河套蜜瓜ACC合成cDNA酶片段的克隆和序列分析

１－氨基环丙烷－１－羧酸（ＡＣＣ）合成酶是高等植物中乙烯生物合成的关键酶。以成熟河套蜜瓜果实的ＲＮＡ为模板,经反转录和ＰＣＲ扩增得到预期大小的ＤＮＡ片段,插入到ＰＵＣ１９的ＳｍａＩ位眯后转化Ｅ．ｃｏｌｉＪＭ１０９,筛选出重组子ＰＨＭＡＳ１。离列分析表明获得了６２７ｂｐ的ＡＣＣ合成酶ｃＤＮＡ片段。与已报道的ＡＣＣ合成酶基因相应离理比较有很高的同源性。     

果实成熟过程相关调控基因研究进展

果实成熟过程中,多聚半乳糖醛酸酶（ＰＧ）参与果胶的分解,从而在果实软化中起作用,新近发现,果实软化过程中,协同展蛋白具有一定的作用：ＡＣＣ合成酶（ＡＣＳ）、ＡＣＣ氧化酶（ＡＣＯ）和ＡＣＣ脱氨酶与乙烯合成直接有关,ＡＣＳ是乙烯形成的关键酶,由多基因家族编码,各个基因协同表达,每一基因都有自己的转录特性,新近不断发现果实中ＡＣＳ基因家族中的新成员;ＡＣＯ是一种与膜结合的酶,这种酶具有结构上的立体专一性     

植物抗病毒基因工程育种策略及其进展

简要讨论了近年来植物抗病毒基因工程育种策略。这些策略包括利用植物自身的抗病毒基因;利用病毒宙蛋白基因、动物蛋白基因、复制酶基因、卫星ＲＮＡ、反义链ＲＮＡ和缺陷干扰型ＲＮＡ;利用抗体基因、核酶和干扰素。并以各种策略的抗病毒机理及其在农业生产上的应用前景进行了讨论。     

延长果实保鲜期的基因工程研究进展

乙烯对果实成熟和衰老具有强烈的促进作用,是造成水果采后腐烂的根本原因。本主要综述了近几年来采用转基因或反义RNA技术,将乙烯生物合成与分解过程中所需酶的基因和细胞壁水解酶基因转化到植物体内,从而延长果实保鲜期的相关研究进展。     

授粉诱导兰花花部乙烯生物合成基因在转录水平上的表达

朵丽蝶兰（Ｄｏｒｉｔａｅｎｏｐｓｉｓｈｙｂｒｉｄａ Ｈｏｒｔ．）的花授粉后,测定乙烯的产生,并分析授粉后花部各器官乙烯生物合成的ＡＣＣ合成酶和ＡＣＣ氧化酶两个基因转录水平上的表达。授粉后在花部均可探测到ＡＣＣ合成酶和ＡＣＣ氧化酶的ｍ ＲＮＡ。在花部不同器官之间,此两种酶的ｍ ＲＮＡ的积累水平均表现出一些差异。ＡＣＣ合成酶的ｍ ＲＮＡ 积累与ＡＣＣ氧化酶相比,具有更明显的特异性。而ＡＣＣ氧化酶ｍ ＲＮＡ 的积累水平远比ＡＣＣ合成酶高     

乙烯诱导下草莓果实采用RNA代谢与蛋白质合成活性的变化

草莓果实在乳白时期采收（开花后约４０ｄ）分别用１０μ１／Ｌ,５０μ１／Ｌ和１００μ１／Ｌ的外源乙烯进行处理。处理后的果实大分子ＲＮＡ和ｐｏｌｙ（Ａ）＾＋ＲＮＡ水平以及ｐｏｌｙ（Ａ）＾＋ＲＮＡ与总ＲＮＡ的比例均有增高,果实体内ＲＮＡ酶活性和体外蛋白质的合成水平也升高。乙烯很可能是促进草莓果实成熟衰老的因素之一。     

乙烯诱导下草莓果实采后RNA代谢与蛋白质合成活性的变化

草莓草果实在乳白时期采收（开花后约４０ｄ）,分别用１０μｌ／Ｌ,５０μｌ／Ｌ和１００μｌ／Ｌ的外源乙烯进行处理。处理后的果实大分子ＲＮＡ和ｐｏｌｙ（Ａ）＋ＲＮＡ水平以及ｐｏｌｙ（Ａ）＋ＲＮＡ与总ＲＮＡ的比例均有增高。果实体内ＲＮＡ酶活性和体外蛋白质的合成水平也升高。乙烯很可能是促进草莓果实成熟衰老的因素之一。     

