多克隆抗体兔免疫血清取血新方法

兔耳动脉采血获得多克隆抗体免疫血清是一种较实用的方法.利用这种改进的取血方法,在25℃左右,可从免疫后的兔一次件采得100 ml左右的血量.该法对动物损伤小,操作简便,可在短期内连续采到较大量的高质量兔血.且血清质量较好,采血后兔仍正常存活.因而非常适合于免疫血清取血,也可用于其它的兔采血实验.     

PCR法评价伊曲康唑注射液治疗播散性白念珠菌病兔模型疗效

目的通过静脉内接种的方法,构建播散性白念珠菌感染的兔模型,并用PCR评价伊曲康唑注射液治疗播散性念珠菌病的疗效。方法在接种后24h,用伊曲康唑注射液5rag／kg对兔模型进行治疗,1次／d,共14d。在不同的时间段取兔模型的静脉血,进行血培养和真菌通用引物以及白念珠菌特异性引物的PCR检测,监测伊曲康唑注射液治疗播散性白念珠菌感染的疗效。结果在接种白念珠菌后1h、6h,外周血中用PCR方法就能检测到白念珠菌,且能持续到8—10d;实验兔外周血血培养1h后阳性,持续到18h。实验结束后解剖实验兔,治疗组较对照组内脏器官的组织培养阳性率及菌落数低。结论PCR是一种快速和敏感的检测播散性念珠菌病的方法,伊曲康唑注射液治疗播散性白念珠菌病有效,但是真菌的清除率特别是肾脏组织的真菌清除率并不理想,治疗结束7d后,组织匀浆真菌培养仍然阳性。     

正常鼠血液流变学观察

本实验测定鼠类11项血液流变学正常值,并在不同鼠种、鼠龄、性别和取血方式间进行比较。结果提示:实验动物的血液流变学值受鼠种、鼠龄、性别及取血方式的影响,因此在同一实验中应保持上述几方面的一致。本实验特别提出取血方式对血液流变学测定结果的影响,并认为心脏取血由于简便、采血量多、较少受其它因素的影响,因而在血液流变学实验中是一个较好的取血方法。     

基于肠道菌群探讨雄性WHBE兔与日本大耳白兔胆固醇代谢的差异性

目的 从肠道菌群途径分析雄性日本大耳白兔黑眼系(white hair and black eyes rabbit, WHBE兔)和日本大耳白兔胆固醇代谢的差异性。方法 各取4～5月龄雄性WHBE兔和日本大耳白(JW)兔6只,取血检测血脂水平,并取结肠内容物提取DNA后进行16S rRNA微生物测序,观察肠道菌群结构与功能的变化。结果 雄性WHBE兔血清总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白-胆固醇水平(LDL-C)均明显低于JW兔(P<0.05)。多样性分析显示,两品系兔的肠道微生物群分离明显,WHBE兔Chao1指数显著低于JW兔(P<0.05)。在门水平,WHBE兔梭杆菌门、软壁菌门和蓝藻菌门的丰度低于JW兔(P<0.05,P<0.01),且厚壁菌门/拟杆菌门比值亦低于JW兔(P> 0.05)。在属水平,WHBE兔中有24个菌属的相对丰度与JW兔存在显著性差异(P<0.05,P<0.01)。LEFSe分析显示,WHBE兔中发现了5个关键菌属,以理研菌科RC9群(Rikenellaceae＿RC9＿gut＿group)最多;JW兔中发现了10个关键菌...     

昆虫生理学实验中的微量技术

<正> 本文简要介绍以七星瓢虫为主要对象的微量取血淋巴、微量点滴和微量注射方法。这类方法同样可以适用于家蝇、果蝇、蚊子、蚜虫、叶蝉和一些小型鳞翅目昆虫。 一、取血淋巴方法 血淋巴是昆虫代谢过程中各种代谢物质储存和交换的场所。分析血淋巴的成分及各种代谢物质的变化是昆虫生理生化实验中最普遍的技术。由于昆虫的个体小,血淋巴的量极少,例如,七星瓢虫的血淋巴一般都在10微升以下,而且离体后很快凝结,有些昆虫的血淋巴遇到空气则很快变黑,所以取血淋巴的方法一定要     

