高频喷射通气治疗海水淹溺肺水肿兔肺AKP活性变化的图像定量分析

用海水灌注的方法诱发海水淹溺肺水肿（ＰＥＳＷＤ）,采取高频喷射通气（ＨＦＪＶ）治疗之。以细胞化学反应和图像定量分析为手段从碱性磷酸酶（ＡＫＰ）角度研究其病理生理变化机理。结果表明,海水灌注后ＡＫＰ产物数量和密度显著增加,ＨＦＪＶ治疗后均回落至接近正常水平。推测ＰＥＳＷＤ引起ＡＫＰ活性代偿性升高,ＨＦＪＶ后,肺部氧供应改善可能是导致ＡＫＰ活性下降的原因     

肺泡上皮细胞钠-钾ATP酶与海水淹溺型肺水肿

钠-钾ATP酶(Na -K -ATPase)对于维持胞质渗透压和细胞容积的相对稳定以及细胞内pH的稳定具有重要的生理意义.肺泡上皮具有阻止液体进入肺泡腔内和主动清除肺泡腔内液体的作用,是抵抗肺泡性肺水肿形成的一道重要屏障.这一功能的完成有赖于Ⅱ型肺泡上皮细胞对钠离子的主动转运和分布于Ⅰ型、Ⅱ型肺泡上皮细胞的特殊水通道,而钠离子的主动转运依靠钠-钾ATP酶来完成.海水淹溺型肺水肿(PE-SWD)是以低氧血症及代谢性酸中毒为主要病理生理学特点的临床病症.PE-SWD发生时,Na -K -ATPase活性的改变直接影响到细胞膜外Na 、K 、等离子的浓度和分布,既是造成PE-SWD发生的多种因素所引起的直接恶果,又是促进PE-SWD不断发生的继发性原因.因此认识肺泡上皮细胞钠-钾ATP酶在PE-SWD发病中的作用对于PE-SWD的治疗具有重要意义.本文就钠-钾ATP酶的功能、结构、调节机制及钠-钾ATP酶在PE-SWD发病中的作用作一综述.     

高频喷射通气治疗海水淹溺肺水肿时兔肺钙离子超微结构变化

用海水灌注的方法诱导海水淹溺肺水肿（ＰＥ－ＳＷＤ）, 采用高频喷射通气（ＨＦＪＶ） 治疗, 应用血气酸碱分析仪对兔动脉血气酸碱三项指标进行自动检测, 并采用Ｃａ２＋ 超微结构方法观察肺内Ｃａ２＋ 变化。结果表明肺细胞内Ｃａ２＋ 超负荷与ＰＥ－ＳＷＤ发生有关, ＨＦＪＶ 对改善ＰＥ－ＳＷＤ症状有明显作用, 同时, 细胞内Ｃａ２＋ 超负荷状况明显缓解     

海水淹溺兔肺泡巨噬细胞TNF-α mRNA的动态表达及地塞米松干预作用

目的:观察海水淹溺后家兔肺泡巨噬细胞内TNF-αmRNA的动态表达规律,并探讨地塞米松干预对TNF-αmRNA表达的影响。方法:采用气管切开插入塑料导管、向气管内灌海水4ml/kg,双肺自主通气的方法模拟海水淹溺造成急性肺损伤模型。于淹溺后0min、30min、60min、90min、120min五个观察时间点进行血气分析,并采集肺组织,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺泡巨噬细胞中TNF-αmRNA的表达。结果:海水淹溺兔急性肺损伤各时相点肺组织中性粒细胞大量浸润,淹溺后TNFα-mRNA表达显著增高,90分钟后达最高峰,而地塞米松可使之降低(P<0.01)。结论:海水淹溺急性肺损伤可能与肺泡巨噬细胞内TNF-αmRNA高表达有关。地塞米松可降低TNF-αmRNA的高表达,减轻肺损伤程度。     

