益生菌辅助厄贝沙坦片对糖尿病肾病大鼠的疗效及调节肠道菌群作用的研究

研究益生菌联合厄贝沙坦对糖尿病肾病大鼠的疗效及对肠道菌群的调节作用。

随机选择24只雄性SD大鼠,平均体质量（220±20）g,随机选择6只SD大鼠作为正常组,另取18只SD大鼠为造模组,以高糖高脂饲料+5%葡萄糖水喂养21 d,对造模组大鼠进行腹腔链脲佐菌素（STZ）注射3 d,对照组大鼠腹腔注射枸橼酸缓冲液,将造模成功的大鼠随机分为模型组、厄贝沙坦组和联合给药组,每组各6只。对于正常组和模型组大鼠进行等量生理盐水灌胃,厄贝沙坦组大鼠进行20 mg/mL厄贝沙坦片灌胃,联合给药组大鼠在厄贝沙坦组基础上加用益生菌灌胃（1×10¹⁰ CFU/mL乳酸菌+1×10⁸ CFU/mL其他菌）,每天灌胃1次,共灌胃2周。治疗结束后收集新鲜粪便于−80 ℃冰箱中储存,收集24 h尿液,测定24 h 尿蛋白（UP）,收集腹主动脉血液,测定尿素氮（BUN）和血肌酐（Scr）,对血样中空腹血糖（FBG）水平进行检测。应用DNA提取试剂盒提取粪便DNA,应用紫外分光光度法对DNA含量进行检测,对16S rDNA V4区进行PCR扩增检测,对rDNA文库进行高通量测序。

经过15 d治疗,厄贝沙坦组和联合给药组大鼠的FBG、Scr、BUN和24 h UP水平均有降低,其中联合给药组大鼠的FBG、Scr、BUN和24 h UP水平降低情况优于厄贝沙坦组（t = 8.379,P = 0.001;t = 3.570,P = 0.005;t = 7.579,P = 0.001;t = 2.486,P = 0.032）;粪便样本中有60%以上高质量序列,组间粪便样本差异无统计学意义（P＞0.05）;厄贝沙坦组和联合给药组大鼠的Ace指数和Chaol指数均相对模型组有所改善（t = 9.210,P = 0.001;t = 2.134,P = 0.050;t = 12.314,P = 0.001,t = 7.180,P = 0.001）,而且联合给药组改善情况优于厄贝沙坦组（t = 3.091,P = 0.011;t = 2.769,P = 0.020）;在门水平上群落结构相似（P＞0.05）,在属水平上,乳杆菌属在各组中均有较高丰度。相对正常组,模型组大鼠肠道菌群门、纲、目、属分类水平均有差异,在科、属中,SMB53科、脱硫弧菌科、消化链球菌科、传代菌属和双歧杆菌属丰度有所上调,瘤胃菌科、理研菌科、梭菌属、乳杆菌属丰度有所下降,厄贝沙坦组和联合给药组大鼠各菌属表达均有所改善,其中联合给药组大鼠改善程度优于厄贝沙坦组（t = 9.181,P = 0.001;t = 2.497,P = 0.032;t = 11.288,P = 0.001;t = 2.466,P = 0.033;t = 2.598,P = 0.027;t = 3.152,P = 0.010;t = 7.924,P = 0.001;t = 5.313,P = 0.001;t = 2.287,P = 0.045）。

益生菌联合厄贝沙坦对糖尿病肾病大鼠的治疗效果显著且对肠道菌群有显著改善作用。

     

氨基酸型肠内营养制剂支持后克罗恩病患者肠道微生物和非靶向代谢组学指标的分析

探讨氨基酸型肠内营养制剂支持后克罗恩病患者的肠道微生物和非靶向代谢组学指标的变化,为该类患者的治疗提供参考。

选择我院收治的20例克罗恩病活动期患者作为研究对象,所有患者均采用氨基酸型肠内营养制剂进行支持治疗。比较患者治疗前后肠道菌群结构、菌群多样性以及非靶向代谢组学检测结果的差异。

治疗后,患者肠道乳杆菌属（t=5.200,P＜0.001）、大肠埃希菌（t=11.974,P＜0.001）、克雷伯菌属（t=15.033,P＜0.001）、糖单胞菌（t=12.166,P＜0.001）、恶臭假单胞菌（t=31.063,P＜0.001）、肠球菌属（t=28.867,P＜0.001）数量均显著升高;同时患者肠道菌群OUTs（t=40.435,P＜0.001）、Observed species（t=5.475,P＜0.001）、Chao1指数（t=12.348,P＜0.001）、Simpson指数（t=2.961,P=0.005）、Shannon指数（t=3.330,P=0.002）均显著升高。相比治疗前,治疗后患者血清以及粪便中的氨基酸、多肽、脂肪酸、胆固醇及碳水化合物水平均显著改善。

