环介导等温扩增快速检测B群链球菌的临床应用

目的建立采用环介导等温扩增（LAMP）技术从临床标本中快速检测B群链球菌的方法。方法根据美国国家生物信息中心上提交的B群链球菌的cfb基因序列（登陆号X72754）设计特异LAMP引物,以热裂解法提取标本中细菌的DNA,然后以LAMP技术扩增cfb基因来鉴定其是否为B群链球菌。在采用LAMP技术检测B群链球菌的同时,以选择性培养法和PCR技术平行检测相同标本,并将3种方法的检测结果比较。结果在176例阴道拭子和176例直肠拭子中,选择性培养法检测到的B群链球菌例数为49和61、LAMP法检测到的B群链球菌例数为49和59,PCR法检测到的B群链球菌例数为48和58。以选择性培养法为金标准,LAMP法检测B群链球菌的灵敏度和特异度分别为96．7％和100％,PCR法检测B群链球菌的灵敏度和特异度分别为95．1％和100％。LAMP法检测B群链球菌的时间为2h左右,模拟菌株的检测结果显示该方法的最低检测限为10^2CFU／mL。结论该方法灵敏度高,特异性强,操作方便简单,适合从临床标本中快速检测B群链球菌。     

90株链球菌血清学及生化特征分群鉴定的研究

本文报告90株链球菌血清学和生化特征分群鉴定结果。研究结果表明,90株链球菌用血清学分群,属A群的63株,B群3株,C群12株,D群10株,G群2株。采用生化鉴定,对链球菌属的确认有参考价值。对分群鉴定无鉴别意义。我国过去沿用的非血清学推测性分群法,只适用于B、D群和绝大部分A群菌的鉴定,对C群和G群菌无鉴别意义。因此,在链球菌分群鉴定时,要采用血清学方法,对非血清学推测性分群需进一步完善,以提高其鉴定的准确性。     

围产期生殖道菌群检测和B群链球菌筛查

目的 调查孕妇生殖道菌群情况,减少不良妊娠结果;筛查B群链球菌（GBS）定植状态,预防新生儿GBS病.方法 产前取阴道分泌物进行细菌培养,并对结果进行回顾性分析.结果 1464例孕妇阴道分泌物标本,872例乳酸杆菌和（或）少量其他菌种生长,占59.6%（872/1464）;592例乳酸杆菌未生长,检出“＋”以上生长菌株820株,其中194例有2种菌生长,34例有3种菌生长,占40.4%（592/1464）.共检出B群链球菌68株,检出率为4.6%（68/1464）.结论 围产期生殖道菌群种类复杂,耐药率高,妇幼保健工作人员应加强检测,采取切实可行的适宜技术,提供进一步的干预措施和保健服务.     

孕晚期妇女无乳链球菌感染与耐药性情况及对新生儿的影响

目的探讨孕晚期妇女无乳链球菌感染与耐药性情况及对新生儿的影响。方法选择在金华市妇幼保健院就诊的孕晚期妇女共1 000例,采集孕妇泌尿生殖道标本并进行无乳链球菌培养及药敏试验,探讨孕晚期妇女无乳链球菌的感染情况及耐药性,并根据培养结果分为观察组与对照组,其中观察组为无乳链球菌培养阳性,对照组为无乳链球菌培养阴性,随访并比较两组新生儿无乳链球菌感染情况。结果 1 000例孕晚期妇女共检测出118例感染无乳链球菌,感染率11.80%;无乳链球菌耐药性较高的三种抗生素为四环素86.44%、红霉素73.73%、阿奇霉素56.78%,对头孢曲松、头孢呋辛、青霉素G、亚胺培南、利奈唑胺、万古霉素六种抗生素未发现耐药;观察组新生儿无乳链球菌感染率明显高于对照组(P0.05)。结论孕晚期妇女无乳链球菌感染率较高,容易通过母婴垂直传播感染新生儿,应早期选择合适抗生素治疗,实验室药敏结果能为临床合理使用抗菌药物提供重要的依据。     

