VEGF-D在甲状腺癌组织中的表达和意义

目的:探讨甲状腺癌中血管内皮生长因子-D(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF-D)在甲状腺癌中的表达及意义.方法:免疫组织化学染色方法分别对16例癌周正常组织和56例甲状腺癌组织切片染色,观察癌周正常组织和甲状腺癌组织VEGF-D的表达情况.结果:(1)在甲状腺癌中VEGF-D阳性表达主要见于细胞的胞膜上和胞质中.VEGF-D阳性表达在癌周正常组织和甲状腺癌分别为18.7%和71.4%,两者在统计学上有显著差异.(2)在甲状腺癌中VEGF-D在淋巴结非转移组表达阳性率为60.0%,而转移组表达为83.8%,明显高于非转移组,两者问在统计学上有显著差异.(3)在甲状腺乳头状癌中VEGF-D阳性表达在非转移组50%,淋巴结转移组85.1%,明显高于非转移组,说明VEGF-D在淋巴结转移组比非淋巴结转移组表达显著,VEGF-D的阳性表达与甲状腺癌的淋巴结转移显著相关.结论:(1)在癌周甲状腺组织VEGF-D阳性反应较弱,在甲状腺癌组织VEGF-D阳性反应较强,两者比较有显著性差异.(2)在甲状腺癌中,尤其是甲状腺乳头状癌中,其癌组织中VEGF-D的表达强度增加,与无淋巴结转移的甲状腺癌组织相比,有淋巴结转移的甲状腺癌组织中VEGF-D的表达较强,可作为肿瘤转移的指标之一.     

CD133在胰腺癌中的表达及临床意义

目的:探讨CD133在胰腺癌中的表达及其与临床病理特征和预后的关系.方法:采用免疫组织化学方法,检测71例胰腺癌和10例正常胰腺组织中CD133的表达.分析CD133在胰腺癌中的表达与临床病理特征和预后之间的相关性.结果:CD133在胰腺癌中的表达的阳性率64.79%明显高于正常胰腺组织中的10%.胰腺癌中CD133的表达率随着临床TNM分期的增加而明显增高(P＜0.05).胰腺癌中CD133的表达率在有淋巴结转移中为71.4%(20/28)明显高于无淋巴结转移中的23.3%(10/43)(P＜0.05).CD133的表达与年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤大小、神经浸润、切缘、病理学分级无显著相关性(P＞0.05).CD133高表达者的中位生存期明显短于低表达者(9.1个月vs 23.9个月,P＜0.05).结论:胰腺癌中CD133的高表达与TNM分期高及淋巴结转移有关.CD133高表达与胰腺癌预后差有关.CD133在胰腺癌的发展、转移及预后中可能发挥重要作用,可作为临床评价胰腺癌生物学行为及评估预后的指标之一.     

宫颈癌组织中的PTEN, VEGF和CD105的表达及临床意义

目的:探讨宫颈癌组织中的人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)、血管内皮生长因子(VEGF)和内皮因子(CD105)的表达及临床意义。方法:收集2010年1月至2016年2月我院收治的宫颈癌患者组织标本320例和同期正常宫颈组织标本100例,采用SP免疫组化法检测宫颈癌和正常宫颈组织中的PTEN、VEGF和CD105,分析各指标在宫颈癌、正常宫颈组织及不同类型宫颈癌组织中的表达,并采用Sperman分析三者相关关系。结果:宫颈癌组织VEGF阳性率、CD105-MVD高于正常宫颈组织,而PTEN阳性率低于正常宫颈组织,差异均有统计学意义(P0.05);宫颈癌组织FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期的VEGF阳性率、CD105-MVD低于Ⅲ~Ⅳ期,而PTEN阳性率高于Ⅲ~Ⅳ期;宫颈癌组织伴有淋巴结转移的VEGF阳性率、CD105-MVD高于无转移,而PTEN阳性率低于无转移,差异均有统计学意义(P0.05);Sperman相关性显示VEGF与PTEN,CD105-MVD与PTEN呈现明显的负相关关系(rs=-0.564,-0.893,P0.05),VEGF与CD105-MVD呈现正相关关系(rs=0.825,P0.05)。结论:PTEN在宫颈癌组织表达降低,CD105和VEGF升高,三个指标在宫颈癌的发生、发展、转移及预后中具有重要作用。     