氨基酸型肠内营养制剂支持后,克罗恩病患者肠道菌群丰度提高,同时患者脂质代谢的改善可能与氧化应激反应通路相关联。

     

约氏乳杆菌GLJO02通过改善肠道通透性缓解DSS诱导的小鼠结肠炎

探究约氏乳杆菌GLJO02对DSS诱导的小鼠结肠炎的影响。

从灌胃普洱茶的小鼠粪便中筛选得到益生菌约氏乳杆菌GLJO02。将18只SPF级C57小鼠随机分成3组：Control+PBS组（6只）、DSS+PBS组（6只）及DSS+GLJO02组（6只）,均自由饮用含3% DSS水7 d以建立结肠炎模型,其中DSS+GLJO02组提前1周灌胃GLJO02菌液;造模期间观察小鼠体质量变化情况及粪便性状改变情况;于造模第8天处死小鼠并留取小鼠血清及肠道样品,检测小鼠血清中LPS水平以评估肠道通透性,通过H&E染色评估小鼠结肠病理情况,通过实时荧光定量技术检测小鼠结肠中炎症因子及紧密连接蛋白的表达情况,通过免疫荧光法检测紧密连接蛋白ZO-1及Occludin的表达情况,并通过高效液相色谱法检测小鼠盲肠内容物中短链脂肪酸的含量。

与Control+PBS组相比,DSS+PBS组小鼠体质量显著降低、DAI评分提高同时结肠长度缩短。与DSS+PBS组相比,DSS+GLJO02组小鼠症状缓解,体质量下降显著改善（t = 6.948,P＜0.000 1）,结肠长度提高（t = 3.790,P = 0.003 4）,DAI评分显著降低（t = 11.880,P＜0.000 1）;组织病理学评分显著下降（t = 10.410,P = 0.000 1）;促炎症因子表达水平降低;免疫荧光检测结果显示ZO-1、Occludin蛋白表达增多;应用高效液相色谱法发现GLJO02处理后能够显著提升盲肠中短链脂肪酸的含量（乙酸：t = 4.042,P = 0.005 4;丙酸：t = 12.380,P＜0.000 1;丁酸：t = 7.819,P＜0.000 1）。

约氏乳杆菌GLJO02能够通过改善肠道通透性,起到缓解DSS诱导的结肠炎的作用。

     

红茶对新生幼鼠肠道菌群形成的影响

探讨红茶对新生幼鼠肠道菌群形成的影响,为从微生态角度研究红茶在人体肠道菌群形成过程中的作用机制奠定基础。

利用宏基因组测序技术检测4周龄新生幼鼠（4weeks组,n = 30）、12周龄正常对照组小鼠（control组,n = 15）和12周龄喂饲红茶水实验组小鼠（teadrink组,n = 15）的肠道菌群分布,分析3组样本的菌群差异情况,探求红茶对新生幼鼠肠道菌群形成的影响。

与control组相比,teadrink组小鼠肠道拟杆菌门（t = −7.711,P＜0.001）、拟杆菌科（t = −3.411,P = 0.009）、长尾嗤菌体科（t = −2.515,P = 0.036）、拟杆菌属（t = −2.693,P = 0.027）、邓肯菌属（t = −2.434,P = 0.041）、居海事城球杆菌属（t = −3.327,P = 0.029）、迪博邓肯菌（t = −2.679,P = 0.028）、普通居海事城球杆菌（t = −3.401,P = 0.027）和Duncaniella_sp._C9（t = −3.104,P = 0.035）相对丰度显著增加,厚壁菌门（t = 8.952,P＜0.001）、乳杆菌科（t = 13.102,P＜0.001）、消化链球菌科（t = 3.665,P = 0.021）、爱格菌科（t = 4.481,P = 0.002）、理研菌科（t = 3.626,P = 0.022）、乳杆菌属（t = 5.542,P = 0.004）、黏液乳杆菌属（t = 6.334,P = 0.002）、龙包茨菌属（t = 3.785,P = 0.005）、阿德勒菌属（t = 4.504,P = 0.002）、约氏乳杆菌（t = 4.282,P = 0.011）和罗伊氏粘液乳杆菌（t = 6.156,P = 0.003）相对丰度显著减少。与4weeks组相比,teadrink组小鼠肠道菌群分布差异大于control组。

