厌氧、还原剂和氧气对运动发酵单胞菌生长的影响

研究了厌氧、加还原剂和好氧条件下运动发酵单菌ＡＴＣＣ２９１９２和ＡＴＣＣ ３５００的生长速率及生长量。在复合培养基不加还原剂的厌氧条件下,生长速率最高,２９１９２和３５０００分别为０．３０９ｈ＾－１和０．４７２ｈ＾－１。２９１９２对还原剂和氧气比３５０００更为敏感。结果表明,还原剂还原力愈强,抑制生长的效应愈强,还原剂随浓度升高,毒性亦增强。     

新月弯孢霉原生质体制备及再生条件的研究

以从自然界中筛选的新月弯孢霉（Ｃｕｒｖｕｌａｒｉａｌｕｎａｔａ）Ｄ－１为出发菌株,进行原生质体制备及再生条件的研究。将培养至１６ｈ的Ｄ－１菌丝体经ＤＴＴ溶液处理３０ｍｉｎ后,用溶壁酶和纤维素酶的混合酶液于３０℃下酶解４ｈ,原生质体释放量达到６．０×１０^６个／ｍＬ,原生质体再生率为８．３％。     

芽孢杆菌M_(50)产生β甘露聚糖酶的条件研究

从土壤中分离到９ 株产生β甘露聚糖酶的芽孢杆菌（ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ ．） 。Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｐ ． Ｍ５０２５０ｍ Ｌ三角瓶摇瓶培养试验,以４ ％ 的魔芋粉为碳源,１－０ ％ （ ＮＨ４）２ＳＯ４ 为氮源,０－３５ ％Ｎａ２ＣＯ３ ,３０ ～３４ ℃培养６０ｈ 产酶达到高峰。酶活力为１８０ ～２００ｕ／ｍ Ｌ。１００Ｌ 罐发酵,在３０ ～３２ ℃,１∶０ ．７５ｖｖｍ 通气量,２００ｒ／ｍｉｎ 条件下,发酵液酶活力高达３３０ｕ／ｍ Ｌ。酶的最适反应温度和ｐＨ 分别为５０ ℃和６－０ ,低于５０ ℃,ｐＨ５ ．０ ～７ ．０ 酶稳定。Ｆｅ^３＋ 、Ａｌ^３＋ 、ＥＤＴＡ、Ｈｇ^２＋ 对酶有抑制作用,而Ｂａ^２＋ 、Ｍｎ^２＋ 对酶有激活作用。发酵粗酶液对苎麻精干麻精练,显示对精干麻的半纤维素残胶具有降解作用。     

雨生红球藻混合营养与异养培养研究*

研究雨生红球藻混合营养生长与异养生长对碳源及碳源浓度的需求,并对两种生长型进行比较。结果表明,乙酸钠较葡萄糖等其他碳源更能维持红球藻进行混合营养生长与异养生长。红球藻混合营养型生长与异养型生长的适宜乙酸钠浓度范围分别是０．５～１．０ｇ／Ｌ和１～１．５ｇ／Ｌ。混合营养型及异养型的平均生长速率分别是０．７２ｄ^－１和０．５３ｄ^－１,培养８ｄ的细胞干重分别是０．６５ｇ／Ｌ和０．３２ｇ／Ｌ。与光养型（对照）相比,混养型的各种生长指标均明显提高,异养型则下降。     

基因工程菌发酵合成L－苏氨酸－N15

采用含有稳定同位素^１５Ｎ－硫酸铵为主要氮源的专用发酵培养基配方和提取精制条件,在国内、外首次采用基因工程菌ＡＡ_７（ｐ^ＴＨ２）（ＡＨＶ^ｒＡＥＣ^ｒ,Ｔｈ^ｒ－Ｎ^－,Ｈｏｍ^ｒ,Ａｐ^ｒ）直接发酵方法研制Ｌ－苏氨酸－Ｎ^１５高丰度精制产品。每ｍｏｌ^１５Ｎ－硫酸铵实际得到０．６３８ｍ     

