染料木黄酮对成骨细胞增殖分化的影响

目的：研究染料木黄酮对体外培养乳鼠颅盖骨成骨细胞增殖分化的影响。方法：取乳鼠颅盖骨,采用胶原-胰蛋白酶消化法,进行颅骨成骨细胞培养,取第二代成骨细胞,添加10^-5～10^-7mol／L染料木黄酮,在CO2孵箱中培养48h和72h后MTT比色法测定细胞增殖,培养72h采用^3H-TdR和^H-Pro掺入实验测定DNA和胶原合成。用试剂盒检测细胞裂解液碱性磷酸酶(ALP)活性。结果：染料木黄酮明显增加成骨细胞MTT的吸光度值、^3H-TdR和^3H-Pro的掺入,增加成骨细胞碱性磷酸酶活性。结论：染料木黄酮促进体外培养的乳鼠颅盖骨成骨细胞DNA和胶原的合成,促进增殖和分化。     

木黄酮对人催乳素瘤细胞增殖及其凋亡影响的实验研究

目的：观察木黄酮（genistein,GST)对培养的人垂体催乳素瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法：将CST、β-雌二醇（E2）作用于体外培养的人催乳素瘤细胞,测定MTT值及^3H-TdR掺入量,流式细胞仪测定细胞周期,并用TUNEL法观察细胞凋亡情况。结果：不同浓度的GST可抑制催乳素瘤细胞的增殖,并存在着剂量效应,10^-5mol.L^-1GST可使G1期的细胞比例从对照组的55.3%上升为90.3%;不同浓度的E2以剂量依赖方式刺激催乳素瘤细胞的增殖,并使G2期的细胞比例从对照组的15.6%上升为41.8%,GST和E2的共同作用仍可抑制催乳素瘤细胞的增殖,但抑制程度降低,不同浓度的GST均明显促进催乳素瘤细胞的凋亡,E2对GST的促凋亡作用无明显影响。结论：GST在体外能明显抑制培养人催乳素瘤细胞的增殖,并促进其凋亡,E2可部分拮抗GST的抑制增殖作用,但对其促凋亡作用无明显影响。     

乙酰胆碱对三种人垂体腺瘤细胞增殖及凋亡的影响

为了解乙酰胆碱（acetylcholine,ACh)在人垂体腺瘤发生、发展中的作用,本研究首先观察了人垂体腺瘤细胞内是否存在合成ACh必需的胆碱乙酰转移酶,并应用MTT实验、[^3H]TdR掺入实验、细胞周期分析和TUNEL法测定了ACh对体外培养的人垂体无功能瘤、催乳素瘤和生长激素瘤等三种瘤细胞增殖和凋亡的影响。结果发现：（1）三种垂体腺瘤细胞中均有胆碱酯酶的表达,但明显少于正常垂体;（2）ACh对三种类型的人垂体腺瘤细胞增殖代谢的影响相类似,不同浓度的ACh能明显抑制体外培养的三种人垂体腺瘤细胞的增殖,呈明显的剂量效应关系,同时ACh能减少垂体腺瘤细胞进入S、G2期的细胞比例,而使处于G1期的细胞比例增加;（3）ACh的这种作用可被阿托品阻断,但不受筒箭毒的影响;（4）ACh对体外培养的三种人垂体腺瘤细胞凋亡无明显影响。该结果提示,ACh可能以旁分泌或自分泌的方式作用于垂体前叶细胞,对垂体腺瘤细胞增殖分化有调控作用,而且是通过ACh M受体来实现的。     

奥帕曲拉对内皮素-1诱导的心脏成纤维细胞增殖的影响

目的：探讨奥帕曲拉（omapatrilat,OMA）对内皮素-1（ET-1）诱导的心脏成纤维细胞（CFs）增殖的干预作用及可能机制．方法：经差速贴壁法培养的新生大鼠CFs,随机分为7组：对照组,ET-1组,OMA组,ET-1＋OMA10^-9mol／L组,ET-1＋OMA10^-8mol／L,ET-1＋OMA10^-7mol／L组．ET-1＋OMA10^-6mol／L组.采用四氮唑盐（MTT）比色法测定CFs数目,流式细胞分析仪（FCM）检测CFs细胞周期,液体闪烁计数仪测定CFs^3H-脯氨酸掺入率,硝酸还原酶法测定细胞培养上清液中NO含量：结果：与对照组相比,10^-7mol／LET-1能显著增加CFs的吸光度A190值及[^3H]-Pro掺入率,降低CFs生成NO的量（均P〈0．01）,10^-9-10^-6mol／L OMA呈浓度依赖性的降低ET-1诱导的A190值和[^3H]—Pro掺入率升高（均P〈0．01）,促进CFsNO的生成（均P〈0．05）;细胞周期分析表明ET—1能显著提高S期细胞百分率（P〈0．01）,10^-7mol／LOMA抑制ET-1诱导S期细胞百分率上升（P〈0．01）.结论：OMA对ET-1诱导的CFs增殖及胶原合成有抑制作用,该作用可能和NO生成有关.     

