消痰化瘀利窍方对慢性间歇性低氧小鼠认知障碍的改善作用*

目的: 探讨消痰化瘀利窍方对慢性间歇性低氧小鼠认知障碍的改善作用。方法: 48只雄性C57小鼠随机分为4组(n=12),常氧对照组(Normoxia),慢性间歇性低氧组(CIH)、慢性间歇性低氧中药干预组(Formula+CIH)、中药对照组(Formula)。Normoxia和Formula组暴露于常氧环境,CIH与Formula+CIH组暴露于间歇性低氧环境(低氧舱中前1.5 min充入氮气使舱内氧浓度降至9%,后1.5 min充入氧气使氧浓度恢复至21%,3 min/循环,每天上舱8 h,共35 d)。其中,Formula +CIH与Formula组于每日灌胃中药水煎液灌胃(26.8 g/kg),同时CIH组与Normoxia组灌胃给予同体积生理盐水。实验在26～35 d连续应用水迷宫观测各组小鼠的学习和记忆能力,35 d造模结束后,首先进行Y-迷宫实验,麻醉后断头取脑,分离海马组织。应用尼氏染色和电镜观察海马神经元的形态学改变,通过Western blot检测海马神经元synapsin和PSD-95的表达水平。结果: 与Normoxia组相比,CIH组小鼠水迷宫和Y-迷宫的成绩显著下降(P＜0.01,P＜0.01),海马神经元尼氏小体的数量和突触后致密物质的厚度均减少,PSD-95蛋白表达下调(P＜0.01),而synapsin表达无明显改变。与CIH组小鼠比较,消痰化瘀利窍方干预可显著提高小鼠水迷宫和Y-迷宫的成绩(P＜0.01),增加海马神经元尼氏小体的数量和突触后致密物质的厚度,上调PSD-95蛋白表达水平(P＜0.01)。结论: 消痰化瘀利窍方可改善由CIH诱导的突触后致密区的结构和功能受损,进而对认知功能障碍起到保护作用。     

消痰化瘀利窍中药组方对改善慢性间歇性低氧大鼠心肌纤维化的作用及其机制*

目的: 探讨转化生长因子-β(TGF-β)信号通路在消痰化瘀利窍中药组方(XC)对改善慢性间歇性低氧(CIH)大鼠心肌纤维化中的作用。方法: 40只SD 大鼠,随机分为常氧组(Normoxia)、常氧+中药干预组(TCMC)、慢性间歇性低氧模型组(CIH)、CIH +中药干预组(TCMC+CIH),每组10只。通过向舱内充入氮气,使舱内氧体积分数在90 s内从21%下降到9%,随后90 s再充氧气使舱内氧体积分数逐渐上升到21%为一循环建立CIH模型。CIH 与 TCMC+CIH 组大鼠置于CIH装置, Normoxia 和TCMC组大鼠置于正常氧舱。此外TCMC+CIH 与 TCMC 组大鼠于每日XC生药(24 g/kg)煎制灌胃,而 CIH 组与 Normoxia 组大鼠给予等体积生理盐水。造模结束后,天狼星红染色观察大鼠心肌间质内胶原沉积情况;Western blot 法检测大鼠心肌间质中 CollagenⅠ、Collagen Ⅲ、Fibronectin、TGF-β、p-Smad2、p-Smad3的蛋白表达水平。采用Q-PCR法检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶抑制因子 2 (TIMP-2) 的 mRNA表达水平。结果: 与正常组比较,CIH大鼠心肌组织出现明显胶原的沉积,CollagenⅠ、Collagen Ⅲ和Fibronectin蛋白表达明显增多(P均＜0.01),TGF-β、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达水平也明显增高(P均＜0.01);CIH大鼠心肌组织TIMP-2 mRNA上调导致MMP-2 mRNA明显减少(P均＜0.01)。给予XC干预后,CIH大鼠心肌组织胶原沉积明显减少,CollagenⅠ、Collagen Ⅲ和Fibronectin蛋白表达明显降低(P＜0.05,P＜ 0.01,P＜0.05);CIH大鼠心肌组织中TGF-β、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达水平明显降低(P＜0.01,P＜0.05,P＜ 0.01)。心肌组织中TIMP-2明显基因减少致MMP-2增多(P均＜0.05)。 结论: 消痰化瘀利窍中药组方可抑制CIH大鼠心肌纤维化的形成,进而改善CIH大鼠心肌功能。其机制与该中药组方下调TGF-β/ Smad2/3信号通路及下调TIMP-2mRNA有关。     

