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Cd2+、Al3+对蚕豆(Vicia faba)DNA合成及修复的影响 总被引:11,自引:2,他引:9
利用^3H-TdR掺入方法,研究了不同浓度单金属离子Cd^2+、Al^3+对蚕豆DNA合成、DNA修复(以UDS为指标)的影响。结果表明:在低浓度Cd^2^+、Al^3+(Cd^2+浓度〈200mg/l,Al^3+浓度100mg/l)处理后,蚕豆DNA合成加快,并且不同程度地诱导了UDS的发生;但在高于此浓度的Cd^2+、Al^3+作用下,蚕豆DNA合成受抑制,浓度越高,抑制作用超强;并且几乎不表 相似文献
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三种类型辐射对质粒超螺旋DNA损伤的研究 总被引:7,自引:0,他引:7
用agarose电泳和图象处理技术比较了60Coγ射线、UV及低能N+离子处理pUC19DNA超螺旋结构的损伤效应及若干自由基清除剂的保护效应。结果表明:(1)γ射线和UV照射干燥DNA的损伤显著低于水溶液样品;(2)N+离子注入后超螺旋DNA的减少(SC%)与剂量呈良好线性关系,而γ射线和UV组的SC%随剂量升高呈指数下降;(3)干燥DNAγ辐照组的D37值为820Gy,SC完全消失的剂量LD为3814Gy,LD/D37=4.65;UV照射组的相应值分别为:1.65J/cm2,7.65J/cm2,4.64;N+离子组的相应值为:3.2×1015N+/cm2,5.0×1015N+/cm2和1.56。虽然上述三种辐射的剂量单位不同,不能直接比较其相对生物学效应,但从LD与D37的比值可反映DNASC破坏的程度和终点剂量(SC%=0)的大小。从而看出,N+离子(高LET辐射)比γ射线(低LET辐射)UV(非电离辐射)对DNA损伤作用更强;(4)乙醇、甘露醇等自由基清除剂对电离辐射损伤有很强的保护作用,但对UV损伤未见明显的保护效应 相似文献
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.OH在博莱霉素A5介导的DNA断链反应中的作用 总被引:4,自引:0,他引:4
利用ESR技术研究了博莱霉素A5(BLMA5)、Fe^2+,O2体系中.OH的产生。并用TBA反应检测了该系对DNA的断链作用。以Fe^3+,Cu^+或Cu^2+替换Fe^2+,则体系中无.OH产生,同时也失去对DNA的断链作用;一定浓匠.OH清除剂可完全清除.OH,地对DNA断链影响甚微;还原剂可淬灭体系中的.OH,却能促进DNA的断链反应;SOD可清除体系中的.OH,失活的SOD夫此功能,但两 相似文献
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观察了亚硒酸钠(Na2SeO3)在体外作用于大鼠晶状体上皮细胞(RLEcells)而造成的DNA单链断裂(singlestrandbreaks,SSB),并对其DNA损伤、修复动力学做了初步研究.发现SSB严重程度与亚硒酸钠的浓度呈线性相关,其SSB重接修复约在30~60min内完成.还作了有关非程序DNA合成(UDS)的检测,发现与SSB相比,UDS发生迟且持续时间更长,提示Na2SeO3可能在体外对大鼠晶状体上皮细胞除造成SSB以外,还可能造成其它种类的DNA损伤. 相似文献
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氧化修饰HDL刺激培养人主动脉平滑肌细胞增殖 总被引:2,自引:0,他引:2
平滑肌细胞(smooth muscle cell,SMC)增殖在动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)形成中起着重要作用。氧化修饰HDL(oxidixed HDL,OX-HDL)可刺激^3H-TdR掺入培养人动脉SMC的DNA,促进SMC增殖。以四甲工偶氮唑盐9MTT)法直接观察OX-HDL对培养人动脉SMC增殖细胞数的影响。结果显示,天然HDL(native HDL N-HDL)对 相似文献
