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康宁木霉CP88329纤维素酶产生条件的研究 总被引:25,自引:2,他引:25
从生霉棉布上分离出的康宁木霉CP88105经诱变处理,获得一株高产纤维素酶的突变株CP88329。在固体培养基上,28℃培养72小时,所产纤维素酶固体曲,以羧甲基纤维素钠为底物酶活力为4880u/g;以脱脂棉为底物酶活力为480u/g。产酶活力水平均为出发菌的3倍。酶在脱脂棉上作用最适条件为pH4.5-5.0,45-50℃;45℃保温4h,pH稳定范围为3.5-6.5;60℃保温1h,酶活力剩余20%。酶可用于苎麻布抛光处理和牛仔服“石磨”处理。 相似文献
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绿色木霉纤维素酶CBHⅡ基因的结构研究 总被引:4,自引:0,他引:4
实验经限制性酶切和双向Southern杂交将重组质粒pCBHII-14的14kb外源片段上的绿色木霉纤维素酶CBHII基因定位于4.4kb的EcoRI片段上,将该片段克隆于质粒pUC19,获得重组质粒pCBHII。通过限制性分析构建了pCBHII上4.4kbEcoRI片段的物理图谱。在此基础上用质粒制作该片段的亚克隆,采用Sanger双脱氧链终止法测定了含绿色木霉纤维素酶CBHII基因的4074bp的DNA序列,由GT-AG规则和cDNA序列推知该结构基因由4个外显子和3个内含子组成,总长1613bp,5′端存在与一般真核基因类似的两个特征性调控序列,但3′端不存在真核基因通常具有的特征序列而存在功能未明的短重复序列和嘧啶富集区。并对纤维素酶基因间的同源性和可能的功能作了初步的探讨。 相似文献
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由绿色木霉(Trichoderma viride)A10菌株的粗酶制剂中分离纯化得到 6个β-葡萄糖苷酶组分,对它们的物理、化学性质和对20种糖苷类化合物的水解作用进行了测试。其中5个组分都是既能水解β-构型的糖苷化合物,又能水解α-构型的糖苷化合物,表明它们对α-、β-异头专一性的要求并不象文献中报导的那样十分严格,对糖基和糖苷配基专一性的要求也并不十分严格。由此,对葡萄糖苷酶类的命名分类方法提出了讨论,并对在纤维素酶系研究中纤维二糖酶活力的检测方法进行了讨论。 相似文献
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绿色木霉纤维素酶CBHII基因的分子克隆 总被引:10,自引:0,他引:10
本文以噬菌体lambda EMBL3 DNA为载体,通过克隆绿色木酶(Trichoderma vi-ride)高分子量基因组DNA的部分酶解片段,并将重组分子进行体外包装后侵染Escheri-chia.coliK802,由此构建了绿色木霉基因文库。以李氏木霉(Trichoderma reesei)纤维素酶CBHII基因的末端片段为探针,用轮回噬菌斑原位杂交从文库中筛选出CBHII基因的阳性克隆5个 相似文献
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本文以噬菌体lambda EMBL3 DNA为载体,通过克隆绿色木酶(Trichoderma viride)高分子量基因组DNA的部分酶解片段,并将重组分子进行体外包装后侵染Escherichia.coli K802,由此构建了绿色木霉基因文库。以李氏木霉(Trichoderma reesei)纤维素酶CBHII基因的末端片段为探针,用轮迥噬菌斑原位杂交从文库中筛选出CBHII基因的阳性克隆5个,随机取其中3个克隆用上述探针作斑点杂交,结果进一步证明克隆了全长或近全长的绿色木霉CBHII基因,用李氏木霉CBHI基因的末端片段探针作斑点杂交,结果提示CBHI与CBHII基因的末端序列之间无同源性存在。从斑点杂交的阳性克隆中提取DNA,酶切鉴定插入片段的长度,并克隆于质粒pUC19,Southern杂交结果证明获得了含绿色木霉CBHII基因的重组质粒pCBHII-14。 相似文献
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绿色木霉ZY-1固态发酵产纤维素酶 总被引:1,自引:0,他引:1