不同取卵时间对兔ICSI胚胎体外发育的影响

目的探讨不同取卵时间对兔ICSI胚胎体外发育的影响。方法采用Piezo操作系统对实验兔进行辅助体外受精。结果hCG注射后14、16、18h取卵,ICSI后的受精率分别为82.2％、75.9％和0.0％,对受精卵进行体外发育培养,桑椹胚的发育率分别为72.9％、70.0％、0.0％,囊胚的发育率分别为62.2％、53.3％、0.0％。14h和16h之间受精率、桑椹胚率、囊胚率差异不显著（P〉0.05）,但是14h采卵比16h要好;18h和14h、16h之间差异显著（P〈0.05）。结论不同取卵时间影响实验兔的ICSI体外受精率及胚胎的体外发育率,hCG注射后14h取卵最有利于兔ICSI胚胎的发育。     

兔在体心脏缺血再灌注模型的制作方法的改进

目的建立兔在体心脏缺血再灌注模型的新方法。方法40只新西兰大白兔随机分为缺血再灌注组（25只）,假手术组（15只）。缺血再灌注组采用＂二线二结＂法结扎心脏左前降支30 min,然后恢复心肌灌注3h;假手术组仅将线从左前降支周围心肌中穿过,但并不结扎。实验中连续描记心电图。两组分别于结扎（穿线）前和再灌注（穿线）后1 h从股静脉取血1 mL测定血清肌钙蛋白。实验结束时取心肌行2,3,5-氯化三苯基四氮唑和苏木精-伊红染色。结果缺血再灌注组心电图存在ST-T的动态演变,再灌注1 h后血清肌钙蛋白浓度明显高于术前（0.47±0.35 vs.0.33±0.31,P=0.002）。两种染色方法均证明存在心肌坏死。结论＂二线二结＂法能够既方便又成功地建立兔在体心脏缺血再灌注模型。     

微卫星技术在高原鼠兔繁殖行为研究中的应用

2002年4～8月,在中国科学院海北高寒草甸生态系统定位站对高原鼠兔的种群进行标志重捕,用眶下取血法对标志的鼠兔各取血样100μL,使用8对引物对血样中的DNA微卫星序列进行扩增。结果每对引物所扩增的产物都具有明显的多态性;结合野外行为观察对这些多态性位点进行分析,基本上对当年出生幼体的父权进行了准确的确定;从中发现高原鼠兔的交配体制为多配制,其家庭中存在等级制度,处于统治地位的雄性的繁殖成功率明显高于处于从属地位的雄性个体。上述工作表明微卫星技术在动物行为研究中具有很高的优越性,在高原鼠兔社会动态、亲缘关系和行为进化等研究领域具有广阔的应用前景。     

实验动物血及组织游离氨基酸含量

本文报告实验动物血及组织游离氨基酸含量,结果表明,实验狗和Wistar大鼠血游离氨基酸含量比较恒定。实验兔组织游离氨基酸含量普遍高于血。     

经隐动脉建立糖尿病兔股动脉血管狭窄模型

目的探讨建立糖尿病兔股动脉损伤后血管狭窄的模型方法。方法采用四氧嘧啶静脉注射建立糖尿病兔模型。建模成功后分为手术组、对照组,手术组接受了经隐动脉途径行球囊损伤股动脉术,对照组不行球囊损伤。术后均给予普食喂养,4周处死,行HE染色后观察血管狭窄情况。结果所有兔均完成了手术,24只存活至实验结束,平均手术时间（26±7）min,成功造成糖尿病兔股动脉狭窄模型,平均相关狭窄达（88.11±1.9）%。结论成功建立了糖尿病兔股动脉损伤后狭窄的实验模型,手术成功率高,操作时间少,存活率高,模型稳定,重复性好,为糖尿病外周血管病变的实验研究提供了借鉴方法。     

