HPLC法测定烟草不同部位、不同提取方法茄尼醇的含量

为了建立烟草不同部位、不同烟草原料中茄尼醇的含量测定方法,本文取烟草不同部位经甲醇超声提取及烟草不同提取方法的提取物,分别用高效液相色谱法测定茄尼醇的含量。结果显示,烟草茎及叶柄中茄尼醇含量极低,烤烟中的茄尼醇的含量：中部烟〉上部烟〉下部烟,烟叶档次越高茄尼醇含量越高。提取溶媒为石油醚〉丙酮〉乙醇。     

响应面法对青稞红曲中两种Monacolin K的提取工艺优化北大核心CSCD

优化青稞红曲中两种Monacolin K的提取工艺,并建立其含量测定方法。在单因素试验基础上,利用Box-Benhnken中心组合试验及响应面分析法确定优化提取工艺,结合HPLC法以ZORBAX Eclipse XDB-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-0.1%磷酸水(60∶40,v/v)为流动相,1.0 m L/min为流速,在238 nm处测定两种Monacolin K含量。所建立测定两种Monacolin K含量方法,线性关系、精密度、重复性、稳定性、加样回收率试验结果良好,最佳工艺条件为:提取溶剂纯甲醇,提取温度60℃,液固比20∶1 m L/g,超声提取1 h,酸型与内酯型Monacolin K得率分别为2.51 mg/g和1.65 mg/g,经验证所得模型方程能较好地预测实验结果。     

金银花不同提取方法的绿原酸比较研究

本文采用了水提法、水提醇沉法、酶解法、醇提法对金银花进行提取,并用紫外分光光度法来测定提取物中绿原酸的含量,依此来比较各种方法的优劣。由实验结果可得：以绿原酸作为指标来考察各种方法的优劣,尤以醇提法较好,绿原酸的含量可达到15.28%;以提取物的得率为指标来考察,以酶解法为最好,提取物的得率可达到37.91%。     

HPLC法测定头孢克肟的含量

采用高效液相色谱法测定头孢克肟的含量 ,HPL C法 C1 8为填充柱 (6 .0× 15 0 mm ) ,以氢氧化四丁铵 -乙腈 (34 0 :16 0 )为流动相 ;检测波长为 2 5 4nm。结果 :线性范围为 0 .144 mg/ ml～ 0 .2 80 mg/ ml(r=0 .9999) ,平均回收率为 99.80 %,RSD=0 .2 0 %(n=3)。本法具有柱效高、经济等优点 ,优于 USP法。     

用磷酸二酯酶定量检测植物钙调素方法的改进

从磷酸二酯酶(PDE)提取方法、钙调素(CaM)到定反应时间、测定体系中的Ca^2 和cAMP浓度、样品处理及活性计算等方面对叶正华等测定钙调素的PDE法作了改进。实验表明,改进后的方法使PDE的提取比较较简便快捷,CaM检测过程中的误差减小,结果的准确性、重复性和可比性都更好,可用于多个样品的同时测定。     

HPLC法测定国产葡萄酒中白藜芦醇的含量

采用HPLC法测定国产葡萄酒中白藜芦醇的含量。色谱条件为 :Shim packCLC ODS柱 (15 0mm× 6 0mm) ,流动相 :0 2mol/LH3 PO4 CH3 CN(2 0∶80pH 3 0～ 3 5 ) ,在 30 6nm测定。测得 15种国产葡萄酒中通化干红葡萄酒的白藜芦醇含量最高为 5 6 0mg/L。该方法灵敏 ,重现性好     

HPLC法测定黄芩叶、花、种子中褪黑激素的含量

应用高效液相色谱—荧光检测系统测定了昼夜两个时间点黄芩鲜叶中褪黑激素的浓度差别,同时也检测了花、种子中褪黑激素的含量。结果表明,夜间和白天采集的新鲜叶片昼夜含量不同,分别为1.6503ng/g和0.5163ng/g。在花和种子中也检测到褪黑激素。尽管目前对褪黑激素在植物中的作用尚不完全清楚,但是有关植物中褪黑激素含量的研究将对营养、医药和农业等提供有益的信息。     

一种从鱼类肌肉组织中提取基因组DNA的简易方法

以泰山螭霖鱼、黄河鲤鱼、东平湖鲫鱼为材料,采用改进的酚-氯仿抽提法和蛋白酶K消化法提取基因组DNA,并对其进行紫外分光光度、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、微卫星PCR扩增等方法的鉴定。结果表明,本方法提取的鱼类基因组DNA浓度为0．9-3．25μg／μL,D260nm/D280nm值为1．79-1．87,电泳条带整齐明亮,适合微卫星PCR扩增。因此,本方法能够从鱼类肌肉组织中获得较为纯净的基因组DNA,适于进一步的分子生物学研究之用。     

