植物遗传工程

960679 遗传工程大麦的最新进展[英]/Mannonen,L.…∥Critical Rev. Biotechnol. -1994,14(4).-287～310[译自DBA,1995,14(12),95-07151] 就以下方面综述了大麦遗传工程的最新进展:大麦作为遗传工程的目标;遗传工程(遗传工程的先决条件,用于大麦转化的基因,大麦组织培养物的转化,大麦体细胞克隆变异,大麦转化的基因转     

基因工程

900573 通过电激作用对类肠膜明串珠菌的质粒转化及其在分子克隆中的用途[英]/David. S. …∥ Appl. Environ. Microbiol.-1989,55(6)-1483～1489[译自DBA,1989,8(15),89-08707] 报道了利用电激对类肠膜明串珠菌(Leuconostoc paramesenteroides)的转化。对决定转化率的几个因子作了最优化处     

基因工程

961610 合成蒽醌类物质的岛青霉和常现青霉的转化[英]/Huang,K.…//Curr,Genet.-1995,28(6).-580～584[译自DBA,1996,15(1),96-00016] 分别用pSV50质粒和pBT6质粒(带有抗苯菌灵的β-微管蛋白基因)及pAN7-1质粒和pDH25质粒(带有由构巢曲霉(Aspergillus nidulans)序列控制的细菌潮霉素磷酸转移酶基因)转化岛青霉(Penicil-     

黄山药的黑曲霉转化产物化学成分研究

研究黑曲霉YM33182(Aspergillus niger)对黄山药转化后,其转化产物的化学成分.采用固体发酵法对黄山药进行生物转化;通过高效液相分析(HPLC)转化前后的化合物种类和含量变化;利用反复硅胶色谱进行化合物分离纯化;通过光谱数据分析鉴定化合物结构.分离得到4个转化产物,分别鉴定为β-胡萝卜苷(dau-costerol,1),薯蓣皂甙元-α-L鼠李糖(1→4)-β-D葡萄糖甙(prosapogenin B,2),薯蓣皂甙元[-α-L鼠李糖(1→2)]-α-L鼠李糖(1→4)-β-D葡萄糖甙(Dioscin,3),薯蓣皂甙元[-α-L鼠李糖(1→2)]-β-D葡萄糖(1→3)-β-D葡萄糖甙(gracillin,4).HPLC分析表明,Prosapogenin B是原提取物不含有的成分,占转化产物的10.77%.     

生物固氮

961070 腐生性固氮放射形土壤杆菌5D-1的遗传转化[俄]/Yablunenko,A.N.…//Genetika(Mascow).-1995,31(6).-778～783[译自DBA,1995,14(19),95-11503] 用质粒pVZ2361和染色体DNA(含有标记trp 、his 和卡那霉素抗性)转化腐生性固氮放射形土壤杆菌5D-1的转化率分别为10000/μg DNA和     

激素和活性多肽

<正> 854119霉菌孢子转化甾类:Ⅲ.雅致小克银汉霉(Cunninhamella elegans)孢囊孢子在萌芽和营养生长不同时间的11-羟化酶活性[英]/Jaworshi,A.…//Appl.Micro-biol.Biotechnol.-1984,20(5).-313～317[译自DNA,1985,4(2),85-     

体外培养和遗传育种

<正> 854455 用发根农杆菌(Agrobacterium rh-izogenes)转化几种高等植物[英]/Tepfer,D.//Cell.-1984,37(3).-959～967[译自DBA,1984,3(25),84-12254]胡萝卜片、田旋花(Convolvulus arve-     

生物固氮

922582 光合同氮菌深红红螺菌人工DNA介导的遗传转化[英]/Fitzmaurice,W.P.…∥Arch.Microbiol.-1991,156(2).-142～144[译自DBA,1992,10(25),91-14770] 用CaCl_2、CaCl_2-PEG6000和冻融法,以载体质粒pSa4转化深红红螺菌(Rhodospirillumrubrum)VR2(一种天然的链霉素抗性突变株)。DNA浓度低时,转化频率呈线性增加,较高浓度时则达到饱和。在用抗生素筛选前,用对数生长早期和静止生长早期的细胞,1～2分钟热激、37℃、200mM CaCl_2、表达5小时的转化最佳。     