氢气对慢性间歇性低氧大鼠肝脏氧化应激损伤的改善作用

目的：研究氢气对慢性间歇性低氧大鼠肝脏损伤的改善作用。方法：24只雄性成年SD大鼠,随机分为3组（n=8）：常氧组（Norm）、慢性间歇性低氧组（CIH）、氢气+慢性间歇性低氧组（H₂+CIH）。Norm组暴露于空气中,CIH组与H₂+CIH组接受间歇性低氧处理5周,其中H₂+CIH组在间歇性低氧处理前给予1 h 67%浓度的氢气吸入。5周后比较各组大鼠血清氧化应激指标、炎症因子指标、肝酶水平、血脂水平,并在电镜下观察大鼠肝组织超微结构变化。结果：与Norm组相比,CIH组肝组织超微结构受损严重,谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）水平显著升高（P<0.05）;血清8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）水平显著升高;超氧化物歧化酶（SOD）活性显著降低;白介素-6（IL-6）水平显著升高。与CIH组相比,H₂+CIH组肝组织超微结构损伤减轻,ALT、AST水平显著降低（P<0.05）;8-OHdG与IL-6水平显著降低,SOD活性显著升高。与Norm组相比,CIH组IL-1水平升高;血清TC、TG、LDL水平升高,但无统计学差异。HDL在各组之间无统计学差异。结论：氢气可以减轻慢性间歇性低氧对大鼠肝脏的损伤,有效降低氧化应激水平,保护肝细胞受损。     

自噬对慢性间歇性低氧大鼠颏舌肌损伤的作用及机制

目的:探讨自噬在慢性间歇性低氧状态下大鼠颏舌肌损伤中的作用及其机制。方法:将36只SD大鼠随机均分为对照组,慢性间歇性低氧组(chronic intermittent hypoxia,CIH组),慢性间歇性低氧+氯喹组(CIH+CQ组)。苏木素-伊红(HE)染色观察颏舌肌组织形态学变化;激光共聚焦显微镜下观察自噬标记物LC3在颏舌肌中的表达;免疫组织化学染色法观察组织中细胞色素c(cytochrome,Cyt c)的表达。结果:激光共聚焦结果显示,对照组颏舌肌中未见明显LC3表达,CIH组中LC3的平均荧光强度较对照组明显增强(P0.05),CIH+CQ组中LC3的平均荧光强度较CIH组显著增加(P0.05)。免疫组织化学结果显示:CIH组中Cyt c的阳性表达较对照组增加(P0.05),CIH+CQ组中Cyt c表达与CIH组相比显著增加(P0.05)。结论:慢性间歇性低氧引起颏舌肌线粒体损伤,触发细胞凋亡,同时诱发自噬。抑制自噬加重线粒体损伤,促进细胞凋亡。说明自噬可能通过抑制凋亡而在慢性间歇性低氧状态下的大鼠颏舌肌中起维护肌肉功能的作用。     

慢性间歇性低压低氧对大鼠动脉血管收缩功能的影响

本研究旨在探讨慢性间歇性低压低氧(chronicintermittent hypobaric hypoxia,CIHH)对大鼠胸主动脉和肺动脉收缩功能的影响及其机制.雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为4组:CIHH处理14天组(CIHH 14)、28天组(CIHH 28)、42天组(CIHH 42)和对照组(...     

多巴胺对急性间歇性低氧诱导的大鼠颈动脉体低氧敏感性的影响

目的:观察急性间歇性低氧刺激后大鼠颈动脉体对低氧的敏感性以及多巴胺对颈动脉体低氧敏感性的影响。方法:将分离SD大鼠的颈动脉体-窦神经移入到孵育槽,然后把分离的窦神经吸入到记录的玻璃电极中行电信号记录。记录基线部分缓冲液充入气体为95%O2+5%CO2混合气,低氧应激给予5%O2+5%CO2+90%N2混合气,低氧刺激给予30 s,95%O2+5%CO2给予90 s,共10个循环,每组实验大鼠数量n大于等于5。结果:大鼠离体的颈动脉体,给予急性间歇性低氧应激,再给予低氧刺激,窦神经较之前低氧刺激放电活动增强。但加入多巴胺后,可以抑制窦神经对低氧的反应,急性间歇性低氧后,多巴胺对窦神经的低氧放电活动抑制作用加强。结论:大鼠颈动脉体给予急性间歇性低氧可增强窦神经对低氧的反应,多巴胺可抑制急性低氧诱导的颈动脉体对低氧敏感性的增强。     

