丁香假单胞菌环式脂肽毒素的生理和分子生物学研究

综合评述了近10年来在丁香假单胞菌脂肽毒素生理和分子生物学研究上的发现。这些毒素依肽部AA数目可分两组。丁香假单胞霉素组(syringomycuns)已报告4个成员,肽部有9个AA;丁香假单胞肽毒素组有2个成员,肽部分别有22个和25个AA。肽部C端羧基与分子内羟基氨基酸残基(AA)的羟基酯化闭合成环,再由羟基脂肪酸酰化。两组毒素都诱导植物电解质渗漏、人和动物红血球溶解,其机制在于在细胞膜上形成二价阳离子可通过的寡体通道。对酵母菌的抑制作用受固醇的种类影响,以胆固醇的保护作用最强。丁香假单胞霉素的合成涉及一个多酶系统,有些负责肽合成,有些负责运输或调节,除受内源调节蛋白调节外,也受外源信号分子调节,尤其是受植物酚糖苷诱导。这些毒素具有抗真菌活性,对人和动物的一些病原霉菌有明显效果,在试验剂量无副作用,在医药上应用的前景良好。     

植物青枯病菌细菌素的产生,性质及其利用

细菌素（Ｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎ）是细菌代谢过程中合成的、对同种或近缘种有特异性抑制作用的杀菌蛋白或多肽物质［１］。大多数植物病原细菌如放射农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｒａｄｉｏｂａｃｔｅｒ）、密执安棒形杆菌（Ｃｌａｖｉｂａｃｔｅｒ ｍｉｃｈｉｇａｎｅｓｔｓ）、软腐欧文氏菌（Ｅｒｗｉｎｉａｃａｒｏｔｏｖｏｒａ、 Ｅ． ｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｉ）、丁香假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｙｒｉｎｇａｅ）、甘蓝黑腐黄单胞菌（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ）等都具有产生细菌素的能力［２］…     

BIOLOG系统鉴定黄瓜根围促生菌的初步研究

对筛选出的８株具有明显促生防病作用的黄瓜根围促生菌ＣＮ１１,ＣＮ３１,ＣＮ４５,ＣＮ１ １６,ＣＮ１２９,ＸＢ１２０,ＸＢ５,ＸＢ４１通过ＢＩＯＬＯＧ法进行了分类鉴定,分别为：铜绿假单胞菌（Ｐｓｅｎｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）,波纹假单胞菌（Ｐ． Ｃｏｒｒｕｇａｔａ）,短芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｒｅｖｉｓ）,荧光假单胞菌Ｂ型（Ｐ． Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ ｔｙｐｅ Ｂ）,铜绿假单胞菌（Ｐ． Ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）,荧光假     

从织锦芋螺中克隆α芋螺毒素序列

为了从我国南海产织锦芋螺（Ｃｏｎｕｓｔｅｘｔｉｌｅ）中分离新的毒素序列并研究其应用价值,进行了织锦芋螺毒素基因的分离工作．从织锦芋螺毒管中提取ｍＲＮＡ,以Ａ族芋螺毒素的信号肽编码部分和３′端非翻译部分的保守序列为引物,通过ＲＴ－ＰＣＲ扩增和序列分析方法获得新的芋螺毒素序列．结果得到两种不同的α芋螺毒素序列,两者都属于α４／７亚型芋螺毒素,预测其成熟肽序列分别为Ｐｒｏ－Ｇｌｕ－Ｃｙｓ－Ｃｙｓ－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｐｒｏ－Ａｒｇ－Ｃｙｓ－Ａｓｎ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｈｉｓ－Ｐｒｏ－Ｇｌｕ－Ｌｅｕ－Ｃｙｓ－Ｇｌｙ（Ｃ端Ｇｌｙ可能被酰胺化）和Ｐｒｏ－Ｇｌｕ－Ｃｙｓ－Ｃｙｓ－Ｓｅｒ－Ｈｉｓ－Ｐｒｏ－Ａｌａ－Ｃｙｓ－Ａｓｎ－Ｖａｌ－Ａｓｐ－Ｈｉｓ－Ｐｒｏ－Ｇｌｕ－Ｉｌｅ－Ｃｙｓ－Ａｒｇ．采用传统的生化分离手段尚未从织锦芋螺中获得过α芋螺毒素序列,这两种α芋螺毒素作用的种属特异性、受体类型特异性和在小细胞肺癌的诊断和治疗中的应用价值有待进一步研究     