植物细胞、组织及原生质体培养

960095 外源激素对转化根培养物生长和次生代谢物形成的影响[会,英]/Rhodes,M.J.C.…∥PlantCell' Tissue Organ Culture.-1994,38(2～3).-143～151[译自DBA,1995,14(5),95-02957] 用发根土壤杆菌LBA9402的农杆碱菌株感染产生转化的根培养物。切下从受伤部分出现的根,除去污染的细菌,并以单独系列进行培养。根系保持在B50(Gamborg B5盐和3％蔗糖)培养基上。用     

动物遗传工程

962267 用作昆虫载体的病毒转化载体[会,英]/Beaty,B…//J.Cell.Biochem.-1995,Suppl.21A.-193[译自DBA,1996,15(7),96-03960] 构建了用于将基因导入蚊细胞的RNA和DNA病毒系统。采用了天然侵染蚊的辛德毕斯病毒     

Aβ1-42淀粉样蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达

本研究中用融合标签技术通过单质粒转化和双质粒转化分别促进Aβ1-42淀粉样蛋白的可溶性表达.构建重组载体pET(yd-b42)、pET(Msb-b42)、pET(Od-b42)、pAY-sls[ydb42]、pAY-sls[tydb42],并在大肠杆菌中表达,通过SDS-PAGE验证分析.标签yd、Msb、Od、tyd都能很好的促进ABβ1-42淀粉样蛋白可溶性表达,其中yd、tyd的促溶效果最好.Aβ1-42淀粉样蛋白能在大肠杆菌中可溶性表达.为阿尔茨海默病的治疗提供进一步理论基础.     

食品上的应用

961546 α-淀粉酶族酶:相互转化和工业应用[会,英]/Imanaka, T.//Abstr.Pap.Am.Chem.Soc.-1995,209Meet.Pt.1.-BIOT 024[译自DBA,1995,14(22),95-13319] 大多数淀粉水解酶和相关酶只催化下述4种类型反应中的一种:α-(1,4)-葡糖苷键水解、α-(1,6)-葡糖苷键水解、转糖基作用形成α-(1,4)-葡糖苷键、及转糖基作用形成α-(1,6)-葡糖苷键。上述反应分别由α-淀粉酶、支链淀粉酶、环麦芽糊     

医药其它

941522由逆转录病毒载体介导的对HTLV-1诱导的细胞转化的反义RNA抑制[会,英]/Gilboa,E.…∥Viral Vector.-1988.-116～121[译自 DBA,1993,12(25),93-14493] 构建了含有HTLV-Ⅰ病毒基因组不同区(逆转录取向、由异源内部启动子调控)的一组逆病毒载体(反义载体)。选择了HTLV-Ⅰ基因组的2个     

2-芳基-1,3-二氧环戊烷的合成与表征

以3-硝基-4-甲基苯甲酸为主要原料,依次通过乙硼烷还原、氯代反应将其中羧基转化为氯甲基,又经过缩争、氧化、醛基保护将甲基转化为缩醛等步骤合成了2-[2-硝基-(4-氯甲基)]苯基-1,3-二氧环戊烷.目标产物及某些重要中间体的结构已通过红外光谱、质谱、核磁共振氢谱的方法进行了表征.     

4个工业大麻品种对根际土壤酶活性的影响

[目的]明确工业大麻对根际土壤酶活性的影响规律。[方法]田间种植火麻一号、格里昂、金刀-15和格列西亚,在不同生长阶段采集根际土,分析不同品种工业大麻对土壤酶活性影响。[结果]土壤过氧化氢酶活性总体呈上升趋势,峰值为0. 89 m L·g~(-1)·20min~(-1);蔗糖酶、脲酶和磷酸酶的峰值(分别为14. 76 mg·g~(-1)·d~(-1)、338. 64和79. 57μg·g~(-1)·h~(-1))出现在快速生长期,随后呈下降趋势。工艺成熟期,火麻一号和格列西亚的蔗糖酶活性(分别为10. 07、11. 03 mg·g~(-1)·d~(-1))高于其它品种;火麻一号的脲酶活性(161. 34μg·g~(-1)·h~(-1))高于其他三个品种;格列西亚的磷酸酶活性(29. 98μg·g~(-1)·h~(-1))高于其他三个品种。[结论]随着工业大麻生长,土壤过氧化氢酶活性总体呈上升趋势;土壤蔗糖酶活性呈波动性变化,在快速生长期达峰值;土壤脲酶和磷酸酶活性呈先升高后降低的趋势,在快速生长期达峰值。工业大麻通过提高过氧化氢酶和蔗糖酶活性促进土壤养分转化,能增强土壤有机碳转化。     