埃他卡林对间歇性低氧暴露肺微动脉的选择性扩张作用

目的:研究新型ATP敏感性钾通道开放剂埃他卡林(Ipt)对间歇性低氧暴露肺微动脉扩张作用特征。方法:将雄性SD大鼠随机分为3组,对照组(Control),低氧暴露组,置于常压低氧舱内(O210%±0.5%)8 h/d,每周6d,和低氧暴露+醋氮酰胺(Acz)干预组(灌胃给予Acz 80 mg/(kg.d))。12周后分离大鼠管径为(197±4)μm的肺微动脉组织,利用DMT微血管张力测定仪在6 nmol/L内皮素-1(ET-1)致血管预收缩条件下,考察不同浓度Ipt对间歇性低氧暴露肺微动脉张力变化并利用ACh考察肺微动脉内皮活性。结果:与常压常氧组对比,10-5mol/LACh对间歇性低氧暴露肺微动脉舒张率显著降低(P<0.01),而与80 mg/kg Acz干预组肺微动脉舒张率无显著性差异(P>0.05);Ipt在(10-11~10-4)mol/L对间歇性低氧暴露肺微动脉呈剂量依赖性舒张作用,与80 mg/kg Acz干预组间无显著性差异(P>0.05),而对常压常氧组肺微动脉无明显的舒张作用。结论:间歇性低氧暴露肺微动脉内皮细胞功能受损,Ipt可选择性扩张低氧暴露肺微动脉;Acz可改善低氧所致内皮细胞功能异常,但并不影响Ipt对低氧暴露肺微动脉的选择性扩张作用。     

大鼠肠系膜动脉的立式包埋及内皮损伤的评估方法

目的建立一种新的小血管立式包埋方法,并通过对内皮损伤的定量分析来评估血管的功能。方法 (1)肠系膜动脉的分离:首先游离大肠小肠部分至体外,暴露出肠系膜动脉,随后用剪刀游离出带有少量组织的肠系膜动脉,最后在镜下剔除黏连组织;(2)肠系膜动脉的立式包埋;(3) HE染色、免疫荧光染色观察肠系膜动脉的结构和内皮损伤程度。结果大鼠肠系膜动脉立式包埋及血管内皮评估方法,能够快速、有效地得到良好形态的大鼠肠系膜动脉切片,并给出小血管病变的病理学研究方法。结论本方法能够降低病理切片的制作难度,为血管病变的研究提供了可借鉴的研究方法,可以进一步推广至其它动物或临床病人的小血管研究。     

埃他卡林对低氧暴露大鼠脑和肺微动脉选择性扩张作用

目的:研究低氧暴露对大鼠脑和肺微动脉内皮功能的影响以及埃他卡林(Ipt)对以上微动脉的扩张作用特征。方法:将雄性SD大鼠随机分为2组,常压常氧组(control)和低氧暴露组(hypoxic),后者置于常压低氧暴露舱内(O27.8%)8 h。分离大鼠管径为(204±5)μm的脑基底动脉、肺微动脉组织,利用DMT微血管张力测定仪在6nmol/L内皮素-1(ET-1)致血管预收缩条件下,利用乙酰胆碱(ACh)考察微动脉内皮功能及观察不同浓度Ipt对脑和肺微动脉张力变化的影响。结果:与常压常氧组对比,10-5 mol/L乙酰胆碱(ACh)对低氧暴露脑肺微动脉扩张率显著降低(P0.05);新型ATP敏感性钾通道开放剂Ipt在(10-11~10-3)mol/L对低氧暴露肺微动脉呈剂量依赖性扩张作用,明显强于对常压常氧组(P0.01),在(10-11~10-3)mol/L对低氧暴露脑微动脉呈剂量依赖性扩张作用,但与常压常氧组相比无显著差异。结论:低氧暴露可导致脑基底动脉和肺微动脉内皮功能受损,Ipt具有选择性增强扩张低氧暴露肺微动脉的作用,但不影响以上条件低氧暴露后脑基底动脉的扩张作用,提示该药可应用于改善低氧暴露所致的肺微血管收缩,为Ipt发展为新型治疗肺动脉高压的药物提供理论基础。     