雌激素受体在人舌鳞癌中的表达及β-雌二醇对其增殖的影响

目的：观察雌激素受体（ER）在人舌鳞癌Tca8113细胞系细胞上的表达,研究β－雌二醇（estrabiol,E2)对培养的舌癌细胞增殖的影响。方法：用免疫细胞化学方法和RT－PCR方法检测雌激素受体在人舌鳞癌细胞上的表达,将β－雌二醇（β－E2）作用于体外培养的人舌鳞癌细胞,测定^3H-TdR掺入量,并用流式细胞仪测定细胞周期。结果：经免疫细胞化学和RT－PCR方法可检测到ER－α和ER－β在人舌鳞癌细胞上均有表达,其中ER－β表哒相对较弱。不同浓度的β－E2可增加^3H-TdR掺入量,并存在着剂量效应。106-6mol/L的β－E2能使人舌鳞癌细胞处于G1期的细胞比例从对照组的76．5％下降至62．3％,而处于S期和G2期的细胞比例从23．5％上升至37．7％,细胞的DNA合成增加,促进细胞的增殖。β－E2对舌癌细胞的促增殖作用可被Tamoxifen阻断。结论：在人舌鳞癌细胞上有雌激素受体的表达,且β－E2在体外能明显促进培养的人舌鳞癌细胞的增殖。     

胍基丁胺对血清诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的：观察胍基丁胺对血清诱导大鼠肺动脉血管平滑肌细胞（PASMCs）增殖的影响。方法：采用组织块贴壁法原代培养大鼠PASMCs,取对数生长期PASMCs分对照组和胍基丁胺组,比色法测定细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）活力。液闪计数仪测定^3H-TdR掺入量,流式细胞仪测定细胞周期,图像分析法测定增殖细胞核原含量（PCNA）作为细胞增殖的指标。结果：胍基丁胺对PASMCs培养液中LDH活力无明显影响;胍基丁胺可显著减少血清诱导增殖PASMCs的^3H-TdR掺入量和PCNA的含量（P〈0．01）,使G0／G1期细胞比例显著增加,G2／M期细胞比例显著减少（P〈0．01）。随着胍基丁胺浓度的增加,PASMCs ^3H—TdR掺入量也相应显著减少（P〈0.01）。结论：胍基丁胺对PASMCs不产生明显的细胞毒性作用;但可抑制血清培养大鼠PASMCs的增殖,这种抑制作用呈剂量依赖性。     

木黄酮对人催乳素瘤细胞增殖及其凋亡影响的实验研究

目的观察木黄酮(genistein,GST)对培养的人垂体催乳素瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法将GST、β-雌二醇(E2)作用于体外培养的人催乳素瘤细胞,测定MTT值及3H-TdR掺入量,流式细胞仪测定细胞周期,并用TUNEL法观察细胞凋亡情况。结果不同浓度的GST可抑制催乳素瘤细胞的增殖,并存在着剂量效应,10-5mol*L-1GST可使G1期的细胞比例从对照组的55.3%上升为90.3%;不同浓度的E2以剂量依赖方式刺激催乳素瘤细胞的增殖,并使G2期的细胞比例从对照组的15.6%上升为41.8%。GST和E2的共同作用仍可抑制催乳素瘤细胞的增殖,但抑制程度降低。不同浓度的GST均明显促进催乳素瘤细胞的凋亡,E2对GST的促凋亡作用无明显影响。结论GST在体外能明显抑制培养人催乳素瘤细胞的增殖,并促进其凋亡。E2可部分拮抗GST的抑制增殖作用,但对其促凋亡作用无明显影响。     