红茶对新生幼鼠肠道菌群的形成能够产生影响,不同丰度的菌群可能通过调节碳水化合物代谢等途径来达到改善肠道菌群结构、增强肠道稳态的目的,具体代谢机制有待深入研究。

     

维生素K2对四氯化碳诱导的急性大鼠肝损伤的保护作用

探讨枯草芽胞杆菌产物维生素K2(MK-7)对四氯化碳诱导的急性肝损伤的保护作用及机制。

选取SPF级实验用6~8周龄SD雄性大鼠30只, 体质量200~220 g, 随机分为5组(每组6只): 空白组、肝损伤模型组、模型+溶剂组、模型+水飞蓟素组和模型+维生素K2组。空白组不做额外处理, 其余各组均予四氯化碳染毒, 溶剂组给予与维生素K2组相同体积的大豆油, 水飞蓟素组添加水飞蓟素100 mg/100 g体质量, 维生素K2组用维生素K2每日灌胃(给药剂量为2 μg/100 g体质量)。1周后观察大鼠体征和肝脏外观、肝脏炎症及微肉芽肿、肝细胞空泡化结构, 检测血液AST、ALT、MDA、SOD、TNF-α和IL-6含量。

与肝损伤模型组大鼠比, 模型+维生素K2组肝脏指数下降(t=3.250 0, P=0.031 4)。HE染色结果显示, 与肝损伤模型组大鼠比, 模型+维生素K2组空泡化程度明显降低, 损伤较为弥散。与肝损伤模型组大鼠比, 模型+维生素K2组肝功、氧化应激指标及相关炎症因子水平降低[AST(t=4.283 0, P=0.012 8)、ALT(t=2.582 0, P=0.041 6)、MDA(t=7.028 0, P=0.005 9)、SOD(t=3.384 0, P=0.011 7)、TNF-α(t=3.459 0, P=0.013 5)、IL-6(t=2.422 0, P=0.041 8)]。

维生素K2可减轻大鼠急性肝损伤程度, 其作用可通过改善抗氧化酶体系、抑制氧化应激反应及降低炎性因子水平而实现。

     

低聚果糖对AOM/DSS诱导的结肠炎相关结直肠癌小鼠辅助性T细胞的调控作用

探讨益生元低聚果糖（FOS）对结肠炎相关结直肠癌（CAC）小鼠肠道辅助性T细胞的调节作用。

将6周龄SPF级雄性C57BL6小鼠（体重18～20 g）随机分为对照组、模型组和干预组,每组10只。通过偶氮甲烷、葡聚糖硫酸钠构建CAC小鼠模型,干预组每日使用2 mg/kg b.w. FOS灌胃,持续10周。造模期间监测各组小鼠体重变化,造模结束后测量结肠长度和肿瘤数目。采用微球免疫分析法检测血清Th1/Th2/Th17相关细胞因子水平,流式细胞术分析肠系膜淋巴结内Th1、Th2、Th17细胞亚群比例。

与模型组相比,干预组小鼠结肠长度显著增加（t=3.106,P=0.006 4）,肿瘤数目显著减少（U=15.000,P=0.011 1）,血清中IL-17A（t=3.504,P=0.008 8）、TNF-α（t=2.381,P=0.030 0）等促炎细胞因子水平降低,肠系膜淋巴结Th17细胞比例显著降低（t=6.031,P=0.002 7）,Th1/Th2显著升高（t=2.419,P=0.038 7）。

FOS可调控CAC模型小鼠结肠内辅助性T细胞的分化,抑制肿瘤的发生。

     

高校女性日常能耗与肠道菌群的相关性研究

探讨高校女性日常能耗及肠道菌群结构特征,分析不同能耗指标与特征肠道菌群之间的相关性。

基于智能可穿戴设备人体运动能耗检测仪对广州两所大学的青年女性（Y组,n=30）、中年女性（M组,n=30）进行48 h能耗监测,统计分析日常能耗的组间差异。采集调查对象清晨粪便进行16S rRNA基因测序,运用多元统计学分析中青年女性肠道菌群结构特征。将目、属水平的特征菌群与能耗指标进行相关性检验及回归分析。

Y组人群的日均步数（t=4.250,P＜0.001）、每日能耗值（t=3.590,P＜0.001）、日均中高强度活动时长（t=4.357,P＜0.001）均显著高于M组;两组人群肠道菌群的目、属水平的丰度差异菌群主要为乳杆菌目（Lactobacillales）（t=2.537,P=0.014）、小杆菌属（Dialister）（t=2.904,P=0.005）、布劳特菌属（Blautia）（t=3.246,P=0.002）,其中Lactobacillales和Dialister与多项能耗指标呈正相关,Blautia与多项能耗指标呈负相关。