利用筛选的绿色木霉ZY-1(Trichoderma viride ZY-1)固态发酵产纤维素酶,采用稻草和麸皮为底物,考察稻草与麸皮比例随发酵时间对产酶的影响。结果表明:底物中,在m(稻草):m(麸皮)为0:5和1:4时,发酵48h,pH保持4.5左右,还原糖量急剧上升,胞外蛋白产量最低;仅以稻草作底物时,整个发酵过程中pH约为7,还原糖量最低,胞外蛋白产量较高而滤纸酶活、羧甲基纤维素酶(CMCase)和β-葡萄糖苷酶(β-Gase)酶活均较低;在m(稻草):m(麸皮)为3:2时,发酵96h,滤纸酶活达最大值5.01U/g干曲;m(稻草):m(麸皮)为1:4时,发酵96h,β-Gase酶活达最大值4.6U/g干曲;m(稻草):m(麸皮)为4:1时,发酵72h,CMCase酶活达最大值6.01U/g干曲。因此,底物中存在适量的稻草和麸皮有利于Trichoderma viride ZY—1产纤维素酶。 相似文献
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表面活性剂对绿色木霉产纤维素酶影响 总被引:9,自引:0,他引:9
利用绿色木霉,以稻草为唯一碳源,采用液态发酵的方法,分别加入生物表面活性剂鼠李糖脂和化学表面活性剂Tween 80,重点研究了生物表面活性剂对绿色木霉产纤维素酶的影响。实验分析了加入不同浓度的表面活性剂时滤纸酶活、羧甲基纤维素酶活、微晶纤维素酶活及酶液的表面张力随时间的变化情况。结果表明,添加鼠李糖脂能够促进绿色木霉产酶,分别使滤纸酶活、羧甲基纤维素酶活、微晶纤维素酶活最大提高了1.08倍,1.6倍和1.03倍。与Tween 80相比,鼠李糖脂促进产酶的效果明显优于Tween 80。 相似文献
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《遗传》1975,2(2):157-163
1.通过各种化学和物理因素的复合处理,诱发T. vi,ide 2” 的变异,得到9株较好的突变型。其中典型的是绿色突变型403-2,其纤维素酶活较高、稳定,平均CMC酶活为101毫克/毫升,滤纸酶活为9.3毫克/毫升,比亲本菌株提高3倍。 2.在所使用的诱变剂中以紫外光和亚硝酸为好,特别是将它们进行复合处理时效果更佳。诱变时,降低诱变剂的相对剂量,即缩短处理时间,正变率大幅度提高。 3.诱变之前采用限量培养液使抱子萌动,可以降低相对剂量,增加抱子对诱变剂的敏感性,提高突变率,增加正变效果。 4.经诱变后得到的突变型遗传性不易稳定,往往发生退化。试验证明,用连续优势选择方法可以选育出种性纯、产量高而稳定的突变型。 5. C 酶是降解夭然纤维素必不可少的成分,因而,用C,酶活表示纤维素酶的离低,菌种的好坏是合理的。测C,酶的底物最好是滤纸。 相似文献
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绿色木霉纤维素酶高产突变型的诱变和筛选 总被引:2,自引:0,他引:2
四川省生物研究所纤维素酶组 《遗传学报》1975,(2)
1.通过各种化学和物理因素的复合处理,诱发T.viride 285的变异,得到9株较好的突变型。其中典型的是绿色突变型408-2,其纤维素酶活较高、稳定,平均CMC酶活为101毫克/毫升,滤纸酶活为9.3毫克/毫升,比亲本菌株提高3倍。 2.在所使用的诱变剂中以紫外光和亚硝酸为好,特别是将它们进行复合处理时效果更佳。诱变时,降低诱变剂的相对剂量,即缩短处理时间,正变率大幅度提高。 相似文献
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利用实验室现有的纤维素酶高产菌株制备纤维素酶。考察了JFY-14菌株产酶培养过程中pH值、培养时间、氮源等条件的影响。得到了最佳产纤维素酶条件:培养时间为72~75 h,初始pH值为4.5~5.0以及最佳培养氮源为1%的硫酸铵。 相似文献
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里氏木霉产纤维素酶研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
木质纤维素类生物质被认为是重要且可持续的可再生能源,其主要组成部分是纤维素.纤维素酶是一种能将纤维素分解为葡萄糖的复合酶,能有效地降解木质纤维素生物质.真菌、细菌、放线菌、酵母等多种微生物均可以产生纤维素酶,其中里氏木霉具有完整的纤维素酶系结构,常作为生物技术领域中一个重要菌株,广泛应用于纤维素酶的商业生产.介绍了纤维... 相似文献