测定胰腺癌组织微血管密度及淋巴管密度的临床意义

目的:研究胰腺癌组织中微血管密度(Microvessel density,MVD)和淋巴管密度(Lymphatic vessel density,LVD)的变化、与胰腺癌临床病理的联系。方法:采用免疫组织化学SABC法应用CD34及D2-40分别检测41例胰腺导管腺癌患者配对癌组织内、癌旁及正常胰腺组织中MVD及LVD的表达情况,分析其与肿瘤分化程度、分期和淋巴转移间的相关性;以及癌组织MVD与癌旁组织LVD表达之间的关系。结果:在41例胰腺癌组织配对癌组织及正常胰腺组织平均MVD值分别为46.585±16.935,11.100±4.036,两组之间差别有统计学意义(P=0.000<0.01)。配对癌组织内、癌旁及正常胰腺组织中平均LVD值分别为11.244±4.800,15.829±7.470和13.512±5.139;其中癌旁组织与正常胰腺组织LVD值差别无统计学意义(P=0.060>0.05),癌旁组织与胰腺癌组织的LVD值有显著性差异(P=0.000<0.01)。癌组织内MVD值与癌旁组织LVD值之间有相关性(P=0.025<0.05)。结论:胰腺导管腺癌组织中MVD及LVD与肿瘤分化程度、病理分期及淋巴转移存在关联。胰腺癌组织内MVD值与癌旁组织LVD之间存在相关性。     

CD31和CD105在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其临床病理意义

目的探讨CD31和CD105在卵巢上皮性肿瘤及正常卵巢组织中的表达情况及其与卵巢肿瘤生物学行为之间的关系,并比较同为肿瘤血管内皮标记物的CD31和CDl05在标记微血管方面的差异。方法收集天津市肿瘤医院临床、病理和预后资料完整的恶性卵巢上皮性肿瘤组织标本76例,病例标本采用免疫组化EnVision法检测CD31和CD105所标记的MVD数值,MVD计数参照Weidner方法进行量化分析,实验同时取20例交界性卵巢上皮性肿瘤、10例良性卵巢上皮性肿瘤和10例宫颈癌手术中切除的正常卵巢组织作为对照。结果①CD31蛋白在卵巢上皮性肿瘤的微血管和大血管上均有较强表达,在正常卵巢组织血管中亦有表达,恶性卵巢肿瘤中的MVD-CD31值（5．484-_0．75）显著高于交界性卵巢肿瘤（2．24±0．61）、良性卵巢肿瘤（2．24土0．41）及正常卵巢组织（1．20±0．37）（P〈0．01）;在卵巢癌中,MVD-CD31值仅与有无淋巴结转移及组织学分级之间的差异有统计学意义（P〈O．05）,而与年龄、病理类型、肿瘤大小、腹水、有无远处转移无关（P〉0．05）。②CDl05蛋白在卵巢肿瘤微血管中有表达,在正常卵巢组织中呈微弱表达或无表达,恶性卵巢肿瘤中的MVD-CDl05值（4．07士2．11）显著高于交界性卵巢肿瘤（2．08土0．30）、良性卵巢肿瘤（1．92±1．15）及正常卵巢组织（O．68±0．39）（P〈0．05或P〈0．01）;在卵巢癌中MV口CDl05值与组织学分级、有无腹水、有无远处转移、有无淋巴结转移有关（P〈0．05）,而与年龄、病理类型、肿瘤大小等因素无关（P〉0．05）。③恶性肿瘤组织中的MVD-CD31值显著高于MVD-CDl05值（P〈0．05）。结论在标染卵巢癌方面,CDl05比CD31有明显优越性,CDl05的表达与卵巢癌的生物学行为密切相关,MVD-CDl05值的检测可更准确的确定肿瘤的临床分期、指导治疗及判断预后。     

