晚期糖基化终末产物、一氧化氮在糖尿病周围神经病变中的作用

目的:研究晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGE)、一氧化氮(nitric oxide,NO)在糖尿病神经病变中的作用.方法:选择69名糖尿病患者,通过是否合并周围神经病变,分为糖尿病无神经病变组39例,糖尿病合并有神经病变组30例,另外设正常对照组30例,分别测血清AGE、NO水平、胆固醇、空腹血糖、糖化血红蛋白等三组间进行比较.结果:糖尿病患者血清AGE高于正常对照组(P＜0.05),糖尿病患者血清NO低于正常对照组(P＜0.05).结论:AGE表达的上调可能与糖尿病神经病变的发生、发展关系密切;NO表达的下调可能与糖尿病神经病变的发生、发展关系密切.     

血清AGEs、sRAGE水平与急性脑梗死后出血性转化的相关性

摘要 目的：探讨血清晚期糖基化终末产物（AGEs）及可溶性期糖基化终末产物受体（sRAGE）与急性脑梗死后出血性转化（hemorrhagic transformation,HT）的相关性。方法：将2017年1月至2019年12月于我院诊治的131例急性脑梗死患者纳入研究对象,根据患者是否出现出血性转化将其分为HT组及NHT组,比较两组患者AGEs、sRAGE等实验室指标,采用多因素Logistic回归模型对影响急性脑梗死出血性转化的因素进行分析,并采用Pearson相关模型对血清中AGEs水平与sRAGE水平的相关性进行分析。结果：HT组患者合并糖尿病史、心房颤动病史比例、脑栓塞比例、梗死面积、采用抗凝治疗比例及血清中IL-1β、TNF-α、AGEs水平明显高于NHT组（均P＜0.05）;多因素Logistic回归分析示大梗死面积、高IL-1β、TNF-α及AGEs水平是患者出现急性脑梗死后出血性转换的保护因素（OR=0.625, 0.832, 0.874, 0.708;均P＜0.05）,而无抗凝治疗、高sRAGE则是患者出现急性脑梗死后出血性转换的危险因素（OR=10.901, 1.004;均P＜0.05）;相关性分析示血清中sRAGE水平与AGEs、IL-1β及TNF-α水平呈明显负相关（ρ=-0.852,-0.828,-0.826;均P＜0.05）。结论：血清AGEs是急性脑梗死患者出现出血性转化的危险因素,而sRAGE则是保护因素,sRAGE可能通过抑制RAGE与AGEs结合,从而减少释放炎症介质,减轻血管损伤,降低HT发生风险。     

RAGE与阿尔茨海默病关系的研究进展

阿尔茨海默病属于神经系统退行性疾病,该类疾病给社会和家庭带来了沉重的负担,且目前尚无一疗效突破性药物,已经成为一个严重的社会问题和经济问题。Aβ是阿尔茨海默病的重要发病机制之一,通过多种途径介导神经损伤,其中与细胞表面的结合位点结合而引发的病理损害成为当今的前沿认识。一方面,它们可以使Aβ聚集,造成细胞膜的直接损伤;另一方面,它们可以以受体的形式,参与细胞内的信号传导;另外,还可以激活细胞内吞作用,通过溶酶体途径造成细胞损伤。关于与Aβ结合的细胞表面结合位点,晚期糖基化终末产物受体备受瞩目。它是一种多功能受体,属于细胞表面免疫球蛋白家族成员,在神经元、小胶质细胞以及血管内皮细胞上都有表达,Aβ是它的配体之一。研究已证实,它与Aβ相互作用,通过激活细胞内不同的信号通路,对阿尔茨海默病的发生发展发挥重要作用。随着对它的不断深入研究,有望在防治退行性疾病方面产生新的治疗策略与措施。     

