学习"三点测验"应注意的几个问题

三点测验是普通遗传学的学习难点,正确理解这部分内容中出现的新概念是克服难点的关键。下面就相关问题进行讨论。１　区别交换率与重组率概念重组率：杂合体在形成配子时,非等位基因之间重新组合产生重组合类型配子的频率,等于杂合体测交后代中重组合类型个体占测交后代总数的百分率。在连锁遗传中,重组率是指位于同源染色体上的非等位基因之间发生重新组合产生的重组合类型配子的百分率。交换率：同源非姊妹染色单体上两个基因之间发生交换的频率。在连锁遗传中,同源非姊妹染色单体之间对等片段在减数分裂前期Ⅰ的交换,使其所携带的…     

重组值和交换值

在遗传学教学中,学生对重组值（recombi－natlonfraction）和交换值（crossing－overvalue）的概念往往搞不清楚,在现行教科书中一般将重组值或重组率也称作交换值或交换率。实际上,这是两个不同的概念。同一染色体上非等位基因之间的重组是非等位基因间交换的结果,但是交换事件并不一定伴随着重组事件的发生,因为非等位基因间的偶数次的交换并不能导致重组,其次,如果交换的片段是相同的话也不会导致重组。重组依赖于交换事件及交换片段的差异。重组值是重组型配子占产生的总配子数的百分比。交换值是两连锁基因间的交换率可从复交换…     

交换值、重组值的概念及其相互关系

交换值和重组值是经典遗传学的两个概念。纵观中外遗传学教科书,大部分是将这两个概念混为一谈,少数教科书指出了它们的区别,但只是一笔带过〔７〕,刘祖洞先生论述过这个问题〔３,４〕,可总觉得没有把它说清楚。考虑到连锁和交换是遗传学教学的重点之一,在此,笔者...     

利用荧光标记高通量鉴定减数分裂重组抑制突变体

正向遗传学突变体筛选被广泛用于揭示减数分裂中涉及的遗传基因, 如调控减数分裂II型交叉形成途径的重组抑制基因。该研究利用拟南芥(Arabidopsis thaliana)花粉荧光标记系进行EMS突变体的正向遗传学筛选, 鉴定拟南芥野生型Col遗传背景下的重组抑制突变体, 共获得18个重组率显著提高3倍以上的重组抑制突变体, 其中包括显性和隐性遗传突变。研究表明, 基于荧光标记高通量鉴定重组抑制突变体是可行的, 可为植物减数分裂重组调控分子机制研究提供新方法和突变材料。     

利用荧光标记高通量鉴定减数分裂重组抑制突变体

正向遗传学突变体筛选被广泛用于揭示减数分裂中涉及的遗传基因, 如调控减数分裂II型交叉形成途径的重组抑制基因。该研究利用拟南芥(Arabidopsis thaliana)花粉荧光标记系进行EMS突变体的正向遗传学筛选, 鉴定拟南芥野生型Col遗传背景下的重组抑制突变体, 共获得18个重组率显著提高3倍以上的重组抑制突变体, 其中包括显性和隐性遗传突变。研究表明, 基于荧光标记高通量鉴定重组抑制突变体是可行的, 可为植物减数分裂重组调控分子机制研究提供新方法和突变材料。     

对遗传学教学中有关减数分裂前期Ⅰ发生的配对、联会和重组事件关系的思考

减数分裂时期染色体行为作为遗传学三大遗传规律（基因分离规律、基因自由组合定律及连锁遗传规律）的细胞学基础,是遗传学教学中的重点,也是生命科学前沿研究的焦点。快速发展的分子生物学为减数分裂的分子机制提供了更深的认识和理解,并出现一些与教科书内容不一致的情况。本文对减数分裂研究前沿进行简单综述,重点阐述对减数分裂时期配对、联会和重组关系的新认识,以期将前沿研究融入遗传学教学之中,从而激发学生的学习兴趣,提高授课效果。     

工业微生物代谢途径调控的基因敲除策略

基因敲除技术是一项重要的分子生物学技术,在工业微生物代谢工程中具有广泛应用。以下从基因敲除技术的遗传重组原理出发,总结了基因敲除策略的类型、特征和应用,重点介绍了采用线性双链DNA的λRed同源重组系统、使用环状质粒载体介导的单交换或双交换同源重组策略以及采用转座酶介导的转座重组等几种主要的基因敲除方法,进一步展望了基因敲除技术的发展前沿和应用前景。     