兔不同急性肝衰竭模型的建立与评价

目的:探讨一种理想的急性肝衰竭(AHF)模型建立方法.方法:36只实验兔随机分为3组:①改良药物手术诱导组(A组,n=12),先用D-氨基半乳糖(D-Gain)和脂多糖(LPS)腹腔注射,同时加用乳果糖,注射后2h以氟烷作为麻醉剂,切除约50%肝脏组织.术中经肝静脉注入5%葡萄糖氯化钠溶液10ml/kg体重;②传统手术诱导组(B组,n=12),切除约95%肝脏组织,术中不行肝静脉穿刺注射5%葡萄糖氯化钠溶液;③药物诱导组(C组,n=12),用D一氨基半乳糖(D-Gain)和脂多糖(LPS)一次性腹腔注射.比较建模死亡率、建模后24h兔存活率、血谷丙转氨酶(ALT)、血氨(NH3)、总胆红素(TB)和血糖(BS).结果:B组手术死亡率高于A组死亡率(41.77%vs0%),A组、B组兔建模成功后24h存活率及C组兔建模成功后72h存活率分别为0%,0%,25%,A组ALT和NH3水平显著高于C组(P＜0.05),TB和BG水平低于C组,但差异无显著性.结论:通过改进的50%肝切除术可建立较理想的兔AHF模型,以氟烷作为麻醉剂,药物诱导注射同时加用乳果糖,术中经中叶肝静脉注入5%葡萄糖氯化钠溶液可减少手术死亡率.     

兔循环血中黄绿烙铁头蛇毒浓度与DIC出现关系研究

目的观察兔循环血中黄绿烙铁头蛇毒浓度与ＤＩＣ出现的关系。方法用抗烙铁头蛇毒的鼠多克隆抗体ＩｇＧ测定兔血中蛇毒浓度,以α２－ＰＩ、ＡＴ－Ⅲ活性和纤维蛋白原水平参数为ＤＩＣ指标。结果上述指标水平随血中蛇毒浓度的增加而降低,ＤＩＣ的发生与血中蛇毒浓度呈负相关系,高剂量的蛇毒可诱发ＤＩＣ。结论ＤＩＣ的发生取决于兔循环血中蛇毒的浓度。     

几种哺乳动物眼眶后静脉丛取血法

(一)引言在实验用哺乳动物——小白鼠、大白鼠、豚鼠和家兔等的取血时,经验告诉我们,常常感到很大的困难。有时由于取血的不成功,会遭致实验的失败。以往在这些动物所采用的各种取血方法,都不能令人满意;如家兔的心脏穿刺,技术上既不简单,某一限度血液量的获得,亦无把握,而且对动物有其一定的危险性,造成死亡的后果。又身体表面静脉的穿刺,同样地有技术上的困难,常常得不到所需要的血量。小白鼠、大白鼠的尾巴,经     

睾酮对雄兔hs-CRP、MMP-9、HO-1、APN和动脉粥样硬化斑块稳定性的影响

目的探讨睾酮对雄兔血高敏C反应蛋白（hs-CRP）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、血红素氧化酶-1（HO-1）、脂联素（APN）和动脉粥样硬化斑块稳定性的影响。方法将66只雄性新西兰纯种兔随机分为4组,其中正常对照组10只（A组）、喂以普通饲料;假去势＋球囊损伤颈动脉组16只（B组）、去势＋球囊损伤颈动脉＋生理剂量睾酮（6mg/（kg.2周））肌注组16只（C组）、去势＋球囊损伤颈动脉＋生理盐水肌注组24只（D组）均喂以高脂饲料。在实验第8周随机抽取处死部分动物,观察颈动脉病变的形态特征,抽血测睾酮、hs-CRP、MMP-9、HO-1、APN水平。结果D组兔血睾酮水平显著降低;B,C组较D组兔血hs-CRP、MMP-9水平显著降低,HO-1、APN水平显著升高;且B,C组较D组兔动脉粥样斑块的面积和内-中膜厚度（IMT）显著减小,斑块纤维帽增厚、胶原含量明显增加。结论生理剂量睾酮可以影响雄兔血hs-CRP、MMP-9、HO-1、APN水平,并能调节动脉粥样硬化斑块进展与斑块的稳定性。     

兔循环血中黄绍烙铁头蛇毒浓度与DIC出现关系研究

目的 观察兔循环血中黄绿烙铁头蛇毒浓度与ＤＩＣ出现的关系。方法 用抗烙铁头蛇毒的鼠多克隆抗体ＩｇＧ测定兔血中蛇毒浓度，以α２－ＰＩ、ＡＴ－Ⅲ活性和纤维蛋白原水平参数为ＤＩＣ指标。结果 上述指标水平随血中蛇毒浓度的增加而降低，ＤＩＣ的发生与血中蛇毒浓度呈负相关系，高剂量的蛇毒可诱发ＤＩＣ。结论 ＤＩＣ的发生取决于兔循环血中蛇毒的浓度。     

