产红色素真菌Monascus sanguineus的液态发酵条件研究

从药用植物地黄中分离出一株产红色素内生真菌RJL03(Monascus sanguineus),为进一步提高菌株RJL03的红色素产量,采用响应面法(RSM)对其液态摇瓶发酵条件进行研究。在单因素实验的基础上,以发酵液OD值为指标,利用Box-Behnken中心组合实验设计原理(BBD)优化菌株液态发酵产红色素的工艺条件。结果显示,该色素发酵液在474 nm处有最大吸收波长,最佳发酵工艺为温度30℃、装瓶量67%、初始p H自然(7)。在此条件下液态发酵菌株,显著提高了菌株RJL03的红色素产量。     

黑米蛋白提取工艺的优化

以黑米为原料,研究黑米蛋白提取工艺的优化。采用"碱提酸沉"法,研究了提取液pH值、温度、搅拌速度、料液比、提取时间、及粒径大小等对黑米蛋白提取率的影响。在单因素试验的基础上,以L9(34)正交实验法优化黑米蛋白提取工艺。结果表明:各因素对黑米蛋白提取率的影响顺序依次为:pH值粒径料液比转速。本实验中,黑米蛋白提取的最佳工艺条件为:提取液p H 12.5、温度28℃、搅拌转速800 rpm、料液比1∶10 g/m L、提取时间为1 h、酸沉淀时间为1 h、粒径大小为能通过100目筛。优化后黑米水溶性蛋白提取率提高到96.77%,纯度为97.75%。     

正交试验法优化桑叶多糖提取工艺

以脱除黄酮的桑叶为原料,采用热水浸提法提取桑叶多糖,研究了提取温度、提取时间、料液比、水溶液pH和提取次数对桑叶多糖得率的影响,通过正交实验优化了提取工艺条件。结果表明,在提取次数为2次条件下,桑叶多糖最佳提取工艺条件为提取温度100℃、提取时间4 h、提取液pH7、料液比(原料:提取液,g/mL)1:30,多糖得率为2.74%。该工艺稳定,桑叶多糖得率高,易于工业化生产。     

野生火棘果红色素提取工艺优化

目的:通过正交实验,确定火棘果红色素的最佳提取工艺。方法:以贵州野生火棘果为原料,首先,以柠檬酸的乙醇溶液为提取剂,在400～800nm范围内对提取液的吸收光谱进行扫描,确定其最大吸收波长;然后,以最大吸收波长处的吸光度为衡量指标,确定最佳提取剂;再次,探讨了提取次数、提取温度、提取时间、料液比等单因素对火棘果红色素提取效果的影响;最后,在单因素实验结果的基础上,通过L9(34)正交实验,确定红色素的最佳提取工艺。结果:1.在400～800nm范围内,火棘果红色素的最大吸收波长为530nm;2.最佳提取剂为9%柠檬酸乙醇溶液;3.火棘果红色素的最佳提取工艺为,料液比1∶10,提取时间60min,提取次数2次,提取温度40℃。     

柚果皮中果胶提取的工艺研究

研究了酸种类、提取液pH值、温度、时间、提取液固比等因素对柚皮中果胶提取的影响。通过单因素及L16(45)正交实验,获得了柚子中提取果胶的最佳条件,即pH值1.5～2.0,提取温度100℃,提取时间100min,提取液固比为20。在此条件下果胶得率达14.9%。提取液经浓缩后采用95%乙醇沉淀,所得果胶胶凝度为152°,半乳糖醛酸含量为76.3%,而灰分仅为2.75%。     

柿子渣中多酚的提取工艺及其抗氧化性研究

采用单因素试验设计,研究了料液比、提取温度、乙醇浓度、提取时间4个因素对柿子渣中总多酚提取效果的影响,运用正交试验设计对提取工艺进行了优化,并采用DPPH法检测了柿子渣多酚提取液清除自由基的能力.结果表明:(1)提取温度和提取时间对总多酚含量影响显著,乙醇浓度和料液比对总多酚含量影响不显著;柿子渣总多酚提取的最佳工艺为:料液比20:1(mL·g-1),提取温度90℃,乙醇浓度40%,提取时间4 h.(2)验证试验结果表明,优化条件下总多酚的提取量可达到21.402 mg·g-1,高于正交试验中任何一组.(3)抗氧化活性试验表明,当柿子渣多酚提取液质量浓度为0.24 mg·mL-1时,对DPPH自由基的清除率可达95.4%,与对照Vc抗氧化能力无显著差异,表明在该优化工艺下提取的柿子渣多酚具有较强的抗氧化活性.     

