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薛建华 《生物化学与生物物理进展》1986,13(1):78-79
垂直板凝胶电泳技术,在生物学和医学研究中使用日益普遍。然而,与水平电泳相比,由装置的垂直状态产生的液面高差,在制板电泳过程中易出现胶液或电极液渗漏,导致电泳失败。因此,发展一项简便可靠的防漏技术实有必要。本文介绍一种以聚丙烯酰胺凝胶(PAG)作为防漏介质的垂直板电泳装置和胶封技术,使用效果满意。一、电泳装置由上、下电泳槽(图1)和凝胶板模(图2)二部分组成。电泳槽用有机玻璃制作。下槽是一只上口敞开的 相似文献
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用凝胶平板电泳分析多个样品时,必须保证各板电泳条件严格一致。因此,最好是在同一电泳槽中做许多块平板的同时电泳。Anderson等的多重平板电泳装置较好地解决了这一问题,但要使用大量铂丝,而且结构复杂。我们结合自己的条件,设计制作了一台大型潜水式电泳槽,结构比Anderson等人所制做的装置简单得多,成本也低,而效果令人满意。电泳槽结构见图1。电极板是将电解用高 相似文献
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用凝胶平板电泳分析多个样品时,必须保证各板电泳条件严格一致.因此,最好是在同一电泳槽中做许多块平板的同时电泳.Anderson等的多重平板电泳装置较好地解决了这一问题,但要使用大量铂丝,而且结构复杂. 我们结合自己的条件,设计制作了一台大型潜水式电泳槽,结构比Anderson等人所制做的装置简单得多,成本也低,而效果令人满意. 电泳槽结构见图1.电极板是将电解用高 相似文献
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本电泳装置经过多次实验,表明仪器性能良好,可满足各种电泳的要求。它具有活动的上槽,能调节上下的距离直至250毫米,槽的两侧至少可同时做二块凝胶板,便于比较实验。凝胶板的大小和厚薄可用不同长度的玻板和不同规格的衬条(宽窄、长短、厚薄)来调节凝胶模框。本电泳槽不仅能做单向或双向电泳,还可作盘状电泳。因此是一种多用途的电泳装置。 相似文献
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从琼脂糖凝胶中回收 DNA片段是重组 DNA实验中经常需要进行的操作。这里介绍一种用自制的微型电泳槽电泳回收 DNA片段的方法。取 4块各长 1cm,宽 0 .5cm,厚 2 mm的聚乙烯条板 ,用氯仿将它们粘合到一块长 2 cm,宽 1cm的聚乙烯板中央 ,制成一四周密闭的小槽。在相对的两块挡板内侧底边各置一条铂金丝 ,两端用蜡固定。两条铂金丝在相对的两角都向上延伸至顶部并翻出 ,用蜡固定在挡板外侧。这样就制成了一个微型电泳槽。铂金丝外露部分可用带导线的夹子与电泳仪相联 ,通电后可进行潜水电泳。DNA样品按常规的琼脂糖凝胶电泳分离后 ,用 EB染… 相似文献
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为更好地解决灌制聚丙烯酰胺平板凝胶时的漏胶问题,我们在多种方法的基础上提出了一种防止漏胶的更为简便可靠、经济实用的新方法。 1 材料和方法 在台面上平放一与所制胶板同样大小的玻板,取一比凝胶板略大一些的塑料袋平放于玻板之上,将两 相似文献
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植物生理各领域都大量地运用电泳技术来进行生理生化分析。但目前普遍使用的管状或板状电泳都各有其不足。管状电泳的操作费工费时,要逐管地进行封头、灌胶,加水做平面以及玻璃管在电泳槽上的安装拆御等等工作。板状电泳则要进行防漏胶处理,如操作不当则易失败。我们经反复试验,吸取 相似文献
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一、琼脂箱凝胶的制备
1.电泳槽与点样孔梳的选择进行琼脂糖凝胶
电泳的电泳槽通常有水平板型和垂直板型两种。这里
我们选择较简便,应用最广的平板型电泳槽。点样孔
杭可根据样品数目、点样量等作出选择。对于一定量
的样品来说.,宽而薄的梳子可产生较细而平直的带,适
合于酶切图谱的分析等,较狭的梳子可增加待测样品
检出的灵敏度,适合于印迹杂交检测哺乳类基因组中
单拷贝基因或DNA样品的量较少等情况。点样孔梳
选定后,再根据凝胶的厚度,就可算出每一点样孔中可
以加入的样品体积。 相似文献
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武廷章 《生物化学与生物物理进展》1992,19(3):239-239
