钾通道在大鼠支气管平滑肌张力调控中作用的研究

目的：探讨延迟整流钾通道（Kv),高电导钙激活钾通道（BKCa)和ATP敏感钾通道（KATP)在大鼠支气管平滑肌张力调控中的作用。方法：以特异性钾通道阻断剂为工具,采用体外等长张力测定观察钾通道对静息和收缩状态下支气管张力的影响。结果：（1）KV阻断剂4－aminopyridine(4-AP)诱发大鼠支气管平滑肌产生浓度依赖性收缩反应,而BKCa阻断剂tetraethylammonium(TEA)和KATP阻断剂glibenclamide(Glib)对其无影响。（2）去除上皮对4－AP诱发大鼠支气管平滑肌收缩反应无影响,而钙通道阻断剂nifedipine对其有显著抑制效应。（3）在0.1mmol/L组胺或50mmol/L KCl诱发支气管平滑肌收缩之前或之后,加入TEA（1,5mmol/L)或0.1mmol/L 4-AP均显著增强二者诱发的收缩反应;而Glib(10μmol/L）对其无明显影响。结论：Kv参与大鼠支气管平滑肌静息张力的调控,而BKCa和KATP对其无影响。Kv和BKCa的关闭增强组胺及高浓度钾离子诱发大鼠离体支气管产生的收缩张力。     

心肌细胞电压依赖性钾通道的研究进展

心肌细胞电压依赖性钾通道的研究进展周军,周兆年（中国科学院上海生理研究所上海２０００３１）在心肌,分布较多且研究较为深入的电压依赖性钾通道（ＶＤＰＣ）主要是短暂外向钾通道Ｉｔｏ、延迟整流钾通道ＩＫ和内向整流钾通道ＩＫ１,它们共同参与心肌动作电位的复极...     

慢性吸烟大鼠气道平滑肌大电导的钙激活钾通道和Kv1.5表达的变化

复制大鼠的慢性吸烟模型,采用气道反应性的测定、HE染色、免疫组织化学染色、原位杂交和免疫印迹实验等方法,观察吸烟对大鼠支气管平滑肌大电导的钙激活的钾通道(BKca)和电压依赖性延迟整流钾通道Kv1．5蛋白和mRNA表达的影响,以阐明吸烟引起的气道高反应性发病机制中钾通道表达变化的作用。结果显示：(1)慢性吸烟可降低大鼠大气道和小气道BKca和Kv1．5蛋白和mRNA表达;(2)大气道BKca的降低程度大于Kv1．5,小气道BKca和Kv1．5的降低程度无明显差异：(3)吸烟对全肺组织BKca和Kv1．5的蛋白表达无明显影响。上述结果提示,慢性吸烟可下调大鼠气道平滑肌钾通道BKca和Kv1．5的表达水平,是导致气道高反应的机制之一。     

人外周血淋巴细胞膜电压依赖性钾通道的特性分析

淋巴细胞是直接参与机体免疫的重要效应细胞。淋巴细胞膜上存在多种离子通道 ,其中主要为电压依赖性钾通道。目前 ,对鼠淋巴细胞该通道的研究较深入 ,它可分为ｎ、ｎ’和ｌ型三种亚型 ,但对人外周血淋巴细胞膜上钾通道的研究较少。国内尚未见这方面的报道。本文采用膜片钳技术记录人外周血淋巴细胞电压依赖性钾通道电流 ,并对其进行特性分析 ,为研究其异常变化与某些疾病的关系提供实验依据。1　材料和方法(1)细胞的分离　取正常人外周静脉血 ,用Ｆｉｃｏｌｌ密度梯度离心法分离出单个核细胞 ,将其置于塑料平皿内 ,37℃孵育 2ｈ ,取含淋巴细…     

电压依赖性钾通道与人类神经性疾病

电压依赖性钾通道是钾通道超家族中成员最多,最为复杂的亚家族,主要包括Kvα亚单位和辅助亚单位两部分,其中快速失活A型通道和毒蕈碱敏感的M通道已被大量研究,它们广泛分布于神经系统,主要参与各种生理和病理作用,如膜兴奋性的产生,神经递质的释放,神经元细胞的增殖和退化,以及神经网络的信号传递等。目前发现Kv通道亚型或亚单位的突变与学习和记忆的损伤,共济失调,癫痫,神经性耳聋等一些神经性疾病的产生有关。     