PTEN在4种胰腺癌细胞系中的表达及意义

目的 通过检测PTENmRNA和蛋白在4种胰腺癌细胞系中的表达,筛选出PTEN不表达或低表达的胰腺癌细胞系,为进一步研究提供依据。方法用DMEM培养液对胰腺癌ASPC-1,MiapacaⅡ,JF305,MiapacaⅠ细胞进行单层传代培养,取指数生长期细胞,采用RT-PCR法和细胞免疫组化法检测PTENmRNA和蛋白在上述4种胰腺癌细胞系中的表达。结果RT-PCR结果显示,位于209bp,381bp处的条带分别为PTEN,13-actinmRNA的扩增片段,ASPC-1,MiapacaⅡ,JF305,MiapacaⅠ细胞PTEN mRNA表达分别为18．76％,32．63％,77．45％,123．07％,ASPC-1细胞系PTENmRNA表达最低。免疫组织化学法检测PTEN蛋白表达水平显示,在ASPC-1细胞中PTEN蛋白有少量表达,而在JF305和MiapacaⅠ细胞系中PTEN蛋白表达较高,胞浆中可见大量棕黄色颗粒。结论ASPC-1细胞系中PTENmRNA和蛋白均呈低表达,因此,该细胞系可作为良好的研究工具,为进一步将PTEN转染该细胞系,以研究PTEN对胰腺癌的抑癌作用提供依据。     

CD44和maspin在肺鳞状细胞癌中的表达及其与血管生成的关系

目的检测肺鳞状细胞癌中CD44蛋白和maspin蛋白的表达及相互之间的关系,并研究它们与肺鳞状细胞癌患者临床病理因素之间的关系。方法采用免疫组织化学Elivision法检测116例肺鳞状细胞癌和30例正常肺组织中CD44、maspin和CD34蛋白表达情况。结果在肺鳞状细胞癌和正常肺组织中CD44和maspin蛋白的阳性表达率分别为60.3%、39.7%和10.0%、100%,两组之间相比,差异有统计学意义;CD44和maspin蛋白的阳性表达率和微血管密度(microvessel density MVD)与肺鳞状细胞癌患者肿瘤组织的分化级别、淋巴结转移与否以及临床分期等相关(P0.05);且CD44蛋白阳性表达率与MVD计数呈正相关关系,maspin蛋白阳性表达与CD44蛋白阳性表达和MVD计数均呈负相关关系(P0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,CD44蛋白阳性表达组患者的生存时间明显高低于其阴性表达组患者(P0.001);maspin蛋白阳性表达组患者的生存时间明显高于其阴性表达组患者(P0.001);MVD≥21组患者生存时间明显低于MVD21组的患者(P0.001)。多因素分析表明CD44和maspin蛋白的表达是肺鳞状细胞癌患者的独立预后因素。结论 CD44和maspin的异常表达参与了肺鳞状细胞癌的发生、发展、浸润和转移,联合检测CD44和maspin蛋白的表达对肺鳞状细胞癌的进展和预后判断有重要意义。     

VEGF-C和VEGF-D在肝内胆管癌组织中的表达与淋巴结转移的关系及临床意义

目的:探讨胆管癌患者血管内皮生长因子C和D(vascular endothelial growth factor-C and-D,VEGF-C and VEGF-D)在胆管癌组织中的表达及其与肿瘤淋巴结转移的关系。方法:应用免疫组化SABC法及Real-time PCR法检测57例胆管癌组织和正常胆管组织中VEGF-C、VEGF-D蛋白及其mRNA的表达。结果:胆管癌组织VEGF-C和VEGF-D表达明显高于正常胆管组织(P<0.01),其中淋巴结转移组VEGF-C、VEGF-D的表达与淋巴结未转移组间统计学差异显著(P<0.05)。VEGF-C和VEGF-D在胆管癌组织中的表达与淋巴结转移有关(P<0.01)。结论:胆管癌细胞非摄入性高表达的VEGF-C和VEGF-D与淋巴结转移密切相关,可作为评估胆管癌患者预后的重要参考指标。     

VEGF-C和VEGF-D在胃癌组织中的表达与微血管生成的关系及临床意义

目的:观察胃癌患者血管内皮生长因子C和D(vascular endothelial growth factor-C and-D,VEGF-C,VEGF-D)在胃癌组织中的表达以及其与肿瘤微血管生成的关系.方法:采用免疫组化S-P法检测30例胃癌组织和30例正常胃组织中VEGF-C和VEGF-D蛋白的表达,检测微血管密度(microvessel density,MVD).结果:胃癌组织VEGF-C和VEGF-D表达明显高于正常胃组织(p<0.01),其中淋巴结转移组VEGF-C、VEGF-D的表达与淋巴结未转移组间差异显著(p<0.05).胃癌组织MVD值明显高于正常胃组织(p<0.01),淋巴结转移组MVD值明显高于未转移组(p<0.01).MVD与VEGF-C的蛋白在胃癌组织中的表达高度相关(r=0.735,p<0.05),与VEGF-D的蛋白在胃癌组织中的表达成正相关(r=0.623,p<0.05).结论:VEGF-C和VEGF-D的高表达与肿瘤微血管生成及淋巴道转移密切相关,可作为评估胃癌患者预后的重要参考指标.     

