双抗原特异性抗体──杂交瘤技术新的生长点

双抗原特异性抗体──杂交瘤技术新的生长点王益民（安徽省生物研究所，合肥２３００３１）王骥飞（合肥市红十字中心血站，２３０００１）杂交瘤技术自１９７５年问世以来，发展极为迅速。当时就有人称它是生命科学中的一项革命性的突破，并预测了其广阔前景。现在，杂交...     

双特异性抗体的制备与应用

双特异性抗体是指通过化学交联、细胞工程和基因工程方法制备的一种可以在体内、外特异识别两种抗原并能与之结合产生生物学效应的抗体分子,在免疫学检测与肿瘤药物导向治疗和介导细胞毒作用中应用广泛。近年来,对双特异性抗体制备与应用的研究越来越深入,本文仅就这两方面研究的最新进展作一介绍。     

基因工程双特异抗体研究进展

双特异抗体特别是双特异性单链抗体、亮氨酸接链双特异性抗体、双特异性单链抗体毒素等是近几年来发展起来的很有前途的监床诊疗生物制剂 ,本文对其基因构建、边接肽设计、表达产物及活性等方面的新进展作了重点论述。     

双抗体夹心ELISA法检狂犬病疫苗抗原活性组分

采用多克隆双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法快速检测狂犬病毒抗原含量。结果表明,灵敏度达到１５μｇ／ｍｌ,同时特异性及变异系数均合呼要求,本方法用于精制狂苗制备过程中有效抗原活性组分的检测准确,快速,重复性好,且抗原的ＥＬＩＳＡ效价与ＮＩＨ动物法测定效价具有平行趋势。     

小鼠杂交瘤单克隆抗体快速制备技术研究进展

小鼠杂交瘤单克隆抗体来源稳定、后期易制备、产量高,是免疫学中使用最为普遍的抗体.传统的耗时费力的杂交瘤制备技术无法满足日益增长的市场需求.文中从抗原设计筛选、B细胞富集与筛选、骨髓瘤细胞的改造、融合技术的改进、阳性杂交瘤细胞筛选及单克隆抗体性能快速测定中所涉及的快速制备技术方面进行阐述,以期为系统化的小鼠杂交瘤单克隆抗...     

抗乙型肝炎病毒e抗原和核心抗原双特异性单克隆抗体的建立与应用

用基因工程技术在大肠杆菌中高效表达的乙型肝炎病毒核心抗原(内含高滴度的e抗原)免疫Balb/C小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(Sp2/0)融合,获得两株分泌高滴度既抗-HBe又抗-HBc的双特异性杂交瘤细胞系。细胞培养上清液中抗体滴度为100～1000以上;免疫腹水中的抗体滴度为8万至10万以上,均属IgG2a亚类。细胞在实验室连续传代二年多,仍保持高效分泌抗体能力。此单克隆抗体与HBeAg或HBcAg的结合可被抗-HBc或抗-HBc阳性血清所抑制,竞争抑制率在85.9％～96.8％之间。用此单克隆抗体与HBe的β型单克隆抗体和抗HBc的α型单克隆抗体配对,可组装成检测HBeAg/抗-HBe和抗-HBc的诊断试剂,具有重要的应用价值。     

双抗体夹心ELISA法检测狂犬病疫苗抗原活性组分

采用多克隆双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法快速检测狂犬病毒抗原含量。结果表明,灵敏度达到１５μｇ／ｍｌ,同时特异性及变异系数均合乎要求。本方法用于精制狂苗制备过程中有效抗原活性组分的检测准确、快速、重复性好,且抗原的ＥＬＩＳＡ效价与ＮＩＨ动物法测定效价具有平行趋势。     

应用流式细胞仪定量评估人—鼠杂交瘤株细胞抗体生...

The paper described a method of quantitative stability analysis of antibody production by hybridoma clones with flow cytometry (FACS). Through FACS analysis the frequency of antibody-negative variants was measured. The rate of generation of antibody-negative variants/cell/generation (mu) could be calculated through Luria-Delbrück fluctuation analysis. The results showed that the value of mu was correlated to the antibody production of hybridoma clones: the larger was the mu value, the more unstable was the antibody production by the hybridoma clones. The experimental results suggested that the clone was stable if its mu value was on the magnitude of 10(-3), while the clone was not stable if its mu value was on the magnitude of 10(-2). According to requirements of single cell for FACS analysis and presence of a variety of methods for dispersing cell aggregates to single cells, the authors regard that this method is fully suitable for analysis of cells in suspension or even in the form of aggregate.     