ACh对人垂体腺瘤细胞内蛋白激酶C、胞内游离钙及cAMP/cGMP的影响

我们曾发现ACh可明显地抑制垂体腺瘤细胞的增殖代谢,为深入探讨ACh抑制垂体腺瘤细胞增殖作用的机制,观察了ACh作用后垂体腺瘤细胞内蛋白激酶C(PKC)、[Ca^2 ]i及cAMP／cGMP的变化。结果发现：(1)与空白处理组相比,使用PKC的激动剂PMA处理培养的人垂体腺瘤细胞时可使胞浆、胞膜和细胞总PKC活性浓度均升高,但ACh(10μmol/L)作用15min后,胞浆、胞膜和细胞总PKC活性均下降,且此作用可被阿托品阻断;(2)ACh(10μmol/L)作用于单个人垂体腺瘤细胞后,立即使垂体腺瘤细胞[Ca^2 ]i相对水平降低,但此作用可被阿托品阻断;(3)ACh作用于人垂体腺瘤细胞15min后,胞内cAMP水平均明显升高,而cGMP没有改变。该结果为探讨ACh抑制垂体腺瘤细胞增殖的分子机制提供了重要线索,同时提示,ACh对垂体瘤细胞增殖分化的调控作用是细胞内多信息系统相互整合的结果。     

血管钠肽抑制低氧刺激心脏成纤维细胞增殖的机制研究

目的：研究血管钠肽（VNP）抑制低氧刺激的心脏成纤维细胞增殖的机制。方法：发离、培养乳鼠心脏成纤维细胞,随机分为四组：对照组、低氧组、低氧＋VNP组和低氧＋8－Bromo-cGMP组。以MTT法观察各组细胞的生长情况,分别采用放射免疫和免疫组化的方法研究了VNP对细胞内cGMP水平和增殖细胞核抗原（PCNA）表达的影响。结果：低氧24h可以使培养的乳鼠心脏成纤维细胞MTT A490nm值显著升高（P＜0．05vs对照组）,VNP（10^-7mol/L和8－Bromo-cGMP(10^-3mol/L)均可以显著降低低氧刺激的心脏成纤维细胞MTT A490nm值（P＜0．05vs低氧组）;对照组和低氧组细胞内cGMP水平无显著差异,而VNP（10^-7mol/L）能升高细胞内cGMP水平（P＜0．05vs对照组、低氧组）;低氧组PCNA的表达显著强于对照组（P＜0．05vs对照组）,VNP（10^-7mol/L可以使低氧刺激的心脏成纤维细胞PCNA表达减弱（P＜0．05vs低氧组）。结论：VNP抑制低氧刺激的心脏成纤维细胞增殖与升高细胞内cGMP水平、减弱PCNA的表达有关。     

缓激肽B1受体在卡托普利抑制心脏成纤维细胞增殖中的作用

目的：探讨缓激肽（BK）B1受体在ACEI类药物卡托普利（captopril）抑制血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的新生大鼠心脏成纤维细胞（CR）增殖中的作用及其可能机制。方法：经差速贴壁法培养新生大鼠CFs,随机给予AngⅡ、captopfil、B2受体阻断剂icatibant和BJ受体阻断剂des-Arg^10,Leu^9-kallidin进行干预。采用四氮唑盐（MTT）比色法测细胞数目,流式细胞仪技术（FCM）检测细胞周期,硝酸还原酶法和放射免疫分析技术分别测定培养CR细胞上清液中NO含量和细胞内cGMP水平。结果：与空白对照组比较,AngⅡ10^-7mol／L孵育细胞48h后可显著升高CRS期细胞百分率和MTT比色法测定的CFs吸光度（A490nm）值（P〈0．01）;Captopril 10^-5mol／L可明显降低AngⅡ刺激的CFsS期细胞百分率和A490nm值升高（均P〈0．05）,显著促进CFsNO和cGMP生成,该作用可被icatibant（10^-6mol／L）部分阻断,同时阻断B1和B2受体可进一步减弱captopril的作用。结论：Captopril抑制AngⅡ诱导的CFs增殖作用部分是由BK经其B2受体介导的;同时阻断BK B1和B2受体可进一步减弱captopril抗CR增殖效应,B1受体在B2受体阻断情况下可能起部分代偿作用,抑制CFs生长,该作用与NO、cGMP生成有关。     

六种藓类植物茎的比较解剖学研究

通过对6种藓类植物,即褶叶青藓(Brachythecium salebrosum(Web.et Mohr.)B.S.G.)、湿地匐灯藓(Plagiomnium acutum(Lindb.)Kop.)、侧枝匐灯藓(Plagiomnium maximoviczii(Lindb.)Kop.)、大凤尾藓(Fissidensnobilis Griff.)、大羽藓(Thuidium cymbifolium(Doz.et Molk.)B.S.G.)和大灰藓(Hypnum plumaeforme Wils.)嫩茎和老茎的石蜡切片和显微观察发现,同一藓类植株的嫩茎和老茎,茎结构稳定,不同种藓类植物茎横切面具有不同特征.植物体茎横切面形状、表层细胞的层数、细胞大小和细胞壁厚薄、皮层细胞大小和形状、中轴的有无以及比例等特征可以作为藓类植物的分科分类依据之一.     

