弓状核神经内分泌细胞中核仁样小体的形态学研究

本文对大鼠弓状核神经细胞中的核仁样小体(Nucleolus-Like Body,NLB)进行了电镜观察。结果表明:各NLB的体积和组织致密度差异较大,同时与细胞内的游离核蛋白体及粗面内质网的含量和排列方式有密切的关系。在体积较小的NLB中,颗粒物质排列稀疏,游离核蛋白体散在颗粒物质之间。这种NLB常被长链状池腔扩张的粗面内质网多层环状包绕。体积稍大的NLB,颗粒物质排列均匀,游离核蛋白体分布于颗粒物质的周边,常被粗面内质网单层半环状包绕或与粗面内质网部分接触。有时在NLB的周边部可见到分泌颗粒。体积最大的NLB,颗粒物质排列致密,与周围结构分界清晰,中央常有一个较大的圆形亮区。与游离核蛋白体和粗面内质网没有任何联系,它独自存在于细胞质中。     

核糖核蛋白体的结构与功能

核糖核蛋白体(Ribosome,亦称核蛋白体)是一种重要的细胞器。它是细胞内蛋白质生物合成的基地。无论原核细胞(细菌)或真核细胞(动植物),凡有蛋白质合成,都一定有核糖核蛋白体的参加。大肠杆菌无细胞制剂(包括核糖核蛋白体)是研究蛋白质生物合成的一个很理想的体系。它在阐明遗传密码子的编排工作中,发挥了非常重要的作用,对于分子生物学的发展有重大的贡献。鉴于上述原因,二十多年来,生物化学家与大肠杆菌核糖核蛋白体交往     

丁型肝炎病毒的分子生物学研究进展

丁型肝炎病毒(Hepatitis delta virus,HDV)是一种缺陷病毒,必须在嗜肝DNA病毒的辅助下才能复制并组装成有感染性的病毒颗粒。其毒粒为直径35～37nm,大小介于HBV的Dane颗粒和HBsAg颗粒之间的球形颗粒。病毒颗粒外层由脂双层和HBsAg组成,内包含由HDAg和HDV RNA基因组结合组成的核蛋白体。HDV是目前所知唯一具有     

α-突触核蛋白的结构特点及其功能

神经元胞浆内嗜酸性包涵体——Lewy体的出现是帕金森病(Parkinson’s disease,PD)的典型病理学特征,而α-突触核蛋白(α-synuclein)是纤维样Lewy体的主要成分。随着研究深入,越来越多的证据表明:α-突触核蛋白纤维性聚集体的产生是PD发病的一个关键环节。病理条件下,由于α-突触核蛋白的结构改变,导致错误折叠,继而纤维化,最终形成纤维性聚集体,这一过程在PD研究中日趋展现出其重要性。α-突触核蛋白结构中,N端、C端、NAC(non-amyloid component)区等区域具有各自特定的结构及功能,在其聚集体产生过程中各司其职。本文就近年来对α-突触核蛋白分子结构及其相应功能的研究进行综述,希望通过深入的综合分析,为寻找α-突触核蛋白结构中潜在的疾病治疗靶标提供理论依据。     

正常肝信息核糖核酸的翻译和对离体肝癌细胞的逆转分化作用

正常肝信息核糖核酸是从肝聚核蛋白体抽提RNA,通过寡聚(dT)纤维素亲和层析制备。分离的正常肝mRNA在麦胚蛋白合成系统和爪蟾卵翻译系统检定,能够翻译白蛋白,由此证明是有生物学活性的。用正常肝mRNA在离体情况下对肝癌细胞进行逆转分化研究,发现:(1)小鼠正常肝mRNA能抑制小鼠腹水肝癌细胞核酸和蛋白质的合成;初步见到人的正常肝mRNA能轻度抑制人体肝癌细胞(BEL-7404)的生长。(2)相应的正常肝mRNA分别在小鼠腹水肝癌和人肝癌细胞诱导了白蛋白合成;在人体肝癌细胞内核蛋白体聚成聚核蛋白体。(3)人体肝癌细胞受刀豆凝集素(Con A)凝集的能力减弱,这种凝集特性的改变,可以维持至3次细胞传代。这些实验结果显示肝癌细胞并非固定不可改变的,在正常肝mRNA作用下能够向正常逆转分化;讨论了mRNA转化机理,认为可能是通过肝mRNA翻译的蛋白质或mRNA本身直接调节基因转录来实现的。     