日均步数、每日能耗值、日均中高强度活动时长的能耗指标可用于预测更好的身体机能;一定条件下,增加低、中、高强度活动时长可能提高Lactobacillales和Dialister的丰度,进而延缓身体机能下降。

     

杀菌型副干酪乳酪杆菌N1115发酵乳饮品对小鼠免疫功能的影响

研究杀菌型副干酪乳酪杆菌N1115（Lacticaseibacillus paracasei N1115）发酵乳饮品对小鼠免疫脏器指数、免疫球蛋白、巨噬细胞、NK细胞、B淋巴细胞及T淋巴细胞的影响。

将SPF级6～8周龄雄性Balb/c小鼠随机分为对照组以及杀菌型副干酪乳酪杆菌N1115发酵乳饮品低、中、高剂量组,每组15只,连续灌胃30 d,进行免疫脏器指数测定、免疫球蛋白测定、碳廓清能力测定、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验、NK细胞活性测定、脾淋巴细胞转化实验、迟发型变态反应、血清溶血素测定和抗体细胞生成实验。

杀菌型副干酪乳酪杆菌N1115发酵乳饮品低、中、高剂量组的小鼠碳廓清指数显著高于对照组（t = 3.926 2,P = 0.000 7;t = 6.000 1,P＜0.000 1;t = 5.314 4,P＜0.000 1）,腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率显著高于对照组（t = 3.812 1,P = 0.001 5;t = 4.257 2,P = 0.000 4;t = 4.976 3,P = 0.000 5）。

杀菌型副干酪乳酪杆菌N1115发酵乳饮品具有增强小鼠非特异性免疫力的功能,可为副干酪乳酪杆菌N1115的开发利用提供科学依据。

     

黄连素和黄芩苷不同配伍对肠道细菌体外生长的影响

研究不同配伍的黄连素和黄芩苷在模拟肠道厌氧环境下对肠道内有害菌、条件致病菌和益生菌体外生长的影响。

采用微量肉汤稀释法测定黄连素和黄芩苷不同配伍对肠道内金黄色葡萄球菌、沙门菌、肠炎链球菌、大肠埃希菌、乳杆菌及嗜黏蛋白阿克曼菌体外生长24 h后吸光度的影响。

对于金黄色葡萄球菌,抑制作用最强的是黄连素∶黄芩苷 = 10∶1（组合六）125 μg/mL（t = –39.350,P＜0.001）,抑制率为99.91%;对于沙门菌,抑制作用最强的是黄连素∶黄芩苷 = 100∶1（组合七）250 μg/mL（t = –73.788,P＜0.001）,抑制率为80.47%;对于肠炎链球菌,抑制作用最强的是黄连素∶黄芩苷 = 1∶0（组合一）250 μg/mL（t = –57.549,P＜0.001）;对于大肠埃希菌,抑制作用最强的是黄连素∶黄芩苷 = 1∶0（组合一）125 μg/mL（t = –29.085,P＜0.001）;对于乳杆菌,增殖作用最强的是黄连素∶黄芩苷 = 100∶1（组合七）31.25 μg/mL（t = 76.280,P＜0.001）;对于嗜黏蛋白阿克曼菌,增殖作用最强的是黄连素∶黄芩苷 = 100∶1（组合七）62.5 μg/mL（t = 8.357,P＜0.001）。

黄连素∶黄芩苷 = 10∶1（组合六）、黄连素∶黄芩苷 = 100∶1（组合七）对有害菌的抑制作用更强,黄连素∶黄芩苷 = 100∶1（组合七）对益生菌的增殖作用更强,而黄连素和黄芩苷联合使用对条件致病菌的抑制作用较弱。

     

营养干预对肝硬化代偿期合并糖尿病患者肠道菌群的影响

探讨营养干预对肝硬化代偿期合并糖尿病患者肠道微生物的影响。

收集2022年9月—2023年9月本院收治的80名肝硬化代偿期合并糖尿病患者,随机分为对照组和观察组,每组40例。对照组使用常规降糖药物治疗,观察组在对照组基础上,进行营养干预,根据1.5 g/kg的体重剂量摄入乳清蛋白质粉,接受常规饮食咨询和营养建议。每4周收集空腹血清样本,在干预前和营养干预后12周收集粪便样本,使用全自动生化分析仪、ELISA法检测血清葡萄糖、总胆固醇、高密度脂蛋白（HDL-c）胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-c）胆固醇水平等临床参数。使用Illumina Nova Seq平台对粪便基因组DNA测序。