无乳链球菌表面蛋白的研究进展

无乳链球菌是链球菌属的一个种,按Lancefild血清学分类,划归为B群(B群链球菌)。上世纪90年代以来,无乳链球菌是新生儿严重感染性疾病致病菌之一,在发达国家的感染率是围生儿间接死因的首位。由于该菌是许多妇女阴道的常驻菌群,在阴道和宫颈的定植率也很高,是引起新生儿侵袭性感     

123名患儿及440名正常儿咽喉拭细菌培养正常参考值调查研究

本文目的为进一步了解患儿及正常儿咽喉部常见菌种类及所占数量,为临床治疗及细菌培养提供正常参考值一、调查对象及检验方法1岁以下到10岁门诊初诊患儿;托儿所,幼儿园的正常儿,以棉拭子当场采样立即接种血平板及中国兰平板,常规培养观察处理标本,鉴定菌种。二、结果分析563人咽拭取样培养:肺炎链球菌100%生长,卡他球菌100%生长,表皮葡萄球菌14.6%,金黄色葡萄球菌7.4%,甲型链球菌1.1%,白色念珠菌0.15%,其它非致病菌占1.19%。     

健康新生儿口腔微生物的早期定植研究

目的：观察母亲阴道细菌对其新生儿口腔微生物定植的影响,确定早期定植于新生儿口腔的细菌种类以及新生儿口腔的优势菌,观察不同喂养方式对新生儿口腔微生物的影响。方法：对刚出生的22名健康新生儿口腔及其母亲分娩前的阴道进行棉拭子取样,新生儿连续一周每天口腔取样,在需氧、兼性厌氧、厌氧条件下培养,检出细菌经形态学及生化鉴定。刚出生婴儿的口腔拭子及其母亲阴道拭子选用成品的CY酵母菌业色检测培养盒检测酵母菌。结果：剖腹生产的刚出生的健康婴儿口腔100％无菌,经产道生产的刚出生的健康婴儿口腔25％有菌;母亲阴道细菌Staphlococcus epidermidis(S.epidermidis),Streptococcus faecalis (S.faecalis),Lactobacilli spp.在经产道生产的刚出生的新生儿口腔中可以检出;45.5%新生儿出生后第二天可检出Streptococcus salivarius (S.salivarius)的定植,S.salivarius和Streptococcus mitis(S.mitis)为出生一周新生儿口腔的优势菌;9.1%的新生儿口腔中可检出厌氧菌Veillinella spp.。母乳喂养和人工喂养的新生儿口腔优势菌差异无显著性（P＞0.05),但人工喂养新生儿口腔中的S.epidermidis检出率和菌量均明显低于母乳喂养组（P＞0.05)。结论：母亲阴道细菌对经产道生产的新生儿口腔微生物的定植有一定影响,出生一周的健康婴儿口腔中的优势菌为S.salivarius和S mitis,Veillonella spp.,是最早定植在新生儿口腔中的厌氧菌,不同喂养方式对优势菌在新生儿口腔的早期定植无明显影响。     

新生儿血培养病原菌分布及与超敏C-反应蛋白的关系

目的分析新生儿血培养阳性标本中各病原菌分布情况及与hs-CRP的相关性。方法统计分析2015年1月至2016年1月大连市妇幼保健院新生儿ICU血培养临床资料并采用CRP检测试剂盒对血培养阳性的患者进行hs-CRP的检测。结果血培养阳性结果中,凝固酶阴性葡萄球菌46株,占65.7%,肺炎克雷伯菌8株,占11.4%,大肠埃希菌5株,占7.1%,肠杆菌、鲍曼不动杆菌、洛非不动杆菌各2株,分别占2.9%,摩根摩根菌、B群链球菌、金黄色葡萄球菌、肠球菌、微球菌各1株,分别占1.4%;hs-CRP的检出量,革兰阴性菌感染组为(20.60±3.40)mg/L,革兰阳性菌感染组为(15.80±2.30)mg/L,正常对照组为(4.10±0.95)mg/L。结论新生儿血培养阳性的主要致病菌为凝固酶阴性葡萄球菌、肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌;有细菌感染的新生儿血中hs-CRP值升高,革兰阴性菌感染hs-CRP值高于革兰阳性菌。     