延缓番茄果实成熟的分子机理

对延缓番茄果实成熟的热处理、反义ＲＮＡ技术及气调技术（高ＣＯ２／低Ｏ２,１００％Ｎ２）等方法进行了阐述,并从分子水平上（包括与乙烯生成有关及无关的蛋白质的合成、基因表达等方面）探讨了这些方法延缓果实成熟的机理。     

植物乙烯生物合成研究进展

本文对植物体内乙烯生物合成途径中控制ＡＣＣ合成及代谢的三种酶：ＡＣＣ合酶,ＡＣＣ氧化酶和ＡＣＣ：Ｎ－丙二酰基转移酶的特性、基因家庭及其表达等方面的问题进行了评述。     

特异切割马铃薯卷叶病毒复制酶基因负链的核酶研究

根据锤头状核酶的作用模式,设计、合成并克隆了特异性切割马铃薯地病毒中国分离株（ＰＬＲＶ－Ｃｈ）复制酶基因负链ＲＮＡ的核酶序列,以体外转录的ＰＬＲＶ－Ｃｈ复制酶基因负链ＲＮＡ作为底物,与转录的核酶ＲＮＡ共同保温,以检测核酶对底和的体外切割作用。实验结果表明,核酸疼 ＲＮＡ对ＰＬＲＶ－Ｃｈ复制酶基因负锭ＲＮＡ具有特异切割作用。     

番茄rin位点上的一个MADS盒基因调控果实成熟

ｒｉｎ番茄突变体的乙烯生成和果实成熟均受到抑制 ,除此之外还表现萼片增大和花序决定性丧失。尽管该突变体维持良好的乙烯敏感性 ,但果实成熟却不能被外源乙烯诱导 ,这暗示ＲＩＮ基因编码的产物同时调控依赖于和不依赖于乙烯的成熟过程。作者先前的研究已表明ｒｉｎ位点定位于番茄第 5染色体。本文报道通过定位克隆发现ｒｉｎ位点上存在两个串联的ＭＡＤＳ盒基因 ,分别定名为ＬｅＭＡＤＳ＿ＲＩＮ和ＬｅＭＡＤＳ＿ＭＣ ,前者调控果实成熟过程而后者则影响萼片先育和花序决定性。这两个基因的功能通过正义转化ｒｉｎ番茄和反义转化野生型番…     

与授粉有关的因子调节的乙烯生物合成基因在兰花花器官中的表达

分析了与授粉有关的因子调节的ＡＣＣ合酶和ＡＣＣ氧化酶基因在朵丽蝶兰（ＤｏｒｉｔａｅｎｏｐｓｉｓｈｙｂｒｉｄａＨｏｒｔ．）花中的表达。生长素和乙烯均可诱导ＡＣＣ合酶和ＡＣＣ氧化酶的ｍＲＮＡ在花器官中积累。然而,去雄却不能诱导这两个基因在花器官中表达。生长素和乙烯所诱导的ＡＣＣ合酶和ＡＣＣ氧化酶的ｍＲＮＡ在花器官中的积累模式相似。原位杂交结果表明,生长素和乙烯处理后ＡＣＣ氧化酶的ｍＲＮＡ在柱头的表皮和薄壁细胞中积累。根据ＡＣＣ合酶和ＡＣＣ氧化酶基因表达的结果,对生长素、乙烯和去雄在兰花授粉后乙烯生物合成过程中的作用进行了分析。     

两个反义基因在番茄工程植株中的生理抑制效应分析

用番茄乙烯形成酶（ＥＦＥ）和多聚半乳糖醛酸酶（ＰＧ）反义ｃＤＮＡ转化番茄子叶,获得两个转基因系统,分别比较了两个基因系统果实和叶片的乙烯生成速率,果实中ＥＦＥ酶活性和果胶酶活性,表明反义ＥＦＥ基因在番茄工程植株中能显著抑制ＥＦＥ酶活性和乙烯生成,反义ＰＧ基因则主要抑制是ＰＧ酶活性。     

授粉诱导蝴蝶兰雌蕊中乙烯合成和ACC氧化酶基因表达

对蝴蝶兰（Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ “Ｇｅｎｅｒａｌｋｕ”ｈｏｒ．）在授粉后乙烯的合成和１－氨基环丙烷－１－羧酸（ＡＣＣ）氧化酶基因的表达进行了研究。实验结果显示在授粉后１２、２４ 和４８ ｈ,柱头和花柱中乙烯的产生和ＡＣＣ氧化酶ｍ ＲＮＡ 的积累显著下降,而子房中则明显上升,表明授粉后雌蕊中乙烯的产生与ＡＣＣ氧化酶基因的表达密切相关。此外,授粉后雌蕊的柱头中合成的乙烯相对量最多,花柱次之,子房中则较少     

