应用XOD—X—Luminol发光体系检测SOD活性

黄嘌呤氧化酶(Xanthine: OxygenOxidore ductase,EC1.2.3.2,简写XOD)在有氧存在时,能催化黄嘌呤(Xanthing,简写X)进行氧化反应生成尿酸和O_2~-。O_2~-可与发光试剂Luminol(5-amino-2,3-dihydro-1.4-phthalazine-dione)反应,使之激发,当O_2~-从激发态返回基态时即向外发光。SOD是专一消除O_2~-的天然物质,故可抑制Luminol对O_2~-的激发发光。根据此原理,本     

慢性肾衰病人血清和红细胞抗氧化能力的ESR研究

用电子自旋共振(ESR)自旋捕集技术研究了正常人和肾衰病人血清和红细胞对黄嘌呤 黄嘌呤氧化酶体系产生的氧自由基的作用.结果发现:(1)正常人血清和红细胞能够有效地清除超氧阴离子自由基(O_2~-),而肾衰病人血清和红细胞清除O_2~-的能力明显比正常人血清和红细胞低;(2)正常人血清能有效地把黄嘌呤 黄嘌呤氧化酶体系产生的O_2~-转化为·OH,病人血清在这方面与正常人血清有显著性差异.     

用碱性连二亚硫酸钠水溶液产生超氧阴离子自由基

产生超氧阴离子自由基(O_2~-)虽有多种方法,例如黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶法、碱性二甲基亚砜法等,但简单易行的方法迄今未见有介绍。本文报道用氧饱和的碱性连二亚硫酸钠(Na_2S_2O_4)水溶液产生O_2~-,方法简易,O_2的浓度稳定。     

SO2对植物的氧化作用和植物的抗氧化作用

本文主要介绍了SO_2通过活性氧(如O_2~-,H_2O_2,·OH等)伤害植物的机理和植物体内清除O_2~-,H_2O_2,·OH,L·,LO·,LOO·的抗氧化系统。     

金属硫蛋白与·OH和O_2~-反应的动力学

以DMPO(5.5-dimethyl-1-pyrroline-N-oxide)为自旋捕捉剂,通过ESR技术测定了兔肝金属硫蛋白(ZnMT_1、ZnMT_2、CdMT_1和CdmT_2)与·OH反应的速率常数.并利用金属硫蛋白与高铁细胞色素C(ferricytochrome C)竞争O_2~-的反应,测定了这四种MT与O_2~-的反应速率常数.结果表明,k_(OHMT)与MT亚型及结合金属有关,对上述四种MT其顺序为ZnMT_2>ZnMT_1>CdMT_2>CdMT_1.而四种MT的k_(O_2~-MT)无明显差异.     

超氧化物歧化酶活性正、负染色方法的比较

超氧化物歧化酶(SOD)广泛存在于活细胞中,它是机体内超氧自由基O_2~-的清除剂,对机体细胞有保护作用。由于该酶的基质O_2~-极不稳定,所以迄今对SOD的检测都采用间接方法。SOD在电泳凝胶     

峨眉山珍稀植物鹅掌楸组培过程中的膜脂过氧化

鹅掌楸(Liriodendron chinense(Hemsl.) Sarg.)是中国特有珍稀树种.鉴于目前还鲜有野生鹅掌楸组培过程生理生化变化的相关报道.本研究以峨嵋山野生鹅掌楸茎尖芽为外植体进行组织培养,并对其继代培养再生过程中超氧阴离子自由基(O_2~-)、过氧化氢(H_2O_2)和丙二醛(MDA)含量的变化进行了测定.研究结果表明,随着培养时间的延长,植物体中O_2~-和MDA含量呈现逐渐增加的变化趋势.这表明在连续继代培养条件下,植物体内活性氧会积累,引起膜脂过氧化.H_2O_2含量"S"形曲线变化,并随着再生芽的分化而上升,因此,H_2O_2不仅参与了膜脂过氧化过程,还可能作为一种细胞信号物质参与诱导细胞分化和再生芽的形成.该研究也为进一步用组织培养法保存峨眉山珍稀植物鹅掌楸种质资源提供了参考.     

植物的超氧物自由基与羟胺反应的定量关系

除了ESR(电子自旋共振)之外,能有一种简易有效的检测植物超氧物自由基(O_2~-)方法,无疑对植物氧代谢研究十分重要。原则上许多检测SOD的方法,如化学发光、NBT还原、细胞色素、连苯三酚、肾上腺素和羟胺氧化,都可用来检测生物系统的O_2~-。但由于干扰因素颇多,实际应用时困难不少。Elstner认为用羟胺氧化反应来检测O_2~-、灵敏度较高,专一性较好,药剂价廉,而且能同时检测大量样品。但经我们验     

丝裂霉素促进活性氧自由基生成的研究

本文探讨了抗癌药丝裂霉素对活性氧自由基,超氧负离子自由基(O_2~-),羟自由基(OH)生成反应的作用,实验表明,丝裂霉素对O_2~-及OH的生成有明显的促进作用,其作用随着丝裂霉素浓度的增加而加强。分别测定了它对两种自由基生成反应的促进率。     