高脂饮食对慢性低氧大鼠肺组织eNOS/NO的影响

目的：本研究旨在探讨高脂饮食对慢性低氧SD大鼠肺组织内皮型一氧化氮合酶（eNOS）/一氧化氮（NO）的影响及其可能机制。方法：24只雄性SD大鼠随机分为3组,常氧组（N组,南京,海拔10 m）、低氧组（H组,低压氧舱,模拟海拔5 000 m）和低氧联合高脂饮食组（H＋HFD组,低压氧舱,模拟海拔5 000 m）,经普通饮食或高脂饮食5周后,留取外周血和肺组织标本,用全自动血细胞分析仪检测静脉血血红蛋白（Hb）浓度,WST-1法检测超氧化物歧化酶（SOD）活力、TBA比色法检测血浆丙二醛（MDA）含量,终点法和直接检测法检测血脂含量,荧光实时定量PCR检测肺组织eNOS mRNA水平,Western blot法检测肺组织eNOS蛋白水平,硝酸还原酶法检测肺组织NO代谢产物硝酸盐/亚硝酸盐（NOx）水平。结果：低氧组大鼠肺组织中eNOS mRNA及蛋白水平及NOx含量明显低于常氧组,而低氧联合高脂饮食组上述三项指标水平明显低于低氧组（P〈0.05）;低氧联合高脂饮食组血浆SOD活力低于低氧组,血浆MDA含量、总胆固醇（TCH）及低密度脂蛋白（LDL）水平明显高于低氧组（P〈0.05）。结论：慢性低氧降低大鼠肺组织eNOS/NO水平,高脂饮食进一步降低低氧大鼠肺组织eNOS/NO水平,减弱其对肺组织保护作用,机制可能与血脂异常及氧化—抗氧化状态失衡有关。     

间歇性低压低氧与连续性低压低氧对大鼠血液动力学作用的比较(英文)

本研究旨在探讨并比较慢性间歇性低压低氧（intermitten thypobaric hypoxia,IHH）和慢性连续性低压低氧（continuous hypobaric hypoxia,CHH）对大鼠血液动力学作用的影响。40只成年Sprague—Dawley大鼠随机分为5组：对照组（CON）,28天IHH处理组（IHH28）,42天IHH处理组（IHH42）,28天CHH组（CHH28）和42天CHH组（CHH42）。IHH火鼠于低压氧舱分别接受28或42天模拟5000m海拔高度低氧（11．1％O2）处理、每天6h。CHH处理大鼠生活在低压氧舱环境中,除每天半小时常氧供食、供水和清洁外,其余时间均分别接受时程为28或42天的模拟5000m海拔高度低氧（11．1％O2）处理。每周定时测定大鼠体重。通过导管法测定基础常氧和急性低氧状态下的血液动力学,包括半均动脉压（meanartery blood pressure,MAP）、心率（heartrate,HR）、左审收缩峰压（1eft ventricular systolic pressure,LVSP）、正负左率最人压力变化速率（maximum change rate of left ventricular pressure,&#177;LVdP／dtmax）。通过生物化学方法测定大鼠心肌超氧化物岐化酶活性和丙二醛含量。并分别测定全心、左心室和右心室重量。结果显示：（1）CHH42大鼠基础HR和MAP低于CON,IHH和CHH28大鼠（P〈0．05）。（2）IHH大鼠表现出明显的抗心肌缺氧／复氧损伤作用,表现为急性低氧状态下的HR、MAP、LVSP和＋LVdP/dtmax,改变明显低于CON大鼠（P〈0．05）;CHH大鼠表现出更为明显的抗急性低氧心脏保护作用,表现为急性低氧的HR、MAP、LVSP和&#177;LVdP/dtmax;改变明显低于CON和IHH火鼠（P〈0．05）,但出现复氧损伤作用,表现为复氧过程中血液动力学的恢复明显低于CON和IHH大鼠（P〈0．05）。（3）与CON大鼠相比较,IHH和CHH大鼠心肌抗氧化能力明显增强（P〈0．05,P〈0．01）。（4）与IHH和CON大鼠相比较,CHH大鼠表现明显的右心室肥厚（P〈0．01）。结果表明,IHH可诱导有效的心脏保护作用,而无明显的不良反应,因而具有潜在的实际应用价值。     

慢性间断性低氧大鼠认知功能和脑胆碱能神经元的进行性变化

目的：探讨慢性间断性低氧（CIH）大鼠认知功能的进行性变化及其与脑胆碱能神经元变化的关系。方法：成年雄性SD大鼠40只,随机均分为对照组、慢性间断性低氧1,3,5周组。应用Morris水迷宫检测认知功能的变化;利用HE染色在光镜下计数前额叶皮层和海马坏死神经元数;利用免疫组化方法检测前额叶皮层和海马胆碱乙酰转移酶（ChAT）阳性表达。结果：CIH各组大鼠学习记忆能力呈进行性下降趋势;与对照组比较,CIH5w组出现明显学习记忆功能障碍（P〈0.05）。CIH各组前额叶皮层和海马变性坏死神经元数增多,且随低氧时间延长,上述改变呈慢性进行性加重趋势。CIH各组前额叶皮层和海马ChAT阳性表达逐渐下降;与对照组比较,CIH3w组和CIH5w组前额叶皮层和海马ChAT阳性表达明显减少,差异具有显著性（P〈0.05）。结论：慢性间断性低氧大鼠认知功能进行性下降与前额叶皮层和海马神经元病理性损伤、ChAT表达进行性减少有关。     

