大鼠脑突触质膜糖皮质激素结合位点的等电点测定

利用离子交换层析法测定了大鼠脑突触质膜糖皮质激素结合位点的等电点,结果表明,膜糖皮质激素结合位点的等电点为5.5,与细胞内糖皮质激素受体的等电点(pI6.7)不同。     

猪大脑皮层突触质膜糖皮质激素结合位点的测定

利用放射配体结合测定法,测得猪大脑皮层突触质膜上存在有皮质酮特异结合位点,该皮质酮膜结合位点的最大结合量（Ｂｍａｘ）为３３１．８±３６．９ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白,平衡解离常数（Ｋｄ）为１８５．０±６２．７ｎｍｏｌ／Ｌ。竞争取代实验表明,它具有较高的甾体结合特异性,按亲和力大小排列为：皮质酮＞孕酮＞１７β－雌二醇≈醛固酮＞睾酮。     

大鼠脑突触质膜糖皮质激素受体的纯化

本文利用抗大鼠肝细胞内糖皮质激素受体的单克隆抗体制备的免疫亲和层析柱,将大鼠脑突触质膜糖皮质激素受体纯化了约1150倍,SDS聚丙烯酰胺簿层梯度凝胶电泳显示,在约67kD处有一较明显的染色条带。     

大鼠脑突触质膜糖皮质激素受体样抗原的免疫电镜研究

本文利用ABC金标记法(受体-抗受体中的单克隆抗体-生物素化马抗鼠IgG-金标链霉亲和素),首次在电镜下观察到大鼠脑突触质膜的外表面存在有糖皮质激素受体样抗原,为神经细胞膜上可能存在有糖皮质激素受体提供了形态学依据。     

川楝素在大鼠大脑皮层匀浆中的结合位点

从驱蛔中药楝属植物根皮提取的一种三萜化合物──川楝素是一个选择性地作用于突触前的神经肌肉传递阻遏剂。根据它作用的专一性和不可逆性推测,突触前末梢应存在着川楝素的结合位点。本工作利用３Ｈ－川楝素进行的结合实验表明,大鼠大脑皮层匀浆中存在川楝素的结合位点;３Ｈ－川楝素与结合位点复合物的平衡解离常数（ＫＤ）约为２．０×１０（－７）ｍｏｌ／Ｌ;皮层匀浆离心团粒（Ｐ２＇）的重悬液含川楝素结合位点约２．７×１０（－１２）ｍｏｌ／ｍｇ蛋白质;该结合位点的Ｈｉｌｌ系数为０．９７。研究还显示,Ｐ２＇重悬液经蔗糖密度梯度超离心得到的突触体组分是川楝素结合位点的富集亚细胞组分,其比结合活性是Ｐ２＇重悬液的２至３倍。     

盐胁迫对大麦幼苗质膜,液泡膜上共价和非共价结合多胺含量的影响

用不同浓度ＮａＣｌ处理７ｄ龄大麦（Ｈｏｒｄｅｕｍ ｖｕｌｇａｒｅＬ．）幼苗３ｄ。以非共价键和共价键形式分别与质膜和液泡膜微囊及膜蛋白结合的多胺含量受低 度盐的促进而被高浓度盐所抑制。以非共价键形式与膜微囊结合的各种多胺中亚精胺（Ｓｐｄ）含量最高,占膜上多胺总量的４０％－７０％,与膜蛋白共价结合的各种多胺中腐胺（Ｐｕｔ）含量占主导地位,占膜蛋白上多胺总量的３５％－６０％。在根系液泡膜上发现一种含量丰     

[^3H]Cortisol及[^3H]Dexamethasone在大鼠肝细胞膜上的特异结合位点

本研究应用［３Ｈ］ｃｏｒｔｉｓｏｌ和［３Ｈ］ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ（ＤＥＸ）两种配基,观察到大鼠肝细胞膜上存在一类糖皮质激素（ＧＣ）特异结合位点。这些位点与ＧＣ的结合具有饱和性、高亲和力及低容量。其平衡解离常数（Ｋｄ）分别为１２．８４±６．５８ｎｍｏｌ／Ｌ和４０．２７±２３．４４ｎｍｏｌ／Ｌ;最大结合容量（Ｂｍａｘ）分别为２．５７±１．８４ｐｍｏｌ／ｍｇ蛋白质与０．６４±０．１８ｐｍｏｌ／ｍｇ蛋白质（ｃｏｒｔｉｓｏｌ,ｎ＝４;ＤＥＸ,ｎ＝３;±ＳＥ）。动力学实验数据所得的Ｋｄ值与Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析所得的Ｋｄ值结果基本一致。［３Ｈ］ｃｏｒｔｉｓｏｌ和［３Ｈ］ＤＥＸ饱和结合实验数据用Ｓｃａｔｃｈａｒｄ作图分析,均显示为直线。Ｈｉｌｌ系数则分别为０．９８８０和０．９９９０．竞争抑制实验结果表明,ｃｏｒｔｉｓｏｌ对［３Ｈ］ｃｏｒｔｉｓｏｌ的结合位点有高度特异性竞争,比其它几种类固醇（强的松、黄体酮、ＲＵ４８６、ＤＥＸ）的竞争力至少强４０倍以上．用放射自显影技术进行研究,也提供了［３Ｈ］ｃｏｒｔｉｓｏｌ特异结合银粒位于大鼠肝细胞膜上的依据。     

