从天然橡胶中提取白坚木皮醇的研究

目的：选择适合于工业化生产的从胶清中提取白坚木皮醇的方法。方法：运用普通的化工技术对胶清进行凝固、浓缩和净化处理,再采用化学拆分法（Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ）从肌醇衍生物中提取白坚木皮醇。结论：本项研究得出的提取方法,其提取率约占胶清重量的０．２％～０．３％。提取的产品纯度达９７％以上,ＦＷ（ＣＥ）１９５,ｍｐ．１９１℃,「α」Ｄ＾２９－８０．３。该提取方法可以进行工业化生产。     

亲水色谱法分析白坚木皮醇的研究

白坚木皮醇是天然橡胶制胶乳液中存在的一种具有极高药用价值的天然化合物,多存在于制胶废水中。由于其极性高且溶于水,在常用的反相液相色谱柱中保留值较低,分析和分离都较困难。本研究选用SHI-SEIDO PC HILIC色谱柱建立了亲水色谱法(HILIC)测定白坚木皮醇的方法。以乙腈-水(V/V,60/40)为流动相,二极管阵列(DAD)为检测器时,检测波长为190 nm,白坚木皮醇的保留因子为1.07,线性范围为0.05～4mg/mL,检测限0.01 mg/mL。     

有机膜在谷氨酸发酵液分离中的应用研究

目的：采用有机微滤膜和超滤膜连续过滤谷氨酸发酵液,去除菌体蛋白,以利于后续的提取操作。方法：利用微滤膜去除菌体及大分子蛋白等杂质,微滤透过液进入超滤膜系统,进一步去除小分子蛋白及色素等,再利用浓缩连续等电法进行提取,得到谷氨酸。结果：发酵液经过滤后,可溶性蛋白、色素去除率分别可达到86.7%和63.2%,谷氨酸的损失率仅为0.6%;谷氨酸的提取收率和纯度分别可达到95%和99%。结论：利用有机膜系统处理谷氨酸发酵液,可高效去除发酵液中的菌体蛋白和色素等,明显地提高了谷氨酸的提取收率及纯度。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳方法的一些改进

聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质时所使用的“高pH系统”的电极缓冲液,通常是Glycine-Tris缓冲液。这两种试剂比较贵,虽然可以重复使用,但消耗量大,不利于普及。此外凝胶的常规染色和脱色需要较长的时间。作者在研究天然橡胶蛋白质的分离分析时,对这些方法作了一些改进:使用“改进高pH系统”的电极缓冲液——硼酸、NaOH缓冲液、改进分离凝胶的制备,并采用了快速染色和脱色,缩短了试验的时间。本法应用于人血清蛋白的测定,亦得到满意的结果。材料与方法 1.天然橡胶的蛋白质新鲜天然胶乳用2％醋酸凝固(5∶1v/v),用压榨的方法取出天然橡胶乳清(乳清相当于人血清),可溶性蛋白质存在于乳清中。 2.正常人血清湛江医学院附属医院提供。     

高山森林林窗位置和附生植物去除对倒木总酚和缩合单宁含量的影响

倒木分解是森林生态系统中重要的养分循环过程,倒木中的难分解物质对土壤有机质积累具有积极作用。但关于森林林窗和附生植物对倒木难分解物质含量的影响还不清晰。为了理解林窗更新及附生植物生长对倒木总酚和缩合单宁含量的影响,2013年8月在川西高山原始森林进行样地布置,在进行3年附生植物去除处理后,2016年8月在不同林窗位置（林窗、林缘和林下）下两种处理（附生植物去除和保留）不同腐解等级（I-V）进行岷江冷杉（Abies faxoniana）倒木不同结构（心材、边材和树皮）样品采集,分析其总酚和缩合单宁含量。结果表明：树皮总酚和缩合单宁含量显著高于心材和边材,树皮总酚和缩合单宁含量随腐解等级变化差异不显著;森林林窗对Ⅲ-V腐解等级心材和边材总酚含量具有显著影响,但对心材和边材缩合单宁影响差异不显著,林窗对倒木树皮总酚和缩合单宁含量影响差异极显著且两者含量特征均表现为林窗 > 林缘 > 林下;附生植物去除处理降低了心材缩合单宁和边材总酚含量,增加了倒木边材缩合单宁含量。附生植物去除处理对树皮影响和林窗位置存在交互作用,林缘和林下的倒木附生植物去除显著降低了树皮总酚和缩合单宁含量。此外,不同林窗位置的温度差异是导致树皮总酚和缩合单宁含量变化的主要原因,附生植物去除对倒木pH的影响也可能是影响倒木总酚和缩合单宁含量的原因之一。由此可见,高山森林林窗更新及附生植物生长会显著影响倒木难分解物质含量变化特征,为进一步了解倒木分解过程在养分循环及对环境的响应提供了新的角度。     

