高效液相色谱法测定雷帕霉素

建立了雷帕霉素高效液相色谱测定方法。其色谱条件：色谱柱Zorbax Eclipse XDB-C8（4.6 mm×150 mm, 3.5 μm）反相柱,以乙腈和水溶液为流动相,紫外检测波长278 nm,流速1.0 mL/min,柱温55 ℃。结果表明：此方法标准曲线范围是0.2～20 μg,线性良好,加样回收率为99.4%～100.79%,日间相对标准偏差（RSD）（n=4）为1.25%～2.25%。本方法操作简便、准确,可有效应用于雷帕霉素提取纯化过程中的检测。     

高聚物型色谱柱在高效液相色谱法中一步分析制备葛根素及大豆苷元的应用

建立了使用以聚苯乙烯-二乙烯基苯(PS-DVB)为基质的高聚物型色谱柱一步分离制备葛根提取液中的葛根素和大豆苷元的方法。采用MKF-RP-HH色谱柱(300 mm×7.8 mm,8μm),葛根提取液经70%乙醇溶解稀释,以水(A)和甲醇(B)为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 m L/min,检测波长250 nm,柱温30℃。结果表明:葛根提取液中的2种有效成分葛根素和大豆苷元均与杂质达到了较好的分离效果,且柱效大于2 100 N/m,优于常规的C-18硅胶色谱柱(柱效:1 000 N/m)。该高聚物型色谱柱不仅可用于上述分析,还可用作半制备柱制备得葛根素和大豆苷元纯品,葛根素在2~50μg/m L范围内线性关系良好,回归方程为y葛根=1.342 2x-1.018 4,线性相关系数为0.999;大豆苷元在2~20μg/m L范围内线性关系良好,回归方程为y大豆=2.275x+0.869 5,线性相关系数为0.999;葛根素和大豆苷元的纯化得率分别可达95.9%和78.5%。     

快速制备液相色谱分离库拉索芦荟中10-羟基芦荟大黄素苷(英文)

采用快速制备液相色谱从库拉索芦荟中高效分离制备10-羟基芦荟大黄素苷A和B。以库拉索芦荟药材粉甲醇提取物为原料,采用快速制备液相色谱,EYELA柱(300 mm×20 mm i.d.,20~45μm),甲醇-水为流动相(35∶65,v/v)等度洗脱,流速10 mL/min,检测波长356 nm,对芦荟样品进行分离制备,得到2种化合物单体,经UV、旋光度、HRMS和NMR鉴定,HPLC测定纯度,2个化合物分别为10-羟基芦荟大黄素苷B(98.9%)和10-羟基芦荟大黄素苷A(98.2%)。该方法简便、快速,所得产物纯度较高,可用于对照品的制备和药理毒理活性研究。     

制备型高效液相色谱法纯化紫丁香苷的研究

救必应药材经粉碎过筛后用50%乙醇超声提取,再以大孔吸附树脂XDA-1分离富集获得紫丁香苷粗提物,然后用制备型高效液相色谱法:采用Welchrom C18(4.6 mm×250 mm,10μm)色谱柱,优化条件,获得DACHB50(50 mm×1000 mm)制备色谱柱初始色谱条件;再以Chromatorex C18(10μm,300 g)为制备色谱柱填料,优化条件探索最佳进样量,并制备获得目标化合物。通过薄层色谱法和分析型高效液相色谱法对该化合物进行定性和定量分析,结果表明所得化合物的纯度为98.6%。以X-单晶衍射方法测定该化合物的分子结构信息,并解析数据,进一步确定该化合物是紫丁香苷。     

纽莫康定Bo色谱纯化工艺的研究

本文介绍了纽莫康定Bo的抗菌机理及其发酵生产中出现的杂质情况,探讨了色谱填料对纽莫康定Bo粗品纯化效果的影响,并考察了纯化过程中的主要影响因素。以上样量、有机相浓度、洗脱流速、纯化温度为考察因素,纯化后纯度在98%以上的回收率为考察指标。采用正交实验法对纯化工艺进行优化,确立了最优的纯化工艺为:上样量为3mg/ml填料,有机溶剂浓度30%乙腈水溶液,洗脱流速1ml/min,纯化温度为20℃,柱床高度460mm。     

