应用超声波技术强化提取余甘多糖

通过单因素和正交实验研究了超声波时间、超声波功率、超声波提取温度和料液比对余甘(Phyllanthus emblica L.)多糖收率的影响。结果表明,多糖收率的主要影响因素为超声波功率、超声波时间、料液比、超声波提取温度。余甘多糖的最佳提取工艺条件为:超声波功率475W、超声波时间70min、料液比1:20、超声波提取温度80℃,余甘多糖收率为95.86mgg-1DW。紫外和红外光谱分析表明,余甘多糖是含有糖醛酸的α型吡喃酸性杂多糖,超声波处理没有改变多糖结构。     

星点设计-效应面法优化戊己丸提取工艺

本文旨在优化戊己丸中抑菌活性物质的提取工艺。通过单因素试验考察了提取方法、提取溶剂、提取时间、液固比及溶剂体积分数对抑菌活性的影响,在此基础上,采用星点设计-效应面法对其提取工艺进行进一步优化,并对结果进行验证。研究中以金黄色葡萄球菌为指示菌,以抑菌直径为活性追踪指标。单因素试验表明:用乙醇为溶剂,回流提取戊己丸的抑菌效果最佳。通过星点设计-效应面法优化确定最佳提取工艺参数:乙醇体积分数80.5%,提取时间38 min,液固比8.3 m L/g,回流提取2次。在此工艺条件下得到戊己丸提取液的抑菌效果最好,抑菌圈直径达到22.20 mm。最终确定提取工艺简单易行,所建立的数学模型预测性好。     

利用植物提取物绿色合成纳米银粒子及其对台湾乳白蚁的毒性

【目的】利用多种药用植物水提液绿色合成纳米银粒子，测定分析其对台湾乳白蚁Coptotermes formosanus的毒杀活性和作用机理，探索绿色合成的(silver nanoparticles, AgNPs)在白蚁防治方面的潜力，拓宽AgNPs在农业领域的应用前景。【方法】分别利用药用植物大黄Rheum palmatum根茎、白毛夏枯草Ajuga nipponensis全株、苦参Sophora flavescens根和鱼腥草Houttuy niacordata全株的水提取液绿色合成纳米银粒子，采用紫外 可见分光光度计(UV-vis)、扫描电子显微镜(SEM)、透射电子显微镜(TEM)、X射线能谱分析(EDS)和纳米粒度分析仪验证AgNPs的生成并表征其粒子大小、形状和聚集程度等；在实验室条件下测定AgNPs对台湾乳白蚁工蚁的毒杀效果。通过测定800 mg/L AgNPs处理7 d的台湾乳白蚁工蚁体内可溶性蛋白质含量、乙酰胆碱酯酶(AchE)活性和滤纸酶活性(filter paper activity, FPA)水平，来探析AgNPs对白蚁的毒杀作用机理。【结果】4种药用植物水提取液合成的AgNPs颗粒均呈球形，粒径在69~180 nm之间；7 d内AgNPs对台湾乳白蚁工蚁的LC₅₀值分别为150, 340, 342和309 mg/L；800 mg/L AgNPs处理7 d后台湾乳白蚁工蚁的可溶性蛋白质含量以及AchE活性和FPA与对照相比均显著降低。【结论】4种植物提取物合成的AgNPs对台湾乳白蚁工蚁均有较好的毒杀效果，它们可通过降低白蚁体内的可溶性蛋白质含量、AchE活性和FPA来影响其存活，说明绿色合成的AgNPs在防治台湾乳白蚁方面具有较大的潜力。     