水稻内生联合固氮细菌的筛选,鉴定及其分布特性

利用乙炔还原法和固定１５Ｎ２ 活性测定法对分离自水稻（ Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ Ｌ．）“越富”种子、根、茎和叶的内生细菌进行了筛选,获得２９ 株具有体外固氮能力的水稻内生联合固氮细菌。鉴定结果表明它们分属于根癌土壤杆菌（ Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ （Ｓｍｉｔｈ ｅｔ Ｔｏｗｎｓｅｎｄ） Ｃｏｎｎ） ,放射土壤杆菌（ Ａ． ｒａｄｉｏｂａｃｔｅｒ （Ｂｅｉｊｅｒｉｎｃｋ ｅｔ ｖａｎ Ｄｅｌｄｅｎ） Ｃｏｎｎ） ;阴沟肠杆菌（ Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ｃｌｏａｃａｅ （Ｊｏｒｄａｎ） Ｈｏｒｍａｅｃｈｅ ｅｔ Ｅｄｗａｒｄｓ） ,成团肠杆菌（ Ｅ． ａｇｇｌｏｍｅｒａｎｓ （Ｂｅｉｊｅｒｉｎｃｋ） Ｅｗｉｎｇ ｅｔ Ｆｉｆｅ） ,坂崎肠杆菌（ Ｅ． ｓａｋａｚａｋｉｉ Ｆａｍｅｒ ｅｔ ａｌ．） ;皮氏产碱菌（ Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ ｐｉｅｃｈａｕｄｉｉ Ｋｉｒｅｄｊｉａｎ ｅｔ ａｌ．） ,反硝化产碱菌（ Ａ． ｄｅｎｉｔｒｉｆｉｃａｎｓ （Ｌｅｉｆｓｏｎ ｅｔ Ｈｕｇｈ） Ｒｕｇｅｒ ｅｔ Ｔａｎ） ;类产碱假单胞菌（ Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｓｅｕｄｏａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ Ｓｔａｎｉｅｒ） ,产碱假单胞菌（ Ｐ． ａｌｃａｌ     

大鼠鼻粘膜肽能神经末梢分布的研究

用免疫组化技术（ＡＢＣ法）系统研究了大鼠鼻粘膜９种肽能神经末梢分布的特征,这９种神经肽分别是Ｐ物质（ｓｕｂｓｔａｎｃｅＰ,ＳＰ）,神经激肽Ａ（ｎｅｕｒｏｋｉｎｉｎＡ,ＮＫＡ）,神经激肽Ｂ（ｎｅｕｒｏｋｉｎｉｎＢ,ＮＫＢ）,降钙素基因相关肽（ｃａｌｃｉｔｏｎｉｎｇｅｎｅ－ｒｅｌａｔｅｄｐｅｐｔｉｄｅ,ＣＧＲＰ）,血管活性肠多肽（ｖａｓｏａｃｔｉｖｅｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ,ＶＩＰ）,神经肽Ｙ（ｎｅｕｒｏｐｅｐｔｉｄｅＹ,ＮＰＹ）,甘丙肽（ｇａｌａｎｉｎ,ＧＡＬ）,生长抑素（ｓｏｍａｔｏｓｔａｔｉｎ,ＳＯＭ）及神经降压素（ｎｅｕｒｏｔｅｎｓｉｎ,ＮＴ）,同时选择与鼻粘膜神经肽（ＮＰ）作用密切相关的三叉神经节（ＴＧ）细胞进行上述ＮＰ的定位。用重组ＰＳＰ６５质粒（４００ＳＯＭｃＤＮＡ）制备ＳＯＭｍＲＮＡ单链探针,以地高辛精标记,在鼻粘膜及ＴＧ细胞进行ＳＯＭｍＲＮＡ的原位杂交组化研究。结果提示大鼠鼻粘膜有丰富的肽能神经末梢;ＴＧ细胞含有多种ＮＰ并且可以合成ＳＯＭ。该研究结果对重新认识鼻粘膜神经分布规律有一定意义。     

四种剧毒鹅膏菌肽类毒素的HPLC分离与鉴定

利用反相市郊和液相色谱（ＨＰＬＣ）、紫外吸收光谱、擀谱分析了灰花纹鹅膏Ａｍａｎｉｔａ ｕｌｉｇｉｎｅａ,白毒鹅膏Ａ．ｖｅｒｎａ,鳞柄白毒鹅膏Ａ．ｖｉｒｏｓａ,豹斑鹅膏Ａ．ｐａｎｔｈｅｒｉｎａ等四种剧毒鹅膏菌的肽类毒素,结果表明：Ａ．ｆｕｌｉｇｉｎｅａ、Ａ．ｖｅｒｎａ含有九种标样毒素中的七种,Ａ．ｖｉｒｏｓａ含有九种标样毒素中的七种,Ａ．ｖｉｒｏｓａ含有标样中的五种;Ａ．ｐａｎｔｈｅｒｉｎａ含有标样     