单核细胞促进人外周血淋巴细胞离体增殖的自由基机理

在人外周血淋巴细胞培养体系中加入不同数量的单核细胞共同培养,以~3H-TdR掺入法和细胞色素C还原法分别测定淋巴细胞增殖能力和培养介质中O_2~-浓度;加入NADPH氧化酶抑制剂DPI实验性地下调O_2~-浓度,观察淋巴细胞增殖能力的变化。结果显示加入单核细胞可增加培养介质中O_2~-浓度,进而促进淋巴细胞增殖,提示O_2~-浓度的升高是淋巴细胞和单核细胞共培养体系中淋巴细胞增殖的重要因素。     

大豆根瘤豆血红蛋白的保护物

体内豆血红蛋白的主要功能似乎是保证类菌体中氧气的适当流量(Bergerson,1980)。含铁的形式仅能束缚氧分子,象其它携带氧气的血红蛋白一样,豆血红蛋白对于自身氧化仍是敏感的,自身氧化导致含铁豆血红蛋白和过氧阴离子(O_2)的形成。以下几点;有利于这一反应: (1)酸性pH:在根瘤中,pH为6.4,t(1/2)为1.5天(Puppo等,1981); (2)存在亚硝酸盐:在6分钟后,KNO_2(62.5uM)导致含氧豆血红蛋白(24uM)50％氧化(Rigavd, Puppo, 1977); (3)存在O_2~-:寄主细胞的过氧歧化酶能除去O_2~-,避免豆血红蛋白的氧化     

O_3与CO_2浓度倍增对油松针叶抗氧化酶活性的影响

以4年生的油松幼苗为试材,采用开顶箱内气体熏蒸实验,对经高浓度O_3(80nmol·mol~(-1))和CO_2(700 μmol·mol~(-1))单一及复合处理3年后,油松当年生针叶内丙二醛(MDA)含量、活性氧自由基和抗氧化酶等逆境生理指标进行了分析.结果表明:超氧化物歧化酶(SOD)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)、过氧化氢酶(CAT)和脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)活性经O_3处理后显著升高,分别比对照上升了43.1%、18.9%、283.5%和142.6%,而CO_2和复合处理仅对APX和CAT活性有明显的诱导作用,但均低于O_3处理;O_3处理导致MDA含量上升51.8%,而外加CO_2则能有效逆转这一趋势;超氧阴离子(O_2~-·)产生速率和H_2O_2含量在所有处理组合间均无显著差异.上述结果说明,O_3能有效地激活油松当年生针叶内的抗氧化酶系统,而CO_2能缓解O_3所带来的不利影响,但并非通过提高抗氧化酶活性这一途径.

Abstract：

Four-year-old Pinus tabulaeformis seedlings were planted in open-topped chambers and treated with elevated O_3(80 nmol·mol~(-1)) and/or CO_2(700 μmol·mol~(-1)). After treated for three years, the malondialdehyde (MDA) content, reactive oxygen species, and antioxidant enzyme activities in the current year needles were analyzed. In treatment elevated O_3, the activi-ties of superoxide dismutase (SOD), aseorbate peroxidase (APX), catalase (CAT) and de-hydroaseorbate reductase (DHAR) increased significantly, being 43. 1%, 18.9%, 283.5% and 142. 6% higher than the control; and in treatments elevated CO_2 and its combination with el-evated O_3, only APX and CAT activities were induced remarkably but still lower than those in treatment elevated O_3. Elevated O_3 increased the MDA content by 51.8%, whereas the combina-tion of elevated O_3 and CO_2 reversed this increase efficiently. No significant differences were ob-served in the superoxide anion (O_2~-·) generating rate and H_2O_2 content among all treatments. All the results demonstrated that elevated O_3 was able to effectively activate the antioxidant enzyme system in P. Tabulaeformis current year needles, while elevated CO_2 could mitigate the negative effects of elevated O_3 through the actions other than enhancing the antioxidant enzyme activities.     

家蝇飞翔肌线粒体超氧化物歧化酶活性及荧光衰老色素含量的年龄变化的研究

超氧阴离子(O_2~-)是生物体内的主要自由基。自由基与很多大分子如脂质、蛋白质及核酸等反应,破坏细胞的结构,干扰细胞的功能,根据Harman 的自由基理论,最终导致有机体的衰老和死亡。超氧化物歧化酶(SOD)促进O_2~-的歧化反应,对机体起保护作用,因此认为它与寿命有关。荧光哀老色素(FAP)又叫脂褐素,被认为是自由基诱导的不饱和脂肪酸和其他大分子如:蛋白质、核酸等氧化的终产物。它的含量被看成是发     