社区老年人上呼吸道定植菌调查及药敏分析

调查社区老年人上呼吸道的定植菌情况,能够了解引起社区老年人呼吸道感染的危险因素,分析主要定植菌的药敏结果,指导社区老年人呼吸道感染的经验治疗。取社区老年人咽喉部拭子进行细菌分离培养及鉴定,调查呼吸道定植菌情况,并对主要定植菌进行药敏试验,细菌鉴定应用法国生物梅里埃公司的细菌鉴定仪VITEK2和API系统,药敏试验采用K-B纸片琼脂扩散法,结果统计应用WHONET5.4软件。对706例社区老年人上呼吸道标本进行分离培养,有274份标本生长了致病菌或条件致病菌,其中248份标本有一种细菌生长,26份标本生长2种细菌,总体阳性率为38.8%。共分离9种细菌,居首位的细菌是肺炎克雷伯菌151株,占21.4%,其次为副流感嗜血杆菌74株,占10.5%,第3位的是β-溶血链球菌31株,占4.4%。75株肺炎克雷伯菌的药敏结果显示全部为敏感株,从药敏表型分析具有较高的同源性。老年人群上呼吸道定植菌以革兰阴性杆菌尤其以肺炎克雷伯杆菌为主,并对常用抗菌药物有高度敏感性,一旦发生定植菌感染应选择合适的抗菌药物并给予恰当的治疗方案,防止细菌产生耐药性。     

新生儿血培养检出潘多拉菌一例

潘多拉菌是一种革兰阴性非发酵菌,隶属伯克霍尔德菌属。国内潘多拉菌感染鲜有临床报道。本实验室在1例新生儿血培养中检出一株革兰阴性杆菌,经生化、药敏试验及16S rRNA基因测序等方法鉴定,确定是潘多拉菌属。     

围产期B族链球菌感染及预防的研究进展

B群链球菌可以引发产褥期败血症、新生儿肺炎和脑膜炎等感染,围产期B群链球菌感染和预防研究有着重要的价值。本研究就围产期女性B群链球菌感染、检测方法及预防相关研究进展作一综述,目的在于提高围产学界对该类微生物的认识。     

围产期孕妇生殖道B族链球菌感染高危因素分析及母婴结局探讨

目的调查沈阳地区围产期孕妇生殖道B族链球菌(group B streptococcus,GBS)定植率和感染高危因素及对母婴结局的影响,以便预防和控制围产期妇女GBS感染,优化母婴结局。方法对2017年9—11月在医院作孕期检查的31～40周孕晚期孕妇691例取阴道拭子及直肠拭子进行GBS培养、分离鉴定,分析GBS定植率;采用卡方检验进行GBS感染的单因素分析,采用多因素二元Logistic回归进行GBS感染的高危因素分析;对比两组孕妇及新生儿结局。结果沈阳地区孕晚期孕妇生殖道GBS定植率为7.67%(53/691),其中阴道试子阳性率为4.63%(32/691),直肠试子阳性率为6.22%(43/691);孕妇GBS感染的危险因素显示,在教育程度、生产史、分娩方式、甲状腺异常、妊娠期高血压、妊娠期贫血和妊娠期糖尿病,组间差异均无统计学意义(P>0.05);孕妇GBS感染危险因素,年龄、体质量、流产史和生殖道感染,组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05);经多因素二元Logistic回归分析结果显示,年龄、体重、流产史和生殖道感染为影响GBS感染发生的独立危险因素,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05);感染组孕妇胎膜早破、早产发生率高于对照组,经比较差异有统计学意义(P<0.05);产后出血发生率经比较差异无统计学意义(χ2=0.624,P>0.05);感染组新生儿胎儿窘迫、绒毛膜羊膜炎、新生儿黄疸发生率高于对照组,经比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论沈阳市孕妇生殖道GBS定植率较高,建议对孕晚期孕妇开展GBS常规筛查。年龄、体重、流产史和生殖道感染为GBS感染发生的独立危险因素,有必要对本地区的围产期孕妇进行健康宣教,减少GBS感染的发生,进而改善母婴结局。     

