纯系动物在医学研究中的应用

从我国医学期刊发表的论文来看,大部分实验研究是采用杂系实验动物完成的。就所了解的国内各医学研究单位而言,多数都没有建立纯系动物的饲养、繁殖机构。因此,无论是纯系动物的使用,还是纯系动物的培育,在我国医学研究中都远没有普及。鉴于研究工作的迫切需要,我们曾引进津白Ⅰ号、津白Ⅱ号及615,三种纯系小鼠用于实验。实践证明,用纯系小     

近交系小鼠感染日本血吸虫的研究

本文报告了近交系C57BL、ICR、615和津白Ⅰ小鼠以及昆明杂交系小鼠感染大陆品系日本血吸虫后体内虫体发育的生物学,包括各品系小鼠体内的虫负荷、两性虫体的体长、性腺及出现虫卵前期等病原生物学的基础资料。     

突变体——侏儒小鼠(dw~t)与津白3(TA3)不同日龄骨骼、体重及体长的比较

侏儒小鼠与津白3体重的比值为1:2.5。它们的骨骼、休重、休长及尾长的测量均具非常显著或显著意义。经均衡性检验,不同日龄、不同性别间TA3/dw~t小鼠的不同骨骼、体重、体长及尾长的比值变化是均匀一致的。证明侏儒小鼠骨骼、体重、体长及尾长均系均匀缩小,是身体各部分匀称的侏儒小鼠。     

β片层阻断肽H102对AD小鼠识别记忆能力和脑内AMPK-mTOR自噬相关通路的影响

目的:研究β片层阻断肽H102 对APP/PS1双转基因AD小鼠脑内AMPK-mTOR自噬通路相关蛋白表达的影响。方法:将30只六月龄的APP/PS1双转基因雄性AD小鼠随机分为AD组和H102干预组,将同月龄同背景的C57BL/6J雄性小鼠设为对照组(n=15)。在SPF级饲养给药,H102干预组的小鼠每天同一时间段经鼻腔给H102多肽溶液5 μl(5.8 mg/kg),对照组和AD组小鼠每日给予等量的空白辅料溶液。持续给药30 d后通过新物体识别实验来测试各组小鼠的记忆识别能力。用免疫组化和Western blot技术来检测磷酸化的腺苷酸活化蛋白激酶(P-AMPK)、磷酸化的哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(P-mTOR)、微管相关蛋白轻链3Ⅱ与微管相关蛋白轻链3Ⅰ的比值(LC3Ⅱ/Ⅰ)在小鼠脑组织中的表达。结果:与对照组相比,AD 组小鼠的新物体识别指数(RI)显著降低(P＜0.05),小鼠脑内P-AMPK、LC3Ⅱ/Ⅰ比值显著降低(P＜0.05),P-mTOR蛋白表达显著升高(P＜0.05);与AD组小鼠相比,H102 干预组小鼠的RI显著提高(P＜0.05),小鼠脑组织中P-AMPK、LC3Ⅱ/Ⅰ比值显著升高(P＜0.05), P-mTOR蛋白表达显著降低(P＜0.05)。结论:H102 可通过激活AMPK-mTOR自噬相关通路,改善AD 小鼠的识别记忆能力。     

肿瘤宿主的免疫状态——Ⅱ.小鼠肉瘤180免疫抑制因子的研究

用溶血空斑试验证明,在615小鼠上移植的肉瘤180的无细胞腹水液中存在着高活性的免疫抑制因子。腹水液的免疫抑制作用与剂量相关,且仅在绵羊红血球抗原致敏前注射才能显示。此免疫抑制因子具有部分热不稳定的性质。肉瘤180带瘤小鼠的血清也有强免疫抑制活性。在C57BL小鼠上移植的肝癌和艾氏癌,在津白Ⅰ号小鼠上移植的另一株肉瘤180的腹水液和带瘤动物血清也有类似的免疫抑制作用。肿瘤无细胞腹水液引起的小鼠脾脏病理组织学变化与带瘤动物脾脏所见相类似。     

