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相似文献
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1.
介绍一种检测SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳中家蝇幼虫蛋白的新方法-海波银染法。该方法对传统银染方法中的试剂与步骤加以改进,省略了乙醇固定与洗涤步骤,只需20 min即可完成全部染色过程,且仅在国产分析纯试剂及普通操作条件下,灵敏度可达毫微克级水平。  相似文献   

2.
Bassam和Sanguinetti银染方法在SRAP和TRAP标记中的比较研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
银染作为一种重要的DNA染色方法,对分子标记检测有重要影响.SRAP标记和TRAP标记是两种较为新型的分子标记,近年来得到了广泛应用,尤其在缺少遗传图谱的物种中应用价值更大.以普通烟草种(Nicotiana tabacum L.)烤烟和香料烟品种作为供试材料,对Bassam和Sanguinetti两种银染方法,在标记检测效率、成本及染色效果等方面进行了研究,并对其在SRAP标记和TRAP标记中的应用进行了探讨.结果表明,Sanguinetti银染法比Bassam银染更为简便、经济,染色照片的色阶图说明Sanguinetti染色方法的背景与扩增带区分明显,能够清楚地读带;且该方法能够扩增出很好的SRAP和TRAP标记谱带.因此,推荐在SRAP和TRAP标记检测中采用Sanguinetti银染方法.  相似文献   

3.
对人和动物细胞的中期染色体的核仁形成区(NOR_s)用硝酸银试剂进行特异性染色(下称银染技术),已由Dencon和Goodpasture等人证明,被银染的物质是一种酸性蛋白质成分。银染能够显示核糖体基因18S和28S在染色体上的位置以及在细胞周期中的活动。染色体银染技术的出现,为细胞学研究提供了新的手段,其应用范围已经扩及到人和动物的体细胞、生殖细胞以及培养细胞等各个方面。  相似文献   

4.
聚丙烯酰胺凝胶快速、高效银染方法的建立   总被引:40,自引:1,他引:40  
梁宏伟  王长忠  李忠  罗相忠  邹桂伟 《遗传》2008,30(10):1379-1382
摘要: 聚丙烯酰胺凝胶电泳目前已经广泛应用在SSR标记、SNP标记以及遗传图谱的构建等过程中, 但是一直以来凝胶银染方法由于染色时间长、染色步骤繁琐, 使得对于开展大批量的实验研究极为不利。文章通过对常规方法的改良, 建立了一个银染步骤只需要10 min, 整个染胶过程只需约20 min的快速、高效的银染方法。  相似文献   

5.
介绍一种快速灵敏的银染新方法   总被引:1,自引:1,他引:0  
银染已成为凝胶电泳中检测微量蛋白质的一项十分有效的实验技术,但实际运用中仍存在着不少问题,对试剂及水要求很高,背景深,导致条带不清是其主要问题。为了解决这些问题,我们比较研究了多种银染程序,主要通过提高反应温度,改变固定及还原步骤的试剂配方,摸索出一套快速、灵敏的新方法,整个染色可在一小时内完成。固定之后,在含有乙醇的醋  相似文献   

6.
李实摊  李立容  王宗仁 《遗传》1981,3(6):19-22
对人和动物细胞的中期染色体的核仁形成 区(NOR,)用硝酸银试剂进行特异性染色(下 称银染技术),已由Denton[4]和Goodpasture[5]等 人证明,被银染的物质是一种酸性蛋白质成分。 银染能够显示核糖体基因18S和28S在染色体 上的位置以及在细胞周期中的活动[7]。染色体 银染技术的出现,为细胞学研究提供了新的手 段,其应用范围已经扩及到人和动物的体细胞、 生殖细胞以及培养细胞等各个方面。  相似文献   

7.
几种快速除去银染后银粒的方法银染技术应用于细胞遗传学的研究已有近百年的历史,近年来得到了更广泛的发展。它不仅能选择性地染核仁组织者(NORS)、着丝点、中心体和联会复合体(SC),而且还能显示核骨架、染色体轴(骨架)等结构。为了进一步研究银染的机理及...  相似文献   

8.
用银染mRNA差异显示进行基因筛选   总被引:1,自引:0,他引:1  
介绍一种简便、快速的mRNA差异显示法银染法。并对在逆转录时总RNA加入的量、dNTP的浓度、银染的条件、差异条带的回收及再扩增等方面作了探讨和改进。实验表明,用银染进行mRNA差异显示具有快速、简便、经济、可靠性高等优点。为新基因的发现和克隆提供了有用的手段。  相似文献   

9.
通过比较而获得沙冬青cDNA-AFLP银染和条带回收的最佳方法.银染时采取Bassam法和Sanguinetti法,凝胶条带回收时利用直接回收法、试剂盒法、LiCl高盐法和聚丙烯酰胺凝胶高效回收法.比较不同方法对于开展聚丙烯酰胺凝胶电泳的影响.采用Bassam银染法对获得的扩增产物进行染色后无法得到差异显示条带,而利用Sanguinetti银染法显色后可观察到比较明显的差异表达条带;以直接回收法、PAGE试剂盒法、LiCl高盐法对差异条带进行回收后,二次PCR无法得到扩增产物,采用聚丙烯酰胺凝胶高效回收法后则可获得比较清晰的二次扩增产物.Sanguinetti银染法和聚丙烯酰胺凝胶高效回收法是应用于本研究的最佳方法.  相似文献   

10.
目的:建立一种酪胺信号放大-量子点标记银染增强的基因芯片可视化检测方法,提高基因芯片检测的灵敏度。方法:待测靶基因与固定在玻片上的探针杂交,依次加入链霉亲和素标记的辣根过氧化物酶、生物素标记的酪胺及链霉亲和素标记的量子点,37℃孵育,然后加入银增强试剂显色,最后用可视化生物芯片扫描仪扫描并记录结果;以牛布鲁菌210105株为检测对象,以酪胺信号放大-荧光素Cy3(TSA-Cy3)检测法为对照方法,测定酪胺信号放大-量子点标记银染增强(TSA-QDS)检测法的灵敏度。结果:确定了基因芯片量子点标记银染增强可视化检测方法的检测流程,优化了检测条件,并考察了检测灵敏度。优化的检测条件为:酪胺-生物素稀释比例为1∶4000,链酶亲和素标记的量子点稀释比例为1∶50,37℃孵育时间为25~30 min,银染增强时间为6~7 min。检测牛布鲁菌的灵敏度为103CFU/mL。结论:该方法实现了基因芯片高灵敏度可视化检测,其灵敏度与荧光法相当,并且有可视化的优势。  相似文献   

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