激光和磁场对滇紫草愈伤组织色素含量的影响

用He-Ne激光和一定强度的磁场处理滇紫草愈伤组织,发现2~3h激光辐照可提高色素含量;而1.0T磁场能促进细胞生长和色素形成。硅胶薄层层析比较两种物理因子对紫草色素成分无显著影响。     

滇紫草愈伤组织中的紫草色素

滇紫草(Onosma paniculatum Bur.et Franch)的幼嫩根茎经二步法诱导产生的愈伤组织.含有较原植物较高的紫草色素。经薄层层析鉴定,此种紫草色素由6种单体组成,其 Rf 值与原植物中的紫草色素各类衍生物非常近似。进一步采用硅胶 H 柱层析进行分离,最后得到4种单体。经结构分析证明它们是:去氧紫色素(deoxyshikonin)、β,β-二甲基丙烯酰阿卡宁(β,β-dimethylacrylalkannin)、乙酰阿卡宁(acetylakannin)和β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁(β-acetoxyisovalerylalkannin)。     

寡糖素对滇紫草愈伤组织色素合成的影响

从黑节草、红花和人参中提取的寡糖素对滇紫草愈伤组织的色素合成均能起促进作用,当它们单独使用时,分别找到了它们作用于愈伤组织以生产色素的最适浓度.本研究对将来采用组织培养方法进一步工业化生产紫草素提供了依据。     

滇紫草愈伤组织培养与紫草素产生

浓度为10~(-5)Smol/1和10~(-6)mol/l的2,4-D和NAA分别与10~(-5)mol/l的KT组合,能明显抑制滇紫草(Onosma paniculatum Bur. et Fr.)愈伤组织中紫草素的产生,但几乎不受天然生长素IAA和KT组合的影响。葡萄糖较蔗糖能更有效地促进紫草素的产生,它们的最适浓度均为6％。LH和CH能抑制紫草素的产生,CH浓度大于0.02％时能抑制愈伤组织的生长,LH对生长无明显影响。椰乳浓度为10％时,能明显地促进紫草素的产生,紫草素的含量是对照的24倍。     

滇紫草愈伤组织培养的初步研究

滇紫草(Onosma paniculatum)属紫草科滇紫草属植物,其根部皮层富含的紫草素(α—萘醌系列衍生物),可用作治疗外伤与痔疮的药物或高级染料以及化妆品。滇紫草为云南特有,由于人工栽培困难,加之不断采挖,致使这一资源受到严重的破坏,产品供不应求。日本Tabata等对紫草(Lithospermum erythrorhizon)的组织培养进行了一系列的研究,但对滇紫草组织培养以生产紫草素的研究至今未见报道。基于这一现状,我们从1988年开始着手进行滇紫草组织培养的研究,以探讨应用组织培养技术生产紫草素的可能性。     

生产培养基中寡糖素对滇紫草愈伤组织培养的影响

黑节草寡糖素C-7和C-8,人参寡糖素G-7和G-8分别加入到培养基中,均能影响滇紫草愈伤组织中色素的合成。C-7、C-8、G-7和G-8加入到培养基中,促进紫草色素合成的最适浓度分别为1.5ppm、2.5ppm、2.5ppm和2.5ppm,色素浓度分别为21.39mg/gDW、22.68mg/gDW、29.46mg/gDW和36.73mg/gDW,均明显地高于对照(16.73mg/gDW)。并对寡糖素的作用机理进行了讨论。     

滇紫草Onosma paniculatum愈伤组织中主要成分的抑菌作用

从诱导形成的滇紫草愈伤组织中分离得到四种单体.其中两种单体:β、β-二甲基丙烯酰阿卡宁(β,β-dimethyacrylalkannin,)和乙酰阿卡宁(Acetylalkannin,)的愈伤组织混合色素,对金黄色葡萄球菌和假单孢杆菌都有比较明显的抑制作用.尤其是乙酰阿卡宁抑制效果格外显著.然而对大肠杆菌却表现不出抑制效应.     