单棕榈酰莽草酸的高效液相色谱-蒸发光散射检测法定量测定

本文建立一种采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法定量测定单棕榈酰莽草酸的方法。色谱条件:色谱柱:反相Symmetry C18柱4.6×250 mm i.d.(填料粒度5μm),柱温30℃,流动相:乙腈-水-甲酸(80∶20∶0.2);流速0.8 mL/min;ELSD漂移管温度:80℃,载气流速:2 L/min。3-,4-和5-棕榈酰莽草酸纯品采用酶法合成,合成产物经柱层析和高效液相色谱制备纯化得到纯品。在该色谱条件下,3-,4-和5-棕榈酰莽草酸在0.21~4.12μg的范围内,其质量与其峰面积线性关系良好(r=0.9991,0.9998,0.9997),回收率分别为95.2~98.7%,96.1%~98.2%,96.3%~98.5%;RSD分别为1.6%,1.8%,1.9%。实验结果表明该方法具有简便、快速、准确、重现性较好的特点,可以用于定量分析单棕榈酰莽草酸,尤其适用于非水相酶促反应合成体系中的产物检测。     

红曲霉发酵液中桔霉素快速检测方法的优化

研究确立了一种高效液相色谱法,能有效地对红曲霉代谢产物中的桔霉素分离和定量分析。色谱柱:Shimadzu VP-ODS C18(5μm,250 mm×4.6 mm),流动相组成为V(乙腈):V(甲醇):V(水)=70:10:20,pH≤2.8。荧光检测器:λex=331 nm,λem=500 nm。在优化的色谱条件下绘制标准曲线,当桔霉素质量浓度为0.1 mg.L-1~1 mg.L-1时线性关系良好,R2=0.9992。对桔霉素标品的最低检测质量浓度为0.01 mg.L-1,在红曲霉发酵样品中的定量回收率达到了0.9187722~1.029138。     

鲍曼不动杆菌烈性噬菌体的分离与纯化

利用柱层析方法,纯化鲍曼不动杆菌（Acinetobacter baumannii）烈性噬菌体AB1。首先采用聚乙二醇6000沉淀方法,初步分离裂解液中的噬菌体,噬菌体纯度由6.1×1010 pfu/mg提高到37×1010 pfu/mg,噬菌体回收率为58.8%,蛋白质去除率为90.6%;噬菌体粗提样品经Sepharose 4B凝胶过滤层析柱进一步纯化,纯度提高到73×1010 pfu/mg,噬菌体回收率为95.7%,蛋白质去除率为48.1%;收集的噬菌体样品最后经DEAE-52阴离子交换层析柱处理,噬菌体纯度为40×1010 pfu/mg,回收率为50.8%,蛋白去除率15.6%。内毒素分析结果显示,Sepharose 4B凝胶过滤层析纯化的噬菌体样品中,内毒素含量为443.8 EU/mg,而DEAE-52阴离子交换层析纯化的噬菌体样品中,内毒素含量为544.4 EU/mg。实验结果显示,PEG沉淀方法与Sepharose 4B凝胶过滤方法能够有效地提高噬菌体纯度,而DEAE-52阴离子交换层析则不能提高噬菌体的纯度,也无法有效地去除样品中的内毒素。     

木瓜药材HPLC指纹图谱研究

以熊果酸为参照物,利用高效液相色谱（HPLC）梯度洗脱,测定了19批木瓜（Chaenomeles speciosa（Sweet） Nakai）样品。建立了药用木瓜的高效液相指纹图谱,为评价控制药用木瓜的质量提供了依据。色谱柱为YPW—Kromasil TM—C18柱（250mm×4．6mm,5μm）（美国迪马公司）;流动相：甲醇（A）一1％冰醋酸（B）,流动相A为甲醇,流动相B为1％冰醋酸水溶液。检测波长290nm,柱温30℃,流速10mL／mjn,进样量20μL。通过分析19批木瓜样品得到的高效液相指纹图谱有11个共有峰,多数峰都可以达到较好分离且19批次相似度符合。因此药用木瓜的指纹图谱特征性及专属性强,可用于药用木瓜的质量控制。     

VLC法分离纯化枸杞子中类胡萝卜素的研究

采用真空液相色谱（VLC）法,快速、简易、高效地分离、纯化了枸杞子中类胡萝卜素及其脂肪酸酯;采用薄层色谱法,对比了氧化镁和硅胶两种吸附剂的分离、纯化效果。结果表明,依次用氧化镁和硅胶为吸附剂进行的两次真空柱色谱分离,可有效去除脂溶性杂质并分离类胡萝卜素各组分,是类胡萝卜素分离、纯化的可靠方法。     

