制造重组血清白蛋白的试验性设施

日本绿十字公司在90年建设规模为1000升的重组血清白蛋白的试验性生产设施,91年开始运行.很可能设在该公司中央研究所内.同时该公司从美国Phillips Petroleum公司(俄克拉何马州)导入了食用酵母的高表达技术,与本公司开发的面包酵母的表达技术竟相开发. 因为市场很大,对生物技术很重视,产品的价格便宜,100ml(5%溶液)约5000日元,用生物技术生产人血清白蛋白有一定难度,但这是大势所趋,制造工本费每克不到200日元.而且1次投药需要1克的量,为了避免抗原性反应,要求的纯度极高(99.99%).人血清白蛋白可以说是障碍相当大的课题.     

重组人血清白蛋白生产工艺研究进展

人血清白蛋白是一种重要的临床药物 ,人源血浆白蛋白可能会传染病原体将逐步被重组白蛋白所代替。对用巴斯德毕赤酵母生产重组人血清白蛋白的表达系统、发酵方法、分离纯化技术以及重组白蛋白的理化及生理特性进行了综述。     

人血清白蛋白及其重组表达研究进展

人血清白蛋白在医疗方面有广泛的应用,其可作为血容量扩张剂和辅助治疗剂、培养基组分和保护剂、药物制剂、诊断试剂和医疗器械包被剂等。基因重组技术提供了一种规模制备人血清白蛋白的有效途径,并已建立了多种人血清白蛋白的重组表达系统。本文综述了重组人血清白蛋白在细菌、真菌、转基因植物和转基因动物等表达系统中的发展和应用概况。     

产业动向

基因重组人血清白蛋白项目迈向产业化目前,上海市生物医药科技产业促进中心与上海欣瑞特生物医药技术有限公司签约,在张江生物医药中试孵化基地启动"注射级基因重组人血清白蛋白"的产业化服务项目,该项目将有望把"基因重组人血清白蛋白"推     

重组人血清白蛋白发酵过程生长期的代谢计算

结合元素平衡和代谢平衡,建立了重组人血清白蛋白发酵过程生长期的数学模型,并按单纯形多变量最优化方法估算了模型的未知参数。该模型能较好地描述重组人血清白蛋白发酵过程生长期中各宏观反应速率之间的关系,为重组人血清白蛋白宿主菌—Pichia pastoris的高密度培养提供了依据。     

重组人血清白蛋白发酵过程表达期的定量研究

结合元素平衡和代谢平衡,建立了重组人血清白蛋白发酵过程表达期的数学模型,按单纯形多变量最优化方法估算了模型的未知参数,并探讨了导致表达期不同阶段产物形成速率存在差异的可能原因。该模型能较好地描述重组人血清白蛋白发酵过程表达期中各宏观反应速率之间的关系,为重组人血清白蛋白的高效表达提供了线索。     

重组人血清白蛋白在Pichia pastoris中分泌表达影响因素的研究

为获得高产稳产重组人血清白蛋白的Pichia pastoris细胞株用于高密度发酵,构建了多种分泌表达载体,在Pichia pastoris中作表达,研究表达载体构建等因素对表达量的影响。发现采用酿酒酵母α性成熟因子前导肽比人血清白蛋白天然前导肽作为分泌信号肽的表达量要高10%左右。而载体整合方式、整合拷贝数、5’非翻译区的改造和甲醇利用表型等对表达量无规律性影响。筛选到的高表达株经高密度发酵,细胞湿重达460 g/L,发酵液上清的人血清白蛋白含量为1.0 g/L。     

重组人血白蛋白临床研究进展

人血白蛋白是人血浆中最丰富的蛋白质,具有许多重要的生理特性,用途广泛。目前主要以毕赤酵母作为宿主表达的重组人血白蛋白,开发了重组人血白蛋白的纯化技术,同时对重组人血白蛋白结构进行了分析,结果表明与人血浆白蛋白基本一致。临床研究结果表明重组人血白蛋白与人血浆白蛋白有着几乎相同的疗效和安全性。综述了重组人血白蛋白的性质结构分析及酵母表达系统;重点介绍了重组人血白蛋白在临床方面研究进展。     