除草剂阿特拉津生物降解研究进展

阿特拉津（Ａｔｒａｚｉｎｅ）又称氯乙异丙嗪［２－氯－４（乙基）－６－（异丙氨基）－１,３,５－三嗪］,商品名莠去津,是一种广泛使用的三嗪类除草剂,用于阔叶杂草和禾草的防除,如玉米、高梁、甘蔗和库区杂草等。阿特拉津虽然是一种低毒除草剂,但由于它被微生物矿化的过程十分缓慢,在土壤中的半存留期长达４-５７周,所以在施用过这种除草剂的土壤中以及地下水和表面水中,其浓度远远超过３ｐｐｂ的最大允许值,造成对环境的污染［１］。阿特拉津在世界范围内已经使用了近４０年,其在环境中的扩散引起广泛重视,因此研究这种化合物的生物降解机理十分必要。虽然自１９８２年以来先后在诺卡氏菌属（Ｎｏｃａｒｄｉａ）［２,３］、红球菌属（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｕｓ）［４,５］、不动杆菌属（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ）［６］、土壤杆菌属（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）［７］和假单胞菌属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）［１,８,９］等多个细菌属中分离到降解阿特拉津的菌株,但直到９０年代中期,对这一生物降解过程所涉及到的基因、酶和中间代谢物仍知之甚少。自１９９５年Ｗａｃｋｅｔ实验室从施用过阿特拉津的土壤中分离到假单胞菌ＡＤＰ菌株以后［１］,阿特拉津的生物降解机理研究获得了迅速发展。此后,又从根瘤菌属（Ｒｈｉｚｏｂｉｕｍ）［１０］以及棍状杆菌属（Ｃｌａｖｉｂａｃｔｅｒ）、产碱杆菌属（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｓ）［１１］和Ｒａｌｓｔｏｎｉａ等多个细菌属中分离到降解阿特拉津的细菌。本文主要对假单胞菌ＡＤＰ菌株降解阿特拉津的酶学、遗传学和生物工程研究概况作简要介绍 。     

湖光微生物饲料添加剂研究Ⅰ．菌种来源及鉴定

湖光微生物饲料添加剂系采用我所从武汉东湖水体分离培养和筛选的光合细菌菌株制备的。我们对其中包含的光合细菌菌株分类鉴定结果表明,它们分别隶属于红假单胞菌属（Ｒｋｏｄｏｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）和红螺菌属（Ｒｈｏｄｏｓｐｉｒｌｌｕｍ）,主要为沼泽红假单胞菌（Ｒｈｏｄｏｐｓｅｕｄｏ－ｍｏｎａｓｐａｌｕｓｔｒｉｓｖａｎＮｉｅｌ）和深红红螺菌（ＲｈｏｄｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍｒｕｂｒｕｍＭｏｌｉｓｃｈ）。并就有关分类问题作了讨论。     

小麦胚乳细胞中肌动蛋白纤丝分布格局的荧光显微观察

以异硫氰四甲基罗丹明－鬼笔环肽为探针,结合电视显微镜术对呈现原生质胞间运动的小麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ａｅｓｔｉｖｕｍ Ｌ．）胚乳细胞胞质中肌动蛋白纤丝（ＡＦｓ）的存在与分布格局进行了观察与分析。结果表明,ＡＦｓ以多种形式在胚乳细胞内呈区域性分布：胞核为ＡＦｓ网络所包围,ＡＦｓ成束由核周向四处辐射直抵周质层,大量纤细ＡＦｓ在胞质皮层内呈无序的密集分布以及腹沟区细胞内ＡＦｓ梭状体的大量汇集。联系胞质组分在胞间运动中的动态与胞质纤索对ＣＢ处理的反应,讨论了ＡＦｓ的不同存在状态与胞质纤索的伸缩穿越和细胞基质的集流迁移这两种胞间运动方式的关系     