余甘子果实水溶性多糖抑菌及群体感应抑制活性初探

以余甘果实(粉甘)水溶性多糖为材料,采用比浊法测定余甘多糖对5种细菌的抑菌活性及对改造型紫色杆菌紫色杆菌素生成量的影响。结果显示,余甘多糖对供试菌的抑菌活性大小顺序为：金黄色葡萄球菌＞枯草芽孢杆菌＞改造型紫色杆菌CV026＞红色粘质沙雷氏菌＞大肠杆菌;余甘多糖终浓度为20 mg·mL-1时,对紫色杆菌素生成量的抑制作用最大,抑制率达(53.47 ± 3.10)%。因此,余甘多糖具有抑菌活性及群体感应抑制活性。     

响应面法优化Chlorella vulgaris224胞外多糖积累及其抑菌和抗氧化活性

通过单因素和响应面法优化淡水微藻Chlorella vulgaris 224胞外多糖的积累,并对其抑菌、抗氧化活性进行研究。经优化后,C.vulgaris 224积累胞外多糖的最佳条件为NaNO_(3 )203.13 mg/L、NaCl 85.34 mg/L、NaHCO_(3 )2.13 g/L;在此条件下,其胞外多糖产量为70.365 7 mg/L,比优化前提高了1.62倍。抑菌实验结果表明,C.vulgaris 224的胞外多糖对金黄色葡萄球菌有较强的抑菌作用,对白色葡萄球菌、绿脓杆菌和大肠杆菌有较弱的抑菌作用。抗氧化实验结果表明C.vulgaris 224的胞外多糖具有较强的抗氧化活性。本研究为筛选天然抗菌、抗氧化活性物质提供了一定的参考价值,同时为产油微藻的综合开发利用提供了一定的理论依据。     

木霉菌合成银纳米粒子条件的优化及其对甜瓜尖孢镰刀菌抑制作用

随着绿色环保观念的普及,生物合成金属纳米粒子的方法备受青睐。纳米银(Silver nanoparticles,AgNPs)由于其抗菌活性强且不易产生抗药性等特点在农业病害防治中越来越受到关注。文中利用橘绿木霉Trichoderma citrinoviride和毛簇木霉Trichoderma velutinous研究了AgNPs的最适合成条件和AgNPs对尖孢镰刀菌抑菌活性。结果表明,所有合成的AgNPs均在400–500 nm处有吸收峰,两种木霉生物合成AgNPs的最适合成条件为CL法(菌丝滤液)静置光照培养,底物AgNO₃浓度为2.0mmol/L,pH值为7,反应温度为45℃。橘绿木霉和毛簇木霉合成的AgNPs均对尖孢镰刀菌有抑制作用,抑菌效果随浓度的增加而增大,AgNPs在浓度为200 mg/L时,抑菌率分别达到33.745%和36.083%。     

苦参配方的醇提工艺优化及抑菌活性研究

利用响应面法设计实验优化苦参抑菌配方的回流提取工艺,以配方对金黄色葡萄球菌抑菌率作为响应值,通过考察提取工艺的单因素:浸泡时间、回流时间、水浴温度、液料比、乙醇体积分数等,选取具有显著影响的参数作为响应面实验设计变量。经过数学模型预测与验证实验确定最优提取工艺为:乙醇体积分数80. 5%、回流时间1. 6h、水浴温度95℃。在0. 003 g/m L生药给药条件下,最优工艺的醇提物的抑菌率达到94. 29%。验证结果稳定且与预测值偏差低于2%,该工艺合理可行。优化后的工艺下,所提浸膏对枯草芽孢杆菌有良好的抑制作用,对大肠杆菌抑制作用较弱。     