RAGE 与阿尔茨海默病关系的研究进展

阿尔茨海默病属于神经系统退行性疾病,该类疾病给社会和家庭带来了沉重的负担,且目前尚无一疗效突破性药物,已经 成为一个严重的社会问题和经济问题。A茁是阿尔茨海默病的重要发病机制之一,通过多种途径介导神经损伤,其中与细胞表面 的结合位点结合而引发的病理损害成为当今的前沿认识。一方面,它们可以使A茁聚集,造成细胞膜的直接损伤;另一方面,它们 可以以受体的形式,参与细胞内的信号传导;另外,还可以激活细胞内吞作用,通过溶酶体途径造成细胞损伤。关于与A茁结合的 细胞表面结合位点,晚期糖基化终末产物受体备受瞩目。它是一种多功能受体,属于细胞表面免疫球蛋白家族成员, 在神经元、小 胶质细胞以及血管内皮细胞上都有表达,A茁是它的配体之一。研究已证实,它与A茁相互作用,通过激活细胞内不同的信号通路, 对阿尔茨海默病的发生发展发挥重要作用。随着对它的不断深入研究,有望在防治退行性疾病方面产生新的治疗策略与措施。     

抗体药物糖化检测方法及其生物学功能研究进展

糖化是一个重要的蛋白质修饰过程,可能影响治疗性蛋白药物（如单克隆抗体药物）的生物活性及分子稳定性。许多研究表明糖化血红蛋白水平升高与心血管疾病及动脉粥样硬化有着密切关系。人体的血浆蛋白,如白蛋白、球蛋白、纤维蛋白和胶原蛋白也可能被糖化,进而形成AGEs,蛋白药物的生产、储存以及药物在体内循环过程中都可能发生糖化反应。综述了治疗性抗体药物糖化的原因、分析方法,以及糖化对抗体药物生物学功能的影响,以期为临床抗体药物的开发、优化及贮存条件研究提供参考。     

晚期糖基化终末产物受体在帕金森病中的作用研究进展

帕金森病是仅次于阿尔茨海默病的第二大神经退行性疾病.帕金森病在全人群中发病率为0.3%,在85 岁至89岁的人中,帕金森病发病率上升到3.5%,是老年群体的常见病之一.晚期糖基化终末产物受体(receptor for advanced glycation end-product,RAGE)是一种普遍存在的跨膜免疫球蛋白...     

胰岛素增强糖基化白蛋白对大鼠血管平滑肌细胞的促增殖作用

在糖尿病性大血管病变的发病过程中,高血糖以及晚期糖基化终末产物（advanced glycation end products,AGEs）、脂质异常和高胰岛素血症的相互作用较其单独作用可能更重要。本研究采用糖基化白蛋白（glycated serum albumin,GSA）模拟AGEs,观察胰岛素和GSA对大鼠血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）的增殖是否存在协同作用,并初步探讨其作用机制。采用组织贴块法分离培养大鼠VSMCs。经过或不经过各种丝裂原激活蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases．MAPKs）抑制剂和氧自由基清除剂N-acetylcysteine（NAC）处理后,加入不同浓度的胰岛素、GSA或GSA＋胰岛素,用MTT法和细胞计数法检测VSMCs的增殖。采用Western blot检测p38MAPK和C-Jun N-terminal kinase1／2（JNK1／2）的磷酸化。结果显示,GSA和胰岛素联合作用促进p38MAPK的磷酸化,而对JNK1／2的磷酸化无明显影响。GSA和胰岛素均可促进VSMCs增殖,而且两者具有协同作用。p38MAPK抑制剂SB203580和NAC可以抑制GSA和胰岛素联合作用引起的VSMCs增殖。以上结果提示,胰岛素和GSA对促进VSMCs增殖有协同作用,这可能是通过氧化应激敏感的p38MAPK通路实现的。胰岛素和AGEs的协同作用在糖尿病性动脉粥样硬化和再狭窄的发病过程中可能起重要作用。     