人脑胶质瘤细胞质膜的制备和鉴定

 本文介绍以手术摘除的人脑胶质瘤为标本,应用蔗糖梯度离心建立的一种较为简便的人脑胶质瘤细胞质膜制备法。经标记酶测定,化学组成分析及电镜检查,证实质膜具有一定的纯度。质膜中5’-核苷酸酶(质膜标记酶)活性为全匀浆的8.2倍,其它亚细胞组份污染较小。质膜收量为24.6％。生化测定还显示质膜5’-核苷酸酶活性随着胶质瘤恶性程度升高而下降。     

玉米根质膜ABA结合蛋白的增溶及特性研究

以玉米(Zea mays L.)根为材料,采用分级离心和两相分配法制备高纯度的质膜。实验比较了Tri-ton X-100和丙酮两种增溶剂对膜上ABA结合蛋白(ABA-BPm)的增溶效果。结果表明0.2％(W/V) TritonX-100的增溶效率超过85％,而丙酮法增溶效率仅达65％。放射配基(~3H-ABA)结合分析表明,增溶的膜蛋白与ABA的结合反应具有竞争性、饱和性、专一性和高亲和性等特点,而相同反应条件下的BSA则没有这些特征,证明了质膜上存在着ABA结合蛋白。实验还比较了ABA-BPm与增溶的ABA结合蛋白(ABA-BPs)与ABA的特异结合活性,结果显示ABA-BPs对反应温度和介质pH更为敏感,保持最大结合活性的时间也较短(<30min),暗示着增溶膜蛋白离开膜脂环境后更不稳定、易失活。     

有被小泡参与突触前后膜特化增厚的形态学研究

本文报告了有被小泡参与突触前、后膜特化增厚的电镜观察结果。实验表明,在突触形成期,即离体培养的7-10天,神经元核周质可见大量的有被小泡,经G6Pase细胞化学反应,可见有些有被小泡与内质网相连。在突触接触区域,有被小泡与突触前、后膜相融合,整个过程类似外吐反应,使得突触前、后膜逐渐增厚、延长,完成其特化增厚的过程。已有的实验结果提示,有被小泡不是作为突触前、后膜的“建筑材料”而存在:,而是向突触前、后膜运送某种物质,Ach受体便是已被证明的一??种物质。     

老年人长跑锻练后白细胞介素-1的变化及其和糖皮质激素受体的可能关系

本文研究长跑锻练对老年人血浆白细胞介素-1(IL-1)活性的影响及其和糖皮质激素受体(GR)的可能关系。IL-1活性用刺激C_(57)小鼠胸腺细胞增生后~3H-胸腺嘧啶核苷参入量的多少来表示,GR用~3H-地塞米松特异结合表示。结果表明:长跑锻练10年以上老年人(n=6)安静时血浆IL-1活性在14.7-18.7,3.8-7.0以及1.5-2.6KD之间出现三个淋巴细胞增生峰,分别为对照组老年人(n=4)的209％,223％和145％(P<0.05);而外周血白细胞GR水平较对照老年人降低,约为对照组的65％。本文对IL-1的活性和GR含量的关系和生理意义进行了讨论。     

牛小脑γ-氨基丁酸受体的生化特性

用放射性配基结合实验方法鉴定了牛小脑γ-氨基丁酸(GABA)受体的生化特性。高速离心制备的牛小脑突触膜与~3H-GABA有一饱和结合,K_D值为96nM,B_(max)为1.02pmol/mg蛋白,Hill系数为0.99。这一结合具有药理专一性和立体专一性,动力学实验测得结合速度常数为9.6×10~6M~(-1)min~(-1),解离速度常数为0.115min~(-1)。冻融、洗涤、超声波和TritonX-100处理突触膜,使~3H-GABA结合活性增加114倍。     

致病性暗色霉的浆膜超微结构分类学意义初探

对致病性暗色霉中的着色霉(Fonsecaea Negroni)外瓶霉(Exophiala Charmichael)瓶霉(Phialophoro Medlar)中的五种真菌浆膜超微结构进行了冰冻蚀刻研究,发现裴氏着色霉(Fonsecaea pedrosoi)和紧密着色霉(F.compacta)的内折长而宽,较深,略有弯曲,数量少,多呈平行或垂直排列。皮炎外瓶霉(Exophiala dermatitidis)的内折数量多,密集而分布均匀,呈圆点状或圆棒状。棘状外瓶霉(Exophiala spinifera)的内折少而表浅,多为圆形。疣状瓶霉(Phialophora verrucosa)的内折数量,排列,形状无一定规律。据上述特征,着色霉可以与外瓶霉,疣状瓶霉区别开来,皮炎外瓶霉也可与棘状外瓶霉区分。浆膜超微结构的性状有一定的分类学意义。     

山莨菪碱对大鼠脑突触膜(Na~++K~+)-ATP酶抑制动力学的研究

山茛菪碱可以明显抑制大鼠脑突触膜(Na~++K~+)-ATP酶的活性。动力学研究结果表明,这种抑制作用为竞争性。     

玉米根细胞质膜硝酸还原酶的研究

以水双相分配分离法从玉米（Ｚｅａ ｍ ａｙｓＬ．）根细胞中提取的高纯度正面向外和内面向外的质膜囊泡为材料,鉴定出质膜上存在有硝酸还原酶（ＮＲ）。通过缺氮和加氮培养,证明质膜ＮＲ具有诱导性。外源电子供体实验表明,质膜ＮＲ除了能利用ＮＡＤＨ 作为电子供体外, 也能直接或间接利用ＮＡＤＰＨ 作为电子供体。通过Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００, 结合胰蛋白酶及其抑制剂实验证明了质膜ＮＲ是偏于膜外侧的跨膜蛋白,它对胰蛋白酶具有特异的敏感性。讨论了质膜ＮＲ的功能