反转录病毒MSCV介导汉坦病毒核蛋白基因在NIH3T3细胞中整合和表达

汉坦病毒是引起肾综合征出血热(HFRS)和汉坦病毒型肺炎综合征(HPS)的主要病原体.由S基因编码的核蛋白(NP)主要与机体的细胞免疫有关,并调节病毒的复制及诱导细胞程序性死亡.构建了汉坦病毒Z10株核蛋白cDNA与含有pac基因的反转录病毒鼠干细胞病毒(MSCV)重组体MSCV-FlagNP,通过磷酸钙转录法导入产病毒的包装细胞系BOSC23中,产生完整的重组MSCV-FlagNP病毒.然后以重组病毒感染NIH 3T3细胞,利用Puromycin的选择特性(pac基因)对感染细胞进行连续压力筛选,获得了转核蛋白抗性细胞.利用Southern blot和PCR方法分别对核蛋白基因在抗性细胞染色体整合情况及其完整性进行了鉴定.并且用Western blot在抗性细胞中可检测到核蛋白的表达.进一步以Flag单克隆抗体介导的免疫荧光染色联合共聚焦激光扫描荧光显微镜,分析了内源性Flag融合核蛋白在抗性细胞内分布,发现核蛋白主要分布于胞浆及胞核周围区,并且部分核蛋白可聚集形成胞浆包涵体.转核蛋白基因细胞模型的建立,对进一步研究汉坦病毒核蛋白功能以及病毒复制机制有重要意义.     

snoRNP的生物发生

核仁小核糖核蛋白体颗粒(small nucleolar ribonucleoproteins partical,snoRNP)是一种定位于核仁的复合物,它由一系列核仁小RNA(small nucleolar RNA,snoRNA)和核心蛋白质结合而成。这些snoRNP指导核糖体RNA(rRNA)前体的加工修饰,在核糖体的生物发生中起着重要的作用。研究显示大多数snoRNP加工和组装的早期阶段发生在核浆,在Cajal小体(Cajal body,CB)中组装成熟之后,在PHAX、p50、p55、SMN和Nopp140等蛋白质的帮助下穿越各种不同的核间隔转运至核仁,并在核仁中发挥功能。本文对snoRNP的生物发生过程作一综述。     

严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒核蛋白的鉴定与分析

利用蛋白质组学技术,对纯化的严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒颗粒所含核蛋白进行初步分离与鉴定。质谱分析结果最终表明,SARS冠状病毒核蛋白的分子量位于47kD与52kD之间,所获得的SARS冠状病毒核蛋白的质谱分析数据覆盖了所预测病毒核蛋白氨基酸序列的87％,且符合率为100％。从而首次从蛋白质水平对SARS冠状病毒核蛋白的氨基酸序列进行了证实。     

α-突触核蛋白的细胞毒性作用

神经系统变性疾病的一个重要特征就是α-突触核蛋白功能障碍,形成含有α-突触核蛋白的胞质包含体。虽然对α-突触核蛋白损伤神经系统的作用做了大量的研究,但其神经毒性机制尚不清楚。该文从α-突触核蛋白的结构、生理功能及其对泛素-蛋白酶体、线粒体、内质网及高尔基体等的毒性作用方面介绍近年来对其的研究进展。     