人—小鼠淋巴细胞杂交瘤中抗体分泌和人染色体丢失的关系

本文应用G带,G11和C带染色体制片的方法分析16个人一小鼠杂交瘤抗体分泌和人染色体丢失的关系。结果表明抗体阳性的9株杂交瘤保留人的染色体较多,7/9在13条以上,阴性的7株中4/7在5条以下。Ig基因相关的三对人染色体中,14号(重链基因相关)最稳定,22号(入链基因相关)其次,2号(K链基因相关)最易丢失。9株以SHM-D33为融合亲本瘤系的杂交瘤,没有1株保留第2号染色体,而用RF瘤系建立的4株杂交瘤中有3株拥有2号染色体,提示2号的丢失可能也与瘤系相关。     

抗原化抗体

抗原化抗体余拥军吴祥甫（中国科学院上海生物化学研究所,上海２０００３１）关键词抗原化抗体抗体基因工程抗原性免疫原性抗体是哺乳动物免疫系统的重要组成部分,担负着机体抵御外来入侵者及清除体内病变、衰老细胞等重要生理功能。抗体分子因其结构的特殊性、对抗原分...     

双特异性抗体与肿瘤导向治疗研究新进展

双特异性单克隆抗体(Bispecific mono-clonal antibody,BSAb)是已发展起来的免疫治 疗和细胞生物学基础研究的新课题。它是两亲代单克隆抗体(Mab)的杂交抗体,同时具备了两亲代抗体的特异性,因此可与两种不同的抗原分子结合,显示了功能上的单价性。1983年Milstein和Cuello第一次利用两次杂交瘤技     

双特异抗体定向运载抗原作为一种新型佐剂系统的研究进展

目前采用基因重组等生物技术制备了大量的纯化亚单位疫苗或合成疫苗,这些疫苗的免疫原性很弱,需要佐剂的帮助才能有效地引发抗体应答。传统的佐剂具有很多本身无法克服的缺陷,促使人们研究开发新的佐剂系统。本文对双特异抗体的概念、Ｔ细胞在免疫应答中的作用及抗原的定向运送、双特异抗体介导的抗原定向运送及佐剂效应等方面对双特异抗体定向运送抗原作为一个新的佐剂系统给予了较为详细的阐述     

双印迹：解决第二抗体非特异性结合问题

在免疫印迹技术中印迹蛋白与非相关第二抗体之间的相互作用会产生假阳性。已经开发了某些程序以期减少这种吸附。Gershoni在1988年就已强调解决这一问题的困难。通过使用一种新膜(DB膜),并从印迹蛋白中提取原始抗体,使这种程序消除了干扰蛋白,并使第二抗体的非特异性结合成为不可能,因此认为上述非特异性结合问题能够解决。     

双价,双特异性单链抗体

双价、双特异性单链抗体是最近几年才出现的一类新的基因工程抗体分子,它在临床诊断和治疗上有着广泛的应用前景,尤其是在肿瘤和病毒的诊治方面更具突出优势。本对其性质,制备方法及应用前景作了系统的综述。     

双特异性抗体的结构及应用研究进展

双特异性抗体(bi-specific antibody,BsAb)是具有双功能的抗体分子,可同时结合两种不同的抗原或表位,将T细胞和自然杀伤细胞重定向到肿瘤细胞,在功能分子(细胞)和靶细胞之间架起桥梁,产生导向性作用。目前,BsAb已广泛应用于癌症、炎症、病毒感染及其他疾病的治疗。现就BsAb的结构、应用等方面的研究进展作一综述。     

一种高效产生小鼠杂交瘤的电融合方法

近年来,细胞电融合技术(Electrofusion)得到了迅速发展和应用.特别是在单克隆抗体领域,人们希望能以电融合技术的高融合频率来更有效地获得分泌单抗的杂交瘤.现主要有两种较有效的电融合方法来实现这一目的:一是Nova/Hopkins的抗原—抗生物素—生物素桥联(antigen-avidin-biotin bridge)方法,另一种则是Zimmermann电融合法.Nova/Hopkins方法虽然非常有效,但其较适用于中高亲和性的抗原—抗体系统     

双特异性抗体在肿瘤治疗中的研究

双特异性抗体(bispecific antibody,BsAb)有两个抗原结合位点,其中一个位点可与靶细胞表面抗原结合,另一个位点则可与载荷物(如效应细胞,分子等)结合。将BsAb应用于肿瘤治疗,发挥抗肿瘤效应的思想已有二十多年历史,随着对效应细胞生物学了解的加深和抗体工程的飞速发展,各种形式的BsAb相继出现,多种BsAb药物已进入临床初期试验或治疗使用阶段。本文就BsAb的各种新形式及其在肿瘤治疗中的应用新进展作简要概述。     

基因工程抗体研究进展

自1975年单克隆抗体杂交瘤技术问世以来,单克隆抗体(下简写为mAb)在临床医学中被广泛地应用于疾病的诊断、治疗及予防。但目前绝大多数mAb是鼠源的,临床重复给药时体内产生抗鼠抗体,使临床疗效减弱甚至消失。