水稻细胞质雄性不育系和保持系的线粒体COⅠ、COⅡ基因组织结构差异的分析

我们研究了水稻珍汕97不育系和保持系的线粒体DNA的PstⅠ、HindⅢ、BamHⅠ酶切电泳带型,发现了不育系和保持系的线粒体DNA分子结构的显著不同,而不育系和保持系的叶绿体DNA的HindⅢ酶切片段没有差异。以线粒体的细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ、Ⅱ(COⅠ、COⅡ)基因为探针,与珍汕97不育系、保持系的叶绿体、线粒体DNA酶切片段进行分子杂交,证明叶绿体DNA没有COⅠ、COⅡ基因的同源顺序,发现不育系和保持系COⅠ、COⅡ基因有组织结构上的差异,但不能确证这些差异是否与细胞质雄性不育有关。     

实验室小鼠的人工授精

实验小鼠人工授精技术,国外早有报道。但在国内,迄今未见报道。这项技术的建立,对于某些突变品系小鼠的繁殖与品种改良有着特別重要的意义,并为受精、着床和胚胎发育等基础理论研究提供了重要的技术手段。参照国外的资料,经过一年多的试验,现已获得初步结果。 (一)材料 1.实验分4组,雌鼠均为昆明种小白鼠,简称“昆明白”,体重22—28克。雄鼠:第一组津白1×129F_1;第二、第三组 昆明白;第四组C57BL和昆明白两种小鼠,体重28—35克。 2.孕马血清(Pregnant Mare’s Serum简称     

新型旱稻昆植S－1两用核不育系花粉败育的细胞学观察

本文首次报道了一种新型旱稻昆植Ｓ－１两用核不育系的花粉败育过程。当不育系处于不育临界光温条件以下时,花粉母细胞减数分裂的末期Ⅰ和末期Ⅱ,不能形成细胞板,从而不能形成正常的二、四分体,而形成４、６、８、１６或更多的多核细胞。这些多核细胞形成花粉壁后发生核解体,内含物渗出,花粉粘连,败育。基于以上的特点,称之为“核增生型”花粉败育途径。     

假臭草从枝病植原体鉴定与多样性分析

研究假臭草丛枝病植原体的多样性,并确定其分类地位,对于利用假臭草丛枝病植原体对假臭草进行生物防治具有重要的意义.本研究采集了海南省8个地区的假臭草丛枝病样品,采用PCR以及巢式PCR方法扩增了假臭草丛枝病植原体的16S rDNA序列片段,进一步选用AfaⅠ、Alu Ⅰ、EcoR Ⅰ、HaeⅢ、HpaⅡ、HhaⅠ、HinfⅠ、Kpn Ⅰ、Sau3A Ⅰ、Taq Ⅰ和Xsp Ⅰ等11种限制性内切酶对巢式PCR产物进行酶切分析(RFLP),并对16S rDNA序列进行测序,确定假臭草丛枝病植原体多样性和生物学地位.结果发现:假臭草丛枝病的病原确为植原体;8个地区的假臭草丛枝病植原体的酶切图谱基本一致,与已知植原体的相似度为0.26～0.97;8个地区假臭草丛枝病植原体的序列同源性均在99.4％以上,应为同种植原体;假臭草丛枝病植原体与16S rRNAⅡ-A组的花生丛枝病(PnWB)的同源性最高达到99.1％,说明假臭草丛枝病植原体在分类学地位上应归属于植原体16S rRNAⅡ-A组.     

615近交系小鼠血红蛋白遗传学分析

本文对615近交系及C_37BL、昆明种小鼠血红蛋白的表型进行了分析,观察到615小鼠及C_37BL小鼠的血红蛋白的表型均为Ⅰ型,而昆明种表现具有多态性。 615小鼠与C_37BL杂交时F_1不发生血红蛋白表型的分离,而与昆明种的Ⅱ型小鼠杂交时F_1表型发生分离。 615系小鼠网织红细胞体外培育合成血红蛋白肽链的分子同末梢红细胞血红蛋白肽链是一致的。     

用尾部皮肤移植法对近交系小鼠的遗传鉴定

本文通过尾部皮肤移植技术对四个品系小鼠进行了同系异体之间、不同近交系及不同近交系的杂交F1代之间、皮肤植片100天以上的实验观察,该法不仅能够确定组织相容性基因高度纯和,还能检出用毛色基因测试法不能反应的亚系趋异,是鉴定小鼠或大鼠遗传纯度的适用方法。     