慢性间歇低氧对幼鼠脑区p38MAPK的影响

目的：研究慢性间歇低氧对幼鼠部分脑区p38MAPK的影响。方法：SPF级健康雄性SD幼鼠（3-4周龄）50只,随机分为5组（n=10）：间歇低氧2周组（2IH组）、间歇低氧4周组（4IH组）、间歇低氧4周后恢复组（4F组）、对照2周组（2C组）和对照4周组（4C组）。建立慢性间歇低氧幼鼠模型,以RT-PCR法和Westemblot法分别测幼鼠海马及前额叶皮层p38MAPKmRNA和磷酸化p38MAPK（p-p38）蛋白的表达。结果：21H、4IH和4F组幼鼠海马、前额叶皮层的p38MAPK mRNA及p-p38蛋白均明显高于相应对照组（P均〈0．05）。结论：慢性间歇低氧可激活幼鼠部分脑区D38MAPK。     

间歇性低压低氧通过促进细胞凋亡抗大鼠胶原诱导性关节炎

本文旨在研究慢性间歇性低压低氧(chronic intermittent hypobaric hypoxia,CIHH)对大鼠胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)影响.雄性成年Sprague-Dawley大鼠50只,随机分为5组:CIHH预处理组(Pre-T)、预处理对照组(...     

Endothelial cell autophagy in chronic intermittent hypoxia is impaired by miRNA-30a-mediated translational control of Beclin-1

Chronic intermittent hypoxia (CIH) in obstructive sleep apnea causes damage of aortic endothelial cells, which predisposes the development of many cardiovascular diseases. Recently, both altered expression of microRNAs (miRNAs) and impaired autophagy were found to be associated with endothelial cell dysfunction in CIH. However, the exact molecular regulatory pathway has not been determined. Here, we address this question. In a mouse model of CIH, we detected significant upregulation of miR-30a, a miRNA that targets 3′-untranslated region of autophagy-associated protein 6 (Beclin-1) messenger RNA (mRNA) for suppressing the protein translation, which subsequently attenuated the endothelial cell autophagy against cell death. Indeed, unlike Beclin-1 mRNA, the Beclin-1 protein in endothelial cells did not increase after CIH. Suppression of miR-30a by expression of antisense of miR-30a significantly increased Beclin-1 levels to enhance endothelial cell autophagy in vitro and in vivo, which improved endothelial cell survival against CIH. Together, these data suggest that endothelial cell autophagy in CIH may be attenuated by miR-30a-mediated translational control of Beclin-1 as an important cause of endothelial cell dysfunction and damage.     

Impact of chronic intermittent hypoxia on the long non-coding RNA and mRNA expression profiles in myocardial infarction

Chronic intermittent hypoxia (CIH) is the primary feature of obstructive sleep apnoea (OSA), a crucial risk factor for cardiovascular diseases. Long non-coding RNAs (lncRNAs) in myocardial infarction (MI) pathogenesis have drawn considerable attention. However, whether CIH participates in the modulation of lncRNA profiles during MI is yet unclear. To investigate the influence of CIH on MI, cardiac damage was assessed by histology and echocardiography, and lncRNA and mRNA integrated microarrays were screened. MI mouse model showed myocardial hypertrophy, aggravated inflammation and fibrosis, and compromised left ventricle function under CIH. Compared with normoxia, 644 lncRNAs and 1084 differentially expressed mRNAs were identified following CIH for 4 weeks, whereas 1482 lncRNAs and 990 mRNAs were altered at 8 weeks. Strikingly, reoxygenation after CIH markedly affected 1759 lncRNAs and 778 mRNAs. Of these, 11 lncRNAs modulated by CIH were restored after reoxygenation and were validated by qPCR. The GO terms and KEGG pathways of genes varied significantly by CIH. lncRNA-mRNA correlation further showed that lncRNAs, NONMMUT032513 and NONMMUT074571 were positively correlated with ZEB1 and negatively correlated with Cmbl. The current results demonstrated a causal correlation between CIH and lncRNA alternations during MI, suggesting that lncRNAs might be responsible for MI aggravation under CIH.