水稻种子贮藏谷蛋白α—2亚基减少突变体

通过筛选水稻（Oryza sativa L.)受精卵的甲基亚硝基脲（MNU）处理后代,获得9个谷蛋白α-2亚基减少（α－2L）突变体。这些突变体依据其SDS－PAGE图谱又可分成3种类型：α－1显增加型（α－1H／α－2L）、β－2减少型（β－2L／α－2L）和α－3显增加型（α3－H／α－2L）。双向电泳分析揭示了产生突变体α-2L的原因在于缺少了一条pI6.71/α－2的多肽;α－1H和α－3H的原因在于分别敢一条新的多肽pI6.50/α-1和pI6.90/α-3;而产生β－2的原因在于缺少一条pI18.74/β－2的多肽。pI6.71/α-2和pI8.74/β-2多肽同时缺失于同一突变体暗示二可能来源于同一前本,为同一基因的产物。这些突变体为水稻谷蛋白遗传规律、生物合成遗传调控机制、基因功能以及蛋白组学研究不可多得的素材。     

α—银环蛇毒素基因的合成与表达

结合国内外的研究现状,以α－银环蛇毒素为例来探讨蛇神经毒素基因在大肠杆菌表达体系中的表达情况及其规模生产的可行性。首先根据文献报道α－银环蛇毒素的氨基酸序列,推导出其ＤＮＡ序列并设计成部分互补的４条寡核苷酸片段,利用ＤＮＡ合成仪人工合成,纯化这４条寡核苷酸片段,通过片段退火,切口补平,连接,克隆,测序鉴定获得了α－银环蛇毒素基因,然后将ａ－银环蛇毒素基因克隆至ｐＧＥＸ－２Ｔ质粒中分别转化ＤＨ５α和     

信号肽C—端和成熟蛋白N—端氨基酸序列的变化对α—淀粉酶分泌作用…

本文利用ｐＡｍｙ４１３质粒通过定点诱变技术,在α－淀粉酶基因的２８７和２９１位分别引入１个Ｇ和Ｃ,代替原来的Ｔ和Ｇ,构建成质粒ｐＡＭＹ４１３Ｂ使成熟的α－淀粉酶Ｎ－端＾７Ｌｅｕ＾８Ｍｅｔ变为＾７Ａｒｇ＾８Ｉｌｅ,ｐＡｍｙ４１３Ｌα－淀粉酶信号序列因引入１个多酶切点接头而比ｐＡｍｙ４１３的２９个氨基酸增加了１３个氨基酸,创造了１个新的信号肽酶Ｉ识别窗口Ａｌａ－Ｇｌｎ－ＡｌａＳｅｒ,利用计算机对该信号     

蛋白酶对解淀粉芽孢杆菌α—淀粉酶活力的影响

目前工业生产α－淀粉酶的主要菌种是解淀粉芽孢杆菌,该菌在培养条件下不但产生α－淀粉酶,同时也产生一定比例的蛋白酶。本文研究了不同来源的蛋白酶对解淀粉芽孢杆菌ＢＦ７６５８和８６３１５α－淀粉酶活性的影响。结果表明发现中性蛋白酶对两种α－淀粉酶活性无显著影响,而２７０９碱性蛋白酶能使α－淀粉酶活性丧失６０％以上。     

α—LTX毒素和细胞分泌过程

α－latrotoxin(α-LTX)是一种突前毒素,在细胞膜上它有两种受体,细胞内分泌过程是神经突触传递的必要步骤之一,与细胞内游离钙离子喾度密切相关,α－LTX可以钙依赖性不依赖性两种方式来影响细胞的分泌过程,对于研究分泌的分子机制和钙不依赖分泌的重要作用。     

中温α—淀粉酶活力测定法的研究

本文研究了中温α－淀粉酶测定过程中的反应动力学机理,建立了吸光度对数值与反应时间的回归方程,分析了分光光度法读数误差对酶测定的影响,从而建立了用分光光度法测定α－淀粉酶活性的方法。     