晚期糖基化终末产物与糖尿病血管并发症

晚期糖基化终末产物（AGEs）是蛋白质、脂质、核酸等大分子物质的氨基基团与葡萄糖或其他还原糖的醛基在非酶促条件下发生一系列反应生成的稳定的共价加成物。晚期糖基化终末产物（AGEs）通过直接修饰蛋白质、脂质、核酸等或者与其受体相互作用的方式诱导氧化应激反应,引起机体各类细胞发生增生、炎症、纤维化反应、形成血栓等,进而加速人体的衰老或导致多种慢性退化型疾病的发生。本文从糖尿病血管并发症的角度对晚期糖基化终末产物的形成过程、致病机制等予以综述。     

晚期糖基化终产物对人脐静脉内皮细胞的肝细胞生长因子表达的影响

目的探讨晚期糖基化终产物(AGEs)对人脐静脉内皮细胞的肝细胞生长因子(HGF)mRNA及蛋白表达的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,予不同浓度(100mg/L、200mg/L、400mg/L)的AGEs刺激24h及400mg/LAGEs作用6h、12h、24h及48h,采用RT-PCR及免疫细胞化学法检测内皮细胞HGFmRNA及蛋白的表达水平。结果在一定范围内随着AGEs浓度增加,内皮细胞HGF表达逐渐增高;AGEs早期作用内皮细胞,促进HGFmR-NA及蛋白的表达,随着AGEs的持续作用,HGF表达减弱。结论随着AGEs作用时间的延长,HGF对受损内皮细胞的修复作用先增强后减弱。     

葛根素注射液对糖尿病大鼠牙周炎的治疗效果及血清AGEs、炎性因子表达的影响

摘要 目的：分析葛根素注射液对糖尿病大鼠牙周炎的治疗效果及血清晚期糖基化终末产物（advanced glycosylation end products,AGEs）、炎性因子表达的影响。方法：随机选取10只大鼠作为正常对照组,另选40只建立糖尿病牙周炎大鼠,将建模成功的大鼠随机分成模型组、实验组和阳性组,每组10只。给药处理6周后,取血清检测AGEs、白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）、IL-8及肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）表达情况;取牙周组织观察压槽骨丧失程度。结果：与健康对照组相比,模型组大鼠胰岛素水平显著降低,血糖、AGEs、IL-6、IL-8和TNF-α水平显著升高,压槽骨降低高度显著增大（P＜0.05）。与模型组相比,实验组和阳性组大鼠水平显著升高,血糖、AGEs、IL-6、IL-8和TNF-α水平显著降低,压槽骨降低高度升高减小（P＜0.05）。结论：葛根素注射液可通过促进胰岛素表达,减少AGEs积聚,降低血糖及炎性因子IL-6、IL-8、TNF-α的表达抑制糖尿病大鼠牙周炎的发展。     

晚期糖基化终末产物荧光光谱检测法在糖尿病筛查中的应用研究

主要研究人体皮肤晚期糖基化终末产物(Advanced glycation end products,AGE)荧光光谱的检测方法,并对AGE荧光光谱在糖尿病检测中的应用价值进行评估.利用研制的AGE荧光光谱检测装置,分别对73例受试者前臂内侧皮肤组织中AGE的荧光进行检测.同时,采用酶联免疫吸附法(ELISA)对受试者血...     

抑制RAGE表达的siRNA重组腺病毒载体的构建及鉴定

目的构建特异性针对细胞膜上晚期糖基化终末产物受体（RAGE）的小干扰RNA（siRNA）腺病毒载体,鉴定其对大鼠胰岛β细胞系INS-1细胞RAGE表达的影响。方法设计并合成针对大鼠RAGE基因的siRNA的靶DNA序列,克隆于穿梭载体pAdTrack中,与腺病毒骨架质粒pAdeasy-1在BJ5183细菌中进行同源重组,脂质体法转染至QB1293A细胞中包装,获得RAGE—siRNA的重组腺病毒,荧光显微镜观察RAGE—siRNA感染INS-1细胞后绿色荧光蛋白（GFP）的表达,Western印迹检测RAGE的蛋白表达。结果成功制备RAGE—siRNA重组腺病毒,在INS-1细胞中RAGE—siRNA感染效率达到90％以上,并能够抑制INS-1细胞RAGE的表达。结论成功构建了携带RAGE的siRNA重组腺病毒载体,能有效沉默INS-1细胞中RAGE的表达。     