用ESR自旋捕集法研究吸烟烟气处理的脂质体对大鼠粒细胞产生O_2~-的影响

吸烟烟气能引发卵磷脂脂质体的脂质过氧化。若将吸烟烟气处理20s的脂质体作用完整的大鼠粒细胞(RPN),用ESR自旋捕集方法发现,当作用时间在25min内(脂浓度1.0mg/ml)或脂浓度小于15.0mg/ml(而作用时间均为15min)时,这种过氧化的脂质体能增加RPN呼吸爆发产生O_2~-的量。而没有经吸烟烟气处理的新制脂质体,在脂浓度大于0.2mg/ml(作用时间15min)时,都不同程度地抑制RPN产生O_2~-。     

用ESR自旋捕集法研究吸烟烟气处理的脂质体对大鼠粒细胞产生O_2~-的影响

吸烟烟气能引发卵磷脂脂质体的脂质过氧化。若将吸烟烟气处理20s的脂质体作用完整的大鼠粒细胞(RPN),用ESR自旋捕集方法发现,当作用时间在25min内(脂浓度1.0mg/ml)或脂浓度小于15.0mg/ml(而作用时间均为15min)时,这种过氧化的脂质体能增加RPN呼吸爆发产生O_2~-的量。而没有经吸烟烟气处理的新制脂质体,在脂浓度大于0.2mg/ml(作用时间15min)时,都不同程度地抑制RPN产生O_2~-。     

磁场对毛蚶肝胰腺抗氧化酶活性的影响

为了研究磁场对毛蚶肝胰腺抗氧化酶活性的影响,本研究在实验室条件下分别检测了在3~10 mt及40~90 mt磁场强度下培养8 d、15 d的毛蚶(Scapharca subcrenata)肝胰腺中的过氧化物酶(POD)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、超氧阴离子自由基(O_2~-)的产生速率和丙二醛(MDA)含量。研究发现,在外加磁场的作用下,毛蚶肝胰腺中的O_2~-、SOD、POD以及MDA等4项指标均受到磁场的影响;在施加3~10 mt及40~90 mt强度的磁场后,磁场对毛蚶产生了氧化胁迫,且40~90 mt组的应激反应快于3~10 mt组。本实验研究认为,O_2~-生成速率、SOD与POD活性可以作为潜在的海洋贝类是否受到外在磁场损伤的监测指标。同时用以提示海洋环境中磁场造成的污染程度,为人类的生产建设活动提供参考。     

木脂素类化合物的SOD活性研究

超氧化物歧化酶,是生物体内对超氧阴离子自由基(O_2~-)的最有效的清除剂,但由于SOD分子量大,体内代谢速度快,作为外源性药物有其不足之处。从中草药中寻找具SOD活性的有效成分,更好发掘天然药物的研究。从地血香分离出四种联苯环烯木脂素类化合物,进行了SOD活性研究。实验证明四种化合物的SOD活性不同,分别测定了它们对O_2~-的清除率和抑制率。     

改良的连苯三酚自氧化测定超氧化物歧化酶活性的方法

超氧化物歧化酶(superoxide dismutase简称SOD)的测活方法很多。目前,国内外采用的连苯三酚自氧化法,其测定缓冲液均用HCl配制,而Cl~-对SOD有一定的抑制作用。为了提高SOD对超氧阴离子(O_2~-)的竞争能力,本法改用K_2HPO_4KH_2PO_4缓冲液。实验表明,改良法不仅比在TrisHCl缓冲液中测定灵敏度提高了50％,而且因减少了SOD的加入量,使酶被O_2~-所饱和。实验还表明,SOD在自氧化速率30—65％范围内,酶的加入量与抑制率成线性关系,见图1。     

维生素E对小麦叶片衰老的影响

维生素 E(V_E)存在于细胞膜内。动物组织研究表明:它可与 O_2和 O_2~-反应,防止脂类过氧化作用,使生物膜免受损害。但 V_E 对植物组织衰老的作用,由于研究条件及对象的不同,结果却不尽一致。为此,本文研究了 V_E 对小麦叶片衰老的影响,以了解 V_E 在抗衰老中的作用。     

板蓝根抗氧化成分及抗氧化性能研究

目的:研究板蓝根抗氧化成分及抗氧化性能,为板蓝根提取物抗衰老、抗肿瘤等领域的开发利用提供科学依据。方法:本文采用系统的分离方法,从板蓝根中提取黄酮、多糖、多酚及生物碱四种成分,并采用Schaal烘箱法、邻苯三酚法、水杨酸法测定板蓝根四种提取物的总抗氧化能力、清除超氧阴离子(O_2~-·)及清除羟自由基(·OH)能力。结果:板蓝根提取物对三种食用油脂均有良好的抗氧化效果,且对抗氧化作用具有剂量效应关系;Vc、柠檬酸及酒石酸对板蓝根提取物的抗氧化作用均有协同增效作用;板蓝根提取物对超氧阴离子(O_2~-·)和羟自由基(·OH)有良好的清除作用,且清除作用具有剂量效应关系;其中板蓝根提取物生物碱和黄酮分别对超氧阴离子(O_2~-·)和羟自由基(·OH)清除作用较强。结论:板蓝根取物具有良好的抗氧化作用,可将其作为一种天然的抗氧化剂应用于油脂、食品及日用品中;也可将其应用于抗衰老,抗高血脂药物研究中,进一步开发其药用价值。