猪肺表面活性物质对海水淹溺性肺损伤大鼠治疗的量效关系

目的:探讨猪肺表面活性物质(PPS)对海水淹溺肺损伤大鼠的治疗效果及量-效关系.方法:24只SD大鼠气管内注入海水观察120min,建立海水淹溺肺损伤模型后,随机等分为4个治疗组(n=6):生理盐水对照组,100mg/kgPPS组,150mg/kgPPS组和200mg/kgPPS组.分别监测4组大鼠给药后30min、60min、120min的BR和Pa02,120min后放血处死,计算大鼠存活率及支气管肺泡灌洗液(BALF)中TNF-α浓度和TP含量,取肺观察肺组织形态学改变.结果:各剂量PPS治疗组与对照组比较在治疗后各时间点的BR、TNF-α浓度和TP含量均有不同程度下降(P＜0.05),Pa02及存活率上升(P＜0.05),肺脏的病理形态学有明显改变.结论:单独应用PPS能明显减轻海水淹溺肺损伤.并且存在量-效关系.     

气-水两生型丝孢真菌的多样性与分类研究

气-水两生型真菌通常定植于自然森林生态系统中溪流或池塘沉积的腐枝叶上,菌丝生长于水体底部,当沉积物暴露于空气中时,形成分生孢子并发育成中空的孢子繁殖体,使其能漂浮在水面,附着新的基质,进行生长繁殖。世界范围内已报道约20属116种,大多为无性型的丝孢菌,其独特的生存环境和产孢特点,在真菌的形态、生态和系统演化上有重要研究价值。文中主要从多样性和分类学、采集与分离培养、孢子形态和发育、有性型-无性型关系、系统演化关系等方面对其进行了综述,为该类真菌系统的研究及潜在的应用提供参考。     

经鼻高流量氧疗联合参芪扶正注射液对COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭患者动脉血气、炎性因子及免疫功能的影响

摘要 目的：探讨经鼻高流量氧疗联合参芪扶正注射液对慢性阻塞性肺疾病（COPD）合并Ⅱ型呼吸衰竭患者动脉血气、炎性因子及免疫功能的影响。方法：选择2017年5月-2019年12月我院收治的COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭患者104例,随机分为研究组和对照组,每组52例。两组患者均给予了基础治疗,对照组采用经鼻高流量氧疗治疗,研究组采用经鼻高流量氧疗联合参芪扶正注射液治疗。比较两组临床疗效、不良反应发生情况及治疗前后的动脉血气指标[动脉血PH值、动脉血氧分压（PaO2）、动脉血二氧化碳分压（PaCO₂）、血氧饱和度（SaO₂）],血清炎性因子[白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、C反应蛋白（CRP）]水平,外周血CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞水平及CD4⁺/ CD8⁺值、免疫球蛋白A（IgA)、IgM、IgG水平。结果：研究组总有效率为92.31%（48/52）,显著高于对照组78.85%（40/52）（P＜0.05）。治疗后两组患者动脉血pH值、PaO₂、SaO₂、CD4⁺T细胞、CD4⁺/CD8⁺、IgA、IgM、IgG显著升高,PaCO2、IL-6、TNF-α、CRP、CD8⁺显著降低（P＜0.05）,研究组患者动脉血pH值、PaO₂、SaO₂、CD4⁺T细胞、CD4⁺/CD8⁺值、IgA、IgM、IgG显著高于对照组,PaCO₂、IL-6、TNF-α、CRP、CD8⁺T细胞显著低于对照组（P＜0.05）。两组不良反应发生率比较无统计学差异（P>0.05）。结论：经鼻高流量氧疗联合参芪扶正注射液治疗可纠正COPD合并II型呼吸衰竭患者的动脉血气指标,改善免疫功能,缓解机体炎症反应。     