诺卡氏菌形放线菌β甘露聚糖酶的纯化和性质

产β１ ,４Ｄ甘露聚糖酶的诺卡氏菌形放线菌（ Ｎｏｃａｒｄｉｏｆｏｒｍ ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ） 菌株ＮＡ３５４０ ,发酵培养７２ｈ ,发酵液离心去菌体,上清经硫酸铵沉淀,９５ ％ 乙醇沉淀,ＣＭＳｅｐｈａｄｅｘ Ａ５０ 柱层析、羟基磷灰石柱层析、ＤＥＡＥ纤维素离子交换及Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ１００ 分子凝胶过滤柱等步骤,β甘露聚糖酶的比活提高了１３７ 倍,获得凝胶电泳均一的蛋白样品。经ＳＤＳＰＡＧＥ 和凝胶过滤法分别测定β甘露聚糖酶分子量为４１ｋＤ和４０ｋＤ,证明该酶为单聚体;用等电聚焦电泳测得其等电点为４－８ ;经氨基酸组成分析,发现蛋白中有较高含量的Ｇｌｙ、Ａｓｐ、Ａｌａ 及Ｇｌｕ 残基。该酶的最适反应温度为７５ ℃,在不超过６０ ℃时酶活较稳定;酶反应的最适ｐＨ 为８－０ ,ｐＨ 稳定范围为６－５～１１－０ 。重金属离子Ｈｇ^２＋ 、Ｃｕ^２＋ 、Ｐｂ^２＋ 、Ｆｅ^3＋ 、Ｃｏ^２＋ 、Ｚｎ^２＋ 能强烈抑制该酶活性,而Ｍｎ^２＋ 、Ｆｅ^２＋ 、Ａｇ^＋ 对该酶有部分的抑制作用,低浓度的Ｎａ^＋ 、Ｋ^＋ 、Ｌｉ^＋ 对该酶基本没有影响。     

缺氧对培养的肺动脉内皮细胞血管紧张素Ⅱ分泌的影响

缺氧是否通过影响血管内皮细胞的分泌功能而参与缺氧性肺动脉高压的发生尚不清楚。本实验动态观察了缺氧对培养的新生小牛内皮细胞（ＰＡＥＣ）的血管紧张素Ⅱ（ＡＴⅡ）分泌的影响。结果发现：２．５％Ｏ２缺氧早期（１．５ｈ）,ＰＡＥＣ的ＡＴⅡ分泌增加（Ｐ＜０．０１ｖｓ常氧组）,缺氧后期与常氧组无明显差别;０％Ｏ２缺氧早期（１．５－６ｈ）,ＡＴⅡ分泌明显降低（Ｐ＜０．０１ｖｓ常氧组及２．５％Ｏ２组）,后期ＡＴⅡ分泌明显增高（Ｐ＜０．０１ｖｓ常氧组及２．５％Ｏ２组）;无论缺氧还是常氧条件下,ＮＯ供体ＳＩＮ１显著抑制ＡＴⅡ的分泌（Ｐ＜０．０１）,而内源性ＮＯ抑制剂硝基精氨酸则明显促进ＡＴⅡ分泌（Ｐ＜０．０１）;０％Ｏ２缺氧２４ｈ后,ＰＡＥＣ细胞内ｃＧＭＰ含量明显降低（Ｐ＜０．０５）。上述结果表明缺氧可通过抑制ＰＡＥＣ的内源性ＮＯ产生而促进ＡＴⅡ的分泌,ＰＡＥＣ自分泌的改变可能参与缺氧性肺动脉高压的发生过程。     

脱卤脱亚硫酸菌脱氯呼吸链的遗传分析*

以携有结合转座子Ｔｎ９１６的Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ　ｆａｅｃａｌｉｓ　ＪＨ２－２为供体,脱卤脱亚硫酸菌ＨＳＳ１（Ｄｅｓｕｌｆｉｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｄｅｈａｌｏｇｅｎａｎｓ,Ｓｍ抗性突变株）为受体,在厌氧条件下,通过滤膜杂交、结合转移,将Ｔｈ９１６转移并插入到受体菌的染色体上,其转移频率为：１．１×１０^－７～３×１０^－８。　在丙酮酸／乳酸－３－氯－４－羟基苯氧乙酸、Ｔｃ、Ｓｍ培养基上,筛选脱氯呼吸的缺陷型突变株,并用反向ＰＣＲ（Ｉ     