白细胞介素—2分子α螺旋B中的活性相关区域

根据人白细胞介素－２（ＩＬ－２）α螺旋Ｂ中氨基酸残基的空间分布选择性地突变了一些氨基酸残基,结果发现：５７Ｇｌｎ→Ｇｌｕ,６２Ｇｌｕ→Ｌｅｕ,６２Ｇｌｕ→Ａｒｇ和６５Ｐｒｏ→Ａｒｇ这些替换均使ＩＬ－２活性显著降低或丧失,而６３Ｌｅｕ→Ｓｅｒ或６４Ｌｙｓ→Ａｌａ对ＩＬ－２活性影响不大。从受体竞争抑制结合实验结果可知,上述不表现活性的突变体也同时丧夫了与高亲和力受体的结合能力,这说明α螺旋Ｂ中这些位点     

醋酸杆菌α—乙酰乳酸脱羧酶基因的克隆表达

根据已知α－乙酰酸脱酸酶（α－ALDC）的基因序称,用PCR法从醋酸杆菌（Acetobacter racens)中克隆到的1kb的DNA片段,经DNA测序证明是ALDC基因,将该基因重组到质粒pBV220中,转化大肠杆菌,实现了高表达,获得了目的蛋白表达量约40％的转化子,为下步研究其酶活性奠定了基础。     

IFN—α治疗慢性乙肝抗病毒疗效与细胞因子变化关系分析

观察一乙型病毒性肝炎（ＣＨＢ）患者（２５例）经α－干扰素（ＩＦＮ－α）抗病毒治疗前后血清中细胞因子和受体水平的变化与乙肝病毒消长之间的关系。收集治疗前后血清标本ＥＬＩＳＡ法同步检测,根据治疗后乙肝病毒复制指标（ＨＢＶ－ＤＮＡ）阴转分应答组（１０例）与无应答组（１５例）进行统计学分析。治疗后两组血清中ＩＬ－６水平下降,尤其答应组下降明显;治疗后应答组ＩＬ－２水平明显升高（Ｐ〈０．０１）,ｓＩＬ－２Ｒ     

分子筛催化α—蒎烯异构的研究

分别用蒸馏水、盐酸、氯化铵溶液处理的分子筛作催化剂,催化α－蒎烯异构为单环单萜。结果表明,用蒸馏水处理后的分子筛做催化剂,产物的得率较高,为６９．５％左右,接近文献值。     

耐高温α—淀粉酶基因在枯草杆菌染色体上的整合,扩增及表达的研究

通过构建一套整合载体,将来自嗜热脂肪芽孢杆菌的耐高温α－淀粉酶基因以及质粒ｐＣ１９４上的一段Ｃｍ抗性基因随机整合至枯草杆菌１Ａ２８９染色体上,通过提高整合菌的抗氯霉素能力和反复进行整合,可提高耐高温α－淀粉酶基因在染色体上的拷贝数,最终耐高温α－淀粉酶基因在染色体上的拷贝数由整合初的一个增至七个以上。同时,在无选择压力的情况下,可产酶２２０ｕ／ｍｌ以上。     

水稻种子萌发过程中α—淀粉酶与萌发速率关系的分析

用丙烯酰胺凝胶电泳技术和3,5－二硝基水杨酸（DNS）测定还原糖法,对不同萌发时间农垦58F,农垦58S和农垦58种子胚中α－淀粉酶同工酶及其酶活性变化进行研究,0－36小时萌发过程中,农垦58F和农垦58Sα-淀粉酶活性高于农垦58。胚中检测出五条酶,A2,A4和A5为上述种子共有酶带,A3为农垦58F和农垦58S特异性酶带,A1为农垦58特异性酶带,据此认为α-淀粉酶对水稻种子萌发速度起重要调控作用,A1和A3可能是调控种子发芽快慢的重要酶分子。     

α-黑色素细胞刺激素对白细胞介素-1β发热的解热机理研究

本研究观察了α－黑色素细胞刺激素（α－ＭＳＨ）对家兔白细胞介素－１β（ＩＬ－１β）发热效应及下丘脑组织腺苷环－磷酸（ｃＡＭＰ）含量的影响;同时观察了下丘本外培养过程中,α－ＭＳＨ对ＩＬ－１β刺激下丘脑释放ｃＡＭＰ的影响。结果显示：α－ＭＳＨ能显著降低ＩＬ－１β引起的体温升高（Ｐ〈０．０５）;同时抑制下丘脑组织ｃＡＭＰ含量的增高（Ｐ〈０．０１）。ＩＬ－１β与下丘脑组织培养,其上清液的ｃＡＭＰ含量明显     

