围绕野生果蝇设计系列课外实验活动

夏末秋初时节,无论城乡都很容易采集到野生果蝇。从饲养野生果蝇开始,可设计出一系列的实验,作为生物学课外活动的内容。１　野生果蝇的采集和培养１．１　诱饵与培养基　果蝇以酵母菌为食,只要富含酵母菌、基质松软、不易被杂菌污染的材料,均可作为野生果蝇的诱饵以及幼虫的培养基。常用的诱饵有洒槽、甜瓜条、香蕉、桔子、苹果、桃子、葡萄和发酵的面团等,这些饵料需要保持湿润。１．２　培养瓶的准备　将诱饵分装在２５０ｍｌ左右的广口瓶或锥形瓶中,罐头瓶洗净亦可。诱饵占瓶高的１／４为宜,瓶口覆盖处理好的纱布（单层）,四周…     

野生果蝇的收集和培养

果蝇实验可从收集野生果蝇开始。培养野生果蝇可用于 :1为做唾腺染色体装片提供三龄期幼虫 ;2观察突变性状和进行杂交试验 ;3观察动物完全变态发育的全过程。本文将介绍收集和培养野生果蝇的经验和方法。1　果蝇的形态和生活习性果蝇是双翅目昆虫 ,成蝇体长约 0 .5cm,体色多数为檀黄色 ,故又称“黄果蝇”,也有灰身和黑身的。眼睛为复眼 ,在放大镜或显微镜下观察 ,如向日葵状 ,多为红色。卵椭圆形 ,长约 0 .0 5cm。受精卵约需 36h孵化出白色幼虫 ,经两次蜕皮发育成三龄期幼虫。一龄二龄幼虫较小 ,三龄幼虫长约 0 .0 3～ 0 .0 5cm。成熟三龄期…     

果蝇唾腺染色体制片方法的改进

1　果蝇的培养培养基为常规的玉米粉培养基 ,培养基要松软、含水量较高、发酵良好。放入 7～ 8对果蝇 ,在 18℃恒温培养。待幼虫出现后 ,将其移至 10～ 12℃恒温培养 ,稍低的温度有利于幼虫的充分生长发育 ,实验时选用肥大的三龄幼虫作为材料 (最好选雌性幼虫 )。2　唾腺的剥离将幼虫放在滴有一滴低渗液 ( 0 .0 75% KCl)的载片口 ,实验者两手各持一枚解剖针 (或大头针 ) ,在解剖镜下左手用解剖针压住幼虫尾端 1/ 3处 ,右手用解剖针自幼虫口沟慢慢地向前拉出 ,一对唾腺也随之被拉出。拉出的唾腺带有脂肪体 ,在低渗液下处理几分钟 ,用解剖针…     

培养果蝇三龄幼虫的小技巧

笔者在进行果蝇唾腺染色体实验培养三龄幼虫时,根据多年的经验发现了2项很实用的小技巧.现介绍如下: 1 选择果蝇的小技巧 果蝇的选择,以野生为宜,一般不要选用长期在实验室培养的果蝇.野生果蝇通常出现在有不新鲜或腐烂的水果周围,所以水果摊或有坏烂水果的垃圾堆是捕获果蝇的首选地点,当然也可以用切成碎片的果肉招引果蝇.     

果蝇的培养和管理

果蝇的发育要经过卵、幼虫、蛹和成虫等几个时期(图一)。观察果蝇唾液腺细胞的巨形染色体是在果蝇的三龄幼虫期。要完成这个实验须经过对果蝇的诱捕、培养和幼虫保存等准备过程。     

实验用果蝇培养技术探索

用添加了臭干子汁液的培养基培养果蝇,能提高果蝇繁殖率37.9%,果蝇幼虫化蛹数增加47.2%,羽化为成虫的数目增加43.5%,成虫平均体重和体长分别增加5.6%和16.6%。由此表明臭干子汁能加速果蝇生长发育,显著提高果蝇繁殖率,是一种简便易行、经济实用的实验室中果蝇培养的新方法。     

果蝇唾腺染色体观察材料的制备

选择夜间气候为南风、多云、20～28℃的条件下,用香蕉培养基引诱、采集果蝇.室内或恒温箱中培养12 d,取野外果蝇三龄幼虫替代实验室长期饲养的果蝇幼虫,制作果蝇唾腺染色体.经剥离、解离、染色、压片,观察到比实验室饲养的果蝇染色体较大、个体更清楚的片子.     