大熊猫中分离出一株肠道杆菌及其初步鉴定

大熊猫出血性肠炎病原,至今未见报道。对此,1988年5月作者作了初步探索。材料与方法一、标本:采自成都市动物园一疑似患出血性肠炎大熊猫的肛拭子。二、培养基:S—S琼脂平板和伊红美蓝琼脂平板。三、分离培养和鉴定:将肛拭子在床旁分别接种在S—S琼脂平板和伊红美蓝琼脂平板培养基。24小时后挑选可疑菌落作革兰氏染色及荚膜染色、生化试验、动物试验和药敏试验。结果在S—S平板和伊红美蓝平板上生长的细菌几乎是纯种。经形态学、生理学等方面的鉴定,确定为肠道杆菌中克雷伯氏菌族中的产气杆菌。该菌对先锋铋(Cefoperazone),先锋霉素等敏…     

老年上呼吸道微生态研究

目的通过研究健康老年机体上呼吸道微生态菌群构成,了解老龄人群上呼吸道优势菌群种类及数量,为从微生态学角度预防呼吸道感染的发生提供参考。方法自沈阳市选取年龄为65～70岁健康老人为研究对象,无菌咽拭法采集咽后壁粘膜表面标本,对菌群进行定量分析、定性鉴定。结果老年人群咽后壁需氧菌群与厌氧菌群数量之比为2.65∶1,检出率较高的需氧菌及厌氧菌包括唾液链球菌、口腔链球菌、缓症链球菌、微黄奈瑟菌、灰色奈瑟菌、麻疹孪生球菌等,检出率较高的菌构成比也较高。结论健康老年人群中检出率和构成比都较高的需氧菌和厌氧菌共同构成老年人上呼吸道口咽部优势菌群,在维持呼吸系统微生态平衡中起重要作用,可作为上呼吸道微生态学研究的重要指标菌。     

牙髓拟杆菌的分离,培养,鉴定

牙髓拟杆菌是产黑色素拟杆菌群中的一个新菌种。本试验通过对牙髓腔感染标本中分离、培养、鉴定各种细菌,发现牙髓拟杆菌主要分布在牙髓腔内,其存在与根尖周炎有无症状密切相关,此菌对氧敏感,用常规鉴定及气相色谱法与其它菌无法区别,而间接免疫荧光法是确定牙髓拟杆菌菌种和直接检测牙髓腔标本中有无此菌的一个快速、可靠的方法。     

恒温扩增芯片法在重症监护病房肺部感染患者诊断中的应用

目的评价恒温扩增芯片法在重症监护病房肺部感染患者下呼吸道感染病原体检测中的效果。方法收集合格痰标本146例,通过恒温扩增芯片法和细菌培养法检测病原体,对两种方法检测结果进行分析。结果 146例痰液标本中,恒温扩增芯片法检出阳性标本114例(阳性率为78.1%),其中单一致病菌感染42例,2种及以上致病菌混合感染72例。45例标本检测到mecA基因,其中13例为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。146例痰标本中,有109例痰标本同时进行了痰培养检测,痰培养阳性率为67.9%(74/109),相应的恒温扩增芯片法检测阳性率为82.6%(90/109);痰培养结果阴性共计35例,与之相符合的恒温扩增芯片法检测阴性共计16例(阴性符合率45.7%)。恒温扩增芯片法对肺炎链球菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌、流感嗜血杆菌的阳性检出率明显高于痰培养,差异具有统计学意义。恒温扩增芯片法检测到2例结核分枝杆菌复合群、1例军团菌、1例肺炎支原体,痰培养检测到3例奇异变形杆菌。结论本实验室所开展的恒温扩增芯片法在重症监护病房肺部感染者下呼吸道病原体检测方面的优势体现在阳性率高、检测时间短,可为临床肺部感染诊断提供及时准确的参考依据。     