响应面法优化细脚棒束孢中N6-(2-羟乙基)腺苷的超声提取工艺研究

为提高细脚棒束孢中N ⁶-(2-羟乙基)腺苷（简称HEA）的提取效率,在超声时间、提取液pH、料液比3个单因素试验的基础上,运用响应面法对超声提取细脚棒束孢中HEA工艺进行优化。结果表明,液料比对提取效果的影响最大,其次是提取液pH,超声时间因素影响最小。响应面法优化后,细脚棒束孢的最佳超声提取工艺为：超声时间31min、液料比22:1（mL/g）、pH 4.88,Box-Behnken模型预测值为0.86mg/g,实际值为(0.86+0.03)mg/g,二者偏差为0.10%,说明响应面优化超声提取细脚棒束孢中HEA工艺稳定可行。该研究所得提取工艺适用于不同虫草类真菌腺苷类成分的提取及分析,具有省时高效、节约能源的优势,可用于虫草的质量评价及开发等研究。     

石蒜中总生物碱提取条件研究

通过研究用酸性醇溶液提取石蒜生物碱的方法和条件,结果表明,提取石蒜生物碱较佳的工艺条件是:提取液pH值1,提取时间为2h,提取液乙醇浓度为50%。     

火棘不可萃取多酚的提取工艺优化及抗氧化研究

采用响应面法优化了火棘不可萃取多酚(non-extractable polyphenol,NEPP)的提取工艺,分析了火棘中可萃取多酚(extractable polyphenol,EPP)和不可萃取多酚分别占总酚(total polyphenol,TEPP)的比例,同时监测了NEPP萃取液的抗氧化能力。以NEPP得率为评价指标,采用Folin-Ciocalteu法测定NEPP含量。考察了乙醇浓度(%,v/v)、乙醇占乙醇-硫酸提取液的比率(%,v/v)、料液比(g/m L)、提取时间(h)及提取温度(℃)对火棘NEPP得率的影响。进一步通过Box-Behnken设计优化提取工艺,同时以ABTS及FRAP法对NEPP提取液的抗氧化能力进行测定。最佳提取工艺为:提取时间2.68 h,乙醇浓度94.44%(V/V),温度83.47℃,NEPP萃取量可达167.328 mg/g,EPP 40.4 mg/g。响应面模型优化火棘NEPP提取工艺结果可靠,NEPP占火棘TEPP比重较高,为80.55%,ABTS及FRAP抗氧化能力均与NEPP含量呈良好正相关性。     

中华稻蝗脂肪提取方法

以丙酮和石油醚的混合液为提取液,通过正交试验,对中华稻蝗Oxyachinensis(Thunberg)成虫体脂肪进行溶剂提取条件的优化研究,并分别讨论了各因素对中华稻蝗成虫体脂肪提取率的影响。结果表明:料液比4/25、溶剂混比1/1(丙酮:石油醚)、提取时间8h、水浴温度85℃为中华稻蝗脂肪提取的最佳工艺条件,在此条件下,脂肪得率可达5.875%。     

虎耳草中抗氧化活性物质的提取及成分研究

对虎耳草中抗氧化活性物质提取工艺进行优化研究并对其进行总黄酮、总多酚、多糖的含量测定。通过单因素试验和Box-Behnken设计,以虎耳草中抗氧化活性物质对DPPH.自由基的清除率为响应值,利用响应面分析法对提取参数进行优化。结果表明:在提取温度39℃、料液比1∶40.5(g/mL)、提取时间3.7 min,微波功率500 W的优化条件下,以水为提取溶剂时,其提取液对DPPH.的清除率达到最大,为80.32%,同时将该提取液进行成分分析,1 g提取液中含有总黄酮11.30 mg,总多酚20.27 mg,多糖55.85 mg。     

