两对姊妹线虫成虫生殖系细胞学特征研究

采用DAPI-荧光染色法研究松材线虫、拟松材线虫、李氏长尾线虫和吴氏长尾线虫等两对形态相似的姊妹线虫的成虫生殖系细胞学特征,描述并且比较了两对姊妹线虫之间以及姊妹线虫对之间的成虫生殖系细胞排列方式和贯穿于生殖细胞分裂过程中的染色体变化行为,同时也图示了这4种线虫的成虫生殖系细胞核形态图和染色体形态图。研究表明,利用线虫成虫生殖系细胞学特征来探讨线虫种类之间甚至个体之间的相互关系,将可能便于人们更好地界定线虫"种"的范围及解释线虫进化和系统发育过程;研究还表明,经DAPI-荧光染色的生殖系细胞排列模式可能可以作为一种较好的线虫分类特征。此外,本研究的4种线虫的染色体数目均为2n=12。     

四种蛔目线虫染色体和DNA含量的比较研究

蛔目（Ascaridida）是寄生线虫中较大的目,全部种类都寄生于脊椎动物,有些还是严重危害人畜健康的寄生虫病的病原体。自从1883年Beneden首先研究马蛔虫染色体以来,关于蛔目线虫的遗传学研究逐渐增多。但由于蛔虫组织较难固定及染色体制片技术的限制,对某些种类的染色体数目和形态,各作者报道差异较大^[7,10],而国内的研究报告甚少^[1]。为有助于弄清蛔目线虫各虫种的遗传组成,我们采集了广州地区较常见的人蛔虫（Ascaris lumbricoides Linnaeus, 1758)、猪蛔虫（A. swum Goeze, 1782)、鸡蛔虫［Ascaridia galli(Schrank,1788) Freeborn, 1923]和犬弓首线虫[Toxocara cams Werner,1782) Stiles, 1905]进行了染色体的研究,同时我们还应用显微分光光度计对4种线虫生殖细胞DNA相对含量进行了比较测定,现报告如下。     

蛔目线虫染色体研究

蛔目(Ascaridida)是寄生线虫中较大的目,其种类均寄生于人和其他脊椎动物体内,有些虫种还是严重危害人畜健康的寄生虫病的病原体。自从1883年Beneden首先报道马蛔虫的染色体以来,关于蛔目线虫的染色体研究逐渐增多。各作者的研究主要集中于对蛔目线虫     

线虫基因显微注射和整合技术——设备、操作与指南

秀丽线虫(Caenorhabditis elegans)是研究动物遗传、个体发育和行为活动的重要模式生物,其主要优点是能够研究从分子细胞水平到整体系统水平的相关生命活动的作用机理．其中基因显微注射和整合是该领域的核心技术,广泛应用于研究线虫的基因表达、功能和基因间的相互作用等．显微注射技术使用尖端开口直径为微米级的玻璃微管,将所研究的目的DNA注射进线虫的性腺．注射的DNA被成熟的卵细胞吸收,以染色体外遗传物质的形式存在．但这种形式并不能稳定遗传,可采用基因整合技术将外源基因整合到染色体上,得到稳定遗传的线虫种系．显微注射是一项精细的实验技术,影响实验成功与否的因素较多,实际操作需要有一定的经验．在实践过程中逐步改进和完善了这项技术,在此主要介绍线虫显微注射技术的操作过程、创新方法以及注意细节．     

线虫Distolabrellus veechi的生殖系统及配子发生

以线虫Distolabrellus veechi的卵巢和精巢为材料,用甲醇固定,DAPI荧光染料对细胞核进行染色,通过Normaski荧光显微镜对其生殖系统结构、性细胞染色体数目、体细胞染色体数目进行了观察.结果显示了该线虫雌虫和雄虫生殖细胞减数分裂Ⅰ前期的细胞核的变化特征;减数分裂Ⅰ前期丝球期雌、雄生殖细胞的二价体数目均为6;卵细胞染色体数目为6,精细胞染色体数目为5或6,其性别决定机制为XX/X0型;体细胞染色体数目为11(雄虫)或12(雌虫)[动物学报 54(3):500-509,2008].     