植物遗传工程

922617 香瓜转化及花椰菜花叶病毒35S启动子在转基因香瓜植物中的表达[英]/Dong,J.Z.…∥Bio/Technology.-1991,9(9).-858～863[译自DBA,1991,10(25),91-14786] 香瓜(Cucumis melo L.Cv.Orientsweet)繁殖过程是:(1)在加0.5mg/l BA的MS培养基上诱导丛生苗;(2)在加0.1mg/l BA和2 mg/l GA的MS培养基上使芽伸长;(3)在加0.1mg/lNAA的MS培养基上发根。总的再生率高于90%。此方法与根癌土壤杆菌介导转化结合使     

基因诱变、重组、克隆

923552甲醇利用型嗜甲基菌属耐热菌株的高效电激转化[英]/Haider,M.Z.…/Acta Biotechn01.一1991,21(4)一295~301[译自DBA,1902,11 (7),92一03606〕 采用pUC19、pBR322、pCMi、pUC/CAT以及由pSAS片段与pUC19的重组质粒(P USM4、pUSFio、pUSMZo)作为载体。分别用感受态、原生质体和电激三种转化法转化万eth好。夕瓜-105属菌株KISRI一5112(NCIB 12138)、KISRI一512(NCIB 12137和KISRI一6.1(NCIBiZi36)。在25产F、3 kV、1 .5一5 kV/cm电激条件下成功地转化了质粒(P UCM20的转化率达180万转化子/拼9 DNA),并稳定…     

产(R)-1,3-丁二醇的工程菌构建及转化条件研究

[目的]利用重组大肠杆菌实现(R)-1,3-丁二醇的生物合成。[方法]从脱硫球菌(Desulfococcus biacutus)中克隆得到羰基还原酶基因DbCR,构建pET28a-DbCR表达载体并在大肠杆菌E.coli BL21中表达,利用气相色谱对反应液进行检测。[结果]DbCR在pH 7.5、35℃的最适条件下的酶活力为4.5 U/mL。在50 mL全细胞反应体系中,重组工程菌在pH 7.5、30℃条件下,反应48 h时,对300 mmol/L底物4-羟基-2-丁酮的转化率 96%,产物(R)-1,3-丁二醇的e.e.值 99%。[结论]构建得到高效催化合成(R)-1,3-丁二醇的工程菌,工程菌对底物的转化率96%,产物纯度 99%。     

原核表达载体pET30a/ATRX-C_(2193-2492)的构建与诱导表达

[目的]构建大鼠ATRX抗原端氨基酸序列的原核表达载体,为进一步制备ATRX多克隆抗体以及探讨ATRX蛋白在HPV16致宫颈癌中的作用奠定基础。[方法]以IF-GFP-ATRX质粒为模板,PCR扩增获得ATRX-C_(2193-2492)基因片段,并克隆至p ET30a(+)空载体上,转化E.coli BL21感受态细胞,构建原核表达载体p ET30a/ATRX-C_(2193-2492),经PCR、双酶切以及测序鉴定。将构建好的质粒p ET30a/ATRX-C_(2193-2492)转化,经IPTG诱导表达,利用镍离子亲和层析法纯化6His-ATRX-C_(2193-2492)蛋白。[结果]成功获得900 bp的ATRX-C_(2193-2492)基因片段并构建了原核表达载体p ET30a/ATRX-C_(2193-2492),且该载体能在E.coli中诱导表达分子量约34 k Da蛋白产物。[结论]原核表达载体p ET30a/ATRX-C_(2193-2492)能成功诱导表达分子量约34 k Da的ATRX-C_(2193-2492)蛋白,该蛋白纯化产物能为后续ATRX多克隆抗体的制备提供实验基础。     

我国和欧美洲栗疫菌低毒株dsRNA同源性比较

在发现我国栗疫苗(Cryphonectria parasitica=Endothia parasitica)含dsRNA低毒力菌株基础上,分别以国内菌株EpC140和EpC32、欧洲低毒株Ep713的dsRNA为探针,同欧洲、美洲及亚洲低毒力菌株dsRNA进行分子杂交,结果表明亚洲株同欧洲株之间有序列同源性,同美洲株之间无序列同源性.