紫山药色素的提取工艺及抗氧化性能研究

研究紫山药色素的最佳提取工艺及其抗氧化性能。在单因素试验的基础上,采用L9(34)正交试验法,以pH示差法测定花色苷得率为考察指标,优化了溶剂提取法提取紫山药色素的工艺参数。通过DPPH体系测定该色素清除自由基能力。试验结果表明:紫山药色素属于花色苷类物质,优化的紫山药色素提取条件为:提取温度60℃,提取时间80 min,料液比1∶30,提取溶剂为0.5%盐酸乙醇溶液,提取液花色苷含量可达2.075mg/鲜紫山药g。紫山药色素提取液清除DPPH自由基的IC50为98.14μg/mL。紫山药具有开发功能性色素的潜力。     

三角叶黄连内生真菌产物红色色素的稳定性研究

对三角叶黄连内生真菌发酵产物红色色素采用分光光度法,检测不同条件下该色素物吸光值的变化,观察光、温度、金属离子、氧化剂、还原剂、酸度调节剂、维生素、及食品添加剂对红色素稳定性的影响。结果表明:红色色素有较好的光热稳定性,而耐氧化性和抗还原性较差;对Fe3+和Zn2+较为敏感,使色素物变成黄色;维生素具有护色素的作用;苯甲酸钠在低浓度(<0.5%)时具有保护作用,但浓度高于1%时使色素物变成粉红色,且OD值显著下降;酸度调节剂氢氧化钠、柠檬酸、苹果酸对色素影响较为显著。因此,可在一定条件下进行优化,提高该红色素稳定性,作为新型天然色素加以开发利用。     

Acinetobacter sp. Y1的氨氮去除性能及其关键酶活性

【目的】研究Acinetobacter sp.Y1的氨氮(NH_4~+-N)去除性能及其关键酶的提取与酶活性。【方法】以柠檬酸钠为碳源,硫酸铵为氮源,研究菌株Y1的NH_4~+-N去除性能;采用正交实验优化超声波破碎法提取粗酶的条件,SDS-PAGE分析比较渗透压休克法和超声波破碎法获得的粗酶;检测关键酶——羟胺氧化还原酶(HAO)、亚硝酸盐还原酶(NIR)、硝酸盐还原酶(NAR)的酶活性。【结果】24 h内菌株Y1的菌密度(OD600)可达1.280,对NH_4~+-N、总氮(TN)和COD的降解率分别达到98%、94%和92%,硝化过程中羟胺、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮不积累,反硝化产生N2;超声波破碎法提取粗酶的最佳工作条件为:破碎功率50 W,工作与间歇时间分别为4 s和7 s,OD600为1.250,总工作时间20 min,关键酶HAO、NIR和NAR的比活力分别为0.011、0.002和0.018 U/mg;渗透压休克法得到的HAO比活力是0.067 U/mg。【结论】Acinetobacter sp.Y1能同时高效去除NH_4~+-N、TN和COD。优化超声波破碎法提取粗酶的条件,检测到HAO、NIR和NAR的酶活性,且渗透压休克法比超声波破碎法更适合用来提取HAO。     

紫薯干燥的动力学模型及工艺优化

为了探究紫薯在干燥过程中水分变化规律,建立动力学模型,进一步为紫薯干中天然色素的高效提取给予理论依据。以新鲜紫薯为原材料,分别研究了切片厚度、热风温度和热风风速对紫薯干燥特性的影响,通过用线性回归法处理,根据较常用的薄层干燥模型进行拟合,建立紫薯热风薄层干燥的动力学模型;在以上单因素试验的基础上,采用正交实验优化提取红色素的干燥工艺参数。研究得出对紫薯薄层干燥速率的影响因素由大到小是切片厚度、热风温度、热风风速;紫薯热风薄层干燥的动力学模型满足Page方程;紫薯红色素提取的最优工艺为热风温度60℃、热风风速0.6 m/s、切片厚度6 mm,此条件下提取得率为15.90 mg/g。     

紫茎泽兰DNA的提取及AFLP反应体系的建立

以紫茎泽兰叶片为材料,用改进的CTAB法,在提取液中加入2%PVP40(V/V)、0.4%BME(V/V),提取到了高质量的基因组DNA,OD260/OD280在1.7~1.9之间,蛋白质、多酚类、多糖、RNA等去除较彻底,适于AFLP分析。通过对紫茎泽兰DNA提取、酶切连接、预扩增、选择性扩增等实验过程中各关键因素的比较研究,建立了一套优化的AFLP分子标记体系,得到了清晰的AFLP银染指纹图谱,实验结果重复性好。     