新线虫属三个种的核型比较研究：小杆目：斯氏线虫科

以格氏线虫(NC513,85011)、苹果蠢蛾线虫(DD-136)及毛蚊线虫的幼胚、精巢及卵巢为材料,用地衣红染色,压片法制片,其染色体组型进行了研究。结果表明,三种线虫的染色体数目均为雌性2n=10,雄性2n=9。但它们的核型并不一致,可概括为以下公式: 格氏线虫(NC513,85011):2n=4m+6t(),2n=4m+5t() 苹果蠢蛾线虫(DD-136):2n=8m+2t(),2n=7m+2t() 毛蚊线虫 :2n=6m+4t(),2n=5m+4t() 此外,本文还讨论了三种线虫的亲缘关系。     

性别决定基因

在个体发育过程中,动物的种类不同,性别决定的方式亦有差异。这取决于胚胎早期不同的性别初级信号对性别决定基因的启动和活化,活化的性别决定基因启动性别分化基因的表达,使个体的性别表现出来。本文略述与线虫、果蝇等的性别决定有关的基因。线虫(Caenorhabditis elegans)体长约1mm,雌雄同体,自体受精。有两条 X 染色体(XX);XO型线虫为雄性。线虫(C.elegans)性别决定的初级信号是 X 染色体与常染色体的比率(X∶     

格氏线虫三个品系染色体组型的研究

本文以精巢、卵巢和幼胚为材料,丙酸地衣红染色,用压片法制片,对格氏线虫NC513、85011和KG的染色体组型进行了研究。结果表明,它们的染色体数目均为雌性2N=10,雄性2N=9。其染色体组型均为:2N=4m+6t(♀),2N=4m+5t((?))。由此可见,它们都是属于格氏线虫的三个不同品系。     

黄鳝体内寄生胃瘤线虫的染色体核型及G-带分析

采用常规空气干燥法制片,对寄生于黄鳝(Monopterus albus)体腔内的胃瘤线虫(Eustrongylidesignotus)染色体核型进行分析。结果表明:胃瘤线虫体细胞有12条染色体,为二倍体,核型公式为2n=12=10 m+2 sm。由5对常染色体和1对性染色体组成,性别决定模式为XX-XY,其中X、Y和1～4号染色体都为中着丝粒染色体,5号为亚中着丝粒染色体。每对染色体都有特定的G-带带型。     

寄生线虫染色体的常规制片技术

寄生线虫中有相当一部分能引起严重的寄生虫病,对人畜健康危害较大。从遗传学角度研究寄生线虫,对防治寄生虫病有积极意义。目前国内尚未见有关寄生线虫染色体常规方法的报道。作者参照吴政安、寺崎邦生等和Sakaguchi等提出的方法,根据本实验室具体条件,结合短期培养及空气干燥技术制片,获得了较好的效果,现简介如下。     

中华卵索线虫雌雄寄生后期幼虫基因差异表达分析

索科线虫是一类具有很大生防潜力的昆虫(如棉铃虫等)天敌资源,但由于其体外培养尚未获得成功,阻碍了商业化生产和大规模应用,究其原因主要是体外培养的线虫不能完成雌雄性别分化。因此,研究该类线虫性别分化机制成为近年本领域的热点课题。该文以中华卵索线虫为实验材料,采用mRNA差异显示的方法,分析了中华卵索线虫性别分化关键时期雌、雄寄生后期幼线虫的基因表达差异。在雌雄线虫体内得到具有表达差异的基因片段20条。其中8条在雄虫体内特异性表达,12条在雌虫体内特异性表达。利用信息生物学技术对所分离到的差异片段进行了序列分析。其中,Ensembl分析发现4个片段与秀丽线虫X染色体具有可匹配片段,推测这些片段可能是影响中华卵索线虫性别分化的重要基因。这些结果将为后续研究提供思路。     

RNA与X染色体失活的后成调节

生物体内,由于性别的差异,两性细胞中的Ｘ染色体数目不同。为了平衡具有不同Ｘ染色体数目的细胞中Ｘ连锁基因的表达量,生物体在进化过程中引入了剂量补偿机制（ｄｏｓａｇｅｃｏｍｐｅｎｓａｔｉｏｎ）。在线虫中,两性体的染色体浓缩和分离与一组蛋白复合体有关,这组...     

线虫PCR:直接针对秀丽线虫进行PCR扩增基因组DNA的新方法

目的:直接针对秀丽线虫进行PCR反应,以便快速扩增基因组DNA,从而提高钓取目的基因和鉴定基因组是否发生突变的效率.方法:根据生物信息学分析,针对不同基因设计单重或多重PCR引物;在不含砌DNA聚合酶的PCR反应体系中加入蛋白酶K消化秀丽线虫染色体中的组蛋白,然后加入Taq酶,直接针对野生型或突变型秀丽线虫个体进行PC...     