植物脂肪酸的生物合成与基因工程

植物脂肪酸既具重要生理功能,又有巨大食用和工业价值。其生物合成途径较为复杂,涉及乙酰－ＣｏＡ羟化酶、脂肪酸合成酶、脂肪酸去饱和酶和脂肪酸延长酶等一系列酶。近年来,对脂肪酸生物合成途径进行了大量研究,克隆出许多相关基因,初步阐明了脂肪酸合成规律,并在此基础上开展了利用基因工程技术调控脂肪酸合成研究,取得可喜进展。本文详细介绍了植物饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸和超长链脂肪酸的生物合成与基因工程研究的新结果     

水稻几丁质酶基因RCH8创伤导转录及启动子功能分析

高等植物几丁质酶基因受病害侵染、真菌激发子、乙烯、机械创伤等诱导转录。我们已经测定过水稻Ⅰ类几丁质酶基因ＲＣＨ８的ＤＮＡ序列。为了研究水稻中与防卫反应有关的几丁质酶基因启动子的活怀、功能和表达调控。我们以ＲＣＨ８几丁质酶基因保守的编码区序烈 探讨针,分别在创伤处理２－２４ｈ后提取水稻叶片的总ＲＮＡ作Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交,发现创伤处理６ｈ可以检测到几丁质酶基因的表达,１２ｈ表达水平最高。合成了一个与     

果实多聚半乳糖醛酸酶分子生物学研究进展

多聚半乳糖醛酸酶（PG酶）是一种在植物细胞壁降解中起重要的作用的酶。作者介绍了PG酶在果实成熟软化中的作用。概述了PG酶基因及其表达调控,评述了乙烯对PG酶合成的影响。     

低温对梨（Pyrus communis L.）果实后熟过程中乙烯合成和反？…

Ｐａｓｓｅ－Ｃｒａｓｓａｎｅ梨果实采后需经过６０－８０ｄ的低温处理才能正常后熟。为了明确促进果实成熟的机理,对果实进行了低温结合１－ＭＣＰ（１－甲基环丙烯,乙烯作用抑制剂）和丙烯（乙烯类似物）处理。研究发现：果实经低温处理后,乙烯合成前体－－ＡＣＣ含量大幅度升高,而未经低温处理的果实,无论贮藏在空气中或用丙烯１０００μｌ／Ｌ处理,果实中ＡＣＣ、Ｍ－ＡＣＣ含量均保持较低水平。但冷藏前用１－ＭＣＰ处理     

马铃薯卷叶病毒基因间隔区转化的马铃薯抗病性研究

将本室合成、克隆的马铃薯卷叶病毒（ＰｏｔａｔｏＬｅａｆｒｏｌＶｉｒｕｓ,ＰＬＲＶ）中国分离株的基因间隔区（ｉｎｔｅｒｇｅｎｉｃｓｅｑｕｅｎｃｅ,ＩＳ）双链ｃＤＮＡ以正、反向两种方式分别构建于转化载体ｐＲＯＫ２中,通过致瘤农杆菌介导,以马铃薯叶圆片为转化材料,转化马铃薯栽培品种Ｄｅｓｉｒｅ,获得了转基因植株。卡那霉素抗性分析和ＰＣＲ检测目的基因,证明ＰＬＲＶＩＳ双链ｃＤＮＡ已经整合到转基因马铃薯的染色体基因组中。将转基因植株移栽网棚用蚜虫接种ＰＬＲＶ,观察症状并用酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）检测转基因植株中ＰＬＲＶ含量。结果表明,表达ＰＬＲＶＩＳ正意和反意ＲＮＡ的转基因植株,接种病毒后表现无症状或症状轻微,ＰＬＲＶ平均滴度均较未转基因对照植株低。表达正意ＲＮＡ的转基因植株ＰＬＲＶ滴度降低４３％～７２％,表达反意ＲＮＡ的转基因植株ＰＬＲＶ滴度降低７２％～８６％,由此可见,表达ＰＬＲＶＩＳ反意ＲＮＡ的转基因马铃薯对ＰＬＲＶ抗性较强。     

表皮生长因子对游离细胞核特异基因体外转录的影响

ＥＧＦ作用于ＮＣ３Ｈ１０和ＴＣ３Ｈ１０细胞核,对ＲＮＡ聚合酶Ⅱ有促进作用,但对ＲＮＡ聚合酶Ⅰ和酶Ⅲ没有影响,此外还发现转化细胞核内的ＲＮＡ聚合酶Ⅰ和酶Ⅱ的活性比正常细胞高１倍多。但两种细胞的ＲＮＡ聚合酶Ⅱ差别不大。同时,以非放射性标记的ｃ－ｆｏｓ、ＣＬＮ１、ＣＬＮ３探针进行点杂交,结果发现,ＥＧＦ直接作用于细胞核可使ｃ－ｆｏｓ、ＣＬＮ１基因的转录水平提高;但是,对ＣＬＮ３无影响。