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人血管内皮细胞生长因子受体Flt—1胞外区cDNA在毕赤酵母中的?… 总被引:2,自引:0,他引:2
将编码血管内皮细胞生长因子受体FIt-1胞外区1-3loop316个氨基酸残基的cDNA插入到含AOX1启动子和α分泌信号肽序列的Pichia pastoris酵母载体中,构建了重组表达质粒pPIC9K/FIt=1(1-3),转化酵母景菌GS115,筛选His^+Mut^s表型转化子,经插瓶培养,1%甲醇诱导表达4d后,SDS-PAGE结果显示,培养上清中FIt-1(1-3)表达这总蛋白的30-% 相似文献
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亚硒酸钠诱发的晶状体上皮细胞DNA损伤及修复 总被引:3,自引:0,他引:3
观察了亚硒酸钠(Na2SeO3)在体外作用于大鼠晶状体上皮细胞(RLE cells)而造成的DNA单链断裂(SSB),并对其DNA损伤、修复动力学做了初步研究。发现SSB严重程度与亚硒酸钠的浓度呈线性相关,其SSB重接修复约在30 ̄60min内完成,还作了有关非程序DNA合居(UDS)的检测,发现与SSB相比,UDS发生迟且持续时间更长,提示Na2SeO3可能在体外对大鼠晶状体上皮细胞除造成SSB 相似文献
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在大鼠肢体缺轿模型上观察质粒pcDNA3对缺血骨骼肌肌浆网(SR)Ca^2+转运的影响。结果显示,骨骼肌缺血时SRCa^2+转运(Ca^2+摄入与释放)较非缺血肌肉增强,而质粒pcDNA3与SR上DNA结合蛋白结合之后,可进一步增强缺备骨骼肌SRCa^2+摄入(P<0.01)及释放速率(P<0.05)。提示质粒DNA对正常及缺血大鼠骨骼肌的SRCa^2+转运能力均有影响,其临床病理生理意义值得进一 相似文献
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DnaJ—like基因在不同环境胁迫下的表达研究 总被引:5,自引:0,他引:5
PvSR6(Phaseolus vulgaris stress-related)基因编码一种菜豆DnaJ-like蛋白。North-ern blot结果表明:PvSR6基因在未处理的菜豆叶片中表达较少,重金属(Hg^2+和Cd^2+)、机械损伤、UV、高温和水杨酸等环境胁迫能强烈地促进其基因的转录,推测DnaJ-like蛋白在保护细胞膜和酶蛋白的结构和功能及提高植物的抗逆性方面有重要作用。 相似文献
11.
利用人粒细胞集落刺激因子(hG-CSF()cDNA3'端非翻译区(3'UTR)中存在的DraI酶切位点,通过部分酶切与完全酶切,删除3'-UTR不同长度构建了四种hG-CSF cDNA瞬时重组表达质粒,转染COS-7细胞手,生物活性测定结果提示,hG-CSFcDNA3'-UTR对其表达起负调控作用,其关键性序列位于紧接终止密码子TGA下游的65bp范围内,3'-UTR对hG-CSF cDNA表达的 相似文献
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酿酒酵母耐热相关基因DNA片断的初探 总被引:3,自引:0,他引:3
对模板DNA,Mg^2+的浓度以及PCR反应程序等因素进行了研究,得出了对酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)进行随机护增多态性DNA(RAPD)分析的优化条件。在此基因上对酿酒酵母耐高温菌株HU-TY-1及原始出发菌株LK的基因组DNA进行RAPD分析,结果表明:两菌株间确实存在着扩增带型上的差异,而这些差异可能与菌株的耐高温性状有关。从而为今后通过四分子分析寻找与耐热相 相似文献
14.