津白_3侏儒小鼠垂体前叶生长激素细胞的免疫细胞化学研究

津白_３侏儒小鼠（ｄＷ~ｔ）是１９８２年从津白_３纯系小鼠（ＴＡ_３）中发现,进而培育成侏的变种。本实验应用免疫细胞化学技术,对ｄｗ￣ｔ小鼠垂体前叶生长激素（ＧＨ）细胞进行观察,并根据体视学原理进行定量分析,以探讨ｄｗ~ｔ小鼠是否存在垂体发育缺陷。实验结果显示,ｄｗ~ｔ小鼠ＧＨ细胞的体积密度（Ｖｖ）和数密度（Ｎｖ）值均低于正常对照组,Ｐ＜０．０１～０．００１。表明ｄｗ~ｔ小鼠由于垂体前叶ＧＨ细胞数量减少,导致ＧＨ分泌不足,从而形成侏儒。     

实验室常用鼠类对约氏疟原虫子孢子敏感性的初步观察

实验室不同鼠种对约氏疟原虫红外期敏感性差异很大。本实验所试10种鼠类中,大鼠敏感性高于小鼠,大鼠中Wistar株高于S-D株;小鼠中以C_(37)BL/6J和BALB/c较敏感,而昆明株、DBA/2、津白Ⅱ号,615 C_(?)H和ICR的敏感性均较低。一般来说敏感性高的鼠株、子孢子发育率高,红外期原虫体积大。     

肿瘤宿主的免疫状态——Ⅰ.几种带瘤小鼠脾脏溶血空斑形成细胞的动态观察

本文应用改良的Jerne氏方法测定小鼠脾脏溶血空斑形成细胞。用此方法测定一株实体瘤(在津白小鼠上移植之肉瘤180)和四株腹水瘤(津白小鼠上移植之肉瘤180,615小鼠上移植之肉瘤180,以及C57BL小鼠上移植之肝癌和艾氏癌)带瘤动物免疫状态的动态变化。结果表明,随着肿瘤进行性生长,小鼠脾脏溶血空斑形成细胞逐渐减少,到晚期几乎不能测得。带瘤小鼠的脾脏普遍增大,病理组织学观察提示带瘤小鼠溶血空斑反应之低下与其脾脏的病理学改变相关。     

正常及白血病小鼠白细胞染色质和DNA的酶切分析

 本文应用的核酸酶为DNaseⅡ、微球菌核酸酶与限制性内切核酸酶BstNI、EcoRⅡ、HpaⅡ和MspⅠ,将它们作用于正常小鼠615和可移植性白血病小鼠L7712脾脏白细胞染包质及其DNA,根据酶切电泳谱及水解动力学分析表明:1.白血病小鼠染色质相对正常小鼠染色质易被DNaseⅡ微球菌核酸酶水解;2.白血病小鼠染色质比正常小鼠者易被MspⅠ水解,但其DNA的MspⅠ酶切电泳谱无明显差别;3.白血病小鼠染色质及其DNA较正常小鼠染色质及其DNA易被EcoRⅡ水解。这些观察说明,白血病小鼠脾脏白细胞染色质有较活跃的构象状态;其染色质DNA的CCATGC区段内有较低的甲基化程度。     

普通小麦栽培品种丰抗13的4B—1D染色体易位的鉴定

通过细胞学观察,在普通小麦栽培品种“丰抗13”和“京红1号”的杂交后代中,发现有多价体出现,这就表明有染色体易位发生。为进一步弄清究竟是哪条染色体发生了易位,我们采用单体测交方法,观察鉴定所有各单体系F_1的花粉母细胞第一次减数分裂中期Ⅰ(以下简称PMCs中Ⅰ)染色体构型。从鉴定结果发现,凡2n=42的F_1 PMCs中Ⅰ出现19~Ⅱ 1~Ⅳ,而2n=41的F_1PMCs中Ⅰ的染色体构型不同,单体与易位有关的两个单体系4B和1D F_1 PMCs中的Ⅰ构型中有部分呈现为19个二价体加1个三价体,即19~Ⅱ 1~Ⅲ,没有单价体,而其余各单体系F_1 PMCs中Ⅰ构型则表现为18个二价体,1个四价体和1个单价体,即18~Ⅱ 1~Ⅰ 1~Ⅳ。因此,可以肯定“丰抗13”存在1个染色体易位,其有关染色体就是4B和1D。     