凝集素和毒素

总的说来,凝集素并不很毒,但是在凝集素和毒素之间却存在一些关系。ＥＢＡ类毒素可以分为两个主要部分。其中一个部分呈现糖结合活性,负责靶向。另一部分则具有不同的酶活性,决定了其毒性。从天花粉中分离得到凝集素分享了ＤＥＡ类毒素（例如蓖麻毒素）的一些特性。还有一些毒素可以在细胞膜上造成孔,形成离子通道。半夏凝集素似乎可归属于这类毒素。从蛇毒中分离得到了一此凝集素,它们和蛇毒中的其它一些成员在氨基酸序列上有     

随机扩增多态DNA（RAPD）标记用于丁香品种遗传分析及品种分类

采用随机扩增多态ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）标记分析了１５个丁香品种的ＤＮＡ扩增产物。研究选用了１６个随机引物,共扩增出９６条带,其中５５条带为可重复性条带,有价值条带大小多在５１７ｂｐ至１６３６ｂｐ之间。这些标记足以区分这些丁香品种。欧丁香（Ｓｙｒｉｎｇａｖｕｌｇａｒｉｓ）与Ｓ．×ｈｙａｃｉｎｔｈｉｆｌｏｒａ间的相似系数为６１．５％,欧丁香与Ｓ．×ｐｒｅｓｔｏｎｉａｅ间的相似系数为４７．２％,Ｓ．×ｈｙａｃｉｎｔｈｉｆｌｏｒａ与Ｓ．×ｐｒｅｓｔｏｎｉａｅ间的相似系数为４３．６％。结果表明,欧丁香与Ｓ．×ｈｙａｃｉｎｔｈｉｆｌｏｒａ亲缘关系最近。应用ＲＡＰＤ资料分析讨论了一些品种的起源。ＲＡＰＤ技术为丁香品种分类鉴定提供了可靠方法。     

阿特拉津降解菌株的分离和鉴定*

从农药厂废水中分离到６株能以除草剂阿特拉津为唯一氮源生长的细菌,即假单胞菌（Ｐｓｅｕ－ｄｏｍｏｎａｓ ｓｐｐ．）ＡＤ１、ＡＤ２和 ＡＤ６,土壤杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｓｐ．）ＡＤ４,黄单胞菌（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ ｓｐ．）ＡＤＳ,欧文氏菌（Ｅｒｗｉｎｉａ ｓｐ．）ＡＤ７。ＡＤ１菌株能使无机盐培养基中的 ０．３ｇ／Ｌ阿特拉津在７２ｈ内降解９９,９％。当以ＡＤ１、ＡＤ２、ＡＤ４、ＡＤ５、ＡＤ６和ＡＤ７菌株的总ＤＮＡ为模板进行ＰＣＲ扩增时,除Ａ     

家蚕FXPRL神经肽前体基因的体外转录

昆虫滞育激素（Ｄｉａｐａｕｓｅｈｏｒｍｏｎｅ：ＤＨ）、性信息素合成激活肽（Ｐｈｅｒｏｍｏｎｅｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓａｃｔｉｖａｔｉｎｇｎｅｕｒｏｐｅｐｔｉｄｅ：ＰＢＡＮ）是诱导昆虫滞育和性信息素（Ｓｅｘｐｈｅｒｏｍｏｎｅ）合成的两个重要神经肽［１...     

金铁锁根中的环肽成分

从云南民间重要的药用植物金铁锁（Ｐｓａｍｍｏｓｉｌｅｎｅ ｔｕｎｉｃｏｉｄｅｓ Ｗ．Ｃ．Ｗｕ ｅｔ Ｃ．Ｙ．Ｗｕ）的根中分离得到２个新的天然环二肽以及２个新的环八肽：金铁锁环肽Ａ和Ｂ（ｐｓａｍｍｏｓｉｌｅｎｉｎｓ Ａ ａｎｄ Ｂ）。它们的结构经光谱方法鉴定为ｃｙｃｌｏ（－Ａｌａ－Ａｌａ－）,ｃｙｃｌｏ（－Ｖａｌ－Ａｌａ－）,ｃｙｃｌｏ（－Ｐｒｏ１－Ｐｈｅ１－Ｐｒｏ２－Ｐｈｅ２－Ｐｈｅ３－Ａｌａ－ｐ     

假单胞菌胞外多糖发酵条件的研究

研究了假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐ．６）利用木糖产胞外多糖的发酵条件。实验表明ＫＨ２ＰＯ４,Ｏ２和高碳氮比对多糖合成有促进作用,在发酵后期补加木糖有助于多糖产量的提高     