水稻条纹叶枯病的研究进展

水稻条纹叶枯病对水稻生产造成了广泛而严重的危害。水稻条纹叶枯病毒（RSV）是致病的元凶,而灰飞虱是传播者。RSV在植物体内能形成核糖核蛋白体（RNP）及内含体,但不形成病毒颗粒。每个RNP只含一种RNA。RSV的全基因组由4条单链RNA组成,编码7种蛋白,它们的具体功能正被逐渐阐明。目前对于RSV的致病机制和植物的抗病机制的研究也取得了进展。     

包含体——流行性出血热病毒形态学的重要特征

用普通电镜和免疫酶电镜方法观察了流行性出血热病毒A9株和R22株感染的VeroE-6细胞中的病毒包含体,发现这些包含体具有以下三种基本形态:1.丝状或丝状颗粒包含体,2.松散颗粒包含体,3.致密包含体。在免疫酶法中,包含体均呈特异性酶染色阳性反应。描述和讨论了包含体与细胞及病毒发育成熟的关系。     

快中子照射诱发人淋巴细胞微核的剂量效应以及微核和染色体畸变的关系

中子主要由核反应产生,用放射源和一定 的靶物质,借助于（a"n）或（Y "n）反应,就能 射出中子。加速器中用高能粒子打击靶或反应 堆中的裂变过程都能产生中子流。尤其是近代 医学上中子治癌机的应用和核武器的发展,人 们接触中子的机会就逐渐增多。如果这些场合 安全防护或操作程序出了故障,就有产生过量 照射的危险。所以研究反映中子损伤效应的生 物学指标是必要的。中子以穿透力强为其特 点,它对外周血液尤其是淋巴细胞的辐射效应 是显著的。我们过去的工作已证明,人体接受 分次局部61C0照射后,用直接浓缩法发现外 周血淋巴细胞微核率增高和染色体畸变率有一 定相关^[1]。用X线照射诱发人淋巴细胞微核, 其剂量效应亦呈线性关系^[2]。为评价微核测定 在辐射损伤中的意义和提供实验依据,本实验 采用氖一氖中子发生器照射健康人离体血1),经 过培养诱发淋巴细胞微核,观察剂量效应以及 微核和染色体畸变之间的关系。     

促红细胞生成素的分泌过程三维模式图

DNA经转录得到前体 m RNA,进一步剪切加工修饰得到成熟的 m RNA。核糖核蛋白体与 m RNA串连成多聚核糖核蛋白体 ,并通过信号识别颗粒及其受体结合于粗面内质网膜上 ,新合成的蛋白质进入内质网腔 ,经过加工修饰 ,以转运小泡的形式 ,运输到高尔基复合体。高尔基复合体由大囊泡、小囊泡和扁平囊组成 ,呈弯曲圆盘状。凸面称形成面或顺面 ,朝向胞核 ,凹面称分泌面或反面 ,朝向细胞表面 ,小囊泡多位于顺面 ,由粗面内质网出芽而来 ,运送新合成的蛋白质到扁平囊中 ,并不断补充扁平囊的膜结构。蛋白质在囊腔中经进一步加工修饰 ,由扁平囊两端和…     

用分光光度法对纯净颗粒体液浓度的测量

警纹鸣夜蛾颗粒体病毒(简称AeGV)、小菜粉蝶颗粒体病毒(PrGV)、茶蚕颗粒体病毒(AbGV)和分月扇舟蛾颗粒体病毒(CasGV)是在形态结构及生物学特性上有显著差异的颗粒体病毒。本文以这四种颗粒体病毒为代表,用统计学方法分析纯净的颗粒体悬浮液在270nm波长处的浓度(C,;μ/ml)与吸光度(A270nm)的,相关性,探讨分光光度法测量颗粒体悬浮液浓度的共用方程式,所有结论均以95％的概率水平为判断依据。本研究证明:颗粒体浓度在10—50/μg/ml范围内时,不同种的颗粒体浓度-吸光度定量关系可以用同一方程式表达。因此,可将该经验式用于快速测定纯净颗粒体悬浮液的浓度,该公式写作为: A270nm=0.018 0.0109C μg/ml (0.1≤A≤0.6)     