AECOPD合并PH患者血清Hcy、Cys-C水平与肺功能、动脉血气分析指标及肺动脉收缩压的关系研究

摘要 目的：探究慢性阻塞性肺疾病急性加重期（AECOPD）合并肺动脉高压（PH）患者血清同型半胱氨酸（Hcy）、胱抑素C（Cys-C）水平与肺功能、动脉血气分析指标及肺动脉收缩压的关系。方法：选择2017年12月至2019年12月我院诊治的80例AECOPD合并PH患者作为AECOPD合并PH组。同时选择80例AECOPD未合并PH患者作为单纯AECOPD组以及50名在我院进行体检的健康志愿者作为健康组。检测并比较各组受试者的血清Hcy和Cys-C水平、第一秒用力呼气容积占用力肺活量比值(FEV₁/FVC）、动脉氧分压（PaO₂）、第一秒用力呼气容积占预计值的百分比（FEV₁%pred）、动脉二氧化碳分压（PaCO₂）,肺动脉收缩压（PASP）,分析各指标的相关性。结果：AECOPD合并PH组血清Hcy、Cys-C水平以及PASP最高,其次为单纯AECOPD组,健康组最低（P<0.05）。健康组FEV₁%pred、FEV₁/FVC最高,其次为单纯AECOPD组,AECOPD合并PH组最低（P<0.05）。与单纯AECOPD组相比,AECOPD合并PH组PaO₂明显下降,PaCO₂明显升高（P<0.05）。经Pearson相关性分析可得,血清Hcy和Cys-C与FEV₁%pred、FEV₁/FVC和PaO₂均呈负相关（P<0.05）,而与PaCO₂和PASP均呈正相关（P<0.05）。结论：血清Hcy和Cys-C水平异常升高与AECOPD患者并发PH相关,并且与AECOPD合并PH患者肺功能下降、动脉血气异常以及PASP异常升高存在相关性。     

急性低氧时Wistar大鼠与高原鼠兔肺组织内皮型一氧化氮合酶基因表达的变化

目的探讨内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase, eNOS)在高原动物适应高原低氧环境中的作用.方法通过模拟4000m、6000m高原低氧,运用免疫组织化学技术,分别检测Wistar大鼠和高原鼠兔肺血管内皮和肺内气道上皮内皮型一氧化氮合酶蛋白表达水平的变化.结果无论是在肺血管内皮,还是肺内气道上皮,Wistar 大鼠eNOS蛋白表达在模拟4000m与6000m高原低氧处理2h后,均显著升高,而高原鼠兔基本保持不变,但高原鼠兔气道上皮eNOS的基础表达水平显著高于Wistar大鼠.结论相比Wistar大鼠,高原鼠兔eNOS基因表达在模拟高原低氧时增加较少甚或无明显增加,eNOS是急性高原低氧耐受过程中的一个重要机制.     

卵巢良、恶组织中mPGES-1的表达及其与COX2的相关性分析

目的:探讨卵巢良、恶性组织中mPGES-1的表达及其与病理类型和细胞分化的关系,并分析mPGES-1和COX2的相关性.方法:采用实时荧光定量PCR的方法,分别检测我院手术切除卵巢癌组织和良性卵巢囊肿组织中mPGES-1和COX2的mRNA表达,分析mPGES-1和COX2的相关性以及与病理类型、分级的关系.结果:卵巢恶性组织中mPGES-1和COX2的表达量显著增高,分别是良性囊肿组织的27倍和113倍,两者的mRNA表达量和肿瘤的病理类型或分级相关,分化低和恶性度高的肿瘤组织表达量高.在卵巢癌组织中mPGES-1和COX2的表达呈直线正相关.结论.mPGIES-1的mRNA在卵巢癌组织中显著高于良性囊肿组织,并且和卵巢肿瘤的病理类型、分级有关,和COX2表达呈直线正相关.     