低能离子束修饰蛹虫草菌株高产虫草素

虫草素具有抗肿瘤、免疫调节、抗炎等多种功效。为了更好地开发蛹虫草资源,选择合适剂量的低能离子束注入蛹虫草,优化虫草素的提取工艺条件,采用紫外分光光度法检测注入前后菌株中虫草素的含量。结果表明:最佳注入剂量为2.60×1015ions/cm2,虫草素最佳的微波-超声波提取工艺为:乙醇浓度70%,提取功率200W,提取时间110s,料液比1:240。选育出虫草素含量较高的15株菌株,最高含量达(11.924±0.063)mg/g,比原始菌株增长了近30%。     

甘灵茶抗氧化成分的提取工艺研究

为了开发甘灵茶的应用价值,采用DPPH法对甘灵茶提取液的抗氧化性进行了研究。以提取液清除DPPH的效果为评价指标,采用单因素试验和正交试验,研究了甘灵茶的提取温度、pH值、提取时间、甘灵茶用量对抗氧化物质提取效果的影响,获得了提取的最佳工艺参数。结果显示：提取甘灵茶抗氧化物质的最优水平组合为提取温度为60℃、溶剂pH值为8.5、提取时间为15min、甘灵茶用量为3%,此条件下DPPH清除率为86.24%,多酚含量为0.187mg/mL,多糖含量为0.244mg/mL。     

一株酸枣内生菌的鉴定及其抗菌活性物质的初步分离

为了从酸枣中筛选出内生菌并分析其代谢产物中的活性成分,用于开发和生产药物,该研究通过组织块分离法和划线分离法,从陕北野生酸枣植株体内分离得到内生菌,采用平板对峙法测定其对7株供试指示菌的抗菌活性,以心神宁片提取液为对照,对各拮抗菌株的发酵液进行薄层层析和高效液相色谱分析。结果表明:从野生酸枣中共分离得到121株内生菌,其中内生细菌49株,内生放线菌6株,内生真菌66株;通过抗菌试验,发现54株内生菌(细菌33株,真菌21株)对1～7种指示菌具有抗菌活性,占分离菌株总菌数的44.63%,其中A-04、A-05、B-03、C-03、C-06和D-04共6株菌株的抗菌谱较广,对7种供试指示菌均具有抑菌活性;薄层层析检测结果显示菌株B-03发酵产物在R_f值为0.46处有与酸枣提取液层析带迁移率相同的显色带,液相色谱分析结果显示其属于黄酮类物质;通过16S rRNA基因序列分析结果显示菌株B-03与Bacillus axarquiensis的相似性为99%。菌株B-03能发酵产生黄酮类或产生与黄酮类类似的化合物,表明酸枣内生菌具有合成黄酮类药物的潜力。     

一株耐受高浓度葡萄糖且产乙偶姻菌株的筛选及产物鉴定

为获得一株耐受高浓度葡萄糖且产乙偶姻的菌株,利用高糖培养基以及乙偶姻显色液从烟田土壤中筛选到一株全新菌株;将筛选出的菌株利用全基因组测序技术和16S rDNA序列比对分析对菌株进行鉴定,并利用不同浓度葡萄糖的培养基对菌株进行耐受实验;最后,利用GC-MS(气相-质谱)将菌株的发酵产物定性分析,并对菌株进行72 h的初步发酵。结果显示,筛选获得菌株为金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus),命名为PX03。葡萄糖耐受实验中,菌株PX03在含有500 g/L葡萄糖的培养基中依然能生长,OD600可达65;300 g/L葡萄糖浓度下生长最好,OD600可达100。GC-MS定性结果分析发现,该菌株可产大量的乙偶姻(22.51%)和2,3-丁二醇(21.29%),同时可产乙酸(13.97%)、3,4-二羟基-3,4-二甲基己烷-2,5-二酮(8.52%)、吡喃酮(5.24%)和3-甲基-丁酸(4.47%)等一些香气成分。对菌株的初步发酵结果显示,该菌株乙偶姻产量可达41 g/L。