在薄层凝胶等电聚焦电泳技术中,制胶可谓是关键的一步。如果制胶失败,将造成时间上的浪费和经济上的损失(凝胶中所用的两性电解质载体——安福林的价格较昂贵)。如果制成的凝胶薄厚不匀或无支撑物,将会直接影响实验结果或给实验操作带来麻烦。我们针对这种情况,结合实验教学,摸索出一种快速、简便而效果较好的制胶方法。现简要介绍如下 相似文献
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蛋白样品的垂直板SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE)不但是一种最常用的蛋白分析方法,也经常用于蛋白质的制备。从电泳凝胶上纯化蛋白,一般都要先用考马斯亮蓝染色,然后切下所需的蛋白条带。这里介绍一种可以不染色,直接从SDS-PAGE制备凝胶上准确切割所需蛋白条带的方法。与染色后切胶的方法相比,这种方法简单、省时,分离到的蛋白容易从胶中洗脱回收,并可明显提高回收率,而且省去了令人烦怖的从回收的蛋白中脱去染色时结合的染料的问题。作者曾用此方法分离过多种蛋白,屡试不爽。这种方法与一般的SDS-PAGE制备电泳的差别主要在电泳结束后对凝胶的处理上。 相似文献
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改良聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA 总被引:8,自引:0,他引:8
本文介绍了应用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA的改进方法。与以往方法相比,本方法从配制凝胶储备液,无需封口的水平灌胶,适当地提高电泳的电压梯度,采用改良银染法检测,省却凝胶固定,银染法DNA的纯化方法,及溴化乙锭染色法的操作等一系列改进措施,使聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA的操作得到简化,更便捷,并减小了对人与环境的毒害作用。 相似文献
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常规聚丙烯酰胺凝胶电泳快速检测胰蛋白酶抑制剂的方法 总被引:3,自引:0,他引:3
SDS—PAGE- 明胶电泳是检测蛋白酶抑制剂的常用方法,基本原理为:聚丙烯酰胺凝胶中加入SDS和明胶, SDS使蛋白酶抑制剂发生可逆变性。电泳完毕,用 Triton X- 100恢复凝胶板中蛋白酶抑制剂的活性,凝胶板置于蛋白酶溶液里保温,含蛋白酶抑制剂部位的明胶不被蛋白酶水解而呈现蛋白染色带。SDS-PAGE一明胶电泳检测蛋白酶抑制剂时,在同一块凝胶板上可同时检测酸性、碱性及中性的蛋白酶抑制剂,但电泳后处理(包括复性,酶解,漂洗和染色)时间长(约20h),而且对于同一样品中分子量相近的蛋白酶… 相似文献
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聚丙烯酰胺凝胶薄板电泳,是进行微量DNA分析的一种有效方法。它能快速鉴定DNA的迁移位置,并将分子量大小不同的DNA片段进行分离。通常DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳均采用2—3毫米厚的平板胶,由于板胶厚度大,因 相似文献
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介绍了一种将聚丙烯酰胺凝胶固定在电泳夹板上的蛋白质电泳方法.通过此方法蛋白质电泳可以在0.4 mm厚的聚丙烯酰胺凝胶上进行.实验证明,经此方法处理的玻板结合凝胶非常牢固,在电泳后的所有处理步骤中都不会发生凝胶脱落现象. 相似文献
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聚丙烯酰胺凝胶电泳的一种辅助辨型方法 总被引:1,自引:0,他引:1
聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)是实验室常用的基本鉴定方法之一.但由于做胶方式以及各实验室仪器设备良莠不齐,经过一系列纷繁复杂的操作,电泳结果未必尽如人意.其中凝胶带型的判断就是一个较为困惑的问题,一般的聚丙烯酰胺胶跑出的条带总体上都有弧度,越是靠近凝胶两侧越是严重.在本实验中,我们设计了一种较为简单易行的方案,即将难以区分的条带样品做成混合样marker来辅助辨型,通过调整电压和凝胶浓度来达到区分条带的目的.我们用该方案可以将相差0~3 bp大小的条带区分开来. 相似文献