VEGF-C和VEGF-D在肝内胆管癌组织中的表达与淋巴结转移的关系及临床意义

目的：探讨胆管癌患者血管内皮生长因子C和D（vascular endothelial growth factor-Cand．D,VEGF．CandVEGF．D）在胆管癌组织中的表达及其与肿瘤淋巴结转移的关系。方法：应用免疫组化SABC法及Real-timePCR法检测57例胆管癌组织和正常胆管组织中VEGF-C、vEGF-D蛋白及其mRNA的表达。结果：胆管癌组织VEGF—C和VEGF．D表达明显高于正常胆管组织（P〈0．叭）,其中淋巴结转移组VEGF-C、VEGF—D的表达与淋巴结未转移组间统计学差异显著（P〈0．05）。VEGF-C和VEGF-D在胆管癌组织中的表达与淋巴结转移有关（P〈0．01）。结论：胆管癌细胞非摄入性高表达的VEGF．C和VEGF．D与淋巴结转移密切相关,可作为评估胆管癌患者预后的重要参考指标。     

VEGF-D表达与下咽癌组织淋巴管生成及预后的相关性

目的探讨血管内皮生长因子-D(Vascular endothelial growth factor D,VEGF-D)在下咽癌组织中的表达规律、与淋巴管密度(LVD)、淋巴结转移之间的关系及其在下咽癌预后中的意义。方法采用Western-bolt方法检测6例下咽癌和6例正常下咽组织中VEGF-D蛋白的表达情况,以45例经病理确诊的下咽癌组织为实验组,15例下咽良性病变组织为对照组,采用免疫组化SP法对上述组织中VEGF-D蛋白的表达进行分析,同时采用5′-核苷酸酶染色法(5′-Nase)计数淋巴管密度(LVD),并结合临床病理特征和生存资料进行相关分析。结果①Western-bolt结果显示下咽癌组织中VEGF-D的表达量较正常组织明显增加。②在下咽癌组织中VEGF-D的阳性率为44.4%,明显高于在良性病变组织的表达水平(P<0.05)。③VEGF-D表达与LVD、淋巴结转移、淋巴管浸润显著相关(P<0.05),与年龄、性别、肿瘤部位及组织学分级无关(P>0.05)。③Kaplan-Meier生存曲线分析VEGF-D的表达与生存率不相关(P>0.05)。结论 VEGF-D促进下咽癌淋巴管生成和淋巴管转移,但与下咽癌预后不相关。     

Prognostic significance of CD34 expression in early cervical squamous cell carcinoma

The aim of the study was to evaluate angiogenesis as an independent prognostic factor and to determine the correlation of the microvessel density (MD) with lymph node metastases and survival rate in 73 women operated because of invasive squamous cell carcinoma (SCC) of the uterine cervix at clinical stages lb and IIa (FIGO). The patients were divided into two groups: I--25 (34.4%) with survival rate <5 years and II--48 (65.6%) with survival rate >5 years. Angiogenesis was quantified in light microscope using an assay for CD34. The CD34 antibody intensely immunostained single endothelial cells as well as larger microvessels. In the study. differences were revealed by comparing the MD between both groups. The 5-year overall survival rate for patients with high MD was significantly worse than for those with low MD (p<0.003). A correlation was found between angiogenesis intensity and vascular involvement as well as the incidence of lymph node metastases. Thus, tissue expression of CD34 in SCC appears to be a significant prognostic indicator.     