思连康对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数的影响

目的研究双歧杆菌四联活菌片(商品名:思连康)对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞吞噬率及吞噬指数的影响。方法将SPF小鼠30只随机分成三组,每组10只,Ⅰ组灌胃生理盐水,Ⅱ组灌胃婴儿双歧杆菌菌悬液,Ⅲ组灌胃双歧杆菌四联活菌片菌悬液,每天给药0.5 mL,菌液浓度为1.0×10~8 CFU/mL,连续给药10 d后小鼠腹腔注入2%鸡红细胞悬液1 mL(红细胞数量为2×10~8个/mL),30 min后处死,取小鼠腹腔洗液,观察并记录吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数及被吞噬的鸡红细胞数,计算吞噬率及吞噬指数。结果与Ⅰ组相比,Ⅱ组和Ⅲ组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数均显著升高(Ps0.05),其中Ⅲ组高于Ⅱ组(P0.05)。结论双歧杆菌四联活菌片及其婴儿双歧杆菌通过提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数提高机体的免疫力。     

小鼠红细胞分化-去核因子的发育期相关性表达与鉴定

以质粒pBS-SK-MEDDF上的小鼠 MEDDF cDNA片段为模板,通过PCR方法删除该片段的非编码序列,将编码序列克隆到pGEM-T-Easy质粒中,经DNA序列测定后,证明其克隆序列正确,再将MEDDF编码序列定向克隆到表达载体pET-30α(+)的BamHⅠ和HindⅢ位点之间,构建了原核表达载体,在获高效表达菌株中,特异表达蛋白质的量占细菌总蛋白的40%.以纯化的该蛋白质为抗原,免疫新西兰纯种大耳兔,获得高效价的抗血清.经免疫细胞化学验证,MEDDF在红细胞的表达具有发育阶段特异性,推测与小鼠红细胞终末分化的启动及细胞核浓缩相关.另外,MEDDF还在小鼠骨髓中的粒细胞系及巨核细胞系表达,说明该蛋白质与小鼠骨髓髓系细胞的分化有渊源关系.     

字母"e"永久装片的制作

显微镜下观察到的物像是其倒像,利用光学显微镜观察字母“e”装片就可得到证实。对字母“e”装片,按2000年国家教育部颁布的全日制中学生物仪器配备目录之配备标准是:Ⅰ类初中为60片,Ⅱ类初中为30片,Ⅲ类初中为15片。其实,字母“e”永久装片的制作方法简单易行,现介绍如下,以供有条件的学校参考自制。1物品准备激光打印的字母“e”(6号字)标签(材料)、载玻片、盖玻片,中性树胶(封固剂)、二甲苯、镊子、剪刀、白绸、恒温箱等。2制作步骤2.1载玻片、盖玻片的清洁将新购的载玻片与盖玻片入1∶2乙醚与95%酒精中浸泡1h以上,用白绸擦干备用。若为…     

Ⅰ-A~k基因克隆转导及对肿瘤细胞成瘤的影响

采用ＲＴＰＣＲ方法合成小鼠ＭＨＣⅡ类分子ⅠＡｋ基因α和β链ｃＤＮＡ,插入逆转录病毒载体ｐＬＳＸＮ,构建ⅠＡｋα和ⅠＡｋβ表达载体,采用脂质体介导的重组质粒转移方法将ⅠＡｋα和ⅠＡｋβ基因导入ＥＬ４小鼠淋巴瘤细胞和Ｐ８１５小鼠肥大细胞瘤细胞,经流式细胞仪检测在细胞表面有ⅠＡｋ表达．将以上两种细胞注射到同源小鼠Ｃ５７ＢＬ／６（Ｈ２ｄ）皮下,观察到肿瘤产生后又消退,证明在肿瘤细胞中单独导入同种异型ＭＨＣⅡ类分子基因也能激活肿瘤的细胞免疫,为进一步开展肿瘤的基因治疗奠定了基础．