分散蓝102标准品的制备研究

将商品化的分散蓝102以二甲基甲酰胺溶解,运用制备高效液相色谱制备分散蓝102标准品,纯度大于99%。制备型色谱柱为Waters Xbridge C18柱(5μm,30 mm×150 mm);流动相为10 mmol.L-1碳酸氢铵水溶液和乙腈;流速为30 ml.min-1;检测波长为254 nm;柱温为室温。该方法所得分散蓝102纯度高,可用作分析方法的对照品。     

固相萃取-反相高效液相色谱法分析粗裂地钱中的黄酮类化合物

建立了粗裂地钱中四种黄酮类化合物的固相萃取高效液相色谱分析方法。样品经95%乙醇溶液提取后,用C18固相萃取小柱预处理,采用甲醇∶乙腈∶0.5%乙酸(150∶100∶150,V/V)为流动相,C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm)进行分离与测定。低、中、高浓度下方法的回收率为89.70%～97.95%,RSD小于6%。结果表明,该法简便快速,节省溶剂,分析结果准确可靠,重复性好,可用于粗裂地钱中四种黄酮类化合物的含量分析。     

精制左旋多巴中L-多巴含量及主要杂质成分的HPLC检测

L-多巴作(L-dopa)为治疗帕金森氏病的主要药物,可以作为食品添加剂开发针对特殊人群的功能性产品。从食药两用植物猫豆种子中纯化的精制L-多巴中通常会含有少量L-酪氨酸等杂质,从而影响精制品作为药物使用。本文建立了一种高效液相色谱方法,可以有效的检测从猫豆中提取的L-多巴主要杂质成分L-酪氨酸(L-tyr)和L-苯丙氨酸(L-phe)的含量。在紫外检测下(λ=260 nm),液相条件为:色谱柱:Dikma Spursil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:2%乙酸溶液-甲醇(90∶10);流速:0.8 m L/min;检测波长:260 nm;柱温:室温;能够检测L-多巴和L-苯丙氨酸;在荧光检测下(λex=280 nm,λem=314 nm),液相条件为:色谱柱:Dikma Spursil C18柱(250 mm×4.6mm,5μm);流动相:0.8%甲酸-乙腈(98∶2);进样量:10μL;柱温:室温;能够检测L-多巴与L-酪氨酸。     

鸦胆子中苦木内酯类化合物的制备分离和化学表征

研究制备型高效液相色谱分离纯化鸦胆子中3个苦木内酯的方法。制备色谱的参数为:色谱柱为C18柱(50 mm×200 mm,5μm),流动相为甲醇-水(体积比为40∶60),流速100 mL/min,二级管阵列检测器检测波长为270 nm,进样体积为2 mL。在30 min的运行时间内,鸦胆苦素D,鸦胆苦醇与鸦胆因H与干扰成分得到很好的分离,经HPLC和熔点测定等方法检测纯度均达到98%以上,化学结构由核磁共振氢谱和碳谱进一步确认。此方法具有快速高效、分离组分纯度高的特点,可用于制备鸦胆苦素D、鸦胆苦醇及鸦胆因H。     

美洲大蠊乙醇提取物中原儿茶酸超高效液相色谱定量分析方法的建立

美洲大蠊Periplaneta americana是重要的药用昆虫,具有抗菌消炎、活血化瘀等多种药用价值。本实验通过外标法鉴定了美洲大蠊乙醇提取物中的原儿茶酸,并建立原儿茶酸定量测定的超高效液相色谱方法。色谱柱选用Waters ACQUITY UPLC HSS T3柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),缓冲盐溶液(含0.1%甲酸,25 mmol甲酸铵)为流动相A,100%乙腈为流动相B,流速0.5 m L·min~(-1),样品温度25℃,柱温40℃。结果显示,美洲大蠊乙醇提取物中原儿茶酸可达到基线分离,峰型良好;原儿茶酸在10~160μg内呈良好的线性关系(R2=0.999 9),平均回收率为98.30%~99.57%,相对标准偏差1%;定量测定美洲大蠊乙醇提取物中原儿茶酸的含量为51.38μg·m L~(-1)。结果显示,超高效液相色谱方法重复性好、稳定性高、分析快速,可以用于美洲大蠊乙醇提取物中原儿茶酸含量的定量测定。     