吡哆胺对糖尿病大鼠视皮质AGE-RAGE系统的影响

目的观察吡哆胺对糖尿病大鼠视皮质高级糖基化终末产物(AGE)及其受体(RAGE)表达的影响,探讨吡哆胺对视皮质的保护作用。方法健康SD大鼠随机分为正常对照组(NC组)、糖尿病未治疗组(DM组)、糖尿病吡哆胺治疗组(PM组)和氨基胍治疗对照组(AG组)各20只,用链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病模型,PM组和AG组分别于造模成功后第二天开始予吡哆胺和氨基胍灌胃。各组于治疗4w和12w后取材,用酶联免疫吸附(ELISA)法定量检测大鼠视皮质中AGEs含量,荧光免疫组化及图像分析半定量检测各组视皮质RAGE的表达。结果糖尿病治疗组和未治疗组血糖无显著性差异。4w时各组AGEs含量无明显差异,12w时PM组视皮质中AGEs含量与AG组、NC组比较差异无统计学意义,与DM组相比显著降低,差异具有统计学意义(P0.05)。PM组视皮质中RAGE表达比DM组显著减少,差异具有统计学意义(P0.05),但高于NC组(P0.05)。结论糖尿病大鼠12w后视皮质中AGEs含量和RAGE的表达高于正常对照组,吡哆胺类似氨基胍可减少AGEs的堆积,还能抑制RAGE的表达,减轻AGEs-RAGE通路作用导致的组织损伤,对视皮质具有一定的保护作用。     

延缓衰老相关的小分子物质研究进展

筛选、研究具有延缓衰老作用的小分子物质,对于发现新的治疗衰老相关性疾病及肿瘤等的有效靶点、开发新型药物、促进人类健康具有重大的现实意义．同时更重要的是,可以这些小分子物质为切入点,对衰老、肿瘤等生命现象的具体分子机制进行深入研究,这对于分子生物学等相关生命科学研究的发展具有重要的推动作用．总结了近一二十年来发现的一些具有代表性的可延缓衰老的小分子物质,并重点论述了其作用的分子机制．     

sRAGE抑制缺血/再灌注引起的心肌细胞自噬

可溶性晚期糖基化终末产物受体（soluble receptor for advanced glycation end products,sRAGE）作为内源性保护物质,能够拮抗心肌缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R）损伤发生,重要机制是减轻心肌细胞凋亡。而近年来随着细胞死亡研究的深入,细胞自噬被认为是一种新的细胞程序性死亡。sRAGE是否可以抑制缺血/再灌引起的心肌细胞自噬尚未见报道。本文研究证明,sRAGE可抑制缺血/再灌注引起的心肌细胞自噬。以心肌细胞缺氧/复氧模拟心肌细胞缺血/再灌注模型,蛋白质印迹检测自噬门户蛋白beclin-1的表达,激光共聚焦显微镜检测自噬小体及自噬溶酶体的形成。心肌再灌注期间,心肌细胞自噬小体增加,而自噬溶酶体下降。细胞内自噬小体堆积,说明心肌细胞缺血/再灌注使自噬小体与溶酶体结合受损,清除发生障碍。与缺血/再灌注（I/R）组比较,缺血/再灌+sRAGE（I/R+sRAGE）组的自噬流减弱。此外,自噬门户蛋白beclin-1也表达下降。以上结果从细胞形态学和蛋白水平两方面说明,sRAGE抑制了I/R引起的心肌细胞自噬。换言之,sRAGE可以直接作用于心肌细胞拮抗缺血/再灌注损伤,其保护性作用可能与抑制心肌细胞自噬有关。     

