离体和在体大鼠心脏缺血再灌过程自由基特性的ESR研究

用ESR技术直接测定离体和在体大鼠心肌组织缺血再灌(I-R)过程中的自由基浓度。结果表明,在用无细胞K-H液灌流的离体I-R模型和在体I-R过程中,大鼠心脏结扎LAD10min再灌30s心肌组织中g=2.0015的自由基浓度均显著高于假结扎对照组。提示心脏I-R过程有大量自由基生成,且其主要来源不是白细胞。体外自由基生成系统试验结果表明,Vit C可清除O_2~ 和·OH,N-乙酰半胱氨酸(NAC)只对·OH有一定清除作用。在体结扎LAD前2min静脉注射Vit C或NAC(150mg/kg)可使再灌后心肌内短时间产生的自由基浓度降至接近假结扎组水平,说明心脏I-R过程产生的原初自由基可能以·OH和O_2~ 为主。测定心肌组织自由基信号对微波功率敏感性及信号g值特性表明了I-R过程中显著变化的信号成分主要来自碳中心有机自由基及有机过氧化自由基。它们可能是初级活性氧自由基反应的次级产物。抑制或清除初级活性氧自由基可能成为改善心脏I-R损伤的途径之一。     

无氧状态下产生的活性自由基中间体的ESR检测

在药物及有害物质的自由基代谢机理研究中,经常需要弄清生物体系反应的引发或中间过程,而避免氧气进入反应体系进一步作用是观察反应中间产物的必要条件。酶及其自由基代谢过程的电子自旋共振(ESR)研究通常采用两种技术,即连续流动法和低温     

用电子自旋共振（ESR）研究肾缺血移植和再灌注过程产生的自由基

在低温（－１００℃）用ＥＳＲ检测和分析了大鼠肾缺血,移植和再灌注过程中出现的ＥＳＲ信号,发现在体（ｉｎｖｉｖｏ）肾缺血１小时再灌注２分钟肾组织除了出现ｇ＝２．００４０的醌类自由基以及ｇ＝１．９３７０和ｇ＝１．９７３０处与过渡金属离子有关的信号外,在低场区又出现一个很明显的信号（ｇ＝２．０８１２）,该信号的位置同及ＬＯＯ．的ｇ     

光系统Ⅱ颗粒内单线态氧诱导产生超氧阴离子自由基

活性氧是生物体有氧代谢的必然产物。当机体处于疾病或胁迫条件下 ,活性氧的生成将更加活跃[1] 。由于类囊体膜是植物体光合放氧的器官 ,处于高浓度的氧环境中 ,同时类囊体膜上还存在着活跃的电子传递体系 ,因此类囊体膜是超氧阴离子自由基生成的活跃部位[2 ] 。最近的研究表明 ,ＰＳⅠ和ＰＳⅡ都是超氧阴离子自由基的生成部位[3] 。其中 ,对ＰＳⅠ生成超氧的机制研究已比较深入[2 .4 ] ,而对ＰＳⅡ生成超氧阴离子自由基的机制研究是在近几年内刚刚开展[3 ,5- 7] 。ＰＳⅡ中生成的另一活性氧是单线态氧。通常认为由于强光照射下ＰＳⅡ生成的…     

高等植物光系统Ⅱ中强光照射产生超氧阴离子自由基的ESR探索

利用自旋捕捉电子顺磁共振（ESR）的方法对从菠菜叶绿体中分离提纯的光系统Ⅱ(PSⅡ)颗粒产生O₂^-_·的机理进行了直接检测.通过对样品充氧、加入超氧化物歧化酶（SOD）抑制剂四氰乙烯（TCNE）以及原位光照检测ESR信号等手段，在PSⅡ中检测到O₂^-_·与DMPO加合物的特征ESR信号.而在没有SOD抑制剂的情况下，光照时PSⅡ中O₂^-_·与DMPO加合物浓度显著下降.进一步实验发现PSⅡ中O₂^-_·产率与氧分子浓度直接正相关.O₂^-_·产率还具有pH值依赖性，在pH值为6.0～6.5范围内，O₂^-_·产率最高，大于此范围时则呈显著下降趋势.而PSⅡ颗粒的Tris处理也将导致O₂^-_·产率的急剧减少.以上结果证实水裂解放氧十分活跃的PSⅡ也是高等植物叶绿体在光照下产生活性O₂^-_·的主要部位，通常大部分的O₂^-_·能被内源SOD清除，且O₂^-_·的生成与PSⅡ的电子传递活性密切相关.     