分化抑制因子-1在大肠癌中的表达及临床意义

目的:研究分化抑制因子-1(Id-1)在人大肠癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:应用免疫组织化学方法(SP法)检测Id-1在56例大肠癌组织及56例远癌肠黏膜中的表达水平,并分析其与临床病理特征的关系。结果:在大肠癌组织中Id-1的过表达率为80.4%,在远癌肠粘膜中过表达率为12.5%,两组比较差异有统计学意义(P0.01)。Id-1过表达与大肠癌Dukes分期及淋巴结转移有关(P0.05),而与患者年龄、性别、肿瘤组织分化程度无关(P0.05)。结论:Id-1过表达可能参与大肠癌演进,Id-1可作为判断大肠癌恶性程度和预后的指标。     

Id-1在喉癌组织中的表达

目的:证实Id-1基因在喉癌组织和喉癌细胞系中的表达.方法:通过反转录PCR(RT-PCR)和蛋白质印迹杂交法(Westernblot法)对30例喉癌组织,10例癌旁正常组织和一个喉癌细胞株在基因和蛋白水平上对ID-1的表达进行检测.结果:喉癌组织和喉癌细胞株中Id-1基因高表达,而正常喉组织中没有Id-1的表达;Id-1蛋白的表达与喉癌组织的、临床分期、分化程度具有相关性(均P<0.05).结论:ID-1蛋白的表达与喉癌的发生、发展及临床分期有关.     

The expression and significance of NET-1 and Contactin in hepatocellular carcinoma

Hepatocellular carcinoma (HCC) is one of the most common cancers worldwide and a major cause of cancer-related mortality. In this study, the significance of NET and Contactin on the pathogenesis and prognosis of HCC was investigated, and further to explore their functions in vitro and in vivo by down regulation with siRNA. The expression of NET-1 and Contactin in HCC and in adjacent non-tumor tissues (ANT) were evaluated by immunohistochemistry, and the correlations of the expression of NET-1 and Contactin with the clinicopathological characteristics and survival of HCC patients were also analyzed. After inhibited by single-target siRNA or dual-target siRNA, the expressions of NET-1 and Contactin mRNA and protein in SMMC-7221 cells were determined by RT-PCR, Western blot and immunofluorescence stain. The cell proliferation and apoptosis were assessed by CCK-8 assays and flow cytometry (FCM). The ability of cell migration and invasion were evaluated by wound-healing migrating assay and transwell chamber assays, respectively. Subsequently, transmission system encapsulated cationic liposome was used to deliver dual-siRNA into HCC xenografts in mice. The expressions of NET-1, Cortactin, Ki67, Bax, Bcl2 and Survivin in xenograft tumor were detected by immunohistochemical staining, respectively. The positive rates of NET-1 and Cortactin in HCC tissues were significantly higher than those in ANT. In HCC, the expression of NET-1 was related to Edmondson''s grade (P<0.05), cirrhosis background (P<0.001) and TNM stage (P<0.05). The expression of Cortactin was related to tumor infiltration (P<0.05), vascular invasion (P <0.001) and TNM stage (P<0.001). The expressions of NET-1 and Cortactin were positively correlated (r=0.280, P=0.004). Significant differences in the 5-year survival rates were seen between the NET-1 negative group and the positive group (P<0.05), and between the Contactin negative group (50%) and Contactin positive group (28.0%, P<0.01). The 5-year overall survival rate (OS) in NET-1 and Contactin co-expression cases (27.78%) were remarkably lower than that in both NET-1 and Contactin negative cases (54.54%) and in NET-1 positive while Contactin negative cases (47.06%, P<0.05). Univariate and multivariate Cox regression analysis revealed that NET-1 and Contactin over-expression were independent indicators for OS in HCC patients (P<0.01). There were higher expressions of NET-1 and Contactin in SMMC-7721 cells than that in other HCC cells. Dual-siRNA was demonstrated to be more effective on inhibiting cancer cell proliferation, migration and inducing apoptosis than individual siRNAs used alone in vitro and in vivo (P<0.05). The results suggest that dual-siRNA may be a great potential in siRNA-based therapeutic applications.     

NUMB在口腔白斑和鳞癌中的表达变化及意义

目的:研究NUMB在口腔白斑和鳞癌中的表达及意义。方法:采用免疫组织化学法检测88例口腔正常黏膜、口腔白斑及口腔鳞癌石蜡包埋组织中NUMB蛋白的表达。结果:NUMB在口腔正常黏膜(95.7%)、口腔白斑(75%)及口腔鳞癌(4.7%)中均有阳性表达但是表达频率依次降低。NUMB在各个组中的阳性表达率具有统计学差异(P0.05)。结论NUMB阳性表达率随口腔组织恶性程度增高而减少的趋势提示该基因可能在口腔正常黏膜到口腔白斑再到口腔鳞癌的转化中起作用,NUMB有可能成为早期发现癌变的分子生物学标志之一。