重组人血清白蛋白表达研究进展

本文综述了重组人血清白蛋白在细菌,酵母,植物和动物等表达系统中表达的研究进展。用酵母表达系统,尤其是毕赤酵母,表达的重组白蛋白产量高且提取工艺简单,是其产业化最具有前途的表达系统。同时在转基因动物、植物中培养表达也具有诱人的前景。     

重组人血清白蛋白表达研究进展

本文综述了重组人血清白蛋白在细菌,酵母,植物和动物等表达系统中表达的研究进展。用酵母表达系统,尤其是毕赤酵母,表达的重组白蛋白产量高且提取工艺简单,是其产业化最具有前途的表达系统。同时在转基因动物、植物中培养表达也具有诱人的前景。     

浅谈重组人血白蛋白的进展

人血白蛋白是临床上使用量最大的血液制品,但血浆来源的人血白蛋白由于来源受到限制,远不能满足市场的需要,而且人血浆有携带病毒的风险,利用基因重组等技术研制的重组人血白蛋白克服了这些不足,成为发展的趋势。表达系统是重组人血白蛋白生产过程中极其重要的环节,本文主要综述了重组人血白蛋白表达系统的研究进展和国内外产业化现状。     

FCLA-PPIX光触发式静态化学发光体系检测人血清白蛋白

本文对基于FCLA-PPIX触发式化学发光的人血清白蛋白检测体系进行了研究。该触发式化学发光体系利用光敏剂和活性氧探针FCLA组成了一个基本的光触发式化学发光检测体系,将待检测样品和体系充分混合后,通过脉冲光触发和延迟发光检测技术测定人血清白蛋白含量。脉冲触发式静态检测体系克服了其他化学发光体系操作复杂、试剂和样品消耗量大以及信号不稳定的缺点,灵敏度高,检测稳定。本文考察了该体系激发光强度、试剂浓度及温度等对人血清白蛋白检测结果的影响。在优化的实验条件下,测定人血清白蛋白的线性范围为2.5×10-9~6.4×10-7mol/L;方法的检出限为1.6×10-10mol/L;本法对5×10-8mol/L的标准样品平行重复测定11次相对标准偏差为4%。     

白蛋白结合肽-多柔比星耦合物的设计、制备、表征及初步评价

为了改善多柔比星在血液中的循环半衰期,基于白蛋白在血浆中含量丰富、性质稳定、半衰期持久的特点,通过大肠杆菌体系重组表达了源于细菌表面蛋白中白蛋白结合肽段,并建立了纯化工艺,获得了纯度高于95%的重组白蛋白结合多肽,并证明重组多肽在体外能够迅速地与人血清白蛋白结合。通过与DOXO-EMCH分子化学耦联,制备获得重组白蛋白结合肽-多柔比星耦合物。A549细胞毒力实验结果显示耦合物的IC50浓度升高,药代动力学结果显示重组白蛋白结合肽能够显著延长多柔比星在血液中的循环半衰期,相对于多柔比星或DOXO-EMCH分别提高了5.6倍和3.8倍。荷瘤小鼠肿瘤生长抑制实验结果显示耦合物的抗肿瘤效力得到提升。证明了基于白蛋白结合机制可为小分子药物长效设计提供新的思路。     

森永乳业、绿十字公司6月申请制造来自尿的M-CSF的认可

森永乳业、绿十字公司上月明确向厚生省提出两公司共同开发的来自尿的巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF,商品名为“P-100”)的制造承认申请。CSF作为干扰素的优胜后补者,正在进行临床开发。达到开发医药的最终阶段的制造承认。这在世界上还是第一次。估计今后商品化的粒状白细胞CSF、粒状巨噬细胞CSF、重组     