负载白藜芦醇自组装多肽水凝胶的抗菌性能研究

[目的]制备一种负载白藜芦醇的自组装多肽水凝胶并探讨其抗菌性能。[方法]通过自组装制备多肽(FmocFFGGRGD)水凝胶和载有白藜芦醇的多肽水凝胶(Pep/RES);通过扫描电子显微镜和透射电子显微镜观察水凝胶的形貌和内部结构;通过流变仪检测水凝胶的流变性质;通过高效液相色谱检测Pep/RES的释放速率;通过细胞毒性试验研究该水凝胶的生物相容性;通过抑菌圈实验和活死细菌染色研究Pep/RES对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抗菌性能。[结果]多肽溶液可在30 min内自组装形成稳定的水凝胶,水凝胶内部的三维结构密度随多肽浓度的增加而增加,2.0wt%浓度的多肽水凝胶稳定效果最好。白藜芦醇从Pep/RES水凝胶中缓慢释放7 d释放量达到50%,Pep/RES浸泡液对NIH/3T3细胞表现出良好的生物相容性。Pep/RES水凝胶中负载的白藜芦醇浓度为512μg/m L时,对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径即可达到5.41±0.18 mm,但即使白藜芦醇浓度达到1 024μg/m L,对大肠杆菌的抑菌圈直径仅为4.27±0.22 nm。[结论]Pep/RES结构稳定,安全无毒,能缓释白藜芦醇,并对金黄色葡萄球菌具有显著抑制作用。     

若羌大枣多糖提取及分离工艺研究

目的：确定大枣多糖提取分离工艺的参数。方法：采用热水浸提法取多糖,乙醇沉淀法分离多糖。对液固比、浸提时间、浸提温度进行了单因素和L9（3^3）正交实验,并对提取过程中影响提取率的因素进行了统计分析。对多糖浸提液浓缩倍数、乙醇沉淀体积、醇沉时间对大枣多糖得率的影响进行了研究。结果：最佳提取工艺条件为：提取时间6h,料水比1：24,提取温度90℃。最佳分离工艺：浓缩倍数为8倍,4倍体积乙醇,醇沉12h,大枣多糖的得率最大。结论：实验结果为新疆次级大枣的深加工提供了可参数据。     

酶水解制备山药皮可溶性膳食纤维及性能测定

本研究以山药皮为原料研究纤维素酶法制备可溶性膳食纤维工艺条件,研究考察了料液比、加酶量、提取时间、提取温度、醇沉时间等因素,确定最佳工艺条件为:料液比1∶30、酶添加量4 U/m L、提取时间2 h、提取温度50℃,醇沉时间4 h。通过响应面法对工艺条件进一步优化,确定料液比1∶35,酶添加量5 U/m L,温度48℃时,SDF制备率最高达22.87%,较初始SDF含量7.96%提高近3倍。同时对制备的SDF性能进行测定,其持水性可达到10.74 g/g,溶胀力为6.45 m L/g,具备了一定的工业应用潜力。     

冬凌草提取物对金黄色葡萄球菌生物膜形成的抑制作用

研究了冬凌草提取物对金黄色葡萄球菌生物被膜形成的影响。采用结晶紫染色法评价了冬凌草提取物在不同质量浓度和不同添加时间下干预金黄色葡萄球菌生物被膜的作用。实验结果表明,冬凌草提取物对金黄色葡萄球菌的MIC和MBC分别为125μg/mL和250μg/mL,在亚抑菌浓度,冬凌草提取物对金黄色葡萄球菌生物膜形成的干预作用不明显;当冬凌草提取物质量浓度大于1倍MIC时,其对金黄色葡萄球菌生物膜形成的有明显的抑制作用,在生物膜形成的初始时间(0 h)添加药物抑制效果最佳,2MIC冬凌草提取物对金黄色葡萄球菌成膜的抑制率达到79%以上;24 h后添加抑制作用较弱,抑制率仅有60%左右。采用银染法和荧光染色法研究了冬凌草提取物对金黄色葡萄球菌生物膜的清除效果和抑制胞外多糖的合成,实验结果也表明,在亚抑菌浓度,冬凌草提取物对金黄色葡萄球菌生物膜的清除和胞外多糖合成的抑制作用很弱,当冬凌草提取物质量浓度大于1 MIC时,在生物膜形成的初始时间(0 h)添加药物,对金黄色葡萄球菌生物膜清除效果明显,胞外多糖的合成也受到显著的抑制。本研究为冬凌草提取物在食品防腐和保鲜,以及无抗饲料的广泛应用提供理论基础。     