高效液相色谱法同时检测棉花根中的多种植物激素

目的：探寻高效液相色谱同时检测棉花根中多种植物激素含量的方法。方法：采用WatersC18反相色谱柱（4.6×250mm,5μm）,在柱温为35℃、流速为1mL.min-1的条件下,以乙腈和三乙胺溶液为流动相梯度洗脱,在每种物质的保留时间附近切换至最大吸收峰（GA3除外）波长作为检测波长,并与254nm同一波长检测多种植物激素含量的方法进行比较,分离和检测棉花根中的玉米素（Z）、玉米素核苷（ZR）、赤霉酸（GA3）、生长素（IAA）和脱落酸（ABA）的含量。结果：切换波长法检测5种植物激素的灵敏度和回收率均较高,检出限均较低。回收率为：Z 96.82%、ZR 94.14%、GA3 92.75%、IAA 93.38%、ABA 95.57%;检出限为：Z 0.1μg.mL-1、ZR 0.1μg.mL-1、GA3 0.5μg.mL-1、IAA 0.3μg.mL-1;ABA 0.05μg.mL-1,能准确检测出棉花根中Z、ZR、GA3、IAA和ABA的含量。结论：采用Waters C18反相色谱柱（4.6×250mm,5μm）,在柱温为35℃、流速为1mL.min-1的条件下,以乙腈和三乙胺溶液为流动相梯度洗脱,结合切换波长法能同时检测出植物组织中多种植物激素含量。     

HPLC法测定罗氟司特粗品有关物质及新化合物的发现

通过罗氟司特的合成方法及过程分析,推测罗氟司特中可能存在的杂质,并通过高效液相色谱(HPLC)测定其杂质。采用Ultimate Phenyl-Ether色谱柱,0.01 mol/L的KH₂PO₄溶液、乙腈作为流动相。该方法专属性、精密度、回收率及稳定性均良好,用此方法能将罗氟司特的有关物质进行分离,在罗氟司特粗品中检测到的3个杂质,其中IMP4为本研究首次检测到并报道。对检测到的罗氟司特粗品中杂质进行分离定量,发现除检测到的3个杂质以外,本文所用方法还能有效分离另外4种潜在杂质。     

反相高效液相色谱法检测脂必妥片中洛伐他汀的含量

对脂必妥片样品进行预处理,得到的混合物用薄层色谱、反相高效液相色谱法进行定性、定量分析,建立检测其含量的方法。当色谱条件为色谱柱:Kromasil(C18250 mm×4.6 mm,5μm);流动相体积比:乙腈∶水为85∶15,;流速:1.0 ml.min-1;检测波长:420 nm;柱温:30℃;测定结果表明被测峰和其它峰可完全分离,在每毫升10.21~200.03μg内具有良好的线性关系,r=0.9997,测得其中洛伐他汀含量为0.25%,回收率:97.73%,RSD:0.56%。这种方法准确、可靠,可用于含洛伐他汀药品的质量控制。     

红酵母细胞中β-胡萝卜素的快速分离柱高效液相色谱法测定

研究了用快速分离柱高效液相色谱法测定红酵母细胞中β-胡萝卜素的方法。发酵法得到的样品经匀浆后用四氢呋喃提取,提取液以ZORBAXStableBound(4.6×50mm,1.8μm)C18快速分离柱为固定相,乙腈-四氢呋喃体积比8020为流动相分离,流速为1.5ml/min;在该色谱条件下,β-胡萝卜素在1.0min内可达到基线分离;用紫外二极管矩阵检测器检测。方法标准回收率为98%～103%,相对标准偏差为0.46%～0.58%,可用于几种发酵样品中β-胡萝卜素的测定,结果可靠。     

发酵法生产紫杉醇的检测分析

目的:采用高效液相色谱法对发酵液中的紫杉醇进行测定。方法:将紫杉醇产生菌发酵产物经乙酸乙酯萃取得测定样品,高效液相色谱分析方法为苯基柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相乙腈-甲醇-水(36∶4∶60),流速1mL/min,检测波长227nm,进样体积20μL,柱温室温。结果:紫杉醇与干扰物可达到基线分离,在2.2～110μg/mL范围内,紫杉醇的峰面积与浓度线性关系良好,相关系数0.9996,平均回收率为99.55%,RSD为0.60%。结论:与使用C18柱色谱条件相比,该分析方法灵敏度高,不需要复杂的样品前处理过程,仪器配置不复杂、操作方便、准确性高,可有效地检测发酵液中紫杉醇的含量。