番茄碱对人红细胞膜Na+-K+-ATPase活性影响的研究

以低渗法从新鲜健康人红细胞中制得膜Na^ -K^ -ATPase,研究了番茄碱(tomatine)X~人红细胞膜Na^ -K^ -ATPase活性的影响。实验结果表明,反应体系中的tomatine浓度低于1mmol／L时,对不依赖钙调蛋白(CAM)激活的Na^ -K^ -ATPase(称之为基本酶活)影响不大,浓度达1mmol／L时,该酶活性仍保持在95％左右;而在此浓度范围内,tomatine对依赖CaM的Na^ -K^ -ATPase有明显的抑制作用,其IC50值为0．16mmol／L．说明tomatine对膜酶Na^ -K^ -ATPase活性的影响可能是通过阻断CaM激活的途径而起作用,从而为进一步研究番茄碱的作用机制奠定了基础。     

Na+K+-ATP酶抑制引起的细胞凋亡和杂合性细胞死亡

Na^ -K^ -ATP酶也称Na^ 泵或Na^ -K^ 泵,是哺乳类细胞膜进行离子转运的跨膜载体蛋白。其基本作用是维持细胞膜内外Na^ -K^ 电化学梯度的平衡。近来研究表明,Na^ -K^ -ATP酶在细胞死亡中起重要作用,细胞K 缺失导致凋亡,在某些类型的细胞中,同一细胞兼具细胞肿胀、细胞器溶解等坏死特征和染色质凝集、DNA梯带、caspase级联反应等凋亡特征,呈现一种特殊的细胞死亡形式,即杂合性细胞死亡。     

盐度对日本囊对虾仔虾生长发育和Na+-K+-ATPase活力的影响

研究了盐度对日本囊对虾仔虾(Marsupenaeus Japonicus)的生长发育和Na -K -ATPase活力的影响。结果表明,盐度对日本囊对虾仔虾存活率、增重率和Na -K -ATPase活力的影响显著(P<0.05)。随着向低盐度变化的增加,仔虾的存活率和增重率明显下降,而向高盐度变化无显著差异;在盐度变化48h内,随着盐度变化的增加仔虾Na -K -ATPase活力变化增大,各处理组仔虾Na -K -ATPase活力随着取样时间的增加呈峰值变化,至24h时低盐度处理组酶活力达到最大值,而高盐度处理组达到最小值:至48h~72h时,不同盐度下仔虾Na -K -ATPase活力趋于稳定,而且盐度越低酶活力越大。由此表明日本囊对虾仔虾在低盐度地下卤水中的适宜盐度为20‰—24‰。     

半胱胺对断奶前后仔猪胃粘膜H+-K+-ATPase表达和活性的影响

实验选取新生仔猪18窝, 随机分为实验组和对照组各9窝, 自12日龄起, 对照组饲喂基础乳猪料, 实验组在基础饲料中添加半胱胺120 mg/kg饲料, 仔猪均于35日龄断奶。分别于断奶前1 周、断奶当天、断奶后36 h、72 h、1周以及断奶后10 d屠宰仔猪取样, 每个时间点随机选取对照组和试验组各6头仔猪, 用相对定量RT PCR方法测定不同日龄仔猪胃组织中H K ATPase mRNA 表达的相对含量, 并同时测定H K ATPase的活性。结果表明: (1) 对照组仔猪在断奶前1 周至断奶后10 d, H K ATPase mRNA相对含量和H K ATPase活性有上升趋势, 两组仔猪在断奶后10 d H K ATPase mRNA相对含量和活性均达到最高水平, 但总体不表现显著的年龄差异; (2) 半胱胺能明显提高仔猪胃粘膜中H K ATPase mRNA的表达, 在断奶前1 周、断奶当天、断奶后1周和断奶后10 d均出现显著差异。半胱胺也能明显提高H K ATPase 的活性, 在断奶当天和断奶后10 d, H K ATPase 的活性分别被提高32 3%和18 3%; (3) 观察期内对照组和实验组H K ATPase mRNA水平和H K ATPase活性之间未发现显著的相关性。以上结果说明: 断奶前后仔猪H K ATPase的mRNA相对含量和活性没有明显的发育性变化, 断奶对H K ATPase mRNA表达和活性没有影响,而半胱     