对照组患者12周后临床各项指标与基线比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）。观察组患者营养干预后空腹血糖（t=2.862,P=0.005）、空腹胰岛素（t=5.926,P＜0.001）、HOMA-IR（t=2.680,P=0.009）、hs-CRP（t=3.386,P=0.001）、蛋白质氧化率（t=7.762,P=0.001）均显著降低,呼吸商显著增加（t=2.958,P=0.004）。营养干预后6个菌种的相对丰度发生了显著变化,分别属于厚壁菌门、拟杆菌门和变形菌门。属于拟杆菌属和梭菌目的菌种在营养干预后产生了显著的菌株基因组变化。基于HOMA-IR的相对改善,将观察组患者分为响应者（R）亚组和非响应者（NR）亚组。两个亚组之间肠道微生物群的动态变化差异有统计学意义（P=0.008）。

肠道微生物群在营养干预对肝硬化代偿期合并糖尿病患者胰岛素敏感性影响中发挥重要作用,可能有助于临床实施个体化生活方式干预。

     

慢病毒载体介导Bdnf基因修饰的骨髓间质干细胞移植治疗脑梗死

为研究经Bdnf基因修饰的骨髓间质干细胞(Mesenchymal stem cells, MSCs)对脑梗死的协同治疗作用, 构建带有大鼠Bdnf基因之慢病毒载体, 并感染大鼠骨髓间质干细胞(Rat mesenchymal stem cells, rMSCs)。运用线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型, 经尾静脉注射移植, 对照组注射0.1 mol/L磷酸盐缓冲液(PBS)1 mL, Bdnf-rMSCs和Mock-rMSCs组分别注射Bdnf-rMSCs细胞悬液以及未插入目的基因的空病毒载体感染后的rMSCs细胞悬液各1 mL。各组大鼠分别于术后24 h、移植后2周及2月应用modified Neurological Severity Scores (mNSS)评价神经功能状况。结果显示, 与对照组相比, Mock-rMSCs及Bdnf-rMSCs移植组神经功能改善明显, mNSS评分差异有统计学意义(P<0.001), 而且Bdnf-rMSCs移植组明显优于Mock-rMSCs移植组(P<0.001)。移植后2周及2月, 与对照组相比两移植组梗死区脑组织结构恢复较好, 均可见EGFP阳性细胞在梗死区及其周边区聚集并存活, 并有部分细胞出现神经元样改变。Bdnf- rMSCs移植组中移植细胞大量表达BDNF, 两移植组中均有部分植入细胞表达神经细胞表面标志物。研究表明Bdnf基因修饰的rMSCs经静脉移植后可迁移至脑梗死灶周围, 向神经细胞分化并长期存活。移植后的干细胞可与其分泌的BDNF协同促进脑梗死后神经功能恢复, 这为将来基因工程干细胞移植治疗脑梗死提供了实验依据。     

高压氧预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及对其海马BDNF和GDNF基因表达的影响

目的:探讨高压氧预处理(Hyperbaric oxygen preconditioning, HBO-PC)对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及对其海马脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor, BDNF)、胶质细胞源性神经营养因子(glialcellline-derivedneurotrophicfactor,GDNF)基因表达的影响。方法:将32只SD雄性大鼠随机分为对照组(Sham组)、高压氧对照组(HBO组)、模型组(MCAO组)、高压氧预处理+模型组(HBO+MCAO组),对HBO组和HBO+MCAO组连续给予高压氧预处理5天,随后对MCAO组和HBO+MCAO组进行右侧颈内动脉栓线术,建立大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)模型,其他两组行假手术,于术后第7天对各组大鼠进行Morris水迷宫行为学检测和神经功能评分,检测结束后处死大鼠,进行神经功能缺损评分及氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride, TTC)染色;通过蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测大鼠海马组织BDNF和GDNF的基因表达情况。结果:(1)神经功能评分提示:Sham组和HBO组均未出现神经功能障碍,MCAO组大鼠出现明显的神经功能障碍,MCAO+HBO组神经功能评分明显高于MCAO组(P0.05)。(2)TTC检测提示:Sham组和HBO组脑组织损伤一侧均未出现梗死灶,MCAO组出现较大的梗死面积比(25.45±8.75)%,MCAO+HBO组的梗死面积比(18.84±10.55)显著小于MCAO组,差异具有统计学意义(P 0.05)。(3)Western Blot检测显示:MCAO组BDNF与GDNF基因表达水平显著低于Sham组和HBO组,差异具有统计学意义(P 0.05),而MCAO+HBO组可以逆转这一效应,差异具有统计学意义(P 0.05)。结论:高压氧预处理可以通过调节BDNF、GDNF基因表达,改善MCAO模型大鼠神经功能和认知水平,发挥神经保护作用。     