运动后恢复过程中大鼠骨骼肌α-肌动蛋白基因的表达

目的：探讨运动后恢复过程中骨骼肌α－肌动蛋白基因的表达及运动对该基因表达的影响。方法：设计强化训练的大鼠模型,用定量反转录聚合酶链式反应（Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ＲＴ－ＰＣＲ）方法,研究恢复过程中,大鼠骨骼肌α－肌劝蛋白（α－ａｃｔｉｎ）基因的表达。结果：所有强化训练运动恢复组的骨骼肌α－肌动蛋白ＭＲＮＡ水平均高于安静对照组（Ｃ）,且强化训练恢复安静组（ＥＲ）、强化训练恢复３０ｍｉｎ组（Ｅ－０．     

中温α—淀粉酶性质的研究

本文对Ｂ．Ｓ．７９６所产中温α－淀粉酶的最适反应温度、热稳定性,最适酶反应ｐＨ以及酶的ｐＨ稳定性等进行了系统的研究。同时研究了钙离子对酶稳定性的作用。为该酶在工业上的广泛应用提供了一定的理论基础。     

牦牛α-乳清蛋白基因的克隆与序列分析

根据奶牛α－乳清蛋白基因序列设计引物,用PCR方法扩增并克隆了牦牛（Poephagens grunnieus）α－乳清蛋白基因的全序列。结果表明,在671－2689bp之间,共有4个外显子和3个内含子,牦牛α－乳清蛋白基因共编码142个氨基酸,其中第1－19氨基酸之间的短肽为信号肽序列。牦牛的α－乳清蛋白基因有较高水平的表达可能与基因内非编码序列碱基突变引起的回文结构消失有关。该基因5′侧翼序列在结构上牦牛和牛基本相同,只有MGF因子识别位点稍有差别。且牦牛的该序列更符合Groenen等1994年总结的该因子识别位点的模式序列,因此牦牛的该基因5′调控区可能更适于进行组织特异性表达的转基因动物的制作研究。     

对人眼晶状体α－晶体蛋白聚集体的准弹性激光散射研究

以准弹性激光散射技术,研究了人眼晶状体内α－晶体蛋白聚集体的扩散系数和流体力学半径,以及其弥散性随温度和浓度的变化。所研究的α－晶体蛋白用分离的方法分别取自成人和胚胎眼晶状体。研究结果表明,人眼α－晶体蛋白在一定浓度和温度下可形成聚集体,且其聚集体半径随α－晶体蛋白的浓度近乎线性地增大,随温度的增加而变小。对α－晶体蛋白溶液（５０ｍｍｏｌ／Ｌ磷酸脂缓冲液）的弥散度分析表明,溶液中有两种不同粒径的散     

鸭肫平滑肌肌球蛋白经α—糜蛋白酶轻微酶解及其Mg^2＋—ATP酶…

用α－糜蛋白酶对鸭肫平滑肌肌球蛋白进行有限酶解,使肌球蛋白重链的电泳双带变成单带。酶解后肌球蛋白与正常肌球蛋白相比,肌动蛋白激活的磷酸化肌球蛋白的Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ活力在低Ｍｇ＾２＋离子浓度时反而较高。从酶解后肌球蛋白溶液中只分离到１个４．２ｋｄ的小肽段。氨基酶组成测定及荧光胺末端标记实验提示,该小肽段酶氏自平滑肌肌球蛋白重链ＳＭ１的Ｃ末端。     

α－乙酰乳酸脱羧酶的研究

从细菌中筛选出１４株α－乙酰乳酸脱羧酶产生菌。从其中的一株α－乙酰乳酸脱羧酶产生菌提取粗酶,将粗酶样品分别加到主发酵的啤酒和主发酵后的啤酒中,在两种情况下均能明显降低啤酒中的总双乙酰量。     

一种新的α—纤维蛋白原酶对血小板聚集的影响

ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）检测中国眼镜蛇毒蛋白酶水解纤维蛋白原的作用方式,发现该蛋白酶可迅速水解纤维蛋白原Ａα链,对γ链作用较弱,对Ｂβ链无作用,是一种新型的α－纤维蛋白原本科,用比浊法测定血小板聚集率,证实中国眼镜蛇毒蛋白酶低剂量（）０．０２５）ｍｇ／ｋｇ）、中剂量（０．０５ｍｇ／ｋｇ）以及高剂量（０．１ｍｇ／ｋｇ）体内给药浓度依赖性地抑制ＡＤＰ（１０μｍｏｌ／Ｌ）和胶原（１