真菌类遗传学分析的知识结构教学

本文以认知结构理论为指导,讨论了真菌类遗传分析与高等动植物遗传分析的内在联系,认为利用这种内在联系进行教学可收到好的效果并说明了作者的具体教学过程。 Abstract:In the paper, the relationship between genetic analysis of Fungi and genetic analysis of high animal and plant was discussed.A good results were obtained when we adopted this method in the teaching.     

医疗机构合理用药评价模型的构建研究

目的 针对医疗机构的合理用药水平进行评价研究。方法 根据医疗机构合理用药的具体要求,构建医疗机构合理用药评价指标体系,采用基于模糊群决策的方法和多指标评价分析法构建医疗机构合理用药评价模型。结果 构建了基于模糊群决策的医疗机构合理用药评价模型,并通过实例分析证明了评价模型的可行性。结论 建立的基于模糊群决策的医疗机构合理用药评价模型能够对医疗机构的合理用药水平进行科学评价,为提高医疗机构合理用药水平奠定基础。     

棉铃虫钙粘蛋白N端多肽多克隆抗体制备及对Bt抗性的初步检测

用重组表达的棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)中肠钙粘蛋白N端多肽片段制备兔多克隆抗体,并利用其对Bt抗性进行鉴定。通过RT-PCR方法对棉铃虫中肠钙粘蛋白N端多肽的基因片段Cad285进行PCR扩增,将其克隆到pET-30a原核表达载体中,在大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导表达,得到35ku的重组融和蛋白,融合表达的包涵体经过变性、Ni-NTA柱亲和纯化、复性等方法处理包涵体,获得可溶性纯化蛋白,用纯化后蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体,ELISA检测其效价高于1∶16000;利用最终获得的多克隆抗体对室内纯合Bt抗/感品系的棉铃虫中肠钙粘蛋白进行Western blot分析,结果显示敏感和抗性品系之间有明显差异,表明其能够应用对Bt抗性进行初步检测。     

Cause of Senescence of Nine Sorts of Flowers

The levels of endogenous phytohormones and respiratory rate in nine sorts of flowers such as Cymbidium faberi Rolfe, Nopalxochia ackermannii Kunth and others were investigated both at full bloom and senescence and meanwhile the effect of exogenous phytohormones on prolonging the blossoms and promoting ethylene production were tested. There is a high content of endogenous ethylene in all the long-lived flowere, about 3–16 folds higer than the short-lived ones. There is a high level of ABA at full blooming flowers of short-lived flowers, in which there is no or only some cytokinins in it, but the ratio of CTK (6BA+zeatin)/ABA is smaller(l.7). The endogenous ABA reached a much higher level at senescence in all nine sorts of flowers, so it is reasonable to consider that it is ABA which plays an important role of regulation in controlling flower's senescence. There is a much higher level of GA3 and zeatin in the long-lived flowers which is not demonstrated in the shortlived ones. The respiratory rate is one of the factors controtling the longevity of flowers, but it does not play a decided role. Application of 6BA and zeatin prolongs distinctly orchid’s longevity, however exogenous IAA through the promotive action on ethylene production, evidently extends the longevity of the flowers of the Nopalxochia ackermannii Kunth.     

青蒿素生物合成机理研究现状

本文总结了目前有关青蒿素生物合成机理方面的研究,主要包括青蒿素生物合成中生理因子的影响,青蒿素生物合成中间体及前体,青蒿素生物合成细胞定位等。指出了存在的一些问题及今后的研究发展前景。     

龙胆科药用植物化学成分的研究现状

龙胆科植物在我国的分布范围很广,且多数为药用植物,其多数种属的药用植物,至今其化学成分尚未被系统研究。综述了目前龙胆科药用植物的化学成分的研究现状及一般提取方法,对近年来发现的环烯醚萜及裂环烯醚萜类化合物进行了总结,为本科药用植物的更深入研究提供了参考。