温度、pH和盐度对克氏原螯虾鳃 Na+-K+-ATPase活性的影响

采用钼蓝法测定克氏原螯虾(Procambarus clarkii)鳃Na~ -K~ -ATPase活性,探讨温度、pH、盐度3个环境因子在环境驯化和突变状态下对Na -K -ATPase活性的影响。实验结果表明,Na~ -K~ -ATPase的活性与环境因子密切相关。酶活性在温度、盐度驯化实验中都表现为正相关关系,不同pH驯化中则表现为中性pH活性最高。在突变状况下表现出明显的应激性,应激响应在2～8h之间,之后逐渐缓和,最终结果与驯化结果相同。     

Enhanced (Na+K)-ATPase Activity and Expression in Mouse Brain after Chronic Ethanol Administration

It is the general hypothesis that the primary mode of action of ethanol is the alteration of membrane structure and function including the conformation of receptors and ion channels essential for neurotransmission and signal transduction. However, the issue of whether ethanol affects (Na+K)-ATPase under physiological conditions remains unsettled. In this study, adult mice were treated with a daily dose of 5 g/kg of ethanol for 28 days. The RNA was isolated from brain and the (Na+K)-ATPase mRNA level was determined using Northern blot analysis. We have found an increased expression of (Na+K)-ATPase -subunit in the chronically treated alcohol group as compared with that of controls. This result was further substantiated by increased protein phosphorylation as well as increased specific activity of this enzyme in the synaptosomal plasma membrane after chronic ethanol administration. Thus we have demonstrated that ethanol may directly affect (Na+K)-ATPase in vivo, leading to the increased synthesis of this enzyme through adaptive mechanisms.     

大鼠单根近端肾小管Na+-K+-ATPase活性测定方法的改进

本研究旨在对Doucet等报道的定量检测大鼠单根近端肾小管Na^＋-K^＋-ATPase活性方法进行改进。取经过Ⅱ型胶原酶消化的大鼠肾脏皮质组织,在体视显微镜下手工分离单根近端肾小管,并测量其长度,经低渗和冻融处理后与[γ-^32P]ATP共同孵育,液闪法检测从[γ-^32P]ATP解离出的^32Pi,采用修正后的公式计算Na^＋-K^＋-ATPase活性。改良法与Doucet等的方法比较,测定单根近端肾小管Na^＋-K^＋-ATPase活性无显著性差异（P〉0．05）。改进后的方法节省试剂,操作简便、省时。     

Endothelin 1 Stimulates Na+,K+-ATPase and Na+-K+-Cl− Cotransport Through ETA Receptors and Protein Kinase C-Dependent Pathway in Cerebral Capillary Endothelium

Abstract: The effect of endothelins (ET-1 and ET-3) on ⁸⁶Rb⁺ uptake as a measure of K⁺ uptake was investigated in cultured rat brain capillary endothelium. ET-1 or ET-3 dose-dependently enhanced K⁺ uptake (EC₅₀ = 0.60 ± 0.15 and 21.5 ± 4.1 nM, respectively), which was inhibited by the selective ET_A receptor antagonist BQ 123 (cyclo-d -Trp-d -Asp-Pro-d -Val-Leu). Neither the selective ET_B agonists IRL 1620 [N-succinyl-(Glu⁹,-Ala^11,15)-ET-1] and sarafotoxin S6c, nor the ET_B receptor antagonist IRL 1038 [(Cys¹¹,Cys¹⁵)-ET-1] had any effect on K⁺ uptake. Ouabain (inhibitor of Na⁺,K⁺-ATPase) and bumetanide (inhibitor of Na⁺-K⁺-Cl^? cotransport) reduced (up to 40% and up to 70%, respectively) the ET-1-stimulated K⁺ uptake. Complete inhibition was seen with both agents. Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA), activator of protein kinase C (PKC), stimulated Na⁺,K⁺-ATPase and Na⁺-K⁺-Cl^? cotransport. ET-1-but not PMA-stimulated K⁺ uptake was inhibited by 5-(N-ethyl-N-isopropyl)amiloride (inhibitor of Na⁺/H⁺ exchange system), suggesting a linkage of Na⁺/H⁺ exchange with ET-1-stimulated Na⁺,K⁺-ATPase and Na⁺-K⁺-Cl^? cotransport activity that is not mediated by PKC.