获取果蝇三龄幼虫的简便方法

果蝇三龄幼虫是观察果蝇唾液腺细胞巨大染色体的好材料 ,如何获取果蝇三龄幼虫 ?我们设计了一个简便的方法 ,效果较好。该方法是 :在天气暖和的日子里 ,取一清洁的广口瓶 ,放入一些已发酵的面团 ,倒入适量凉开水 ,搅拌发面成糊状 ,厚约 2～ 3cm。取纱布盖住瓶口 ,用线扎紧 ,在纱布的中央开一小孔 ,将广口瓶放到窗口。不久 ,就会有果蝇飞进瓶里 ,在发面上生活 ,雌雄果蝇交配、产卵 ,卵孵化成幼虫 ,幼虫以发面中的酵母菌为食。当发现有幼虫爬到瓶壁上时 ,取其大的即为充分发育的三龄幼虫。果蝇生活史 (即卵→幼虫→蛹→成虫 )的长短与温度关系…     

香椿子对果蝇的寿命及其抗氧化相关指标的影响作用

香椿子[Toona sinensis(A.Juss.)Roem seed]为楝科植物香椿的果实,本文研究了香椿子对野生黑腹果蝇的寿命和抗氧化相关指标的影响作用。实验收集羽化8 h内的黑腹果蝇,置于含1、5 g/L和10 g/L浓度的香椿子培养基上培养,以基础培养基作为对照,采用生存实验检测果蝇的寿命,并研究了不同浓度香椿子对果蝇抗氧化酶活性(SOD、CAT)、脂质过氧化酶产物丙二醛(MDA)以及蛋白含量的影响。结果表明,与对照组相比,雌雄果蝇的寿命与香椿子存在剂量依赖关系,当香椿子浓度为10 g/L时能够显著提高雌雄果蝇的平均寿命、最高寿命和半数死亡时间(P0.05或P0.01);随着香椿子浓度的增大,雌雄果蝇组织总SOD、CAT酶活性升高,MDA含量降低,蛋白含量增加,且对雌蝇的影响高于雄蝇。结论,香椿子具有延缓衰老、抗氧化的作用。     

香椿子对果蝇的寿命及其抗氧化相关指标的影响作用北大核心CSCD

香椿子[Toona sinensis(A.Juss.)Roem seed]为楝科植物香椿的果实,本文研究了香椿子对野生黑腹果蝇的寿命和抗氧化相关指标的影响作用。实验收集羽化8 h内的黑腹果蝇,置于含1、5 g/L和10 g/L浓度的香椿子培养基上培养,以基础培养基作为对照,采用生存实验检测果蝇的寿命,并研究了不同浓度香椿子对果蝇抗氧化酶活性(SOD、CAT)、脂质过氧化酶产物丙二醛(MDA)以及蛋白含量的影响。结果表明,与对照组相比,雌雄果蝇的寿命与香椿子存在剂量依赖关系,当香椿子浓度为10 g/L时能够显著提高雌雄果蝇的平均寿命、最高寿命和半数死亡时间(P<0.05或P<0.01);随着香椿子浓度的增大,雌雄果蝇组织总SOD、CAT酶活性升高,MDA含量降低,蛋白含量增加,且对雌蝇的影响高于雄蝇。结论,香椿子具有延缓衰老、抗氧化的作用。     

果蝇唾液腺细胞多线染色体观察实验的改进要点

(一)捕捉野生果蝇夏天,气候温暖,野生果蝇大量活动。取一只广口瓶,内盛腐烂水果或甜酒糟,瓶口罩上一层细纱布,在细纱布上用铅笔尖钻上直径为2—3毫米的圆孔数个,限制苍蝇进入,置于室内窗台上。过几天,就会有果蝇飞进瓶里取食,产卵、卵孵出白色的小幼虫。这种方法能使我们     

果蝇纯系繁育的初步研究

为探究果蝇的纯系繁育,选用处女蝇,利用玉米培养基对6个纯系果蝇进行纯系繁育实验,判断果蝇纯系繁育过程中是否出现群体退化现象并有无突变发生,为纯系果蝇的长期保存提供参考。实验中使用玉米培养基进行培养并观察记录果蝇生活史以及产卵数量。观察到果蝇生活周期无明显变化,产卵数目稳定,没有发生群体退化和突变现象。     

一种高效的酵母菌培养基的设计

为了设计一种高效酵母菌培养基,以便在需要酵母菌快速生长繁殖时,使用该类培养基,在较短时间内获得大量酵母菌,分别以LB培养基、麦氏培养基作为最基本的培养基加入一定量的大豆提取物,配制成为一定浓度的培养基,并用于酵母菌的培养。根据酵母菌的生长情况,判定大豆提取物对酵母菌的生长繁殖是否有促进作用。实验证明,大豆提取物对酵母菌生长繁殖具有明显的促进作用,尤其是浓度为6％时作用最明显。结果表明,采用LB或麦氏培养基加入6％的大豆提取物对酵母菌的生长促进作用最佳,是一种高效的酵母菌培养基。     

