磷酸化功能的损伤及其机制.方法:测定血PaO2和肠黏膜Phi,提取肝细胞线粒体测定其超氧阴离子O-2生成量,同时测定线粒体呼吸链功能:ADP/O、呼吸控制率(RCR).结果:在内毒素血症大鼠动脉血氧分压尚正常时,其肝细胞线粒体O-2生成量显著增加.结论:在内毒素血症的发病机制中存在由于肝细胞线粒体内源性氧自由基生成增加对线粒体呼吸功能所造成的氧化损伤.肠粘膜酸中毒的发生提示细胞利用氧的功能障碍.     

SCD1在高脂饮食大鼠肝脏的表达及其与肝细胞凋亡的相关性

目的:探讨高脂饮食大鼠肝脏中硬脂酰辅酶A去饱和酶1(stearoyl-CoA desaturase 1,SCD1)的表达及其与肝细胞凋亡的相关性.方法:30只SD大鼠随机分成正常组和高脂组,分别给予普通饲料和高脂饲料喂养.在实验的第8w,16w和24w分批处死,观察肝细胞组织学改变,RT-PCR方法检测SCD1和丝氨酸棕榈酰转移酶(serine palmitoyl transferase,SPT)mRNA的表达,TUNEL方法观察肝细胞的凋亡.结果:肝组织HE染色显示高脂组大鼠肝脏内肝细胞呈弥漫性脂肪变性,8w即达到脂肪肝的诊断标准.RT-PCR分析结果显示高脂组SCD1 mRNA表达下降,SPTmRNA表达进行性上升.TUNEL凋亡检测表明,随着高脂饮食时间延长,肝细胞凋亡趋于严重.SCD1表达与SPT和凋亡指数(AI)之间呈负相关,SPT表达和AI指数之间呈正相关.结论:长期高脂饮食可引起肝SCD1表达下调,同时促进细胞凋亡关键基因SPT的表达,肝细胞凋亡增多.     

MOI对PK-15细胞感染PPV后细胞因子mRNA转录时相的影响

【目的】更好地了解感染复数(MOI)对猪细小病毒(PPV)感染PK-15细胞后引起细胞因子的反应,探讨宿主-病毒之间的作用关系。【方法】运用荧光定量PCR技术,测定和分析3种感染复数对PPV感染PK-15细胞引起的病毒DNA量的变化和细胞因子IFN-、IRF-3、TNF-a和IL-18分泌水平。【结果】PPV感染PK-15细胞12 h病毒开始大量迅速增殖,感染48 h且MOI为1.0时达到最高峰;PPV感染后可引起PK-15细胞中IFN-、IRF-3、TNF-a和IL-18的表达量显著增加,其中IRF-3基因在感染后1 h且MOI为10.0时表达量达到967倍。【结论】细胞因子的分泌水平显著依赖感染复数和感染时间的交互作用。     

TSA杀伤培养的人大肠癌细胞DLDl及机理的研究

我们用曲古抑菌素A(TSA)作用于人大肠癌细胞DLDl,研究小眼相关转录因子(MITF)表达及其酰基化与癌细胞凋亡关系.Northem杂交实验结果表明TSA作用组MITF表达明显增加,而对照组无明显MITF表达.电镜观察可见TSA引起DLDl超微结构的损伤及凋亡改变.提示TSA可能成为有效的杀伤癌细胞的药物.细胞因子作用组也可见MITF表达增加和细胞超微结构的改变.说明是否TSA引起MITF表达等可能与细胞因子作用通路相关.     

肝细胞癌中miR-92a的表达及其对HepG2细胞凋亡的影响

目的:探讨miR-92a与肝细胞癌的相关性,及其表达改变对肝细胞癌HepG2细胞凋亡的影响.方法:实时定量PCR检测肝细胞癌和癌旁正常组织中miR-92a的表达;将miR-92a的抑制物miR-92a inhibitor转染了肝细胞癌HepG2细胞,然后检测了转染后细胞的凋亡.结果:与癌旁正常组织相比,肝细胞癌组织中miR-92a的表达显著上调;转染后miR-92a inhibitor组的凋亡率显著增加.结论:miR-92a与肝细胞癌的发生相关,抑制其表达能够促进肝细胞癌细胞凋亡,在肝细胞癌中发挥癌基因的作用.     

促凋亡蛋白Bid诱导肝细胞凋亡的机制

为研究促凋亡蛋白Bid对肝细胞凋亡过程中的调节机制 ,在体内和体外分别用TNF α或抗Fas抗体诱导小鼠肝细胞凋亡 .免疫荧光染色观察Bax转位和构象变化 ;采用ELISA检测caspase 3和 8的活性 ;Western印迹测定Bid和Bax的裂解活化及Bax的转位和插入 .结果显示 :TNF α或抗Fas抗体通过激活Bid导致Bax转位和构象变化 ,使Bax得以插入线粒体膜诱导肝细胞凋亡 .阻断Bid的作用 ,则Bax的转位和插入明显被削弱 ,肝细胞的凋亡受到抑制 .提示由死亡受体诱导的肝细胞调亡可能受Bid调节 ,Bax转位和插入依赖于Bid .