Changes in bone volume and bone resorption by olpadronate treatment in an experimental model of uremic bone disease

Thirty male adult Wistar rats (300-/+10 g body weight) underwent either 5/6 nephrectomy (Nx, n=20) or sham operation (SHAM, n=10) to determine olpadronate effects in an experimental model of uremic bone disease. For a 38-day period, 10 rats received olpadronate (16microg/100g bw) once a week (Nx+OPD) and the other vehicle (Nx). SHAM received vehicle. At baseline, treatment onset (t=7 days) and end of study (t=45 days) calcium, phosphorus, creatinine, bone alkaline phosphatase (b-ALP) and deoxypyridinoline crosslinks (DPyr) were determined. At t=0 and t=45 bone mineral density (BMD) was measured by DXA. At t=45 the right tibia was removed for bone histology. There were no differences in serum calcium. Phosphorus increased in Nx and Nx+OPD compared to SHAM (p相似文献   

脑梗死患者的细胞免疫与体液免疫的变化规律研究

目的探讨脑梗死患者的细胞免疫功能与体液免疫功能的变化规律。 方法2016年5月~ 2017年5月期间广东省佛山市禅城区中心医院收治的脑梗死患者120例设为观察组,观察组患者按照脑梗死的面积分为轻症组（大脑中动脉区域脑梗,脑梗范围的直径≤5 cm者,60例）和中重症组（大脑中动脉区域脑梗,脑梗范围的直径> 5 cm者,60例）;选择120例健康体检者设为对照组。采用流式细胞仪和速率散射免疫透射比浊法测定各组血免疫球蛋白IgA、IgM、IgG、补体C3、C4水平来反应体液免疫功能;用试剂盒、外周血中T淋巴细胞亚群CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺、NK细胞、B细胞和CD4⁺/CD8⁺百分率水平的测定;对抗心磷脂抗体（ACA）浓度进行测定;通过ACA浓度反映的颈动脉粥样硬化（CAS）中生化指标的变化分析脑梗死患者的细胞免疫功能与体液免疫功能的关联。多组间比较采用单因素方差分析;患者性别比例采用χ²分析;通过直线相关分析细胞免疫与体液免疫的相关性。 结果脑梗死中重症组T淋巴细胞含量低于脑梗死轻症组和对照组,差异具有统计学意义（P < 0.05）,CD8⁺细胞百分率（27.91%±2.97%）T淋巴细胞含量高于脑梗死轻症组和对照组,CD4⁺/CD8⁺比值（1.98±0.03）水平高于脑梗死轻症组和对照组（P < 0.05）;与脑梗死轻症组和对照组比较,脑梗死中重症组NK细胞（12.29%±1.58%）和B细胞（12.76%±2.00%）均下降（P < 0.05）。与脑梗死轻症组和对照组比较,脑梗死中重症组血清中血球免疫球蛋白IgG（10.60±1.06）IU/ml水平降低（P < 0.05）;血球免疫球蛋白IgA（4.01±0.35）IU/ml、补体C3（2.13±0.04）IU/ml和补体C4（0.39±0.01）IU/ml的水平升高（P < 0.05）,而IgM（2.60±0.05）IU/ml无明显变化,差异无统计学意义（P > 0.05）。与脑梗死轻症组（14.11±2.09）PLU/ml和对照组（7.82±1.15）PLU/ml比较,脑梗死中重症组（16.88±2.50）PLU/ml血清ACA浓度提高,差异具有统计学意义（t = 9.153,P < 0.01）。与脑梗死轻症组和对照组比较,脑梗死中重症组总胆固醇[（1.75±0.03）mmol/L]和甘油三酯[（2.42±0.33）mmol/L]含量增加;高密度脂蛋白胆固醇[（0.41±0.03）mmol/L]含量降低;与对照组比较,脑梗死中重症组低密度脂蛋白胆固醇[（1.55±0.21）mmol/L]含量升高（P < 0.05）。通过细胞免疫参数与体液免疫参数之间的相关性分析显示呈负相关,且相关性曲线陡峭（P < 0.05）。 结论脑梗死患者的细胞免疫与体液免疫的变化规律可指导脑梗死治疗和预后。     