沼泽红假单胞菌生物合成银纳米粒子及其抗菌作用

近年来,利用沼泽红假单胞菌合成银纳米粒子作为一种可靠和环境友好的方法出现。主要利用沼泽红假单胞菌的细胞滤液来还原银离子。制备的纳米粒子用紫外可见光谱(UV-vis)、X射线衍射光谱(XRD)和透射电镜(TEM)进行表征。含有银粒子溶液的UV-vis光谱显示在420 nm-460 nm处出现银纳米粒子的吸收峰。TEM图像表明所形成的银纳米粒子的粒径范围为5 nm-20 nm。纳米粒子的XRD图谱证明产物为金属银。所制备的银纳米粒子对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌作抑菌性试验。     

乌梅有机酸的提取工艺及其抑菌活性

优化乌梅中有机酸的提取工艺并对其抑菌活性进行了研究。首先通过单因素试验考察不同提取方法、溶剂浓度、提取时间、超声频率以及料液比对有机酸得率的影响,然后通过正交试验确定最佳提取工艺,并进行抑菌实验。获得最佳提取条件:超声波提取法、乙醇95%(体积分数)、料液比(g/m L)为1∶25、提取时间60 min以及提取频率为100 k Hz。验证试验结果表明:乌梅有机酸得率可达到12.17%;抑菌试验表明:乌梅提取液对枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和四联球菌有明显的抑制作用,最小抑菌质量浓度分别为15.625、15.625、31.25和31.25 mg/m L。本超声波提取法提取有机酸工艺用时少、得率高,且有机酸表现出较强的抗菌作用,为乌梅有机酸的深入研究和应用开发提供了一定的参考。     

基于万古霉素建立荧光酶联免疫吸附法检测金黄色葡萄球菌

以猪IgG作为捕获抗体固定金黄色葡萄球菌,修饰有万古霉素的量子点荧光微球作为"检测抗体",建立荧光酶联免疫吸附法检测金黄色葡萄球菌。文中制备了平均粒径为100 nm的量子点荧光微球并与万古霉素偶联;摸索了反应最佳盐离子浓度为0.01 mol/L,反应最佳pH为6.0。在该实验条件下,金黄色葡萄球菌的检测灵敏度为104 CFU/m L,与其他致病菌无交叉反应。以上结果表明,该方法可用于快速检测金黄色葡萄球菌,为金黄色葡萄球菌的临床监控和食品检测提供参考。     

响应面法优化超声波法提取红枣多糖工艺

以新郑红枣为原料,利用响应面法优化超声波提取红枣多糖工艺。以红枣多糖的提取率为参考指标,研究料液比、提取次数、提取时间3个因素对红枣多糖提取率的影响。在单因素试验的基础上,利用Box-Behnken中心组合试验设计及响应面分析,对料液比、提取次数和提取时间进行优化组合,考察3个因素对红枣多糖提取率的影响。结果表明:提取红枣多糖的最佳工艺条件为液料比16∶1(m L/g)、提取次数2次、提取时间38 min,在此最佳条件下,红枣多糖的实际提取率为7.25%;证明此工艺可应用于红枣多糖的大规模提取。     