食源性相关腹泻肠炎沙门菌感染抗菌药物敏感性

目的了解食源性相关腹泻非伤寒沙门菌感染的菌种分布及其对抗菌药物敏感性,为控制该类细菌的感染及传播提供技术支持。方法对2015-2017年本系统2家社区卫生服务中心就诊的食源性相关腹泻患者粪便(或肛拭子)标本采用直接分离与增菌分离相结合的方法常规培养分离获得42株沙门菌;采用血清凝集法进行快速血清分型,并进行自动化生化鉴定及抗菌药物敏感性试验;通过现况调查进行流行病学危险因素分析。结果自动化生化鉴定结果能够覆盖常规血清学快速鉴定结果,同属沙门菌群;42株沙门菌以肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌和斯坦利沙门菌为主,其中肠炎沙门菌占全部菌株的23.81%,鼠伤寒沙门菌占19.06%,斯坦利沙门菌占14.29%;其中肠炎沙门菌可对氟喹诺酮类、三四代头孢菌素类与碳青霉烯类等敏感(敏感率可达97.00%以上),而对氨基糖苷类可产生双向耐药。通过现况调查,发现患者有腹痛、腹泻等胃肠道症状,可伴有发热,所有患者48h内有可疑食物暴露史,无水源性案例,均为散发。结论菌种鉴定应以常规快速血清学凝集结果为准,自动化生化鉴定仅供参考,并将鉴定菌种与药敏报告相关联,可根据药敏结果合理选用敏感抗菌药物;应对社区居民开展针对性的健康宣教。     

FTA-DNA直接提取法在病原真菌分子鉴定中的应用

目的建立并评价FTA-DNA直接提取法在病原真菌分子鉴定中的应用。方法采用whatman FTA-DNA直接提取法从25个不同种属的45株培养的菌株和6例临床标本中提取病原真菌DNA,用于病原真菌的测序鉴定。配制不同浓度的孢子悬液探索该方法的检测限和安全性。结果 45株菌株扩增后均能得到1条清晰的DNA扩增片段,并成功测序。应用该方法亦成功从腹水、胸水、口腔拭子、宫颈拭子来源的临床标本中直接提取DNA并成功鉴定病原真菌。该DNA提取方法联合降落PCR能检测到1.0×103个cell/mL的孢子悬液,1.0×104个cell/mL及以下浓度的孢子悬液可以被FTA卡完全灭活。结论 FTA-DNA直接提取法可快速有效地从培养的菌株及部分临床标本中提取并保存病原真菌DNA,用于病原真菌的测序鉴定。     

1例流行性脑脊髓膜炎病例的菌群鉴定及分析

目的对2015年河南省1例流行性脑脊髓膜炎(流脑)病例的菌群进行分子分型鉴定及分析,为河南省流脑预防和控制工作提供科学依据。方法对患者脑脊液和血液标本以及37例密切接触者咽拭子标本进行细菌培养,提取DNA进行PCR及多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)分析。用ELISA检测密切接触者血清标本的脑膜炎奈瑟菌A群和C群抗体水平。结果患者和1例密切接触者分离的菌株经细菌培养及PCR鉴定,分别为C群和B群脑膜炎奈瑟菌。MLST分型显示,患者和密切接触者标本分别为ST4821型和ST5664型,两者均为ST4821克隆群。37例密切接触者脑膜炎奈瑟菌A群和C群抗体阳性率分别为91.89%和21.62%,平均抗体质量浓度分别为6.50μg/m L和1.73μg/m L。结论引起流脑疫情的致病菌为C群ST4821型脑膜炎奈瑟菌,当地C群平均抗体含量偏低,需加强流脑A+C疫苗的接种,有效预防流脑的暴发。     

无乳链球菌的研究进展

无乳链球菌亦称B群链球菌（Group B streptococcus,GBS）,一直是新生儿和女性生殖道受感染的重要病菌,尤其是新生儿时期的感染是危及生命的重要原因,其病发症包括败血症、肺炎和脑膜炎等。在成年妇女的阴道和直肠内有15％～40％可以检出无乳链球菌,因此,这类女性所分娩的新生儿感染该菌的机率会比较高。