延迟整流钾通道对哮喘患者血清被动致敏的人支气管平滑肌的张力调控

目的：探讨延迟整流钾通道（Kv）在哮喘患者血清被动致敏的人支气管平滑肌（HBSM）张力调控中的作用。方法：采用等长张力测定法,观察Kv通道阻断剂对正常与哮喘患者血清被动致敏的HBSM静息和收缩张力的影响。结果：①哮喘患者血清被动致敏的HBSM对组胺诱发的收缩反应明显强于对照组。②Kv阻断剂4-氨基吡啶（4-AP）可引起静息状态下两组HBSM产生浓度依赖性收缩反应,且致敏组对4-AP所致收缩的敏感性强于对照组。即量效曲线中被动致敏组达到最大效应的一半时所需浓度的负对数值（PD2）明显升高;但两组的最大收缩强度（Emax）无明显差异;KCa阻断剂四乙基铵（TEA）和KATP阻断剂格列苯脲（Glib）对HBSM静息张力无明显影响。③4～AP预处理标本后,可明显增加对照组支气管环对组胺的收缩反应,即处理后Emax明显高于处理前;但不影响致敏组对组胺的收缩反应,即致敏组4-AP处理前后Emax无明显差异。结论：①Kv参与HBSM静息张力的调控。而KCa、KATP对其无明显影响。②哮喘患者血清被动致敏的HBSM的Kv活性下降,此变化可能是哮喘形成和发病的机制之一。     

川芎嗪对大鼠胸主动脉平滑肌电压依赖性Cl-通道的影响

川芎嗪(即四甲基吡嗪tetramethylpyrazine)是从具有活血化淤兼有理气功用中药川芎中分离得到的一种生物碱,现已广泛应用临床,对治疗缺血性脑血管疾病、缺血性肢体血管疾病、部分泌尿系统疾病等有明显的疗效,安全而无明显的毒副作用.有作者报道川芎嗪有明显抑制α1-肾上腺受体激动所引起持续血管收缩,而使血管舒张作用,可能与其有类似的"钙通道阻断剂"作用有关.目前认为血管平滑肌的张力与钙、钾和氯通道有关,川芎嗪与钾和氯通道的关系目前未见报道. 1 材料与方法 (1)药物川芎嗪,无锡市第七制药厂生产;DMEM,DIDS,HEPES,胰蛋白酶,EGTA,硝苯地平(nifedipine),苯肾上腺素(简称PHE)均为 Sigma公司出品,其余试剂均为市场销售的分析纯试剂.均为美国Sigma公司产品;其余的试剂均为国产分析纯.     

平滑肌内向整流钾通道(K_(IR))

平滑肌内向整流钾通道在维持和调节细胞膜电位中发挥重要作用,并可能成为新的治疗靶点.综述了其分子学基础、电生理特性、生理功能和调控机理等研究进展.     

多巴胺对血管平滑肌细胞钙激活钾通道的影响及其机制

目的：研究多巴胺对血管平滑肌细胞大电流、钙激活钾（ＢＫｃａ）通道的影响及其信息传递机制。方法用膜片钳细胞贴附式技术,记录细胞能液内灌流多巴胺受体激动剂、阻断剂以及第二信使及相关蛋白激酶拮机剂对猪冠状动脉血管平滑肌细胞ＢＫｃａ 爱道活动的影响。结果：多巴胺增加ＢＫｃａ通道活性（Ｐ〈０．０１）,并可被ＣＡ－１受体阻断剂ＳＣＨ２３３９０完全阻断,但不受β２受体阻断剂普藉洛尔的影响。腺苷酸环化酶抑制剂ＳＯ     

运动对大鼠血管平滑肌大电导钾通道生物物理特性的影响

对大鼠进行不同强度的游泳训练以建立动物模型,应用膜片钳技术分析训练1～4周以及对照组的大鼠血管平滑肌细胞大电导钾通道(BK通道)的门控．实验结果显示,BK通道的开放概率在游泳训练第2、3周时明显升高,到第4周趋于稳定;游泳训练后,通道对膜电位、胞内钙离子的敏感性显著增加,通道的平均开放时间常数增大,关闭时间常数减小．实验结果还显示,由游泳训练导致的被动牵张并不改变通道的电导．BK通道在被动牵张力作用下生物物理特性的变化,可能有缓解由于游泳训练而导致血压升高的作用,进而使机体保持正常的生理状态．     