用PAGEA活性染色分析了D.radiodurans过氧化氢酶(Cat)和起氧化物歧化酶(SOD)。2种同种异型D.radiodurans(R1和Sark)的Cat在电泳带型上存在差异,两者Kat均可分为A、B和C3条带,但各带所占比例明显不同,SOD的分析结果表明,D.radiodurans SOD以Fe^2+和Mn^2+离子的嵌合体形式存在,其中Fe-SOD成分占90%以上。PAGE活性染色法 相似文献
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利用人粒细胞集落刺激因子(hG-CSF)cDNA3′端非翻译区(3′-UTR)中存在的DraⅠ酶切位点,通过部分酶切与完全酶切,删除3′-UTR不同长度,构建了四种hG-CSFcDNA瞬时重组表达质粒。转染COS-7细胞后,生物活性测定结果提示,hG-CSFcDNA3′-UTR对其表达起负调控作用,其关键性序列位于紧接终止密码子TGA下游的65bp范围内,3′-UTR对hG-CSFcDNA表达的影响与转录水平的差别有一定关系。 相似文献
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利用双功能试剂N-琥珀酰亚胺-3(2-二硫吡啶)丙酸酯(SPDP)作交联剂,合成了尿激酶(UK)-抗人交联纤维蛋白降解物D-二聚体单抗(MA-HID1)化学偶合体(UK.MA-HID1)并用苯甲脒-Sepharose6B及人交联纤维蛋白降解物D-二聚体-Sepharose4B亲和柱纯化,获得偶合体产物,SDS-PAGE呈现一条带,其分子量约为200000,纤维蛋白平板法测活结果显示,偶合体中酶比活 相似文献
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本文发现线粒体H^+-ATPase复合体先用0.5ug/ml的DCCD(二环已基碳二亚胺预保温处理,再经12.5%(V/V)乙醇进一步保温处理,则乙醇可完全消除DCCD引起的H^+-ATPase的抑制效应。若H^+-ATPase用DCCD和乙醇同时预保温处理,则DCCD同样消失其抑制作用。用相同浓度的甲醇代替乙醇,则仅可部分的消除DCCD的抑制作用。用相同浓度的DMSO(二甲基亚砜)代替乙醇,则不 相似文献
18.
本实验对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)合成与释放篾这活性多肽(VPs)及其作用机制进行了研究。结果表明:(1)无神经支配的人脐血管内皮细胞(VEC)所含VPs较有神经支配的肠系膜血管VEC多;(2)这些VPS是VEC自身合成且能释放到胞外;(3)血管活性肠肽(VIP)和P物质(SP)使HUVEC膜上Ca^2+通道开放概率明显增加,生长抑制(SOM)使其明显降低,但它们均使胞浆内「Ca^2+」和CA 相似文献
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利用双功能试剂N-琥珀酰亚胺-3(2-二硫吡啶)丙酸酯(SPDP)作交联剂,合成了尿激酶(UK)-抗人交联纤维蛋白降解物D-二聚体单抗(MA-HID1)化学偶合体(UKMA-HID1),并用苯甲脒-Sepharose6B及人交联纤维蛋白降解物D-二聚体-Sepharose4B亲和柱纯化,获得偶合体产物.SDS-PAGE呈现一条带,其分子量约为200000.纤维蛋白平板法测活结果显示,偶合体中酶比活为53000IU/mg尿激酶蛋白,与偶联前的54300IU/mg蛋白相仿.ELISA测试显示,偶合体对人交联纤维蛋白降解物D-二聚体有免疫反应性,并且与偶联前的抗D-二聚体单抗对此抗原的反应性相当 相似文献
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本文以含外源基因的甲醇酵母表达载体pPIC9/E2F-1-DB质粒DNA电转化甲醇酵母GS115,小规模抽提所得转化子的总DNA,并以其为模板,以乙醇氧化酶(AOX1)5’端序列和3’端的TT序列为引物,进行PCR反应。PCR产物走0.8%Agarose电泳,通过对PCR产物的电泳带型分析,鉴定出甲醇酵母转化子的表型,即Mut^+或Mut^s。这一鉴定结果为转化子的诱导表达产物的SDS-PAGE图 相似文献