四苯基卟啉氯化锰与ctDNA的相互作用

目的:探究非水溶性的四苯基卟啉氯化锰[(TPP)MnCl]与小牛胸腺DNA(ctDNA)的相互作用方式及机理.方法:借助紫外-可见光谱、荧光光谱和电化学等手段研究了(TPP)MnCl与ctDNA相互作用的过程.结果:两者作用后,(TPP)MnCl的紫外-可见光谱在Soret带减色30%;EB-DNA体系的荧光猝灭;(TPP)MnCl的循环伏安也明显变化.实验测得(TPP)MnCl与ctDNA的表观结合常数为9.3×105L·moL-1.结论:在实验条件下,(TPP)MnCl与ctDNA以静电结合方式相互作用.     

电子自旋共振-自由基捕获技术在生物学中的应用

本文结合作者实验室的工作,简要回顾了电子自旋共振-自由基捕获技术在生物领域的应用,包括新型自由基捕获探针的分子设计与合成,以及该技术在细胞、植物体系中的应用实例,并结合该技术的研究现状初步讨论了它的未来发展前景。     

自旋捕捉结合液相色谱/电子自旋共振/质谱联用技术用于检测多不饱和脂肪酸过氧化过程中产生的自由基(英文)

ω-6和ω-3类多不饱和脂肪酸是两种人体所需的重要营养物质。人体内的很多生理病理过程均涉及到这些多不饱和脂肪酸,以及它们在环氧合酶(cyclooxygenase,COX)和脂氧合酶(lipoxygenase,LOX)催化下产生的过氧化代谢物。环氧合酶和脂氧合酶催化的多不饱和脂肪酸的过氧化是复杂的生化过程,会产生一系列的自由基产物。这些自由基产物又会与蛋白质、DNA和RNA结合,从而导致很多生理功能的改变。然而一直以来,缺乏合适的分析方法来有效分离和鉴定这些自由基产物,限制了人们对环氧合酶和脂氧合酶,以及多不饱和脂肪酸的过氧化在生理作用方面的研究。直到最近,才出现了对COX/LOX催化产生的活泼自由基定性和定量分析的报道。这里将对一种可以用来鉴定体外脂类过氧化产生的自由基产物的自旋捕捉-LC/ESR/MS联用技术的发展与改进过程进行综述。这种新颖的LC/ESR/MS联用技术首次使得直接检测多不饱和脂肪酸代谢产生的自由基成为可能,这对自由基的生理学作用研究是一个重大突破,为人们在多不饱和脂肪酸的生理作用以及环氧合酶和脂氧合酶催化的脂质过氧化方面的研究带来了极大便利。     

γ射线辐照嘧啶核苷水溶液的电子自旋共振（ESR）研究

亚硝基特丁烷（ＭＮＲ）为捕集剂,利用自旋捕集技术,对γ射线辐照嘧啶苷水溶液进行了ＥＳＲ研究,确定了胸苷、尿苷和胞苷可产生的自肇捕集自由基的类别,并讨论了自由基形成的机制。     

大脑皮层神经元膜蛋白构象改变的ESR研究

采用马来酰亚胺标记完整的大脑皮层细胞,观察由低氧引起的ESR谱线的变化及脑细胞脂质过氧化程度,低氧引起细胞过氧化物生成增加,膜蛋白构象改变．金属硫蛋白(10^-5mol/L)能明显抑制过氧化反应,具有一定的抗氧化作用．并对实验的分子机理进行了简要的讨论．     

茶多酚抑制吸烟气相物质刺激鼠肝微粒体产生脂类自由基的ESR研究

在吸咽气相物质引起大鼠肝粒体产生脂类自由基的研究基础上,本文研究了茶多酚主要单体L-EGCG[(-)-epigallocatechin-3-gallate]等抗氧化剂对吸烟气相物质引起鼠肝微粒体产生脂类自由基的作用,结果发现,L-EGCG.粗晶态茶多酚,粉态茶多酚,维生态E以及维生素C都不同程度地抑制了脂类自由基的产生,同时,本文也研究了不同浓度的L-EGCG在此抑制过程中的动力学性质.     