四种剧毒鹅膏菌肽类毒素的HPLC分离与鉴定

利用反相高效液相色谱（ＨＰＬＣ）、紫外吸收光谱、质谱分析了灰花纹鹅膏Ａｍａｎｉｔａｆｕｌｉｇｉｎｅａ,白毒鹅膏Ａ．ｖｅｒｎａ,鳞柄白毒鹅膏Ａ．ｖｉｒｏｓａ,豹斑鹅膏Ａ．ｐａｎｔｈｅｒｉｎａ等四种剧毒鹅膏菌的肽类毒素,结果表明：Ａ．ｆｕｌｉｇｉｎｅａ、Ａ．ｖｅｒｎａ含有九种标样毒素中的七种。Ａ．ｖｉｒｏｓａ含有标样中的五种;Ａ．ｐａｎｔｈｅｒｉｎａ含有标样中的四种毒素。Ａ．ｆｕｌｉｇｉｎｅａ的毒素含量最高,其中最重要的ａ－ａｍａｎｉｔｉｎ含量高达６７８８．２(ｇ／ｇ干子实体,是Ａ．ｖｅｒｎａ的４倍,β－ａｍａｎｉｔｉｎ含量（２６３３．８μｇ／ｇ干子实体）是Ａｖｅｒｎａ的６倍。     

流加发酵法生产生物可降解多聚体

聚羟基烷酸（ＰＨＡｓ）是微生物细胞在其营养不平衡的生长条件下积累的一类胞内聚酯。由于ＰＨＡｓ具有生物可降解性和生物可相容性,因而被认为是替代化学合成塑料最具潜力的多聚体,已受到广泛的重视。目前ＰＨＡｓ中研究和应用的最多的是聚β－羟基丁酸（ＰＨＢ）和３－羟基丁酸与３－羟基戊酸的共聚物Ｐ（ＨＢ－ｃｏ－ＨＶ）。流加发酵技术是提高聚合物生产速率和改进其质量的关键,具体表现在采用Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐ．ｋ和Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓｅｕｔｒｏｐｈｕｓ,在适宜的流加培养条件下,可达到聚合物在细胞内的最大积累、控制共聚物适宜的聚合分率和得到平均分子量大且分布范围窄的产物。因此针对于某种特定的微生物,研究得到生物可降解多聚体的一套最佳流加培养策略至关重要。     

蝮蛇蛇毒影响大鼠胫神经对辣根过氧化酶（HRP）逆行运输的初步观察

蝮蛇蛇毒［ＡｇｋｉｓｔｒｏｄｏｍＨｏｌｙｓ（ｐａｌｌａｓ）Ｖｅｎｏｍ］（简称ＡＨＶ）影响大鼠胫神经对辣根过氧化酶（ＨＲＰ）逆行运输的实验,在不同组别的动物中所观察其结果如下：以左侧外侧腓肠和作注入点为实验例：Ａ组：ＡＨＶ和ＨＲＰ同时等量注入,在脊髓Ｌ４－６灰质前角和脊神经节内未见标记细胞;Ｂ组：注入ＡＨＶ两天后,再注入等量ＨＲＰ;Ｃ组和Ｄ组：在注入ＨＲＰ的同时,在胫神经干上浸滴ＡＨＶ和低１０倍的ＡＨＶ后,三组在相应的左侧脊髓灰质前角和脊神经内均见有标记细胞。按Ａ组方法,将ＡＨＶ用量递减７５ｕｌ、５０ｕｌ、３５ｕｌ注入后,标记细胞也逐渐显示。上述结果提示：ＡＨＶ（粗毒）对肌内神经末梢有抑制ＨＲＰ向胞体的运输作用,而在神经干处作用不显,此种抑制影响可因延时和浓度逆减而逐渐消减。并结合实验结果,对其机理进行了讨论。     

肾素血管紧张素及降钙基因相关肽在肾性高血压大鼠的动态变化

高血压是一种严重危害人类健康的常见病症。近年来,与血压调节有关的血管活性物质在高血压发病中的作用越来越受重视。本实验观察了不同时期肾性高血压（ｒｅｎａｌｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ,ＲＨ）大鼠主动脉、肾脏组织肾素血管紧张素系统（ＲＡＳ）以及主动脉、血浆降钙基因相关肽（ＣＧＲＰ）的动态变化,旨在探讨其在肾性高血压发生发展中的作用。１　材料与方法健康雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠（本校动物部提供）,体重１６０～１８０ｇ,随机分成两组：肾性高血压组（ＲＨ组）与假手术组（Ｃ组）。采用Ｇｏｌｄｂｌａｔｔ方法复制两肾—夹…