浸麻类芽孢杆菌葡甘露聚糖降解酶的异源表达及功能研究

【目的】克隆表达浸麻类芽孢杆菌(Paenibacillus macerans)的葡甘露聚糖降解酶,研究其性质和功能,丰富葡甘露聚糖降解酶资源,了解浸麻类芽孢杆菌降解葡甘露聚糖机制。【方法】检索浸麻类芽孢杆菌的葡甘露聚糖降解酶基因,构建重组菌株,表达纯化重组酶,系统研究其功能及在降解葡甘露聚糖中的作用。【结果】克隆表达了5个葡甘露聚糖降解酶组分。结果显示PmMan1和PmMan2为内切β-甘露聚糖酶,PmGlc1、PmGlc2和PmGlc3为外切β-葡萄糖苷酶。其中PmGlc1只能水解pNPβGlc,PmGlc2能水解二糖和人参皂苷的β-1,6-葡萄糖苷键,而PmGlc3对β-葡萄糖苷键的选择性较为广泛。PmMan1、PmMan2、PmGlc2和PmGlc3能够降解葡甘露寡糖,PmMan1和PmMan2可以降解葡甘露聚糖。共同降解葡甘露聚糖时,PmGlc2和PmGlc3与PmMan2具有协同效应,且PmGlc3与PmMan2的协同作用更为显著。【结论】从浸麻类芽孢杆菌中获得了4种葡甘露聚糖降解酶,阐明了该菌葡甘露聚糖降解酶系成员的作用,丰富了酶资源和理论研究成果的同时,为酶法制备活性葡甘露寡糖提供了有效工具。     

浸麻类芽孢杆菌葡甘露聚糖降解酶的异源表达及功能研究

【目的】克隆表达浸麻类芽孢杆菌(Paenibacillus macerans)的葡甘露聚糖降解酶,研究其性质和功能,丰富葡甘露聚糖降解酶资源,了解浸麻类芽孢杆菌降解葡甘露聚糖机制。【方法】检索浸麻类芽孢杆菌的葡甘露聚糖降解酶基因,构建重组菌株,表达纯化重组酶,系统研究其功能及在降解葡甘露聚糖中的作用。【结果】克隆表达了5个葡甘露聚糖降解酶组分。结果显示Pm Man1和Pm Man2为内切β-甘露聚糖酶,Pm Glc1、Pm Glc2和Pm Glc3为外切β-葡萄糖苷酶。其中Pm Glc1只能水解p NPβGlc,Pm Glc2能水解二糖和人参皂苷的β-1,6-葡萄糖苷键,而Pm Glc3对β-葡萄糖苷键的选择性较为广泛。Pm Man1、Pm Man2、Pm Glc2和Pm Glc3能够降解葡甘露寡糖,Pm Man1和Pm Man2可以降解葡甘露聚糖。共同降解葡甘露聚糖时,Pm Glc2和Pm Glc3与Pm Man2具有协同效应,且Pm Glc3与Pm Man2的协同作用更为显著。【结论】从浸麻类芽孢杆菌中获得了4种葡甘露聚糖降解酶,阐明了该菌葡甘露聚糖降解酶系成员的作用,丰富了酶资源...     

不同产地川乌炮制前后差异性成分研究北大核心CSCD

为建立川乌及制川乌的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并结合化学计量学方法和主成分含量测定和比较3个不同产地川乌炮制前后的差异成分。该文采用HPLC法,利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)计算相似度,并结合聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)、偏最小二乘判别分析(PLS-DA)、正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)及主成分含量测定结果进行综合分析。结果表明:(1)建立了3个产地15批川乌炮制前后的HPLC指纹图谱,分别标定了25个和14个共有峰,并通过对照品指认出6个共有峰,分别为苯甲酰新乌头原碱(峰16)、苯甲酰乌头原碱(峰17)、苯甲酰次乌头原碱(峰18)、新乌头碱(峰21)、次乌头碱(峰22)、乌头碱(峰23)。(2)化学计量学方法分析显示,川乌炮制前后的30批样品被明显分为2类,15批川乌被分为3类,15批制川乌被分为3类,新乌头碱、次乌头碱等6个成分可能是不同产地川乌炮制前后的潜在差异成分。(3)炮制前后主成分含量测定结果均有不同程度的变化,四川江油所产川乌炮制前后部分成分含量明显高于另外两个产地所产川乌。该研究建立的指纹图谱精密度、重复性、稳定性均较好,结合化学计量学分析方法和主成分含量测定分析,可为不同产地川乌炮制前后质量控制提供参考。     

鞘磷脂合成酶的提取和检测

在20℃条件下,采用相对饱和度为80％的（NH4）2SO4一步盐析并经低温冷冻干燥12h得到鞘磷脂合成酶粗酶粉后,采用体外酶促反应并结合HPLC法检测鞘磷脂合成酶的含量。     