软紫草愈伤组织的初步培养

外植体来源不同的软紫草愈伤组织产生紫草色素的能力各异。６０Ｃｏ－ｒ射线辐照处理后的Ｈ２无性系愈伤组织生长量和色素产生均属上乘。改良ＭＳ基本培养基添加１毫克／升ＫＴ,０．５毫克／升ＩＡＡ,５％（Ｗ／Ｖ）蔗糖对愈伤组织培养较为适宜。马铃薯提取液对愈伤组织生长有明显的促进作用。     

真菌诱导物在滇紫草细胞培养中对紫草色素形成的影响

在滇紫草细胞悬浮培养中,真菌诱导物可抑制细胞生长,促进草色素的合成,将培养６ｄ的曲霉菌丝体的粗提物以６００μｇ碳水化合物／５０ｍｌ培养液的浓度加入到处于指数生长初期的滇紫草细胞悬浮培养物中,诱导物促进紫草色素合成的作用最大,紫草色素含量为对照的两倍,经高压锅处理２０ｍｉｎ到２ｈ不影响诱导物的活性,真菌诱导物还影响了紫草色素各衍生物的相对含量。     

激光对香石竹愈伤组织蛋白质和同工酶谱的影响

用氦氖激光处理香石竹愈伤组织,可使材料中的34kD和28kD蛋白含量高于对照,并产生分子量约为22kD的新的蛋白带。而用氩离子激光处理后,则出现一条分子量约为45kD的新的蛋白带。此外,激光处理亦明显影响愈伤组织的过氧化物酶同工酶谱及其活性,其中氦氖激光处理后产生了Rf为0.17和0.26的新酶带,而用氩离子激光处理则只产生Rf为0.17的新酶带。激光对香石竹愈伤组织的酯酶同工酶无影响。     

米曲霉中的紫草色素诱导物对滇紫草细胞代谢的影响

在滇紫草细胞培养第８天时加入来源于米曲霉的紫草色素诱导物,１２ｈ后滇紫草细胞中紫草色素含量增加,其衍生物之一的乙酰紫草素的相对含量增加,胞内可溶蛋白合成量上升,细胞对碳源消耗增多,而细胞生长受到抑制。处理１２ｈ后,培养液电导率下降,ｐＨ上升,Ｋ＾＋外泄和Ｎａ＾＋大量内流,表明离子跨膜运输发生改变。     

滇紫草（Onosma paniculatum） 愈伤组织中主要成分的抑菌作用

从诱导形成的滇紫草愈伤组织中分离得到四种单体[3]．其中两种单体:β、β-二甲基丙烯酰阿卡宁（β,β-dimethyacrylalkannin）和乙酰阿卡宁(Acetylalkannin)的愈伤组织混合色素,对金黄色葡萄球菌和假单孢杆菌都有比较明显的抑制作用。尤其是乙酰阿卡宁抑制效果格外显著。然而对大肠杆菌却表现不出抑制效应。     

真菌诱导物在滇紫草细胞培养中对紫草色素形成的影响

在滇紫草细胞悬浮培养中,真菌诱导物可抑制细胞生长,促进紫草色素的合成。将培养６ｄ的曲霉菌丝体的粗提物以６００μｇ碳水化合物／５０ｍｌ培养液的浓度加入到处于指数生长初期的滇紫草细胞悬浮培养物中,诱导物促进紫草色素合成的作用最大,紫草色素含量为对照的两倍。经高压锅处理２０ｍｉｎ到２ｈ不影响诱导物的活性。真菌诱导物还影响了紫草色素各衍生物的相对含量。     

激光对珠子参愈伤组织诱导影响的研究

通过不同激光功率密度和处理时间处理珠子参植株,然后分别用珠子参的茎和叶做外殖体进行愈伤组织诱导。结果表明,不经激光处理,珠子参茎和叶的愈伤组织诱导率分别为45.3%和0.7%。经激光处理后,珠子参茎和叶愈伤组织诱导率分别最高达到了92.0%和6.7%。经t检验,激光处理后,外殖体的愈伤组织诱导率与对照相比达到了显著性差异,表明激光处理有助于珠子参愈伤组织的诱导。     

真菌诱导物对滇紫草细胞色素形成的影响（简报）

在滇紫草细胞培养中加入真菌诱导物后紫草色素的合成增强,培养液的电导率和pH值在24h内分别下降和上升,且三者均以指数生长初期加入时作用最为明显。     

激光辐照葡萄愈伤组织的过氧化物酶同工酶分析

利用法国产ＤＡＴＡＣＨＲＯＭ—５０００型染料脉冲激光器处理葡萄“胜利”品种的愈伤组织,用聚丙烯酰胺凝胶电泳法（ＰＡＧＥ）分离过氧化物酶同工酶,研究了激光辐照对葡萄生长发育和过氧化物酶同工酶表达的影响,发现：适当剂量的激光辐照能使葡萄愈伤组织明显提前分化;激光能够影响葡萄过氧化物酶同工酶基因的调控,适当剂量的激光能够促进该基因的表达;激光处理的愈伤组织在不同的生长发育时期与对照相比,过氧化物酶同工酶在数目和活性上有明显增加。