氧自由基对大鼠心肌细胞核钙转运系统的影响

观察氧自由基对心肌细胞核钙转运系统的影响。方法;大鼠心肌细胞核采用蔗糖密度梯度心分离纯化,用酶学方法测定了ＡＴＰａｓｅ活性,用＾４５Ｃａ＾２＋同位素法测定下摄取。结果;低浓度的Ｈ２Ｏ２短时间作用使核钙泵活性增加３１．６％,高浓度Ｈ２Ｏ２使核钙泵活性降低,呈时间和剂量信赖性。     

用ESR自旋捕集法研究吸烟烟气处理的脂质体对大鼠粒细胞产生O_2~-的影响

吸烟烟气能引发卵磷脂脂质体的脂质过氧化。若将吸烟烟气处理20s的脂质体作用完整的大鼠粒细胞(RPN),用ESR自旋捕集方法发现,当作用时间在25min内(脂浓度1.0mg/ml)或脂浓度小于15.0mg/ml(而作用时间均为15min)时,这种过氧化的脂质体能增加RPN呼吸爆发产生O_2~-的量。而没有经吸烟烟气处理的新制脂质体,在脂浓度大于0.2mg/ml(作用时间15min)时,都不同程度地抑制RPN产生O_2~-。     

用ESR自旋捕集法研究吸烟烟气处理的脂质体对大鼠粒细胞产生O_2~-的影响

吸烟烟气能引发卵磷脂脂质体的脂质过氧化。若将吸烟烟气处理20s的脂质体作用完整的大鼠粒细胞(RPN),用ESR自旋捕集方法发现,当作用时间在25min内(脂浓度1.0mg/ml)或脂浓度小于15.0mg/ml(而作用时间均为15min)时,这种过氧化的脂质体能增加RPN呼吸爆发产生O_2~-的量。而没有经吸烟烟气处理的新制脂质体,在脂浓度大于0.2mg/ml(作用时间15min)时,都不同程度地抑制RPN产生O_2~-。     

用电子自旋共振（ESR）研究肾缺血移植和再灌注过程产生的自由基

在低温（－１００℃）用ＥＳＲ检测和分析了大鼠肾缺血,移植和再灌注过程中出现的ＥＳＲ信号,发现在体（ｉｎｖｉｖｏ）肾缺血１小时再灌注２分钟肾组织除了出现ｇ＝２．００４０的醌类自由基以及ｇ＝１．９３７０和ｇ＝１．９７３０处与过渡金属离子有关的信号外,在低场区又出现一个很明显的信号（ｇ＝２．０８１２）,该信号的位置同及ＬＯＯ．的ｇ     

用ESR技术研究含硒蛋白抗羟基自由基作用的活性

用ＥＳＲ技术研究含硒蛋白抗羟基自由基作用的活性。与ＳＯＤ、茶多酚相比较,含硒蛋白对羟基自由基的清除也有显著作用。找到了一种有实用价值,天然无毒,抗羟基自由基的新资源。     

金属硫蛋白对大鼠红细胞膜受羟自由基损伤保护作用的自旋标记—ESR研究

用自旋标记物5NS,16NS及MSL分别插入红细胞膜脂及标记膜蛋白,发现金属硫蛋白(10~(-5)mol/L)对羟自由基引起的膜运动性减弱和膜蛋白构象改变有明显抑制作用,说明金属硫蛋白对大鼠红细胞膜的羟自由基损伤有保护作用,并且,对于低剂量的羟自由基损伤,保护作用更为明显。     

电子顺磁共振法测定清栓酶在沙鼠脑缺血再灌流损伤中的抗自由基作用

本文设计了沙鼠脑缺血再灌流实验模型,以清拴酶作脑缺血后静脉注射再灌流模型和非药物再灌流模型组对照,用电子顺磁共振法(ESR)测定脑组织自由基波谱,结果清栓酶组出现自由基信号很弱,接近正常组,显著区别于未用药脑缺血再灌流30分钟和60分钟组(P<0.01),证明清栓酶有抗自由基和再灌注损伤的作用.