黄芩甙提取工艺研究

本文研究了纤维素酶在黄芩甙提取工艺上的应用。纤维素酶的比活力为1500个活力单位,酶解温度为50℃、pH值为5.0、酶解时间为18 h、煎煮时间为40 min。实验结果表明:加酶提取黄芩甙比不加酶提取的产率提高16.3%,产物中黄芩甙的纯度有明显的提高。     

松萝酸提取工艺的研究

以破茎松萝为材料,分别以碱水或碱醇直接提取、制备松萝酸钠,并对松萝酸钠提取影响因素进行探究。对所得提取物进行分离和定性鉴定,并利用高效液相层析技术测定提取物中松萝酸的含量。通过单因素实验考察了NaOH和Na2CO3浓度对松萝酸提取的影响,用HPLC测定不同浓度碱液提取物中松萝酸的含量。实验结果说明,1.5%NaOH和75%乙醇+4%Na2CO3提取松萝酸效果较好,松萝酸提取得率最高,分别为1.75%和1.99%,破茎松萝材料中松萝酸含量为2.4%。     

洋甘菊中芹菜苷提取工艺研究

洋甘菊因含有丰富生物活性成分,具有多种保健作用而受到人们广泛关注,其中芹菜苷(Apioside)是其主要活性物质。本实验建立了HPLC测定洋甘菊中芹菜苷含量的方法,采用有机溶剂回流法提取洋甘菊中的芹菜苷,并用HPLC测定芹菜苷的含量。在单因素试验的基础上,采用响应面分析法对洋甘菊提取芹菜苷提取条件进行优化。确立了提取的最佳工艺条件:乙醇体积分数为67%,料液比是1∶24,提取温度为72℃,提取时间为2 h。试验证明,此条件下芹菜苷率为2.14%(n=3),与模型预测2.096%基本一致。     

豆科植物中鱼藤酮含量测定及光学异构体研究

采用HPLC法测定了豆科鱼藤属的毛鱼藤、白花鱼藤、边荚鱼藤、马来鱼藤,灰豆属的非洲山毛豆、灰毛豆,豆薯属的豆薯、鸡血藤属厚果鸡血藤和紫穗槐属紫穗槐9种植物中鱼藤酮含量,发现毛鱼藤含量最高,每100g植物干粉中含1．82g鱼藤酮,紫穗槐含量最低,仅含0．005g。通过比较毛鱼藤、白花鱼藤、边荚鱼藤、非洲山毛豆、豆薯分离得到鱼藤酮的比旋光度,结合马来鱼藤、灰毛豆、厚果鸡血藤、紫穗槐提取物对3龄家蚕的点滴触杀活性差异,说明这些植物中含有的鱼藤酮均为同-光学异构体。     

葛根中总黄酮的提取条件优化及含量测定

采用乙醇浸提法对葛根黄酮提取工艺进行研究,考察了提取温度、时间、乙醇浓度及固液比对葛根黄酮收率的影响,通过正交试验确定了葛根黄酮提取的最佳工艺条件,并采用紫外分光光光度法,以葛根素标准溶液为标样,测定了葛根中总黄酮的含量。实验结果表明,提取温度为70℃,固液比控制在1∶20,乙醇体积分数为80%,提取120min,葛根黄酮得率高达3.3%。在葛根黄酮检测方法的方法学考察中,平均回收率为97.5%,标准差与变异系数均较小,表明该测定方法精密度高,重现性好,可作为检测葛根中总黄酮含量的一种有效手段。     

不同提取剂对粗细菌素提取效果的影响

摸索并建立了粗提细菌素的方法。从粗提细菌素的能力和活性保留两个方面,比较了酸沉淀法和硫酸铵沉淀法的优劣。结果发现,相对于硫酸铵沉淀法,酸沉淀法能够获得更多的粗细菌素,蛋白总量提高了28.7%。且酸沉淀法得到的粗细菌素的比活性比硫酸铵沉淀法提高了55.5%,单位效价是硫酸铵沉淀法的2倍。比较了不同有机溶剂抽提以上沉淀物,综合考虑细菌素得率及活性,发现三氯甲烷的抽提效果较好。     

高效液相法测定盐酸乐卡地平片含量

使用高效液相色谱法测定乐卡地平片含量,流动相为乙腈-0.O1 mol/L乙酸铵溶液—三乙胺(650:350:1)(pH 6.0).结果显示盐酸乐卡地平在浓度为2.05～404.0μg/mL范围内具有良好的线性关系,盐酸乐卡地平片剂的平均标示量含量为100.3％,符合要求.研究表明HPLC色谱法对乐卡地平片剂进行含量测定...