关于遗传学中有丝分裂重组的理解

有丝分裂重组是遗传学的重要内容,但当前遗传学教学中对有丝分裂重组部分的课堂教学较少。从有丝分裂重组的发现、真菌系统中的有丝分裂重组、有丝分裂重组作图等几个方面较为详细的介绍了有丝分裂重组现象,希望为教师课堂教学提供参考,并有助于学生对基因重组内容的全面认识。     

确定遗传图距时重组值的校正机理分析

论述了确定遗传图距时重组值的校正机理.探讨了三点测验中计算基因间的交换值有时用1倍、有时用2倍双交换重组值校正的原因;理论上"四点测验"中交换值的计算规律更好地揭示了校正值"倍数"的本质是形成该重组配子时在所计算的2个基因间相关交换所涉及的交换次数;并探讨了重组值较大时交换值往往低于重组值,需要作图函数校正的原因.     

应用Red重组工程技术建立asd基因缺失的大肠杆菌DH108菌株

目的：建立一株新遗传表型的大肠杆菌DH10BAasd菌株。方法：应用pKD46介导的重组系统、kan／kil选择反选择系统、双链线性DNA重组技术和重叠引物介导的DNA重组技术,在菌株DH10B体内,对其染色体上的asd基因进行了基因敲除。结果：建立了一株二氨基庚二酸（DAP）营养缺陷型重组大肠杆菌DH10BAasd。结论：为进一步建立以大肠杆菌DH10B为载体的DNA疫苗或基因治疗载体奠定了基础。     

同源重组法构建多功能农药降解基因工程菌研究

构建遗传稳定的多功能农药降解基因工程菌可以为农药污染的生物修复提供良好的菌种资源,然而,构建遗传稳定且不带入外源抗性的基因工程菌是一个难点。通过以受体菌的16S rDNA为同源重组指导序列、sacB基因为双交换正筛选标记构建同源重组载体,二亲结合的方法将甲基对硫磷水解酶基因（mpd）整合到呋喃丹降解菌Sphingomonas sp.CDS1染色体的16S rDNA位点,分别成功构建了含1个和2个mpd基因插入到rDNA位点且不带入外源抗性的基因工程菌株CDSmpd和CDS-2mpd。同源重组单交换的效率为3.7×10^－7～6.8×10^－7。通过PCR和Southern杂交的方法验证了同源重组事件。基因工程菌遗传稳定,能同时降解甲基对硫磷和呋喃丹。甲基对硫磷水解酶（MPH）的比活在各生长时期均高于原始出发菌株,比活最高达6.22 mu/μg。     

基因概念的现代发展

基因概念的现代发展黄青阳（华中师范大学生物系,武昌４３００７０）在早期的遗传学里,基因指的是孟德尔的遗传因子,在整个的细胞遗传学时期,基因被看成是一个具有自我繁殖能力的遗传传递、重组、突变和功能的基本单位,“一个基因一个酶”,随着微生物遗传学的发展,...     

Lowry蛋白定量法用于重组人生长激素定量上的差异

Ｌｏｗｒｙ蛋白定量法用于重组人生长激素定量上的差异马自兰吴中华周蓬蓬何晓淮姚红谊（安徽安科生物高技术有限责任公司合肥２３００３１为了准确的测定重组人生长激素（ｒｈＧＨ）的含量，给ｒｈＧＨ生产的质量控制提供切实可行的检测方法，本实验比较了Ｌｏｗｒｙ蛋白...     

新方法检测Holliday交叉动力学过程更容易

生物通2007年10月19日报道来自伊利诺斯大学香槟分校（University of Illinois at Urbana—Champaign）、霍德华休斯医学院和英国邓迪大学的研究人员报道了一种新的杂交方法,能更好的检测Holliday交叉（Holliday junction,HJ）的动力学过程。Holliday交叉是四股DNA所形成的交叉结构,名称来自于1964年提出此概念者Robin Holliday,用以解释发现于酵母菌的遗传资讯交换,也就是同源重组。[第一段]     

分枝杆菌噬菌体重组系统及其应用

噬菌体是微生物遗传学研究的有力工具及源泉.分枝杆菌噬菌体也是构建分枝杆菌,尤其是结核分枝杆菌遗传研究工具的基础.目前,基于分枝杆菌噬菌体重组酶的重组系统是国际热点.总结了近年来基于分枝杆菌噬菌体Che9c重组酶gp60、gp61所构建的分枝杆菌重组工程体系及其在分枝杆菌基因组研究方面的应用,并结合实验室工作展望了其研究前景.该体系不依赖细菌自身的RecA系统,不需要限制性内切核酸酶和DNA连接酶,不需要复杂的体外操作,只需表达分枝杆菌噬菌体重组酶,从而使结核分枝杆菌基因敲除、基因敲入及点突变和构建分枝杆菌噬菌体突变株更方便.这为分枝杆菌及其噬菌体基因诱变及基因功能研究提供了迅捷的新途径.     