抗菌肽CMIV变体的制备及对临床耐药致病菌作用的初步研究

应用新的融合方法制备抗菌肽ＣＭＩＶ变体;了解重组型抗菌肽变体对几株临床耐药菌的抗性。通过基因工程的手段,将合成的抗菌肽ＣＭＩＶ的ｃＤＮＡ与根据金黄色葡萄球菌Ａ蛋白（ＳＰＡ）的ＩｇＧ结合结构域设计并合成的ＺＺ结构域基因融合,在大肠杆菌细胞中表达;用制备的ＣＭＩＶ变体进行抑菌圈试验和液相试验。结果表明５ｕｌ（１０ｕｍｏｌ／Ｌ）抗菌肽可在大肠杆菌Ｋ１２Ｄ３１平板上产生直径１５ｍｍ的抑菌圈;抑制５０％大肠杆菌生长的抗菌肽浓度约０．２ｕｍｏｌ／Ｌ。６种青霉素抗性的革蓝氏阴性菌的抑菌圈直径在６～１３ｍｍ之间;而同样的条件下,对革蓝氏阳性菌——金黄色葡萄球菌的作用很弱。用新的融合方法可通过大肠杆菌体系制备有活性的抗菌肽变体,重组型抗菌肽有可能成为新一代的抗菌素     

金顶侧耳胞内多糖生物活性研究

对金顶侧耳Pleurotus citrinopileatus胞内多糖的热水浸提工艺进行研究,并研究了该多糖的抑菌活性以及对超氧阴离子自由基和亚硝基的清除作用。结果表明,金顶侧耳胞内多糖的最佳提取工艺为:提取温度60℃,液料比100:1,时间4h,此条件下多糖提取率可达17.65%。该多糖对埃希氏大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有抑制作用且对超氧阴离子自由基和亚硝基有较强的清除作用,说明该多糖具有明显的生物活性。     

微波辅助提取石榴皮多糖工艺优化及其免疫调节作用研究

优化石榴皮多糖的微波辅助提取工艺并初步探究石榴皮多糖的免疫调节作用。在单因素试验的基础上,以液料比、微波提取时间、微波功率为自变量,石榴皮多糖得率为响应值,利用响应曲面分析方法,确定石榴皮多糖提取工艺的最佳条件为:液料比44∶1 m L/g,微波提取时间10 min,微波功率450 W,在该条件下石榴皮多糖的得率为10.48%。通过MTT法、中性红法、NO释放量测定和黏附试验初步表明石榴皮多糖对RAW264.7巨噬细胞具有一定的免疫调节作用。     

2,5-二氨基-1,4-苯醌类化合物的抑菌活性

通过稀释和测量抑菌圈大小的方法,测定了10种不同氨基醌对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的生长抑制性。这些醌的DMSO溶液对三种菌的抑制程度随浓度的提高,效果越明显。当浓度达500 mg/L时,对三种细菌的生长完全抑制。在同样条件下,这些醌的DMSO溶液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果比枯草杆菌好,大肠杆菌对2,5-二氨基-1,4-苯醌类的敏感度略大于金黄色葡萄球菌。     

黄连内生真菌的分离鉴定及抑菌活性研究CSCD

为研究四川省峨眉地区黄连内生真菌多样性及菌株抑菌活性和机制,发掘黄连内生真菌资源,本研究从川黄连植株分离鉴定14株黄连内生真菌,分属于2纲,5目,7科,11属。根状茎、茎、叶和须根中的内生真菌定殖率分别是27.8%、56.7%、52.5%和39.6%。14株黄连内生真菌对金黄色葡萄球菌均有抑菌效果,Cop S01、Cop L01、Cop FR01的抑菌圈直径超过35 mm,纸片扩散法测得3株内生真菌发酵液对金黄色葡萄球菌均有效,Cop L01抑菌圈直径大于20 mm,抑菌效果最好,其发酵产物最低抑菌浓度(MIC)为10 mg/mL,最低杀菌浓度(MBC)为11 mg/mL。初步探究Cop L01抑菌机制发现该菌株发酵产物破坏金黄色葡萄球菌细胞膜,引起胞内核酸及蛋白外泄,造成金黄色葡萄球菌死亡。本研究表明川黄连内生真菌具有丰富的多样性,部分菌株及其发酵产物对金黄色葡萄球菌均表现出较好的抑菌效果,预示着黄连内生真菌Cop L01具有产生新型抗菌活性物质的潜力,为后续深入开发这一资源宝库提供了新的菌种和思路。