VIP对气道平滑肌增殖的调节作用

为探讨血管活性肠肽（ＶＩＰ）对气道平滑肌增殖的影响及机制,我们以体外培养的犬气管平滑肌细胞为对象,以３Ｈ－ＴｄＲ掺入为指标,探讨了ＶＩＰ的作用,并分析了ＶＩＰ受体拮抗剂［４Ｃｌ－Ｄ－Ｐｈｅ６,Ｌｅｕ１７］ＶＩＰ,腺苷酸环化酶激活剂Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ,百日咳杆菌毒素（ＰＴｘ）和磷酯酶Ｃ抑制剂新霉素等对ＶＩＰ作用的影响。实验发现：ＶＩＰ对犬气道平滑肌细胞体外增殖有显著的抑制作用,且呈剂量依赖性。［４Ｃｌ－Ｄ－Ｐｈｅ６,Ｌｅｕ１７］－ＶＩＰ能完全阻断ＶＩＰ的作用,Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ则呈现出对ＶＩＰ的促进效应,ＰＴｘ和新霉素对ＶＩＰ作用无任何影响。上述结果提示：ＶＩＰ通过特异性受体在ＰＴｘ非敏感型Ｇ－蛋白介导下,激活ＡＣ,使平滑肌细胞内ｃＡＭＰ浓度增加,而发挥平滑肌细胞增生抑制效应     

肺泡巨噬细胞对豚鼠气道平滑肌神经兴奋的影响

以调理酵母多糖（ＯＰＺ）激活的大鼠肺泡巨噬细胞（ＡＭ）上清液,作用于受电场刺激的豚鼠单个气管环平滑肌标本。结果显示,对气道平滑肌（ＡＳＭ）胆碱能神经兴奋有易化作用,其机理可能是ＡＭ释放前列腺素类物质（ＰＧｓ）促进了接头前膜ＡＣｈ的释放。ＡＭ上清液对肾上腺素能和非肾上腺素能抑制神经活动没有明显影响,但使ＡＳＭ舒张恢复５０％时程（ＲＴ１／２）缩短,提示在病理情况下ＡＭ大量激活时,可导致气道口径缩小、阻力增大;这可能在哮喘的发病中起一定作用。     

肺泡巨噬细胞对豚鼠气道平滑肌张力的调控

经调理酵母多糖(OPZ)刺激的大鼠肺泡巨噬细胞培养上清液可松弛豚鼠离体气管肌条,上清液中PGE_1增加,表明PGE_1是肺泡巨噬细胞松弛气管肌条的介质之一。经OPZ激活的肺泡巨噬细胞培养上清液与豚鼠血小板作用后,其松弛效应被逆转为收缩效应,提示可能由于肺泡巨噬细胞分泌血小板活化因子激活血小板,使释放收缩介质所致。肺泡巨噬细胞借助所分泌的介质经常性地调节气道阻力,对肺通气具有保护意义。     

P物质对兔离体输卵管峡部平滑肌活动的影响

本文在离体状态下观察P物质对不同性激素状态兔输卵管峡部平滑肌活动的影响。动物分成动情组、间情组、去卵巢组。实验结果:(1)P物质对间情兔输卵管峡部平滑肌的收缩有明显的抑制作用。(2)P物质对动情兔和去卵巢兔输卵管峡部平滑肌的收缩没有影响。结果表明P物质对不同性激素状态下的兔输卵管峡部平滑肌的作用不一致。     