大动脉粥样硬化性脑梗死合并SCH患者甲状腺激素与血脂、BDNF及Hcy的关系研究

摘要 目的：探讨大动脉粥样硬化性脑梗死合并亚临床甲状腺功能减退(SCH)患者甲状腺激素与血脂、脑源性神经营养因子(BDNF)以及血清同型半胱氨酸(Hcy)的关系。方法：选取2017年8月~2019年8月期间本院收治的单纯大动脉粥样硬化性脑梗死患者278例纳入脑梗死组,大动脉粥样硬化性脑梗死合并SCH患者122例纳入合并组,另选同期在我院进行体检的健康受试者40例为对照组。检测并对比三组受试者的甲状腺激素、血脂指标、BDNF、Hcy水平,并对大动脉粥样硬化性脑梗死合并SCH患者甲状腺激素与血脂、BDNF、Hcy的相关性进行分析。结果：脑梗死组、合并组患者的促甲状腺激素(TSH)水平均高于对照组,且合并组高于脑梗死组(P<0.05)。脑梗死组、合并组患者的甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)水平均高于对照组,且合并组高于脑梗死组(P<0.05)。脑梗死组、合并组BDNF水平低于对照组,Hcy水平高于对照组,且合并组BDNF水平低于脑梗死组,Hcy水平高于脑梗死组 (P<0.05)。经Pearson相关性分析,大动脉粥样硬化性脑梗死合并SCH患者的TSH水平与TG、TC、LDL-C、Hcy呈正相关性,与BDNF呈负相关性(P<0.05)。结论：脑梗死合并SCH患者甲状腺激素水平与患者的血脂水平、BDNF、Hcy有一定的相关性,初步推测SCH通过影响机体的脂质代谢、升高Hcy水平、降低BDNF水平等途径,加重患者的脑梗死程度。     

Prenatal hypoxic-ischemic insult changes the distribution and number of NADPH-diaphorase cells in the cerebellum

Astrogliosis, oligodendroglial death and motor deficits have been observed in the offspring of female rats that had their uterine arteries clamped at the 18(th) gestational day. Since nitric oxide has important roles in several inflammatory and developmental events, here we evaluated NADPH-diaphorase (NADPH-d) distribution in the cerebellum of rats submitted to this hypoxia-ischemia (HI) model. At postnatal (P) day 9, Purkinje cells of SHAM and non-manipulated (NM) animals showed NADPH-d+ labeling both in the cell body and dendritic arborization in folia 1 to 8, while HI animals presented a weaker labeling in both cellular structures. NADPH-d+ labeling in the molecular (ML), and in both the external and internal granular layer, was unaffected by HI at this age. At P23, labeling in Purkinje cells was absent in all three groups. Ectopic NADPH-d+ cells in the ML of folia 1 to 4 and folium 10 were present exclusively in HI animals. This labeling pattern was maintained up to P90 in folium 10. In the cerebellar white matter (WM), at P9 and P23, microglial (ED1+) NADPH-d+ cells, were observed in all groups. At P23, only HI animals presented NADPH-d labeling in the cell body and processes of reactive astrocytes (GFAP+). At P9 and P23, the number of NADPH-d+ cells in the WM was higher in HI animals than in SHAM and NM ones. At P45 and at P90 no NADPH-d+ cells were observed in the WM of the three groups. Our results indicate that HI insults lead to long-lasting alterations in nitric oxide synthase expression in the cerebellum. Such alterations in cerebellar differentiation might explain, at least in part, the motor deficits that are commonly observed in this model.     

cAMP/PKA-pCREB信号通路介导康复训练促进脑缺血大鼠运动功能恢复的探讨

目的探讨cAMP/PKA-pCREB信号通路是否在康复训练促进的缺血性脑卒中大鼠运动功能的恢复方面发挥作用。方法采用Longa改良线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型(middle cerebral artery ischemia-reperfusion model,MCAO),造模成功的大鼠随机分为自然恢复组(n=24)、自然恢复+Rp-cAMP组(n=24)、康复训练组(n=18)和康复训练+Rp-cAMP组(n=18)。同时设立假手术组(n=12)。于侧脑室注射RpcAMP后立即进行MCAO模型的制备。训练组大鼠于术后48 h开始每天给予平衡木、转棒及滚筒训练。采用平衡木试验评定大鼠的运动功能。酶联免疫法(ELISA)检测缺血灶周围的脑组织内PKA表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测pCREB蛋白表达,同时采用免疫组化法对pCREB进行定位检测。结果 (1)运动功能评分结果揭示,自然恢复+Rp-cAMP组大鼠的运动功能低于自然恢复组,提示Rp-cAMP可抑制脑缺血大鼠运动神经功能的恢复;康复训练组大鼠的运动功能明显高于自然恢复组,也高于康复训练+Rp-cAMP组,提示Rp-cAMP明显减弱康复训练促进脑缺血大鼠运动神经功能的恢复;(2)于术后2 d、7 d、14 d、21 d检测缺血灶周围的脑组织PKA、pCREB的蛋白表达结果显示:康复训练组明显高于自然恢复组,同时高于康复训练+Rp-cAMP组,提示康复训练促进脑缺血大鼠的PKA、pCREB蛋白的表达,且Rp-cAMP明显抑制了康复训练促进脑缺血大鼠的PKA、pCREB蛋白的表达。结论 cAMP/PKA-pCREB信号通路可能介导康复训练促进的脑缺血大鼠运动功能的恢复。     