高活性反硝化颗粒污泥的研究

以上流式厌氧污泥床（ＵＡＳＢ）反应器中的反硝化颗粒污泥为样品,研究了颗粒污泥的基本特性。测定出颗粒污泥中的优势无机元素为Ｃａ、Ｐ．颗粒表面以球菌和短杆菌为主。反硝化菌是颗拉中的优势菌群,数量可达６．５ｘ１０^８－１．５ｘ１０^１０个／ｍｌ颗粒污泥。初步鉴定了两株脱氮菌Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓｓｐ．ｓｔｒａｉｎＮ_１和ＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａｓｔｒａｉｎＮ_２．     

缺氧时培养的心内膜内皮细胞内皮素自分泌调节的探讨

本实验观察缺氧对心内膜内皮细胞（ＥＥＣ）内皮素－１（ＥＴ－１）分泌的影响。传代培养的新生小牛右心室ＥＥＣ的ＥＴ－１免疫组织化学显色强阳性。采用放免测定发现ＥＥＣ可向培养液中分泌ＥＴ－１,其分泌速度与细胞密度呈线性负相关（ｒ＝－０．９５４２,Ｐ＜０．００１）,与温育时间呈指数负相关（ｒ＝－０．９９８,Ｐ＜０．００１）。０％Ｏ２缺氧６～１２ｈ后,ＥＥＣ的ＥＴ－１分泌约增加１倍（Ｐ＜０．００１）。无论在常氧还是缺氧情况下,硝普钠抑制ＥＥＣ的ＥＴ－１分泌,而ＮＯ合酶抑制剂ＬＮＡ则促进ＥＴ－１分泌。上述结果表明：ＥＥＣ可能通过分泌ＥＴ－１调节心脏功能,内源性ＮＯ抑制ＥＴ－１分泌;缺氧可能显著影响ＥＥＣ的ＥＴ－１分泌     

球形红杆菌W1分批发酵和恒化培养的研究

本文对球形红杆菌Ｗ１的培养方式进行了研究。由分批培养确定了适于常规发酵的培养基及培养条件。恒化培养该菌的最大生长速率Ｐ＝３．８ｇ／ｌ．ｈ;最适稀释率Ｄ＝０．１５０ｈ＾－１;最大比生长速率为０．２０ｈ＾－１;饱和常数Ｋｓ＝２．８２ｇ／ｌ。恒化培养可获得比分批培养高的生长速率。     

人主动脉硫酸乙酰肝素蛋白聚糖对培养的人血管壁细胞生长的作用

通过培养的人主动脉平滑肌细胞（ｈＡＳＭＣ）及脐静脉内皮细胞（ｈＵＶＥＣ）,应用３Ｈ－ＴｄＲ参入、Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析、逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）、放射免疫分析（ＲＩＡ）、和紫外比色法等技术观察了人主动脉中硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（ＨＳＰＧ）对ｈＡＳＭＣ和ｈＵＶＥＣＤＮＡ合成的作用及对血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）、ＰＤＧＦ受体、转化生长因子β（ＴＧＦ－β）、内皮素－１（ＥＴ－１）或碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）基因表达和肾素－血管紧张系统（ＲＡＳ）的影响,结果显示,ＨＳＰＧ明显抑制培养的ｈＡＳＭＣ基础的ＤＮＡ合成（ｃｐｍ值为：１０３８５±３２６３ｖｓ,２５５４１±６４２１,Ｐ＜０．０１）及外源性ＰＤＧＦ诱导的ＤＮＡ合成（ｃｐｍ值为：９８７８±１９４７ｖｓ．１３４８１±４４ｌ０,Ｐ＜０．０５）;抑制ＰＤＧＦＡ链、ＴＧＦ－Ｂｐ和ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达,提高ＰＤＧＦａ和β受体ｍＲＮＡ的表达;显著降低ｈＡＳＭＣ培养液中血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）的浓度和血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）的活性,推测ＨＳＰＧ抑制ＰＤＧＦＡ链、ＴＧＦ－β及ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达,降低ＡＣＥ活性及ＡｎｇⅡ浓度是其抑制ｈＡＳＭＣ增殖的重要机     