钙通道阻滞剂对肾上腺素能受体激动剂促血管平滑肌细胞增值的抑制

本工作观察到１０－６—１０－５ｍｏｌ／Ｌ去甲肾上腺素（ＮＥ）和１０－７—１０－５ｍｏｌ／Ｌ异丙基肾上腺素（ＩＳＯ）可明显促进离体培养的血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）的增殖和ＤＮＡ的合成,并呈剂量依赖效应,该效应可为相应的受体阻断剂ｐｈｅｎｔｏｌａｍｉｎｅ（１０－６ｍｏｌ／Ｌ）和ｐｒｏｐｔａｎｏｌｏｌ（１０－５ｍｏｌ／Ｌ）所抑制;ｎｉｆｅｄｉｐｉｎｅ（１０－６ｍｏｌ／Ｌ）和ｖｅｒａｒｏｍｉｌ（１０－６ｍｏｌ／Ｌ）分别与同样浓度的ＮＥ同时加入细胞培养液中,其细胞计数和３Ｈ－ＴｄＲ掺入率分别较单用ＮＥ时显著降低（Ｐ＜０．０１）,ｎｉｆｅｄｉｐｉｎｅ与ｖｅｒａｐａｍｉｌ亦明显抑制ＩＳＯ促ＶＳＭＣ增殖的作用。     

苯扎贝特对培养的牛主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响

目的探讨苯扎贝特对体外培养的牛血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)增殖的影响,以及可能的信号转导通路.方法采用改良的贴块法培养小牛胸主动脉VSMC,α-actin单克隆抗体免疫组织化学染色鉴定培养细胞.以MTT法反映VSMC增殖情况;用Westem Blot方法检测与细胞增殖有关的丝裂原激动蛋白激酶(MAPK)信号传导通路.结果苯扎贝特呈剂量依赖性抑制VSMC增殖,其抑制增殖的作用主要是通过MAPK传导途径.结论苯扎贝特通过抑制VSMC增殖可能参与延缓动脉粥样硬化及经皮冠状动脉腔内成行术(percutaneous transluminal coronaryangioplasty,PTCA)术后再狭窄的发生、发展.     

亮氨酸脑啡肽抑制培养大鼠主动脉平滑肌细胞增殖

实验以培养的ＳＤ大鼠胸主动脉平滑肌细胞为模型,用四唑盐比色地及＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入技术动态观察发现亮氨酸脑啡肽可显著抑制血管平滑肌细胞的增殖及ＤＮＡ的合成,阿片受体阻断剂纳洛酮对ＶＳＭＣｓ的增殖及ＤＮＡ的合成无影响,但ＮＡＬ可拮抗亮氨酸脑啡肽对ＶＳＭＣｓ增殖的抑制作用。     

5—羟色胺对肺动脉平滑肌细胞在缺氧条件下增殖的作用

本研究应用细胞培养、＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入,核酸分子杂交、免疫组织化学染色技术,探讨无氧（０％Ｏ２＋９５％Ｎ２＋５％ＣＯ２）和／或低氧（２．５￣３％Ｏ２＋９２％Ｎ２＋５％ＣＯ２）对新生小牛肺动脉平滑肌细胞增殖和５－羟色胺转载体基因表达的影响。结果表明：无氧２４ｈ可刺激ＰＡＳＭ的ＤＮＡ合成,＾３Ｈ－ＴｄＲ的掺入增加（Ｐ〈０．０５）,加入５－羟色胺能非常显著地促进无氧ＰＡＳＭ增殖（Ｐ〈０．００１）,而对常     

高压力对体外培养动脉中膜平滑肌细胞增殖及增殖相关蛋白和生长因子的影响

为了探讨力学因素在血管重建中的作用和机制,观察在单纯高压力条件下血管平滑肌细胞增殖及其相关蛋白和生长因子的变化。应用血管体外应力培养系统,在施加单纯压力的条件下培养猪颈总动脉。按压力大小,将培养的血管分为高压力(21．3kPa)组和正常压力(13．3kPa)组。两组血管均分别培养1、4和7d。免疫组织化学检测血管中膜平滑肌细胞的α-肌动蛋白,增殖细胞核抗原、血小板源性生长因子A、转化生长因子13l及P53蛋白的变化。结果显示：在高压力的作用下,随着培养时间的延长,α-肌动蛋白呈减少的趋势;增殖细胞核抗原,转化生长因子131、P53持续增多;血小板源性生长因子A先增加而后有所减少。说明高压力可明显促进血管平滑肌细胞表型的转变,发生增殖现象。提示高压力可能通过调节血小板源性生长因子A、转化生长因子131及P53蛋白的表达来调控血管平滑肌细胞的增殖。