荸荠汁对果蝇生长发育的影响

在正常果蝇培养基上每日添加荸荠汁,显著提高果蝇繁殖率,加速幼虫发育,增加成虫体重和身长。     

爬沙虫提取液对果蝇繁殖力及寿命的影响

本实验通过研究爬沙虫提取液对果蝇繁殖力及寿命的影响,证实爬沙虫提取液具有增强果蝇的繁殖力和提高雌性果蝇寿命的作用。采用乙醚麻醉法,收集8 h内羽化的成虫,选择个体大小相近的雌雄果蝇,在不同爬沙虫浓度的培养基中培养,统计各组第一子代(first filial generation,F1)果蝇成体的数目及果蝇体重。收集各培养基中果蝇,区分雌雄,在原浓度爬沙虫培养基中培养,每日观察果蝇死亡数,直至全部死亡。结果表明:与对照组比较,各爬沙虫处理组子代果蝇雄体数目均显著增加(P<0.05),2.500%组的子代果蝇雌体数目差异显著(P<0.05)。各爬沙虫处理组刚羽化的果蝇体重极显著高于对照组(P<0.01)。2.500%剂量组果蝇雌体平均寿命极显著增加(P<0.01)。本研究为更好地利用爬沙虫的药用价值提供了参考依据。     

VSV糖蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及其自激活作用的检测

构建水泡性口炎病毒糖蛋白(VSV-G)酵母双杂交诱饵载体,检测其在酵母细胞中的表达和自激活作用,为进一步研究酵母双杂交系统筛选与VSV-G相互作用蛋白奠定基础。通过RT-PCR方法从水泡性口炎病毒(VSV)克隆糖蛋白(G)基因,BamH I和Sal I双酶切后连接诱饵载体pSos,获得诱饵质粒pSos-VSV-G,经测序鉴定后pSos-VSV-G转化到酵母菌株cdcH25(α),在营养缺陷培养基中观察pSos-VSV-G的自激活作用和毒性作用,同时利用蛋白印迹法分析诱饵蛋白的表达。成功扩增VSV-G基因,并准确克隆入pSos中,诱饵载体pSos-VSV-G成功转化到酵母菌株cdcH25(α)中,经表型筛选检测无自激活作用和毒性作用,蛋白印迹法检测证实pSos-VSV-G在酵母细胞中表达诱饵蛋白。可以利用酵母双杂交系统筛选与VSV-G相互作的蛋白质。     

“探究培养液中酵母菌种群数量的变化”实验的改进

“探究培养液中酵母菌种群数量的变化”实验过程复杂、计数困难、硬件设施要求高,导致实验结果误差较大,严重影响实验的开设率。本文采用残翅果蝇替代酵母菌作为实验材料,并通过自制果蝇培养瓶达到活体计数的目的,降低了实验难度,提升了实验的可行性和实效性。     

抗增殖蛋白在酵母双杂交系统中转录激活作用的检测

目的:检测抗增殖蛋白在酵母双杂交系统中是否具有转录自激活作用。方法:采用PCR方法扩增抗增殖蛋白基因全长序列,构建酵母双杂交系统的诱饵载体pGBKT7-PHB,制备酵母菌AH109感受态细胞,将pGBKT7-PHB转化感受态酵母菌AH109后培养于含缺失培养基的平板上,检测β-半乳糖苷酶活性,判定其是否具有转录自激活作用。结果:扩增出抗增殖蛋白基因全长序列,构建了诱饵载体pGBKT7-PHB,转化酵母菌AH109后在双缺和三缺培养基上未能使β-半乳糖苷酶活性滤纸片变蓝,说明报告基因未被激活。结论:抗增殖蛋白没有转录自激活作用,可用于酵母双杂交系统。     

果蝇唾液腺染色体观察实验的改进

《全日制中学生物学教学大纲》明确规定 :使学生掌握关于染色体、DNA和基因三者之间的相互关系的知识以及基因的概念。笔者在高中生物学教学中利用果蝇三龄幼虫作实验材料 ,并对该实验步骤进行了一些探索和改进 ,在指导学生理解和掌握染色体、DNA与基因的相互关系的知识方面 ,取得了较好的教学效果 ,具体作法如下 :1　实验原理染色体的数量和形态特征跟生物体的性状遗传有着密切的关系 ,而染色体的形态特征又不易观察 ,科学家们发现果蝇三龄虫的唾液腺细胞处于永久早期 ,染色体解旋呈伸展状态。在幼虫发育过程中细胞核中的DNA多次复制 ,…     

L-精氨酸在实验室果蝇扩繁中的应用

目的实验旨在研究在玉米琼脂培养基中添加L-精氨酸,探究L-精氨酸对果蝇化蛹时间、羽化时间、羽化率及雌雄比例的影响。方法实验分为2组,分别为对照组和实验组,对照组为基础培养基,实验组在基础培养基加1%的L-精氨酸,每管中雌、雄1∶1放入7对果蝇,每组12个重复,接种72 h后移除亲本,统计各组果蝇化蛹时间、羽化时间、羽化数及各组雌雄个数。结果培养基中添加1%的L-精氨酸,白眼(w~(1118))、残翅(CyO)和野生型黑腹果蝇的化蛹数、羽化数分别比对照组提高313.64%、303.53%(P0.01),157.09%、182.76%(P0.01)和233.33%、239.03%(P0.01),添加1%的L-精氨酸后白眼和野生型果蝇的化蛹时间比对照组提前2 d。结论在本实验条件下,1%的L-精氨酸可提高实验室果蝇繁殖力,可应用于实验室果蝇的扩繁。