三孢布拉霉发酵生产番茄红素的提取工艺及残留溶剂去除

用超声波皂化法从三孢布拉霉(Blakeslea trispora)发酵菌丝中提取番茄红素,对皂化条件、超声处理时间、提取温度和时间进行优化,得到番茄红素含量大于0.5%的番茄红素油树脂,总提取率达92.9%。提出溶剂提取与SC-CO2去除溶剂的技术路线,使番茄红素粗提物的溶剂残留符合标准。     

中水技术污水处理工艺去除病毒的效果

中水技术开发既可缓解水资源的紧缺,又能改善城市环境。本文报道用石英粉吸附/洗脱和浓缩棒脱水的二步浓集水病毒技术(回收率为25.4～37.3％),研究中水技术不同处理工艺去除病毒的效果。结果,二级处理可去除掺入病毒的98.9％,结合三级处理的混凝沉淀和过滤,可去除99.976％,再加活性炭吸附或加氯消毒,所得中水分别去除掺入病毒的99.986％和99.991％。经首都机场中水道试验厂水样检测表明,中水中未检测到病毒(<0.23PFU/L)。     

离子液体微波辅助提取降香檀叶中鹰嘴豆芽素A和染料木素

以降香黄檀可再生资源——叶子为原料,利用离子液体微波辅助提取技术对鹰嘴豆芽素A和染料木素进行提取。通过单因素实验,3因素3水平的BBD(Box Behnken design)实验,对提取条件进行优化,确定了离子液体微波辅助提取降香檀叶中鹰嘴豆芽素A(biochanin A)和染料木素(genistein)的最佳提取工艺条件：1.00 mol·L^-1［C₄MIM］Br,提取温度为56℃,液固比18∶1,提取时间为11 min,提取功率300 W。在最佳提取条件下,鹰嘴豆芽素A和染料木素平均提取率分别可达1.598和0.939 mg·g^-1。     

微波辅助提取木豆根中染料木素工艺

以木豆根为原料,利用微波辅助提取技术进行提取,在单因素实验的基础上对提取条件进行了考察,根据BBD(Box-Behnken design)实验设计原理,采用3因素3水平的响应面分析法,以木豆根中主要异黄酮染料木素(genistein)为指标,对提取过程进行优化,得到最佳工艺参数为：提取温度为68℃,固液比为32∶1 mL·g^-1,乙醇浓度为78%,提取功率700 W,提取时间15 min。在最佳提取条件下染料木素的提取率可达到0.465±0.032 mg·g^-1。本研究对于微波提取技术的应用及木豆根的开发和利用都具有显著的意义。     

超滤技术在蛋白质分离纯化中应用

超滤是一种非常实用的膜分离技术,在生物工程制药领域,可有效去除发酵液中的内毒素,实现蛋白质溶液快速脱盐、脱醇和浓缩等。本文仅对超滤技术在蛋白质分离纯化中的应用进行综述。     