二甲基苯蒽对小鼠皮肤表皮鸟氨酸脱羧酶和转化生长因子βmRNA水平的影响

本文利用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹分析技术研究了完全致癌物二甲基苯蒽（ＤＭＢＡ）对小鼠表皮鸟氨酸脱羧酶（ＯＤＣ）ｍＲＮＡ和转化生长因子β（ＴＧＦ－β）ｍＲＮＡ水平的影响。ＤＭＢＡ在１５μｇ和９００μｇ剂量下一次涂用于小鼠皮肤,可使表皮ＯＤＣｍＲＮＡ和ＴＧＦ－βｍＲＮＡ表达增加。ＯＤＣｍＲＮＡ为单一的２．０ｋｂ大小的条带,其表达在在３６ｈ时最为明显。而ＴＧＦ－βｍＲＮＡ大小为２．５ｋｂ和１．９ｋｂ,其表达在３６ｈ时最高,到４８ｈ几乎降至正常,但在７２ｈ又有增加。ＯＤＣ和ＴＧＦ－β可能在ＤＭＢＡ诱癌过程中起重要作用。     

嗜热脂肪芽孢杆菌质粒DNA的高压电穿孔转化研究*

采用高压电穿孔法将穿梭质粒导入了嗜热脂肪芽胞杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）Ｋ１０４１和Ｔ５２１菌株。以对数生长后期的菌体制备Ｋ１０４１转化细胞,以ＬＢ平板上于５０℃培养的过夜菌制备Ｔ５２１转化细胞,细胞密度为５～７×１０^９细胞／ｍＬ。电击条件如下：电容２５μＦ,电场强度１０．０ＫＶ／ｃｍ,脉冲控制器设定２００。 Ｋ１０４１和 Ｔ５２１最高转化效率分别达２．０１×１０⁴和１．１９ ×１０²转化子／     

利用淀粉产生碱性蛋白酶工程菌的构建

以不能利用淀粉为碳源、抗ｐｐ系列噬菌体和ｐＬ１噬菌体、产碱性蛋白酶（９４００－９８００ｕ／ｍｌ）的ＢａｃｉｌｌｕｓｐｕｍｉｌｕｓＣ１７２－６０为受体株,采用原生质体转化技术将携带糖化型小淀粉酶基因（Ａｍｖ）、Ｃｍ^ｒ基因、Ｋｍ^ｒ基因的ｐＢＸ９６质粒导入到受体株内,经两次利福平抗性筛选,获得一株能直接利用淀粉为发酵碳源、保留噬菌体抗性、产碱性蛋白酶的工程菌Ｃ１７２－３０６（ｐＢＸ９６）。菌体增殖９６．５代质粒丢失率为０．７７％,摇瓶发酵蛋白酶活力１４０     

矮生鸡冠花的离体快繁及试管苗开花

１植物名称矮生鸡冠花（Ｃｅｌｏｓｉａｃｒｉｓｔａｔａ）。２材料名称无菌种子苗顶芽、腋芽。３培养条件基本培养基为ＭＳ。培养基组合为：（１）ＭＳ＋ＢＡ１－２ｍｇ·Ｌ~（－１）（单位下同）＋ＮＡＡ０．１～０．２;（２）ＭＳ＋ＢＡ２＋ＩＡＡ０．２;（３）ＭＳ＋ＫＴ２;（４）ＭＳ＋ＢＡ０．１～０．５。以上培养基均含３％蔗糖,０．６％琼脂,ｐＨ为５．８,培养温室为（２６±２）℃,光照１２ｈ．ｄ~（－１）（２０００ｌｘ）。４生长与分化情况４．１无菌材料的获得成熟的种子置７０％酒精中摇动５０ｓ后,转入饱和漂白粉溶…     