斯氏线虫共生细菌一亚种新纪录

近年来,国内开展了斯氏线虫和异小杆线虫共生细菌的研究,但未见有关亚种鉴定的报道。本文报告了从我国采到的一斯氏线虫(编号85011)中分离到的一株共生细菌,经研究,该菌株属Xenorhabdus nematophilus subsp.poinarii。材料与方法一、线虫来源斯氏线虫85011(Steinernema sp.85011)采自广东海陵岛。格氏线虫(S.glaseri)KG品系从澳大利亚引种。二、菌株分离按Akhurst(1980)方法。经柯氏(Koch's)定律检验。三、菌株鉴定有关鉴定方法见文     

鱼类寄生毛细科线虫－新属新种的研究

作者在武陵山地区的鱼类寄生线虫调查工作中,发现一种毛细线虫,经研究,为一新种,定名为岁新毛细线虫,新种(Neocapillaria phoxini sp.nov.).根据其特征,为此建立一新属──新毛细线虫属.       

线虫内寄生真菌资源及生防应用研究进展

线虫内寄生真菌是一类能通过产生各种特殊孢子寄生游离线虫的食线虫真菌,对维持自然界线虫种群及其数量起到了关键作用,是线虫的重要天敌,也是研究物种多样性的重要材料,因此具有特殊的研究意义和经济价值.目前许多学者主要研究捕食线虫真菌对线虫的侵染力.这种食线虫真菌的侵染力主要针对二龄幼虫,而线虫内寄生真菌对线虫的各个时期都有侵染力.本文综述了线虫内寄生真菌物种资源现状,孢子形态多样性、侵染方式多样性、生活史多样性和寄主多样性,以及具有生防潜力和已商品化的生防菌的生防应用,探讨了在物种资源的发掘、物种分类鉴定和生防制剂商品化存在的问题及其对策,并展望了研究前景.     

SEC-10在秀丽线虫逆行行为中功能的研究

秀丽线虫(Caenorhabditis elegans)是一种研究行为和神经系统相互关系的良好的模式生物,可以在实验条件下给予它物理、化学等多种外部刺激,也可以在分子水平改变其基因结构以改变线虫的行为方式,从而进一步研究神经系统中与行为相关的分子机制.以sec-10突变为遗传背景,采用一种秀丽线虫逆行行为的简单测定方式,研究发现sec-10突变导致线虫逆行动作增多,初步探讨了在突变体线虫的神经系统中重新表达野生型SEC-10可以回复该逆行行为缺陷.     

昆虫病原线虫应用研究概况

大规模工厂化离体培养技术的发展,活跃了昆虫病原线虫的实际应用研究.近20年来在生物防治实践和产业化方面已经取得了令人鼓舞的进展,已成为当前国际生防领域研究热点之一.我国在昆虫病原线虫的实际应用方面也进行了大量研究.本文从昆虫病原线虫对土栖性、钻蛀性和叶面害虫的防治效果,以及影响线虫应用的环境因子的分析,简要概述了昆虫病原线虫的应用进展,并探讨昆虫病原线虫进一步应用的前景.     

武昌罗索线虫的研究与展望

武昌罗索线虫Romanomermis wuchangensis Bao.作为一种昆虫病原线虫,在昆虫的生物防治中起着重要作用。文章综述90年代以来我国关于武昌罗索线虫的生物学特性、田间应用、体内外培养以及生化与分子生物学研究进展,并对武昌罗索线虫今后的研究提出了建议。     

氮磷输入对过度放牧退化草原土壤线虫群落的影响

线虫是陆地生态系统中数量最多的一类无脊椎后生动物,在土壤碎屑食物网中占据多个营养级,并在能量流动和养分循环中发挥重要的生态功能.土壤线虫的群落结构和多样性水平可以反映生态系统功能的变化.多年来,过度放牧等不合理的开发利用导致我国大面积的草原处在不同程度的退化之中,外源性养分输入是维持其养分平衡进而恢复其生态和生产功能的重要措施.本研究以内蒙古锡林郭勒退化草原为对象,就氮磷输入对土壤线虫丰度和群落结构的单独效应和交互效应进行了研究.本研究获得线虫38属,其中垫咽属、滑刃属、索努斯属和盾垫属是该退化草原线虫群落优势属.氮输入降低了土壤线虫总丰度、捕食杂食线虫丰度以及植物寄生线虫丰度,而磷输入提高了土壤线虫总丰度、食真菌线虫丰度、捕食杂食类线虫丰度以及植物寄生线虫丰度,氮输入抑制了磷输入对线虫总丰度、捕食杂食线虫和植物寄生线虫丰度的促进作用.氮磷输入对线虫多样性无影响,可能与不同养分输入下稳定的植物群落多样性有关.氮输入显著提升了退化草原线虫成熟度指数,降低了植物寄生线虫成熟度指数(PPI),并且能缓解磷输入对PPI和瓦斯乐斯卡指数的负面作用,表明氮输入提高退化草地土壤健康程度,促进线虫群落和食物网的稳定性.上述研究结果有助于从土壤生物学角度理解氮磷输入对退化草地恢复的影响机理.