Synergic effects of ultrasound and laser therapies on mesentery for management of obesity and diabetes in rats

Nowadays, the mesentery as a new organ was discovered. Mesenteric events may play an important role in the pathophysiology of several diseases. The aim of our study was investigate the synergic effects of ultrasound (US) and laser therapies on mesentery in obese-hyperglycemic rats. The 25 male Wistar rats were randomized into five groups. Obese nondiabetic (OND) group: obese rats without diabetes and no treatment conditions; SHAM group: obese-hyperglycemic rats treated with placebo; US group: obese-hyperglycemic rats treated with US; LASER group: obese-hyperglycemic rats treated with laser and; US+LASER group: obese-hyperglycemic rats treated with US plus laser. An animal model of type 2 diabetes based on a hyperlipidemic diet combined with a low dose of streptozotocin was used in this study. Body mass and biochemical measurements were performed. GOT and GPT level showed a significant reduction in the treated groups than SHAM. The total cholesterol, triglycerides and very low-density lipoprotein (VLDL) levels showed significantly lower values for the US+LASER group. There was also reduced risk of cardiovascular diseases evidenced by Castelli index in the treated groups than SHAM. This study showed that the US and laser treatment on mesentery resulted to an improvement in biochemical measurements of the obese-hyperglycemic rats, especially the total cholesterol, triglycerides and VLDL levels.     

芪龙通络胶囊联合长春西汀对脑梗死患者神经功能、血管内皮功能及血液流变学的影响

摘要 目的：探讨芪龙通络胶囊联合长春西汀对脑梗死患者神经功能、血管内皮功能及血液流变学的影响。方法：选取2016年4月~2019年5月期间我院收治的脑梗死患者142例,上述患者根据随机数字表法分为对照组（n=71）和研究组（n=71）,其中对照组患者给予长春西汀治疗,研究组则在对照组的基础上联合芪龙通络胶囊治疗,比较两组患者疗效、神经功能、血管内皮功能及血液流变学,记录两组治疗期间不良反应状况。结果：研究组治疗2周后的临床总有效率为90.14%（64/71）,高于对照组患者的73.24%（52/71）（P<0.05）。两组治疗2周后美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分、神经元特异性烯醇化酶（NSE）、内皮素 -1（ET-1）、全血黏度高切、全血黏度低切、血浆黏度、纤维蛋白原降低,且研究组低于对照组（P<0.05）;两组治疗2周后神经生长因子（NGF）、脑源性神经营养因子（BDNF）、血管内皮生长因子（VEGF）、一氧化氮（NO）升高,且研究组高于对照组（P<0.05）。两组不良反应发生率对比未见统计学差异（P>0.05）。结论：芪龙通络胶囊联合长春西汀治疗脑梗死患者的疗效显著,可有效改善患者神经功能、血管内皮功能及血液流变学,且不增加不良反应发生率。     

Age dependent response to exogenous estrogen on micturition, contractility and cholinergic receptors of the rat bladder.

The age related effects of 17beta-estradiol (E) supplementation on micturition and contractility of ovariectomized rats (OVX) were evaluated. Studies were carried out in young, 2 month, and mature, 10 month old rats which were distributed into three groups: Sham-operated (SHAM), (OVX), and (OVX+E). Following treatment, urodynamic studies were performed followed by an in vitro bladder tissue evaluation. Urodynamic studies show age and time related changes in bladder function. The in vitro results show that the hormone deprived tissues of 2 months old rats had a decreased responsiveness to cholinergic stimulation; maximum contractile force occurred at 78% and 187% for the SHAM. The response from the OVX+E tissues was evident at 113%. E supplementation of the mature rats increased bladder contractile force to the same levels as SHAM (156% and 176%). The response of the mature OVX rats remained significantly below that of SHAM or OVX+E rats. Findings suggest that the impact of E on bladder function depends on age at which it is given. Differential response between young and mature to exogenous E indicates that endogenous estrogen plays a major role in the neuromuscular development of normal bladder function and micturition reflexes. Contractility data show that OVX in young rats irreversibly decreases the response of the bladder to cholinergic stimulation, suggesting that exogenous E partially restores function while in mature rats, exogenous E was able to reverse the effects of OVX.