芹菜夜蛾NPV离体复制的研究

芹菜夜蛾ＮＰＶ能够在小菜蛾细胞系中有效地复制增殖。受感染细胞呈典型细胞病理变化。病毒在细胞核中复制装配,病毒感染率为８５％,多角体产量为５８８×１０^６ＰＩＢｓ／ｍｌ。病毒增殖动力学显示,病毒感染细胞７２ｈ,胞外病毒达最大滴度,ＴＣＩＤ_５０值为１．９×１０^８ＴＣＩＤ５０／ｍｌ。     

内皮素—1对大鼠排卵前卵泡颗粒细胞产生孕酮的影响

本文用离体细胞体外孵育法研究了内皮素－１（ＥＴ）对大鼠排卵前卵泡颗粒细胞孕酮生成的影响及其作用机理。结果发现,ＥＴ能显著抑制ｈＣＧ刺激下的孕酮产生,抑制作用在浓度为１０－８ｍｏｌ／Ｌ时,即有显著意义（Ｐ＜０．０５,ｎ＝６）,至１０－７ｍｏｌ／Ｌ时则有非常显著的意义（Ｐ＜０．０１,ｎ＝６）;不同浓度ＥＴ（１０－７—１０－７ｍｏｌ／Ｌ）,对颗粒细胞基础孕酮的产生无明显影响。进一步研究表明,ＥＴ对ｈＣＧ刺激下孕酮生成的抑制作用,在用免抗人内皮素抗血清（ＥＴ－Ａ）１：１０００及ｃＡＭＰ后能明显被逆转。实验中还观察到,ＥＴ使颗粒细胞ＬＨ／ｈＣＧ受体数下降,亲和力降低。本文结果提示,ＥＴ可能为卵巢内的一种局部调节肽,通过作用于ＥＴ受体,干扰ＬＨ／ｈＣＧ受体功能和ｃＡＭＰ生成而抑制颗粒细胞孕酮的产生。     

宫粉郁金的组织培养和快速繁殖

１植物名称宫粉郁金（Ｃｕｒｃｕｍａ　ｋｗａｎｇｓｉｅｎｓｉｓ）。２材料类别　块茎萌动芽。３培养条件　萌动芽生长培养基：（１）ＭＳ＋６－ＢＡ１ｍｇ·Ｌ－１（单位下同）＋ＮＡＡ０．２。不定芽增殖与愈伤组织诱导培养基：（２）ＭＳ＋６－ＢＡ１０＋ＫＴ５;（３）ＭＳ＋６．ＢＡ１０;（４）ＭＳ＋６－ＢＡ５＋ＫＴ２．５;（５）ＭＳ＋６－ＢＡ５;（６）ＭＳ＋６－ＢＡ２＋ＫＴ１。生根培养基：（７）ＭＳ＋ＮＡＡ０．５;（８）ＭＳ＋６－ＢＡ０．５＋ＮＡＡ０．５;（９）ＭＳ。以上培养基均加０．７％琼脂,３％蔗糖,ｐＨ５…     

一株产虾青素的黄杆菌CF-60的研究

从土壤中分离到一株黄杆菌（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｓｐｐ）Ｃ_Ｆ－６０,该菌的生长需Ｍｇ^２＋存在,ＭｇＳＯ_４·７Ｈ_２Ｏ的最适浓度为０．２％;蛋白胨是该菌株生长的最好氮源,它不能利用无机氮。种龄超过９６ｈ的菌体不能在新鲜培养基中生长。经５４ｈ的２Ｌ恒化器发酵,生物量达６．８ｇ／Ｌ,色素产量为１０．６ｍｇ／Ｌ。该菌产生的类胡萝卜素成分简单,主要成分的含量为９０．３％,该成分经初步鉴定是分子结构中含有羰基和羟