天然产物的糖基化及糖基侧链改造

抗生素和抗癌药物等多种天然产物的活性都依赖于其糖基侧链,糖基侧链结构的变化对母体化合物的生物活性、底物适应性及药理学性质具有重要影响。糖基侧链结构变化多端,修饰、改变天然产物的糖基侧链已成为获得临床候选药物的重要方法。利用化学法和酶法,研究者创造了多种改造天然产物糖基化的方法。详细介绍了天然产物的糖基化过程,并从组合生物学、糖基转移酶改造、糖类随机化及新型糖类随机化和糖基转移酶可逆性四方面阐述了糖基侧链的改造方法。     

糖基化终末产物对3T3-L1脂肪细胞脂联素分泌的影响

目的糖基化终末产物(Advanced glycation end products,AGE)对3T3-L1脂肪细胞脂联素(adiponectin,APN)分泌的影响。方法3T3-L1小鼠前脂肪细胞体外培养并诱导分化为成熟的脂肪细胞,以PBS和BSA作为阴性对照,用含不同浓度梯度(50μg/ml、100μg/ml、150μg/ml)AGE的培养液对成熟的脂肪细胞体外培养48h,收集细胞和上清液,用RT-PCR方法检测脂联素mRNA的表达,ELISA方法检测培养液中脂联素蛋白的分泌情况。结果AGE干预组脂联素的表达在mRNA和蛋白水平较对照组均明显下降(P<0.05),并且随着AGE浓度的升高脂联素的合成和分泌逐渐减少,其中100μg/ml、150μg/ml AGE干预组脂联素的减少较对照组有显著差异(P<0.001)。结论糖基化终末产物能够通过抑制3T3-L1细胞脂联素mRNA的合成,近而抑制脂联素的分泌,且这种抑制呈浓度依赖性。     

晚期糖基化终产物在糖尿病肾病中的病理作用

高糖环境下体内积聚的晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)是糖尿病慢性并发症的主要致病因素.AGEs可通过对蛋白的修饰直接作用于机体或通过受体介导的作用影响机体.本文就AGEs的来源、病理生理作用,尤其是在糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)发生发展中的作用及治疗干预作一综述.     

晚期糖基化终产物受体的结构和功能

晚期糖基化终产物受体（RAGE）是一种膜蛋白,属于免疫球蛋白家庭,由400多个氨基酸组成,分子量为35kD,分胞包段、跨膜段和胞内段,在单核巨噬细胞、血管内皮细胞、肾系膜细胞、神经细胞及平滑肌细胞等细胞中普扁表达。RAGE作为信号转导受体介导晚期糖基化终产物（AGE）和其配体在细胞表面结合,激活细胞内多种信号转导机制,在糖尿病慢性并发症、透析相关性淀粉样变（DRA）、阿尔采末病（AD）、动脉粥样硬化等疾病发生中起重要作用。对RAGE结构和功能的认识可能为这些疾病的防治提供新的靶位,因此具有重要意义。     

内质网应激在晚期糖基化终产物诱导心肌细胞损伤中的作用

目的:研究晚期糖基化终产物(AGEs)对原代培养SD乳鼠心肌细胞的损伤,探讨内质网应激在AGEs诱导心肌细胞损伤中的作用.方法:原代培养SD大鼠乳鼠心肌细胞,随机分为对照组、AGEs组.MTT法检测心肌细胞存活率,Western blot法检测内质网应激蛋白GRP 78和CHOP蛋白表达水平.结果:与对照组相比,AGEs具有损伤心肌细胞的作用,并呈现剂量和时间依赖性;AGEs可以诱导内质网应激相关蛋白GRP 78和CHOP的高表达,并呈现剂量依赖性增加.结论:AGEs可以导致心肌细胞损伤,GRP 78和CHOP蛋白表达水平升高,提示内质网应激通路可能参与了AGEs诱导的心肌细胞损伤.