研究报告重组人GPx7的原核表达、纯化及其抗肿瘤活性检测

研究大肠杆菌表达重组人谷胱甘肽过氧化物酶7（glutathione peroxidase 7,GPx7）,并对纯化精制的重组人GPx7进行体内抗肿瘤活性检测。以质粒pCDNA3.1（-）-GPx7为模板,PCR 扩增获得N-端去除信号肽的 GPx7 基因片段,构建的重组质粒pET24A-GPx7在E.coli BL21（DE3）中诱导表达。采用Sulfopropyl强阳离子交换层析和Superdex 75分子排阻层析纯化精制获得原核表达的重组人GPx7蛋白。该蛋白的体外催化活性微弱,但S180荷瘤小鼠连续14d注射GPx7蛋白后,肿瘤生长受到抑制,抑制率为29.26%,与对照组相比具有显著差异。实验结果表明,采用阳离子交换和分子排阻层析两步法可纯化精制原核表达的重组人GPx,重组人GPx7蛋白在荷瘤小鼠模型中表现出体内抗肿瘤活性。     

利用同源重组建立地中海拟无枝菌酸菌U32染色体的基因置换/中断系统

地中海拟无枝菌酸菌U32是力复霉素SV的工业产生菌,其遗传操作一直是一个难题。在该菌株DNA高效电转化的基础上,利用同源重组的原理,建立了地中海拟无枝菌酸菌染色体的基因置换/中断系统。通过大肠杆菌重组质粒pDK110构建、转化及两步重组筛选,成功地用α淀粉酶基因（amy）取代了地中海拟无枝菌酸菌U32染色体上的3-氨基-5-羟基苯甲酸合成酶基因（ahbas）。第一步单交换和第二步双交换的频率分别是0.5%～0.7% 和 2%。将质粒pDK110变性后转化可显著提高重组频率,在第二步筛选双交换前对单交换重组子进行电击也能够提高其双交换重组的频率。此外,通过转化构建的两端带同源区段的线性DNA片段及一步重组筛选,我们在地中海拟无枝菌酸菌U32染色体的amrD,rifO基因中间插入了阿普拉霉素抗性基因（apr）,其效率约为30～50转化子/μgDNA。     

20世纪遗传学的发展轨迹及其启示

20世纪是遗传学诞生并飞速发展的世纪。在这 10 0年里 ,遗传学所取得的每一巨大成就 ,如 DNA双螺旋结构的发现、DNA重组技术的创立、人类基因组计划的实施以及动物克隆技术的应用等 ,对人类社会的发展都产生了深刻的影响。在当今的生命科学领域 ,遗传学占有举足轻重的地位 ,已成为影响整个自然科学乃至人类社会的带头学科。可以说 ,遗传学是自然科学所有门类中发展最快、影响最深、应用价值最大的学科之一。众所周知 ,遗传学 (genetics)是研究生物体遗传与变异规律及其物质基础的科学。经过百年的发展 ,现代遗传学的研究十分广泛 ,已成为…     

群居性啮齿动物集群重组率的估算

提出了一种定量估算群居性啮齿动物的集群重组率的方法。此法以特定时期集群中动物个体之间的异源概率（即来源于不同家族的概率）作为衡量群居性啮齿动物的“混合”程度（即重组率）的定量指标,并与平均重组率（即重组期望）进行比较,进而判断动物在集群过程中的选择倾向。按照这种方法估算了内蒙古典型草原区布氏田鼠越冬集群的重组率。结果表明,该鼠的越冬集群重组率很低,仅在0.1左右,集群个体多数来源于相同的家族。此外,该鼠的集群重组率远低于其重组期望值,表明该鼠在秋季集群中,有强烈的选择同源个体的倾向。     

用基于“Neo/E”的技术构建重组质粒

根据重组工程原理,建立了一种用于构建重组质粒的 “neo/E”（抗生素/单酶切位点）选择与反选择新方法。首先采用 PCR方法扩增出线性打靶分子：然后进行两步体内同源重组,（1）neo/E基因敲入,重组子呈现neo抗性表型;（2）目的基因替换neo/E基因。用限制酶E消化时,发生第二步重组的DNA分子不能被消化,能够转化大肠杆菌受体菌DH5α。应用该方法构建了重组质粒pGL3-Basic PC1900T。PCR及测序鉴定证明：外源片段重组率为20%,所建立的重组工程选择与反选择新技术为质粒构建提供了新的解决方案。