黑胸大蠊（Periplaneta fuliginosa）病毒的分离及某些特性

从黑胸大蠊(Periplaneta fuliginosa)自然罹病的虫尸中分离得到一株非包涵体病毒。将病毒悬液均匀拌入无菌饲料并供食154～169日龄黑胸大蠊健康若虫时,能使其感染、发病,死亡率可达98％以上。在电子显微镜下观察时,病毒为球形二十面体颗粒,直径约23nm。病毒悬液具有典型核蛋白紫外吸收光谱。病毒用DNase和RNase处理并经吖啶橙染色、二苯胺和苔黑酚试验及甲醛反应证明:该病毒含有单链DNA。以上特性与细小病毒科的特征有点类似。     

信使核糖核蛋白通过核孔的运输

信使核糖核蛋白通过核孔的运输韩志勇朱睦元（杭州大学生命科学学院,杭州３１００１２）关键词信使核糖核蛋白（ｍＲＮＰ）核孔复合体巴尔尼氏环图１ＢＲｍＲＮＰ颗粒的装配和运输（上）包含五个外显子的ＢＲ基因;（中）ＢＲ颗粒在基因水平的装配（左）、展开和穿过ＮＰ...     

编辑机器:锥虫RNA编辑复合体(译文)

包括底物前体mRNA和指导RNA（gRNA)在内的核糖核蛋白复合体的装配和解装配是RNA编辑的起始和增殖的关键。本文讨论了这些复合体的组成,以及它们的装配是如何调控RNA编辑的。     

核不均一性核糖核蛋白在RNA加工过程中的作用

在真核细胞中,初始转录产物（前体mRNA）经过一系列复杂的转录后加工过程形成成熟的mRNA.在这一过程中,大量蛋白质和加工因子有序汇集在核糖核蛋白复合体中并参与对前体RNA的加工过程. 该复合体中的蛋白质部分主要由一类约20种称为核不均一性核糖核蛋白的多肽分子构成.除了早期了解的一些结构性功能外,近来已有许多证据显示这些蛋白质在细胞中RNA的代谢及其他活动方面具有更加广泛和积极的作用.     

谈谈放射遗传学

什么是放射遗传学从实验得知,辐射特别是电离辐射对于生物体的生长和发育有很大的影响。什么是电离辐射?电离辐射一般是穿透性很强、能够引起被穿过物质离子化的射线。这包括宇宙线、x射线、γ射线、α射线、β射线、中子等等。这些射线有的是波长很短的电磁波,例如x射线和γ射线等;有的是物质小颗粒,例如β射线、中子等。放射性同位素     

抗汉坦病毒核蛋白细胞内抗体抗病毒作用的研究

本文报道在内质网和细胞浆内稳定表达抗汉坦病毒核蛋白细胞内抗体,研究抗汉坦病毒核蛋白细胞内抗体抗病毒作用及其抗病毒作用机理。在获得稳定表达抗汉坦病毒核蛋白细胞内抗体的细胞系的基础上,用MTT法检测细胞内表达抗汉坦病毒单链抗体对细胞增殖的影响,证实细胞内抗体的表达不会影响到细胞的生长。不同时间收集病毒感染毒后细胞培养培养上清和细胞裂解物,用ELISA方法检测细胞内外病毒结构蛋白含量的变化,结果表明定位于细胞内质肉和细胞浆内的抗汉坦病毒核蛋白细胞内抗体均能不同程度降低感染细胞上清中的核蛋白含量,但是不能或轻微抑制细胞内汉坦病毒核蛋白的合成。利用病毒微量滴定免疫荧光方法,对细胞内抗体与病毒的增殖关系进行了研究,证实无论在内质网还是在胞质,抗核蛋白细胞内抗体都能够抑制病毒的增殖,具有抗病毒活性。抗汉坦病毒核蛋白细胞内抗体不能抑制病毒结构蛋白的合成,其抗病毒效果是通过抑制病毒的包装而实现。