重组人血清白蛋白在汉逊酵母中的表达与纯化

优化人血清白蛋白（Human Serum Albumin, HSA）基因的密码子,合成基因连接到用于汉逊酵母（Hansenula polymorpha）表达的表达载体上,构建成重组人血清白蛋白（recombinant Human Serum Albumin, rHSA）表达质粒,转化汉逊酵母细胞,筛选得到的rHSA高表达细胞株HP-rHSA－C,30L发酵罐批式发酵表达量可达1.033g/L,经Streamline SP,Phenyl Bio-Sep 6FF,DEAE Sepharose层析分离获得纯化蛋白,除菌过滤后稀释,进行小鼠免疫原性分析,结果与人血清中提取的人白蛋白具有相同的抗原、抗体反应特性。     

项目推介

新型人血清白蛋白融合长效α干扰素该项目来源于国家重大科技专项“创新药物和中药现代化”平台课题,是对Albuferon(美国HGSI公司利用人血清白蛋白融合技术构建的长效α干扰素)进行的仿制研究,并通过改变融合蛋白的相位使新型人血清白蛋白融合长效α干扰素具有更好的均一性和稳定性和更高的回收率,可以显著地降低生产成本。该项目已经建立了中试规模的稳定的制备工艺:在30L发酵罐上的表达水平达到500mg/L,回收率达到20%以上,每批可得到纯品1.5g以上,并将生产成本控制在100元/支以下。α干扰素在临床上被广泛地应用于病毒性肝炎以及肿瘤的…     

BOC买下重组白蛋白技术

八十年代,酿酒公司—窝蜂开发酵母生产重组DNA药物。然而,在过去二年中,大多数又撤回了生物技术投资。现在,BOC集团公司(Murray Hill,NJ)已买下Delta生物技术公司(Nottingham,U.K)及其生产重组人血蛋白(包括重组白蛋白)的技术。Delta的产品正在临床前研究阶段;不过,重组白蛋白的临床试验不久就会开始。截止9月份,Delta净亏1150万美元。BOC花钱支撑业务。若有所改观,还将给Delta原主额外红利。     

转基因技术让水稻成为人血清白蛋白的生产车间

正由于转基因技术打破了物种间的生殖隔离障碍,即可以根据需要,在基因水平上进行任意的遗传操作,来实现不同物种间的基因转移,获得人类所需要的产品。基于这个原理,转基因技术自然可以将人的基因在植物上进行基因转移。下面要谈的就是利用转基因技术在水稻中生产重组人血清白蛋白的例子,来说明转基因技术不仅可以在动物体内合成医药产品,也可以在植物体上合成医药产品。人血清白蛋白是人体血液主要成分,占血浆的40%～50%,在体内主要起维持血浆渗透压,转运各种代谢物质与药物的作用。在临床上广     

人血清白蛋白在蛋白多肽类药物长效化中的应用 *

重组蛋白/多肽类药物在人体血清内半衰期较短, 很大程度上限制了其临床应用。人血清白蛋白(HSA)具有半衰期长、生物相容性好、低免疫原性等优点,是理想的药物载体。各种基于HSA的蛋白质药物长效化技术得到了广泛的应用和发展,目前主要包括构建HSA融合蛋白,通过共价化学键与HSA偶联,通过非共价键与HSA可逆性结合。总结了近年来基于白蛋白药物长效化技术的发展,各项技术的优缺点及药物开发现状。     

转基因动物乳腺生物反应器相关技术及研究进展

转基因动物乳腺生产人类重组蛋白人血清白蛋白(h SA)、人纤维蛋白原(h FIB)、人蛋白C(h PC)、人凝血因子(h F-Ⅷ)和(h F-Ⅸ)等具有较高市场潜力,使其在医学领域获得广泛应用。对转基因动物乳腺生物反应器的优势、目的基因选择、载体构建、基因工程技术、重组蛋白在肿瘤治疗上的应用、当前困境和未来前景等方面进行较为全面的综述,以期能有助于转基因动物生物反应器的研究。此外较详细地探讨了利用CRISPR-Cas基因打靶技术生产高表达量的人类重组蛋白的可能性。