介绍一种有效的家兔采血法

由于家兔耳缘静脉的血液先经耳尖部再流至耳根部,如果在耳缘静脉的耳尖部先经穿刺或割破而取血效果不理想时,就很难再于耳根部穿刺取血。因此我们认为,在耳缘静脉多次取血时,应从耳根部开始,逐渐移向耳尖部为宜。如以注射针头穿刺取血时,应从耳根部向耳尖方向插入耳静脉内。此外,为使血管扩张,     

羊源肠球菌溶血性的检测

[目的]了解羊源肠球菌溶血素的特性.[方法]以平板法、接触法、培养法、上清法及PCR法,对11株肠球菌临床分离株、30株健康羊分离株、肠球菌参考株和G群链球菌参考株进行了溶血性检测.[结果]接触法和上清法均不能检测到11株肠球菌临床分离株对兔血和羊血的溶血;平板法和培养法测得11株肠球菌临床分离株中,63.6%对兔血呈现β溶血,36.4%对羊血平板呈现α[溶血;基于检测cylA基因的PCR法,63.6%溶兔血菌能扩增出特异性条带,扩增产物序列与GenBank(L37110)中肠球菌同源性达99.3%.平板法测定30株健康羊分离株,初次分离培养53.3%对兔血β溶血,53.3%对羊血α溶血,43.3%对羊血β溶血,但二次传代后只有6%对兔血仍有溶血能力,且30株均不能检测到cylA.标准肠球菌对羊血平板有α溶血,而对兔血没有溶血性.[结论]提示肠球菌溶血性具有一定的溶血谱,不同检测方法检测的溶血情况不同;并且肠球菌溶血素必须在红细胞诱导下,通过细菌的生长繁殖产生;溶血素表型和基因型的检测不完全一致,对二者同时检测能提高肠球菌溶血素检测的准确性.     

利用FPLC系统结合自装层析柱纯化兔血清IgG

为了建立一种简便、成本低的纯化兔血清IgG的实用方法,采用FPLC系统结合实验室常规手段填充的Sephacryl-S200凝胶柱和DEAE-Sephadex A-50离子交换柱进行兔血清IgG的纯化,结果表明,在流速为0．5ml／min时,此方法可以纯化得到高纯度的兔IgG;脱盐柱Sephadex G-25重复实验证明此实验方法具有很好的稳定性;并且与商品化的层析柱相比,成本大为下降;此方法主要的不足之处是层析柱的流速较低,为0．5ml／min左右。该方法可以推广到其他生物大分子的纯化中去。     

牛泡沫病毒中国株感染兔的研究

将牛泡沫病毒(BFV3026)感染的细胞经耳缘静脉注射兔子,并以正常细胞注射的兔为对照.1年后处死,病毒挽救实验及PCR检测显示兔经一次注射即可被BFV3026感染,病毒广泛分布于感染兔的多种脏器中,通过共培养可从感染兔血、肝、脾、肺、肾中拯救出相应感染性病毒颗粒,并在脑、骨髓、心、胰、肠系膜中检到高拷贝BFV原病毒DNA存在.同时,血清学检测表明感染兔在接受注射一个月后即产生高滴度抗病毒蛋白抗体,并维持该滴度水平直至实验终止,兔未表现任何可观病变.     

牛泡沫病毒中国株感染兔的研究

将牛泡沫病毒(BFV3026)感染的细胞经耳缘静脉注射兔子,并以正常细胞注射的兔为对照。1年后处死,病毒挽救实验及PCR检测显示：兔经一次注射即可被BFV3026感染,病毒广泛分布于感染兔的多种脏器中,通过共培养可从感染兔血、肝、脾、肺、肾中拯救出相应感染性病毒颗粒,并在脑、骨髓、心、胰、肠系膜中检到高拷贝BFV原病毒DNA存在。同时,血清学检测表明：感染兔在接受注射一个月后即产生高滴度抗病毒蛋白抗体,并维持该滴度水平直至实验终止,兔未表现任何可观病变。