松突圆蚧基因组DNA提取方法的比较

分别采用醋酸钾(KAc)法、十二烷基硫酸钠-蛋白酶K(SDS-PK)消化法、十六烷基三乙基溴化铵(CTAB)法及DNA提取试剂盒(吸附柱型)对单只松突圆蚧的基因组DNA进行提取。同时针对盾蚧科昆虫的特点,在提取前利用氯仿和解剖针去除样品表面的介壳。结果表明,用同种提取方法提取的经氯仿处理与未经处理样本的提取效果无明显差异,而采用解剖针去除介壳的样本提取效果较好。所采用的4种提取方法均能从新鲜标本中提取出DNA,其中CTAB法提取的DNA量较多,而SDS-PK法提取的DNA质量较好。     

大叶千斤拔的微波预处理-超声波提取工艺及其抑菌活性研究

对大叶千斤拔的微波预处理-超声波提取工艺及其抑菌活性进行研究。以染料木素得率和染料木苷得率为考察指标,通过单因素实验与正交实验优选大叶千斤拔中染料木苷和染料木素的最佳提取工艺,并对微波预处理-超声波提取法、超声波提取法和热水浸提法进行了对比研究,同时研究大叶千斤拔提取液和染料木素的抑菌活性。最佳提取工艺条件为:微波功率700 W,超声波功率200 W,解析剂比7∶1(m L/g),微波时间180 s,乙醇为提取溶剂,乙醇体积分数90%,液料比35∶1(m L/g),提取温度80℃,提取时间15 min。该工艺条件下,染料木苷得率为0.9047 mg/g,染料木素得率为0.4834 mg/g,总得率为1.3881 mg/g,优于超声波提取法和热水浸提法。在实验范围内染料木素和大叶千斤拔提取液对3种常见菌的抑制作用大小均为金黄色葡萄球菌枯草芽孢杆菌大肠杆菌,但染料木素对大肠杆菌无明显抑制作用。微波预处理-超声波提取法具有省时高效的特点,特别适用于大叶千斤拔染料木苷和染料木素的提取,大叶千斤拔提取液具有良好的抑菌活性,可作为天然的食品防腐剂。     

LC-MS/MS法分析北五味子中的木脂素成分

建立了同时测定北五味子果实中6种木脂素含量的高效液相色谱-离子阱质谱方法。样品经正己烷提取,提取液过滤后通过旋转蒸发仪浓缩近干,用甲醇溶解,然后采用LC-MS/MS进行测定。6种木脂素在0.005～10.0 mg/g范围内呈良好线性,相关系数为0.9907～0.9998。6种木脂素的定量限为4.0×10-4～1.5×10-3mg/g,平均添加回收率为81.01%～92.45%,相对标准偏差为3.05%～7.98%。采用本文所建立的方法对北五味子果实进行测定,获得了很好的分离效果,分析结果令人满意。     

迟钝爱德华氏菌RNA提取及痕量基因组DNA去除方法探究

迟钝爱德华氏菌EIB202是一类细胞壁结构特殊的革兰氏阴性菌,高质量RNA提取相对较难。为了从转录组水平研究这类致病菌的致病机理,需要摸索有效的RNA提取及RNA样品中痕量基因组DNA去除方法。对常规RNA提取步骤进行改进,增加PBS清洗、反复冻融及较高浓度溶菌酶处理等步骤;另外,利用小体系基因组DNA去除系统,Mg2+与Mn2+协同激活DNase I去除RNA样品中基因组DNA污染。利用优化方法提取的RNA在质量及浓度(1 740 ng/μL)方面均有了显著改善,并建立了一套完全去除RNA样品中痕量基因组DNA污染的程序。     

猪瘟DNA疫苗制备工艺研究

猪瘟DNA疫苗制备工艺的建立是其走向产业化 ,从而在猪瘟防制中发挥作用所需解决的关键问题之一。以猪瘟DNA疫苗质粒pVAXE2IL2转化大肠杆菌后 ,转入发酵罐发酵培养。将菌体悬浮裂解和中和后 ,经澄清和浓缩处理 ,上阴离子交换色谱和体积排阻色谱进行纯化 ,首次提纯出符合药学规格的猪瘟DNA疫苗 ,且整个工艺回收率达 64.53% ,从而表明所建立的工艺为猪瘟DNA疫苗规模化生产奠定了技术基础。     

用氢氧化钾和过氧化氢从甘蔗渣中提取木聚糖的条件优化及甘蔗渣木聚糖酶解产低聚木糖的分析

甘蔗渣含有约40%纤维素和20%半纤维素,是生物炼制生产高附加值生化产品的良好原料。本研究通过响应面分析实验优化了氢氧化钾和过氧化氢处理甘蔗渣从中提取木聚糖的工艺参数:氢氧化钾浓度、过氧化氢浓度和处理温度,以甘蔗渣木聚糖提取率为考察指标,获得处理甘蔗渣的最优条件:10.0%KOH,2.36%H_2O_2,50℃,处理时间6 h,甘蔗渣木聚糖提取率达到78%。用重组内切木聚糖酶水解提取的甘蔗渣木聚糖生产低聚木糖,主要包括木二糖和木三糖,在底物浓度36 g/L、反应温度36℃、p H 5.0、木聚糖酶添加量800 U/g的条件下,水解反应24 h,木聚糖产生低聚木糖的转化率为43%。     

生物基橡胶和汽车轮胎及材料开发进展

介绍了基于生物基或生物质的原料开发生物基材料的情况,着重对天然橡胶的可替代植物来源以及生物基橡胶、汽车轮胎及材料的国内外开发进展进行了简要分析。1生物基橡胶脱颖而出橡胶有两种主要类型,它们是来自橡胶树提取的天然橡胶和从原油生产的合成橡胶。随着全球汽车保有量的增加,橡胶的需求量每年也在不断攀升,一方面天然橡胶很难提高生产量;另一方面,尽管石油基异戊二烯用作合成橡胶的中间材料,它可部分替代天然橡胶,但受制约的是其生产能力。     

乳清蛋白质的生物学特性和保健功能

本文综述了乳清蛋白质分离、改性技术的最新进展,乳清蛋白质的理化和生物学特性,乳清蛋白质的功能性及应用开发的前景。     

用于双向凝胶电泳分析的奶牛乳清蛋白样品制备方法的比较

为建立适用于双向凝胶电泳分析的奶牛乳清蛋白的制备方法,分别比较了直接裂解法、三氯乙酸-丙酮法,Trizol法和2-D clean up kit法对奶牛乳清蛋白提取效率和双向凝胶电泳图谱的影响.用2-D Quant Kit试剂盒测定蛋白浓度,分别用十二烷基磺酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳和双向凝胶电泳进行奶牛乳清蛋白的分离.蛋白定量结果表明,2-D clean up kit法产率最高,直接裂解法、三氯乙酸-丙酮法次之,trizol法产率最低;十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明,2- D clean up kit法提取的蛋白质量最高;双向电泳图谱分析表明,2-D clean up kit法得到的蛋白图谱与另外3种方法相比,检测到的蛋白点最多,图谱背景清晰,分辨率最高.结果提示,2-D clean-up法相对最适合于双向凝胶电泳分析奶牛乳清蛋白样品的制备,尤其对一些低丰度高分子量蛋白的分离效果较为明显.     

免疫胶体金法提取环境标本中细菌DNA技术*

将抗DNA单克隆抗体标记在胶体金颗粒上制成免疫胶体金试剂,提取标本中DNA,直接用于PCR检测,从而建立一种简单、快速、高效的免疫胶体金方法提取环境标本中的DNA。结果表明:应用免疫胶体金试剂可有效去除环境标本中PCR抑制剂,浓缩模板,提高PCR检测敏感度3～4个数量级。操作步骤简单,无需使用有机溶剂,避免环境污染,吸附了DNA的免疫胶体金可直接用于PCR扩增。研制了免疫胶体金试剂并确定其最佳反应条件,有效提高PCR技术在检测现场环境标本中的敏感性和实用性。